カンジダ・アルビカンスを阻害するローズベンガル媒介光線力学療法

薬剤耐性カン ジダ・アルビカンス の発生率の増加は、世界中で深刻な健康問題です。抗菌光線力学療法(aPDT)は、薬剤耐性真菌感染症と戦うための戦略を提供するかもしれない。本プロトコールは、多剤耐性 C.アルビカン ス株に対するローズベンガル媒介性aPDT有効性を インビトロで記載する。

侵襲性 カンジダ・アルビカンス 感染症は、腸、口、膣、および皮膚の最も一般的な植民者の1つであるため、ヒトにおける重要な日和見真菌感染症である。抗真菌薬が利用可能であるにもかかわらず、侵襲性カンジダ症の死亡率は〜50%のままである。残念なことに、薬剤耐性の C.アルビカンの発生 率は世界的に増加しています。抗菌光線力学療法(aPDT)は、 C.アルビカンス バイオフィルム形成を阻害し、薬物耐性を克服するための代替またはアジュバント治療を提供し得る。ローズベンガル(RB)媒介性aPDTは、細菌および C.アルビカンスの効果的な細胞死滅を示している。この研究では、多剤耐性 C.アルビカンス に対するRB−aPDTの有効性が記載されている。自家製の緑色発光ダイオード(LED)光源は、96ウェルプレートのウェルの中心に合わせるように設計されています。酵母を異なる濃度のRBを有するウェルでインキュベートし、様々な緑色の光のフルエンスで照らした。殺傷効果をプレート希釈法により分析した。光とRBの最適な組み合わせにより、3対数の成長阻害が達成された。RB-aPDTは薬剤耐性 のC.アルビカンスを潜在的に阻害する可能性があると結論付けられた。

C.アルビカンスは 、健常人の胃腸管および尿生殖路に定着し、個体の約50%において正常な微生物叢として検出され得る¹。宿主と病原体との間に不均衡が生じると、 C. albicans は侵入して病気を引き起こす可能性があります。感染は、局所粘膜感染から多臓器不全²までの範囲であり得る。米国の多施設サーベイランス研究では、2009年から2017年の間に侵襲性カンジダ症患者からの分離株の約半分が C. albicans³である。カンジデミアは、高い罹患率、死亡率、長期入院⁴と関連している可能性がある。米国疾病管理予防センターは、試験されたすべてのカンジダ血液サンプルの約7%が抗真菌薬フルコナゾールに耐性があると報告し^ました5。薬剤耐性 カンジダ 種の出現は、抗真菌剤に代わるものまたはアジュバント療法を開発する懸念を提起する。

抗菌光線力学療法(aPDT)は、PS⁶のピーク吸収波長の光で特定の光増感剤(PS)を活性化することを含む。励起後、励起されたPSは、そのエネルギーまたは電子を近くの酸素分子に伝達し、基底状態に戻る。このプロ....

1. aPDTシステムの準備

1. LEDストリップから緑色の発光ダイオード(LED)を4つ切り取り( 材料表を参照)、96ウェルプレートの4ウェルに合わせます(図1)。
   メモ: LED は 4 x 3 アレイに配置されました。LEDの背面は、照射時に熱を分散させるためにヒートシンクに接着した。
2. 540nmにおけるLEDのフルエンス率¹¹ を光パワーメー.......

図1は 、本研究で使用されているaPDTシステムを示す。高温は著しい細胞死を引き起こす可能性があるため、LEDアレイを扇風機で冷却し、照射時にはヒートシンクを用いて25±1°Cで一定温度を維持する。 熱効果は割引できます。均一な配光を持つことも、aPDTを成功させるための重要な決定要因です。したがって、照明中にLED電球を井戸に正確に合わせることが重要です。.......

真菌性角膜炎に対するRB−PDTの臨床応用の有望な結果が最近報告されている¹⁹。RBの吸収ピークは450〜650nmにある。aPDTを成功させるためには、光源のフルエンス率を決定することが不可欠です。がん細胞の治療には高いフルエンス(通常>100J/^cm2)が必要であり、感染病変の治療には低いフルエンスが必要である^{と予想される6}。高いフルエンスは、臨床?.......

この研究は、文部(MOE)による高等教育スプラウトプロジェクトの枠組みの中で、国立成昆大学応用ナノ医学センター、国立成昆大学から資金提供を受けており、台湾科学技術部[MOST 109-2327-B-006-005]からTW Wongに資金提供を受けています。J.H. Hungは、台湾の国立成昆大学病院[NCKUH-11006018]および[MOST 110-2314-B-006-086-MY3]からの資金提供を認めています。