L'imaging vascolare e tumorale ad alta risoluzione è stato realizzato dal nanoprob da vicino infrarosso a fluorescente, fornendo un metodo accurato ed efficace per dirigere le malattie vascolari e il cancro. L'imaging in vivo nella finestra NIR-II, che ci consente di esaminare in profondità il soggetto vivente, produce opportunità per la ricerca biomedica e le nostre applicazioni cliniche. Prepararsi per l'imaging nel vicino infrarosso II o NIR-II posizionando cartone nero disponibile in commercio al centro del supporto del dispositivo di imaging.
Quindi, posizionare il campione sopra il cartone nero, in modo che sia al centro del corriere. Dopo aver selezionato il filtro appropriato, eseguire la regolazione dell'altezza della piattaforma. Premere a lungo l'opzione di piattaforma verso l'alto sull'interfaccia touchscreen dell'area di controllo della console di supporto per spostarla verso l'alto.
E premere a lungo la piattaforma verso il basso per spostarla verso il basso. Dopo aver sintetizzato il colorante NIR-II HLY1, preparare i punti HLY1 con il metodo di nanoprecipitazione utilizzando DSPE-PEG-2K come matrice di incapsulamento. Per fare ciò, posizionare un becher contenente una soluzione di 10 milligrammi di DSPE-PEG-2K in nove millilitri di acqua per la sonicazione a 25 gradi Celsius.
Quindi, sciogliere un milligrammo di HLY1 in un millilitro di tetraidrofurano o THF. E aggiungere lentamente la soluzione nella soluzione acquosa DSPE-PEG-2K sottoposta a sonicazione. Successivamente, rimuovere THF dalla miscela mediante dialisi.
Dopo aver concentrato centrifugamente la soluzione di cui sopra con ultrafiltrazione a 7.100 G per 10 minuti, metterla in un frigorifero a quattro gradi Celsius per un uso futuro. Per l'imaging in vivo, iniettare i punti HLY1 per via endovenosa nei topi anestetizzati. E tre minuti dopo, procedere all'esecuzione dell'imaging a fluorescenza NIR-II dei vasi sanguigni di tutto il corpo dei topi utilizzando un sistema di imaging ottico NIR-II.
Concentrati ulteriormente sulla testa del topo per raccogliere l'imaging vascolare cerebrale. Impostare i parametri dello strumento del sistema di imaging ottico NIR-II a 90 milliwatt per centimetro quadrato e laser a 808 nanometri. Raccogliere le immagini cinque minuti dopo l'iniezione di punti HLY1 nei topi ed elaborare i dati utilizzando il software ImageJ.
L'intensità di fluorescenza di HLY1 nella soluzione al 90% di THF contenente il 90% di acqua era cinque volte superiore a quella della soluzione di THF, indicando un'emissione indotta dall'aggregazione o una caratteristica AIE di HLY1. I punti HLY1 emettevano forti segnali fluorescenti sotto un filtro passa-basso o LP da 1.500 nanometri, stabilendo la sua idoneità per l'imaging NIR-IIb. La lunghezza d'onda massima di assorbimento ed emissione dei punti HLY1 era rispettivamente di 740 nanometri e 1.040 nanometri.
Inoltre, la dimensione idrodinamica dei punti HLY1 è stata determinata essere di 145 nanometri mediante diffusione dinamica della luce. Nei topi somministrati con punti HLY1, i vasi cerebrali e i micro vasi nell'arto posteriore sono stati identificati chiaramente dall'imaging NIR-II sotto un filtro LP da 1.500 nanometri. Inoltre, i quattro tumori T1 dei topi portatori di tumore erano anche chiaramente visibili dall'imaging NIR-II, indicando la maggiore permeabilità e ritenzione o effetto EPR dei punti HLY1.
Tutti questi risultati hanno suggerito che i punti HLY1 sono una sonda di fluorescenza NIR-II brillante applicabile per l'imaging vascolare e tumorale. La preparazione della nanosonda sospendibile in acqua nell'ambito dell'imaging a fluorescenza in vivo e NIR-II è la parte più importante della procedura.
