Elektrofizyolojik Motor Ünite Sayısı Tahmini (MUNE) Fare Arka ayağın KASLARDAKİ bileşik kas aksiyon potansiyeli (BKAP) Ölçme

Özet

Biz fare motor ünite fonksiyonunun in vivo izlenmesi sağlayan rafine protokolleri sunuyoruz. Teknikler siyatik sinir tarafından innerve fare arka bacak kaslarında bileşik kas aksiyon potansiyeli (BKAP) ve motor ünite sayısı tahmini (MUNE) ölçmek için tarif edilmiştir.

Özet

Compound muscle action potential (CMAP) and motor unit number estimation (MUNE) are electrophysiological techniques that can be used to monitor the functional status of a motor unit pool in vivo. These measures can provide insight into the normal development and degeneration of the neuromuscular system. These measures have clear translational potential because they are routinely applied in diagnostic and clinical human studies. We present electrophysiological techniques similar to those employed in humans to allow recordings of mouse sciatic nerve function. The CMAP response represents the electrophysiological output from a muscle or group of muscles following supramaximal stimulation of a peripheral nerve. MUNE is an electrophysiological technique that is based on modifications of the CMAP response. MUNE is a calculated value that represents the estimated number of motor neurons or axons (motor control input) supplying the muscle or group of muscles being tested. We present methods for recording CMAP responses from the proximal leg muscles using surface recording electrodes following the stimulation of the sciatic nerve in mice. An incremental MUNE technique is described using submaximal stimuli to determine the average single motor unit potential (SMUP) size. MUNE is calculated by dividing the CMAP amplitude (peak-to-peak) by the SMUP amplitude (peak-to-peak). These electrophysiological techniques allow repeated measures in both neonatal and adult mice in such a manner that facilitates rapid analysis and data collection while reducing the number of animals required for experimental testing. Furthermore, these measures are similar to those recorded in human studies allowing more direct comparisons.

Giriş

Motor ünite sayısı tahmini (MUNE) aslen McComas ark tarafından tanımlanmıştır. üzerinde üç yıl önce ^1. Orijinal teknik submaksimal artışlarını elde etmek için uyarım kademeli bir artış kullanılan bileşik kas aksiyon potansiyeli (CMAP) Kayıt tekniğinin bir modifikasyonu olmuştur. Bu artışlarla toplanır ve bir tek motor ünite potansiyeli (SMUP) tahmini boyutunu belirlemek için ortalaması alınmıştır. Bu boyut, motor ünitelerinin sayısını tahmin etmek CMAP tepki içine test edilen kas innerve bölündü. Orijinal açıklaması ardından, elektrofizyolojik yanıtları ve artan kuvvet her ikisini de kullanarak çok sayıda varyasyonları (mekanik) ölçümleri insan çalışmaları ve hayvan modellerinde ² hem de kullanılmıştır. MUNE tekniği Amyotrofik Lateral Skleroz ^{(ALS), 3, 4} fare modelleri araştırmak Shefner ve arkadaşları tarafından modifiye edildi.

Geçerli açıklama, biz detay simplifgerçekleştirmek için hızlı olan MUNE teknikleri ied değişiklikler. Önemli olarak, CMAP ve MUNE neonatal ve yetişkin farelerde ^5-8 hem de güvenilir bir önlem sağlar. Deneyimli kişiler hayvan başına 10-20 dakika içinde bu önlemleri gerçekleştirebilirsiniz ve tekrarlayan ölçümler boyuna veri ⁵ edinimi izin veren mümkün bulunmaktadır. Cari çalışmalarda, bir klinik elektrodiyagnostik sistemi kullanır. Bizim tecrübelerimize göre, klinik elektrodiagnostik sistemler in vivo elektrofizyolojik verilerin hızlı ve etkin yakalama için optimize edilmiş, yine de standart elektrofizyolojik kuleleri kolayca bu uygulama için adapte edilebilir.

Protokol

Bu protokol tarafından onaylanan ve Ohio Devlet Üniversitesi Wexner Tıp Merkezi hayvan bakımı ve etik kurallarımıza uygun oldu.

