Imagens vasculares e tumorais de alta resolução foram realizadas pelo nanoprob infravermelho próximo a fluorescente, fornecendo um método preciso e eficaz para direcionar doenças vasculares e câncer. A imagem in vivo na janela do NIR-II, que nos permite olhar profundamente para o sujeito vivo, produz oportunidades para a pesquisa biomédica e nossas aplicações clínicas. Prepare-se para a imagem de infravermelho próximo II ou NIR-II colocando papelão preto comercialmente disponível no centro do portador do dispositivo de imagem.
Em seguida, coloque a amostra em cima do papelão preto, para que fique no centro da transportadora. Depois de selecionar o filtro apropriado, execute o ajuste de altura da plataforma. Pressione longamente a opção de plataforma para cima na interface touchscreen da área de controle do console da operadora para movê-la para cima.
E pressione longamente a plataforma para baixo para movê-la para baixo. Após a síntese do corante NIR-II HLY1, prepare os pontos HLY1 pelo método de nanoprecipitação usando DSPE-PEG-2K como matriz de encapsulamento. Para fazer isso, coloque um copo contendo uma solução de 10 miligramas de DSPE-PEG-2K em nove mililitros de água para sonicação a 25 graus Celsius.
Em seguida, dissolva um miligrama de HLY1 em um mililitro de tetraidrofurano ou THF. E lentamente adicione a solução na solução aquosa DSPE-PEG-2K submetida a sonicação. Posteriormente, remova o THF da mistura por diálise.
Depois de concentrar a solução acima centrífugamente com ultrafiltração a 7, 100 G durante 10 minutos, coloque-a num frigorífico de quatro graus Celsius para utilização futura. Para imagens in vivo, injete os pontos HLY1 por via intravenosa nos camundongos anestesiados. E três minutos depois, prossiga para realizar imagens de fluorescência NIR-II dos vasos sanguíneos de todo o corpo dos ratos usando um sistema de imagem óptico NIR-II.
Concentre-se ainda mais na cabeça do rato para coletar imagens vasculares cerebrais. Defina os parâmetros do instrumento do sistema de imagem óptico NIR-II em 90 miliwatts por centímetro quadrado e laser de 808 nanômetros. Colete as imagens cinco minutos após a injeção de pontos HLY1 em camundongos e processe os dados usando o software ImageJ.
A intensidade de fluorescência de HLY1 na solução de 90% de THF contendo 90% de água foi cinco vezes maior que na solução de THF, indicando uma emissão proeminente induzida por agregação ou característica AIE de HLY1. Os pontos HLY1 emitiram fortes sinais fluorescentes sob um filtro passa-baixas ou LP de 1.500 nanômetros, estabelecendo sua adequação para imagens NIR-IIb. O comprimento de onda máximo de absorção e emissão dos pontos HLY1 foi de 740 nanômetros e 1.040 nanômetros, respectivamente.
Além disso, o tamanho hidrodinâmico dos pontos HLY1 foi determinado como sendo de 145 nanômetros por espalhamento dinâmico de luz. Em camundongos administrados com pontos HLY1, os vasos cerebrais e os microvasos no membro posterior foram identificados claramente por imagens NIR-II sob um filtro LP de 1.500 nanômetros. Além disso, o tumor T1 dos camundongos portadores de tumor também foi claramente visível por imagens NIR-II, indicando o aumento da permeabilidade e retenção ou efeito EPR dos pontos HLY1.
Todos esses resultados sugeriram que os pontos HLY1 são uma sonda de fluorescência NIR-II brilhante aplicável para imagens vasculares e tumorais. A preparação da nanossonda suspensível em água sob a imagem de fluorescência in vivo e NIR-II é a parte mais importante do procedimento.
