孟加拉玫瑰介导的光动力疗法抑制 白色念珠菌

耐药性白色念珠菌的发病率不断上升，这是全世界的一个严重健康问题。抗菌光动力疗法 （aPDT） 可能提供对抗耐药性真菌感染的策略。本方案描述了Rose bengal介导的apDT在体外耐多药白色念珠菌菌株的疗效。

侵袭性 白色念珠菌 感染是人类中一种严重的机会性真菌感染，因为它是肠道，口腔，阴道和皮肤最常见的定殖者之一。尽管有抗真菌药物，但侵袭性念珠菌病的死亡率仍约为50%。不幸的是，耐药性 白色念珠菌 的发病率在全球范围内正在增加。抗菌光动力疗法（aPDT）可以提供替代或辅助治疗，以抑制 白色念珠菌 生物膜的形成并克服耐药性。孟加拉玫瑰（RB）介导的aPDT已经显示出对细菌和 白色念珠菌的有效细胞杀伤。在这项研究中，描述了RB-aPDT对耐多药 白色念珠菌的 疗效。自制的绿色发光二极管（LED）光源设计用于与96孔板的孔的中心对齐。酵母在具有不同浓度RB的孔中孵育，并用不同流量的绿光照亮。采用平板稀释法分析杀伤效果。通过光和RB的最佳组合，实现了3对数生长抑制。得出的结论是，RB-aPDT可能潜在地抑制耐药的 白色念珠菌。

白色念珠菌定植于健康个体的胃肠道和泌尿生殖道中，在约50%的个体中可被检测为正常微生物群¹。如果在宿主和病原体之间产生不平衡，白色念珠菌能够入侵并引起疾病。感染的范围可以从局部粘膜感染到多器官衰竭²。在美国的一项多中心监测研究中，2009 年至 2017 年间，从侵袭性念珠菌病患者中分离出的约一半是白色念珠菌 ³ 号。念珠菌血症可能与高发病率、死亡率、住院时间延长有关⁴.美国疾病控制和预防中心报告说，在所有测试的念珠菌血液样本中，约有7%对抗真菌药物氟康唑⁵具有耐药性。耐药性念珠菌属的出现引起了人们的关切，即开发抗真菌药物的替代或辅助疗法。

抗菌光动力疗法（aPDT）涉及用PS⁶峰值吸收波长处的光激活特定的光敏剂（PS）。激发后，激发的PS将其能量或电子转移到附近的氧分子并返回到基态。在此过程中，形成活性氧和单线态氧并引起细胞损伤。aPDT自20世纪90年代以来已被广泛用于杀死微生物⁷。aPDT的一个好处是，在照射过程中，单线态氧和/或活性氧（ROS）在细胞中会损坏多个细胞器....

1. aPDT系统准备

1. 从LED灯条上切割四个绿色发光二极管（LED）（参见 材料表），并将它们与96孔板的四个孔对齐（图1）。
   注：LED 被排列成一个 4 x 3 阵列。LED的背面粘附在散热器上以在照射过程中分散热量。
2. 使用光功率计测量LED在540 nm处的通量率¹¹ （参见 材料表）。参见 补充图1 ，确保LED?.......

图1 显示了本研究中使用的apDT系统。由于高温可能导致严重的电池死亡，因此LED阵列由电风扇冷却，并在照射过程中使用散热器将恒定温度保持在25±1°C。 热效应可以打折。具有均匀的光分布也是成功的apDT的重要决定因素;因此，在照明期间将LED灯泡精确地对准井至关重要。由于LED的亮度，在开灯之前需要配备太阳镜。

白色念珠菌 立即用RB染色，.......

最近报道了RB-PDT治疗真菌性角膜炎的临床应用结果^{令人鼓舞 19}.RB的吸收峰在450-650nm处。确定光源的通量率对于成功的apDT至关重要。治疗癌细胞需要高通量（通常>100 J / cm²），而较低的通量有望治疗感染的病变⁶。高通量意味着长时间暴露，这在临床环境中可能不切实际。对于治疗真菌性角膜炎，眼科界同意5.4 J^{/ cm 2 20}。RB的孵育.......

这项工作已获得国立成功大学应用纳米医学中心的资助，教育部（MOE）高等教育萌芽项目框架内的特色区域研究中心计划，以及台湾科技部[MOST 109-2327-B-006-005]到TW Wong。洪俊华感谢台湾成功大学医院[NCKUH-11006018]和[MOST 110-2314-B-006-086-MY3]的资助。