1. Hayvan Hazırlama ve Anestezi

1. Fareler tutarken eldiven giyin.
2. Yüzüstü pozisyonda inhale izofluran ve yer ile fareler anestezi. % 3-5 izofluran ve dakika _O 2 akış hızı başına 1 L kullanarak anestezi neden. Anestezi indüksiyonu takiben,% 2-3 anestezi ve dakika _O 2 akış hızı başına 1 L korumak.
   1. Hayvanın hastalık hali, yaş ve solunum oranına göre yeterli anestezi için _O 2 akışını ve izofluran yüzdesini ayarlayın. Daha küçük ya da zayıf hayvanlar yeterli anestezi (yani 1.5-% 2.5 izofluran) için daha az izofluran gerekebilir.
   2. Böyle bir çekilme yanıtı eksikliği göstermek için forseps gibi bir nesne ile hafif hindlimb ayak tabanı basınç uygulayarak yeterli anestezi onaylayın.;
3. CMAP boyutunu ve süresini etkileyebilir sıcaklık varyasyon olarak termostatik bir sıcak tutma levhasının 37 ° C yüzey sıcaklığında sıcaklığı muhafaza edin.
4. Kuruluğunu önlemek için gözlere veteriner petrol bazlı merhem sürün. Anestezi gözlemleyerek solunum oranı seviyesini izlemek ve forseps aracılığıyla ayak pedi uygulanan baskının ardından çekilme yanıtları için değerlendirmek.
5. Makası kullanılarak incelenmesi gereken hindlimb saç çıkarın. Hindlimb (ler) incelenmesi gereken saç çıkarıldıktan sonra, hafifçe, diz arka ayaklarında uzatmak kalça kaçırmaya ve (Şekil 1'de gösterildiği gibi) yapışkan bant kullanılarak çalışma yüzeyine yapıştırın.
6. Sternal yatma korumak için yeterli bilinci yerine kadar CMAP ve MUNE kayıtları ve anestezi kesildikten sonra, sahipsiz hayvan bırakmayın. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirkete hayvan iade etmeyin.

2. RKurulum ve Ekipmanları ayıt

1. Şekil 1'de resimdeki gibi CMAP ve MUNE kayıtları için elektrotlar yerleştirin.
2. Kayıt elektrotları için iki ince halka elektrotlar kullanın.
   1. Diz ekleminde arka bacak gastroknemius kasının proksimal kısmı, örten cilt üzerinde aktif (E1) halka elektrot ve ayağın orta-metatarsal kısmı üzerinde cilt üzerinde referans (E2) halka elektrot yerleştirin.
   2. Empedansını azaltmak için, ceket jel ile halka elektrotlar altında yatan cilt yeterince kalan saçları doyurmak ve elektrot-cilt teması maksimize etmek. Bu elektrotlar arasında bir elektrik köprü neden olabilir ve doğru kayıt önleyebilir olarak elektrot jeli aşırı uygulama yapılmamalıdır.
3. Proksimal arka bacak siyatik sinir stimülasyonu için iki katot ve anot olarak 28 G iğne kutuplu izole kullanın. Proksimal arka bacak bölgesinde katodu yerleştirin ve ano eklemekde daha proksimalde deri altı dokuda sakrumu örten.
   1. Siyatik sinir aşırı yakın ya da doğrudan yaralanma siyatik sinir ya da diğer yapı. Şekil 1 elektrot yerleşimini gösterir ki çok derin uyarıcı elektrotlar takarak kaçının.
4. Toprak elektrot için, karşı taraf arka bacak veya kuyruk atılabilir yüzey elektrot yerleştirin.

