Использование анализа теплового сдвига для зондирования связывания субстрата с селенопротеином O

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

483 Views

•

03:09 min

•

August 9th, 2024

DOI :

10.3791/67139-v

August 9th, 2024

•

Abner Gonzalez¹, Anju Sreelatha¹^,²

¹Department of Physiology, University of Texas Southwestern Medical Center, ²Charles and Jane Pak Center for Mineral Metabolism and Clinical Research, University of Texas Southwestern Medical Center

Транскрипт

Наша цель — изучить биохимическую активность белков с неизвестными функциями. Связывание кофактора не только важно для активности некоторых белков, но также может изменять их термическую стабильность. Одно из практических применений этого явления заключается в использовании изменения термической стабильности, измеряемого температурой плавления белка, для анализа связывания лигандов.

Анализ теплового сдвига является универсальным инструментом для исследования взаимодействия белков с потенциальными кофакторами или лекарственными препаратами, а также для выявления стабилизирующих условий для кристаллографии. Некоторые из его преимуществ по сравнению с другими методами грохочения заключаются в относительно простой настройке и высокой производительности с 96 или 384 луночными планшетами. Селенопротеин О, или SelO, является эволюционно консервативной псевдокиназой, которая переносит аденозинмонофосфат из АТФ в белковые субстраты в посттрансляционной модификации, известной как АМПилирование.

В этом протоколе мы используем TSA для анализа связывания нуклеотидов и металлов с SelO.

Резюме

Смотреть дополнительные видео

Главы в этом видео

0:00

Introduction