분자 기능을 명확히 하기 위해서는 세포 기반 분석이 필요합니다. 관절염 연구에서 일차 세포를 분리하는 방법은 활막 섬유아세포에서는 잘 확립되어 있지만 활막 대식세포에서는 확립되어 있지 않습니다. 따라서 우리는 관절염 모델에서 활막 대식세포와 활막 섬유아세포를 모두 분리하고 확장하는 프로토콜을 개발했습니다.
쥐 관절염 조직의 일차 활막 섬유아세포는 관절염 발병기전에서 분자 메커니즘의 해명에 기여했습니다. 한편, 골수 유래 대식세포, 혈액 단핵구 유래 대식세포 및 대식세포 세포주는 관절염 연구를 위한 대식세포 자원으로 자주 사용되어 왔다. 대식세포는 미세 환경과 관련된 기능을 획득할 수 있기 때문에 대식세포의 일반적인 공급원은 관절염 조직에 특이적인 반응이 부족할 수 있습니다.
또한, 쥐의 활막은 관절염 모델에서도 매우 작은 조직이기 때문에 분류하여 충분한 활막 세포를 얻는 것이 어렵습니다. 활막 섬유아세포를 분리하기 위한 이전의 방법에서, 활막 대식세포는 폐기하였다. 그 외에도 일부 장기에서 상주하는 대식세포를 분리하고 확장하는 방법이 보고되었습니다.
따라서 기존 프로토콜은 쥐 관절염 조직에서 활막 대식세포와 활막 섬유아세포를 모두 분리하고 확장하기 위해 조합하여 수정되었습니다. 이 방법은 염증성 활막에서 대식세포와 섬유아세포를 모두 고순도로 분리할 수 있으며 간단하고 재현 가능합니다. 이 방법은 활막 섬유 아세포와 공동 배양 하에서 활막 대 식세포의 확장을 허용합니다.
또한, 이 방법은 활막 섬유아세포가 더 적은 계대배양으로 사용될 수 있다는 점에서 이점을 제공한다. 확립된 프로토콜은 류마티스 관절염의 병리학적 기전을 밝히는 데 유리할 것입니다.