3. Veri Toplama

1. Siyatik BKAP
   1. Kare-dalga 0.1 ms süreli bakliyat ve mA 1-10 arasında değişen şiddette siyatik siniri uyararak siyatik BKAP yanıtlarını alın.
   2. Artık artar yanıt genliği kadar uyaran yoğunluğu artan CMAP yanıtları edinin. Daha sonra, maksimumun üzerinde bir uyan sağlamak amacıyla, en fazla bir tepki elde etmek için kullanılan uyaran yoğunluk ~% 120 uyarılması artırmak ve ilave bir tepki elde etmek. Hiçbir yoksa daha i artırmakn CMAP boyutu, maksimum CMAP olarak bu tepkiyi kaydeder.
   3. Kayıt başlangıç-tepe mV ve pik-tepe CMAP genliklerinin (Şekil 2).
2. Ortalama Tek Motor Ünite Potansiyel (SMUP) Boyut ve MUNE Hesaplama
   1. Artışlı uyarım tekniği ¹ ile ortalama tek motor ünite potansiyeli (SMUP) boyutunu belirler. Minimal hep ya hiç yanıtları elde etmek için 0.03 mA adımlarla yoğunluğunu artırırken artan tepkiler elde etmek için, 1 Hz frekansta 0.1 ms süreli submaksimal uyarımı sağlar. 0.21 mA ve 0.70 mA arasındaki uyaran yoğunluğu ile ilk tepkiyi edinin.
      1. Ilk tepkisi 0.21 mA 0.70 mA arasındaki uyaran yoğunluğu ile oluşmazsa, sırasıyla azaltmak veya gerekli uyaran yoğunluğunu arttırmak ya yakın ya da uzakta siyatik sinirin konumundan proksimal uyluk uyarıcı katot konumunu ayarlamak.
      2. İlk i isencremental cevap 9 ek artışlarla toplam elde etmek için 0.03 mA adımlarla ayarlama uyaran yoğunlukları artan ek artışlarını mA 0.21 mA 0.70 arasında bir uyarıcı yoğunluğu ile elde karşılar (3.2.2), mağazanın aşağıda belirtildiği kriterleri ve kayıt olduğu belirlenen kriterleri karşılaması.
   2. Artan tepkilerin ölçümler sırasında, her artış aşağıdaki kriterlere karşıladığından emin olun.
      1. Artan tepkilerin ilk negatif zirve Şekil 2'de CMAP resimde gölgeli bölümü olarak gösterilen maksimum BKAP tepkisinin negatif zirve kapsamında geçici olarak hizalanmış olduğundan emin olun.
      2. Her artan tepkisi kararlı ve fraksiyon olmadan olduğundan emin olun, üç çift tepkileri gözlemleyerek kurdu. (Önceden kaydedilmiş artışlarla üzerine bindirilmiş) gerçek zamanlı görsel artan tepkiler ayırt eder.
         Not: Her bir artış görsel olarak ayrı olmalıdırve daha büyük bir önceki tepki (Şekil 3) ile karşılaştırıldığında. Gerçek zamanlı olarak analiz öncesinde tepkiler ile karşılaştırıldığında daha büyük bir amplitüd (artan) tepkilerinin tanıma izin verir ve arka plan gürültüsünü atfedilebilen küçük değişiklikler göz ardı edilebilir. 10 artışlarla bir bindirilmiş bakış daha bu noktayı açıklamak için Şekil 4 (B ve D) gösterilmiştir.
      3. Görsel her artış onayladıktan sonra, ölçülen genlik farkı (önceki yanıt teyit tepki genlik = genlik fark) en az 25 mV olduğundan emin olun.
      4. Artım az 25 mV ise, atın ve yanıtı yeniden ölçün. 10 artan yanıt alındıktan sonra, her bir artan tepkinin geninin (nihai toplam yanıt genliğinde örneğin) tüm on artışlarla toplamının 1/3 daha büyük olmadığını sağlamak için artışlarını değerlendirmek. Bu kurala uyulmaz ise, artan tepkiler yeniden ölçün.
   3. (Şekil 3), ortalama tek motor ünite potansiyeli (SMUP) genlik bir tahmin vermek üzere 10 artan değerlerinin ortalamasını alın. Not: Şekil 3 ortalama SMUP hesaplama temelini ayrıntıları, ancak ortalama SMUP genlik sadece artışlarının toplam sayısına göre nihai artan tepkinin tüm genliği bölünmesiyle hesaplanır (yani, 10).
      (Şekil 3'te gösterilen) Örnek bağımsız SMUP hesaplamalar:
      Artım 1 SMUP 1 = zirve-tepe genlik
      SMUP 1 = 0,050 mV
      SMUP 2 = (2 artış tepe-tepe genlik) - (artışının tepe-tepe genliği 1)
      SMUP 2 = 0.150 mV-0,050 mV = 0,100 mV
      1. (10 toplam kadar) sonraki her artış hesaplayın ve on artışlarla ortalama yapmak.
   4. Ortalama SMUP genliği maksimum BKAP amplitüdü (tepe-tepe) bölerek Mune hesaplayın (peak-to-peak). (MUNE = CMAP / ortalama SMUP). CMAP tipik olarak mV cinsinden verilmektedir ise bir elektrofizyolojik sistemlerde, SMUP artışlarla uV ölçülür. Gerektiğinde, MUNE hesaplama öncesinde benzer birimlere CMAP ve SMUP sonuçları dönüştürmek.

