Bu çalışmada, fonksiyonu bilinmeyen proteinlerin biyokimyasal aktivitelerini incelemeyi amaçlamaktayız. Kofaktör bağlanması sadece bazı proteinlerin aktivitesi için gerekli değildir, aynı zamanda termal stabilitelerini de değiştirebilir. Bu fenomenin pratik bir uygulaması, ligand bağlanmasını analiz etmek için proteinin erime sıcaklığı ile ölçülen termal stabilitedeki değişimin kullanılmasında yatmaktadır.
Termal kayma testi, potansiyel kofaktörler veya ilaçlarla protein etkileşimlerini araştırmak ve kristalografi için stabilize edici koşulları belirlemek için çok yönlü bir araçtır. Diğer tarama yöntemlerine göre avantajlarından bazıları, nispeten basit kurulumu ve 96 veya 384 kuyulu plaka ile yüksek verimidir. Selenoprotein O veya SelO, AMilasyon olarak bilinen translasyon sonrası bir modifikasyonda adenozin monofosfatı ATP'den protein substratlarına aktaran, evrimsel olarak korunmuş bir psödokinazdır.
Bu protokolde, nükleotidi ve metalin SelO'ya bağlanmasını analiz etmek için TSA'yı kullanıyoruz.