分子機能を明らかにするためには、細胞ベースのアッセイが必要です。関節炎の研究では、初代細胞を単離する方法は滑膜線維芽細胞では十分に確立されていますが、滑膜マクロファージでは確立されていません。そこで、関節炎モデルから滑膜マクロファージと滑膜線維芽細胞の両方を単離・増殖させるプロトコルを開発しました。
マウス関節炎組織由来の初代滑膜線維芽細胞は、関節炎の発症機序の分子機構の解明に貢献している。一方、骨髄由来マクロファージ、血中単球由来マクロファージ、およびマクロファージ細胞株は、関節炎研究のためのマクロファージリソースとしてしばしば使用されてきた。マクロファージは微小環境に関連する機能を獲得できるため、マクロファージの一般的な供給源は関節炎組織に特異的な応答を欠いている可能性があります。
また、マウス滑膜は関節炎モデルにおいても非常に小さな組織であるため、ソーティングによって十分な滑膜細胞を得ることは困難である。滑膜線維芽細胞を単離する以前の方法では、滑膜マクロファージは廃棄された。それ以外にも、いくつかの臓器から常在マクロファージを単離・増殖させる方法が報告されました。
したがって、既存のプロトコルは、マウス関節炎組織から滑膜マクロファージおよび滑膜線維芽細胞の両方を単離および増殖させるために組み合わせて修正された。この方法は、炎症性滑膜からマクロファージと線維芽細胞の両方を高純度で単離することができ、簡便で再現性があります。この方法は、滑膜線維芽細胞との共培養下で滑膜マクロファージの増殖を可能にする。
また、この方法は、滑膜線維芽細胞をより少ない継代で使用できるという点で利点を提供する。確立されたプロトコルは、関節リウマチの病理学的メカニズムの解明に有利である。