Sonuçlar

CMAP ve Mune teknikleri minimal invaziv elektrot yerleştirme (Şekil 1) kullanılarak siyatik inerve arka bacak kaslarının nöromüsküler fonksiyonun kaydını izin Bu raporda açıklanan. Kas grubu toplam gücü gösterir supramaksimal CMAP boyutu, amplitüdü ve alanında (Şekil 2) parametreleri kullanılarak tanımlanabilir, ancak, mevcut yöntemlerde biz CMAP ve SMUP boyutları ölçmek için genliği kullanılır. CMAP tepki önlemler kas içinde kas liflerinin depolarizasyonunu toplamlı beri, her yerde kas lifi motor nöron patoloji CMAP boyutunda azalmaya neden olabilir. Bu nedenle, CMAP toplam fonksiyonel durumu mükemmel bir ölçü verir. Beklendiği gibi, CMAP boyutu geliştirme ⁵ sırasında artacaktır. Nedeniyle şu denervasyon (yani teminat filizlenmesi) oluşabilir telafi değişiklikler, CMAP boyutu motorlu neur süreçleri rağmen muhafaza edilebilirveya motorlu akson kaybı. Bu nedenle, Mune tekniği kas veya kas grubunun, motor nöron veya akson girişi denenmektedir belirlemek için gereklidir. Bireysel artışlarla kaydedilmesi (Şekil 3), motor ünitelerinin fonksiyonel durumu hakkında daha detaylı bilgi vermek için tek motor üniteleri (SMUP boyutu) ortalama çıkış tahminini verir.

CMAP ve MUNE nöromüsküler hastalığın çeşitli fare modellerinde nöromüsküler fonksiyonu ölçmek için kullanılabilir. Şekil 4'te, yetişkin bir kontrol fare ve siyatik sinir ezmek izleyen bir yetişkin fare 11 hafta bulgular tezat vardır. Siyatik sinir ezmek ardından, MUNE ciddi kontrol fare 278 fonksiyonel motor ünitelerinin normal bulguları ile karşılaştırıldığında 50 tahmini fonksiyonel motor ünitelerinde azalır. Bunun aksine, ezilmiş hayvanda CMAP genliği (39.6 mV taban-tepe, 74,9 tepe-tepe mV) kontrol (49.0 mV taban çizgisi ile karşılaştırıldığında sadece hafif bir azalma gösterir-peak, 84.2 mV tepe-tepe) nedeniyle tali filizlenme için.

Şekil 1. Elektrot Yerleştirme. Siyah (E1) "aktif" elektrot (A) ve kırmızı (E2) "referans" kayıt elektrodu (B) diz gastroknemius proksimal kısmında gastroknemius üzerine yerleştirilir. Uyarıcı katot (siyah) (C) ve anot (kırmızı) (D) uzak yanıtları üretmek için kayıt elektrotları deri altından proksimal yerleştirilir. Bir tek kullanımlık bir disk elektrot (D) artifakı en aza indirmek için bir zemin olarak arka bacak, kuyruk veya sakrum üzerine yerleştirilir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

sayfa içinde
Şekil 2. Bileşik kas aksiyon potansiyeli. Resimde bir temsili BKAP yanıtının bir resmidir. (A) temel-tepeye genlik (negatif gerilim taban üzerinde tasvir edilmiştir) başlangıçtaki negatif tepe izoelektrik başlangıca ölçülür. ( B) tepe-tepe genlik pozitif zirve voltajına negatif zirve voltajı ölçülür. Gri gölgeli alan negatif pik alanı gösterir. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 3. Artan tepkiler. İki temsili artan tepkiler üst üste ve isola içinde olarak gösterilmektediryon. Her artışının MUNE hesaplama genlikleri için zirveye-tepe ölçülür. Artım 1. hepsi ya da hiçbiri yanıt kaydedilen ilk ve tek motor ünite potansiyeli (SMUP) simgelemektedir. Her bir sonraki artışı (# 2-10) önceki yanıtta bindirilmiş bir quantal artışı temsil ediyor. Bu nedenle artışlarla 2-10 için SMUP amplitüdlerini elde etmek için, önce tepki genliği elde artış genliği çıkarılır. Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Şekil 4. Örnek Siyatik CMAP ve MUNE. (A) bir yetişkin olarak Siyatik birleşik kas aksiyon potansiyeli (BKAP) (yaş 6 ay) başlangıç-tepe 49.0 mV genlik ve zirve sı kontrol fare84.2 mV tepe genliği. Ekran hassasiyeti = bölüm başına 10 mV ve ekran süresi 10 ms. (B) (kontrol fare) On gelen artan tepkiler 3,028 mV toplam genlikli ortalama SMUP boyutu (0,3028 mV) belirlemek için 10 ile ayrılır. Ekran hassasiyeti = 0.5 mV ve bölüm başına 1 ms süpürme hızı. Hesaplanan MUNE = 278 (MUNE = CMAP / ortalama SMUP (84.2 mV / 0,3028 mV)) (C) Siyatik CMAP hafif azalmış bazal-tepeye genlik gösteren bir yetişkin farelerde siyatik sinir ezmek (6 aylıktan) Aşağıdaki 11 hafta ( 39.6 mV) ve pik-tepe genliği (74,9 mV). Ekran hassasiyeti = bölünme ve bölüm başına 1 ms süpürme hızı başına 10 mV. (D) On 10 bölü 14,923 mV toplam pik-tepe genliği ile (sinir ezmek ile fare) artan tepkiler karşılık gelen ortalama bir SMUP elde etmek için 1,4923 mV boyutu. Ekran hassasiyeti = 2 şube başına mV ve bölüm başına 1 ms'lik bir süpürme hızı. Hesaplanan MUNE = 50 (MUNE = CMAP/ Ortalama SMUP (74.9 mV / 1,4923 mV)). (** Siyatik ezilme fare artan tepkiler için farklı hassasiyet Not). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.

