Клеточные анализы необходимы для выяснения молекулярных функций. В исследованиях артрита метод выделения первичных клеток хорошо зарекомендовал себя в синовиальных фибробластах, но не в синовиальных макрофагах. Поэтому мы разработали протокол для выделения и расширения как синовиальных макрофагов, так и синовиальных фибробластов из моделей артрита.
Первичные синовиальные фибробласты из ткани мышиного артрита способствовали выяснению молекулярных механизмов патогенеза артрита. С другой стороны, макрофаги, полученные из костного мозга, макрофаги, полученные из моноцитов крови, и клеточные линии макрофагов часто использовались в качестве макрофагальных ресурсов для исследований артрита. Поскольку макрофаги могут приобретать функции, связанные с их микроокружением, общие источники макрофагов могут отсутствовать реакции, специфичные для тканей артрита.
Кроме того, трудно получить достаточное количество синовиальных клеток путем сортировки, так как синовиальная оболочка мышей представляет собой очень маленькую ткань даже в моделях артрита. В предыдущем методе выделения синовиальных фибробластов синовиальные макрофаги были отброшены. Кроме того, был описан способ выделения и распространения резидентных макрофагов из некоторых органов.
Таким образом, существующие протоколы были изменены в комбинации для выделения и расширения как синовиальных макрофагов, так и синовиальных фибробластов из ткани мышиного артрита. Этот метод позволяет выделять как макрофаги, так и фибробласты из воспалительной синовиальной оболочки с высокой чистотой, он прост и воспроизводим. Этот метод позволяет распространять синовиальные макрофаги при совместном культивировании с синовиальными фибробластами.
Кроме того, метод дает преимущество в том, что синовиальные фибробласты могут быть использованы с меньшим количеством ходов. Установленный протокол будет полезен для выяснения патологических механизмов при ревматоидном артрите.
