Murin Artrit Dokusundan Primer Sinovyal Makrofaj ve Fibroblastların İzolasyonu ve Kültürü

Moleküler fonksiyonları açıklığa kavuşturmak için hücre bazlı tahliller gereklidir. Artrit çalışmalarında, primer hücreleri izole etme yöntemi sinovyal fibroblastlarda iyi bilinmektedir, ancak sinovyal makrofajlarda değildir. Bu nedenle, artrit modellerinden hem sinovyal makrofajları hem de sinovyal fibroblastları izole etmek ve genişletmek için bir protokol geliştirdik.

Murin artrit dokusundan primer sinovyal fibroblastlar, artrit patogenezinde moleküler mekanizmaların aydınlatılmasına katkıda bulunmuştur. Öte yandan, kemik iliği kaynaklı makrofajlar, kan monosit kaynaklı makrofajlar ve makrofaj hücre hatları, artrit çalışmaları için sıklıkla makrofaj kaynakları olarak kullanılmıştır. Makrofajlar mikroçevreleri ile ilişkili işlevler kazanabildiklerinden, genel makrofaj kaynakları artrit dokusuna özgü yanıtlardan yoksun olabilir.

Ayrıca murin sinovyum artrit modellerinde bile çok küçük bir doku olduğu için sıralama ile yeterli sinovyal hücre elde etmek zordur. Sinovyal fibroblastları izole etmek için önceki yöntemde, sinovyal makrofajlar atılmıştı. Bunun yanı sıra, yerleşik makrofajları bazı organlardan izole etmek ve genişletmek için bir yöntem bildirilmiştir.

Bu nedenle, murin artrit dokusundan hem sinovyal makrofajları hem de sinovyal fibroblastları izole etmek ve genişletmek için mevcut protokoller kombinasyon halinde değiştirildi. Bu yöntem hem makrofajları hem de fibroblastları inflamatuar sinovyumdan yüksek saflıkta izole edebilir ve basit ve tekrarlanabilir. Bu yöntem, sinovyal fibroblastlarla ko-kültür altında sinovyal makrofajların genişlemesine izin verir.

Ayrıca, yöntem, sinovyal fibroblastların daha az geçişle kullanılabilmesi açısından bir avantaj sağlar. Oluşturulan protokol romatoid artritte patolojik mekanizmaların aydınlatılmasında avantaj sağlayacaktır.