Tartışmalar

MUNE ve CMAP deneysel çalışmalarda sıklıkla ve ALS ve spinal müsküler atrofi (SMA) ^{9, 10} gibi nöromüsküler bozukluğu olan hastaları takip kullanılan klinik olarak önemli önlemlerdir. Örneğin, SMA, CMAP ve MUNE yaş, şiddeti ve klinik ile iyi bir korelasyon fonksiyonunun ^10-14 ölçüleri. Her iki tedbirler minimal invaziv ve aynı kişide uzunlamasına fonksiyonun değerlendirilmesine imkan vermektedir. Önemlisi, bu önlemler kortikal motor nöronlar tarafından aktivasyonunu veya motor ünitesinin alımı ölçmek değil, ama onlar motor nöron bütünlüğü ve fonksiyonel muadili motor ünitesinin bir klinik ile ilgili bir değerlendirme sağlar.

Nöromüsküler hastalığın hayvan modelleri, insan hastalığının patojenik mekanizmaların anlaşılması ve potansiyel olarak etkili terapötik ajanların klinik öncesi gelişimi için çok önemlidir. Sonuç ölçütlerini ve olabilir Biyobelirteçleri çevirmek yeteneğikolaylaştırmak ve insan klinik çalışmalarda umut verici preklinik bulgular çevirisini hızlandırmak edebilirsiniz türler arasında kullandı. Çeşitli gruplar, daha önce fare modellerinde ^{2-4, 15-22} motor ünitesi fonksiyonunu tahmin etmek elektrofizyolojik ve kuvvet (mekanik) ölçümleri hem kullanmışlardır. Nedeniyle önlemlerin göreli karmaşıklığı, farelerde daha yaygın kullanımı ve uygulanmasını sağlamak için görsel bir biçimde bu teknikleri rafine. Video gösterimi ve öğretim biçimi, prosedürün önemli adımlar vurgulanır ve potansiyel tuzaklar ele alınması sağlar. Motor nöron hastalığı potansiyel tedavilerinin klinik öncesi testler bu tekniklerin uygulanması insan hastalığına farelerden putatif tedavilerin translasyonu geliştirebilir.

CMAP ve MUNE yanıtlarını edinme sürecinde birçok kritik adımlar vardır. Uygun ve tutarlı kayıt elektrot yerleştirme ve hind ile yeterli elektrot temasEkstremite tekrarlanabilir ölçüm genlik ve arka plan gürültüsünü azaltmak için kritik öneme sahiptir. Bu nedenle, arka bacak cilt ve elektrotlar arasındaki yakın temas sürekli teyit edilmelidir. Bu yüzey elektrotları iğne elektrotlar daha tutarlı CMAP ve MUNE kayıtları sunduğunu bulduk. Dolayı çok ince deri altı dokulara, iğne kayıt yüzeyinin küçük hareketler CMAP amplitüdlerinde geniş varyasyon yol açabilir. Ayrıca, iğne elektrotlar daha invaziv doğası nedeniyle potansiyel kas bozulması ve yaralanma yenidoğan farelerde veya boyuna çalışmalar için uygun değildir. Belirli bir kas diğeri ile karşılaştırıldığında daha çok veya daha az yer olduğu ve bu bir ALS fare modelinde ²¹ bildirilmiştir halinde selektif olmayan, yüzey elektrod kayıtların potansiyel bir dezavantajı, azalan çözünürlük fenotipi olasılığı ile ilgilidir.

Ortalama SMUP boyutunu Kazanılması CMAP göre teknik olarak daha zordur. Nedeniyle küçük yanıt vermeyen içinarka plan gürültüsü (uV ziyade mV aralığında) e büyüklüğü daha sorunlu olabilir. Arka plan gürültüsü deney düzeneği yakın diğer elektrikli ekipman toprak elektrot, katot, anot ayarlayarak ve kontrol ederek azaltılabilir. Tipik olarak, hücre içi elektrofizyoloji uygulamalarda kullanılan bir Faraday kafesi, gerekli değildir. Bireysel SMUP cevapların Görsel belirlenmesi elde etmek en zor beceri ve yeterli tekrarlanabilirlik ile tutarlı sonuçlar için pratik ister. Bu takip etmektedir SMUPs maksimal CMAP yanıt süresi içinde başlatmasını sağlamak için önemlidir. Biz gerçekleştirmek ve içi ve gözlemciler arası güvenilirliği artırmak için bu süreç daha kolay hale getirmek için bireysel artan tepkilerin kabulü için kriterleri belirledik.

Artan MUNE tekniği potansiyel bir dezavantajı nedeniyle moto arda fonksiyonel motor ünitelerinin sayısını abartmanin olasılığını içerirr birimleri. Biz Shefner ve diğerleri benzer bir teknik kullanılmıştır. O her cevap tekrarlanabilir bu fenomenin ³ etkisini azaltmak için 3 kez toplam görülmelidir.

Bizim tecrübelerimize göre, klinik elektrodiagnostik sistemler nedeniyle kontrol kolaylığı sağlayan gelişmiş muayene-elektrodiagnostik sistem arayüzü ergonomi burada tarif edilen çalışmalar için optimize edilmiştir. Laboratuarımızda kullanılan iki kanallı sistem Dijital Converter 24 bit Analog ile bir amplifikatör ve kanal başına 48 kHz örnekleme oranı kullanılarak olmayan iki anahtarlı amplifikatör kanalları ile donatılmıştır. Donanım kazancı 100 mV / lige 10nV arasında ayarlanabilir. Düşük frekans filtresi 0,2 Hz-5 kHz bir menzile sahip ve yüksek frekans filtre ayarları 30 Hz-10 kHz arasında değişir. Bir sabit akım stimülatörü (:;: 0,02-1 ms süre 0-100 mA yoğunluk) kullanılır. Çoğu klinik sistemleri benzer uygun özelliklere sahip ve yeterli CMAP ve MUNE yanıtları kaydetmek için ayarlanabilir. Additionally standart elektrofizyolojik kuleleri yeterli CMAP ve MUNE kaydetmek için monte edilebilir, ancak arayüz stimülasyon ayarı ve CMAP ve SMUP tepkilerinin hızlı tanımlama kolaylığı için ayarlanması gerekebilir.

Biz daha önce CMAP tekniklerini kullanmış olması ve MUNE yetişkinlik ⁵ doğum sonrası erken dönemde farelerde arka bacak siyatik innervasyonlu kas hızlı ve tekrarlanabilir bir değerlendirme sağlamak için burada nitelendirdi. Motor fonksiyon için davranışsal testler uygun olmadığı ya da az güvenilir olduğunda bu teknikler fare modellerinde değerlendirilmesine imkan vermektedir. Yenidoğan farelere bu tekniğin uygulanması motor ünitesi geliştirme çalışması kolaylaştırır ve motor nöron innervasyonu ve budama anlayışımızı genişletmek için bir potansiyele sahiptir. Örneğin, MUNE ile kaydedilen fonksiyonel motor birimlerinin sayısı ilk iki haftasında mononeuronal innervasyonu polyneuronal gelen Budama sırasında artacak göstermiştirYenidoğan farelerde ⁵ yaşam s. Bu teknikle uzun süre boyunca fareler test yeteneği periferik sinir hasarı, kalıtsal nöromüsküler bozukluklar ve yaşlanma motor ünite yanıt çalışmaya kendisini ödünç.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Pro trimmer Pet Grooming Kit	Oster	078577-010-003	clippers for hair removal
Synergy T2 EMG system	Natus Neurology	Model no longer available	portable electrodiagnostic system
monopolar needles 28 gauge	Teca	017K121	cathode and anode stimulating electrodes
Alpine Biomed Digital Ring Electrode with twisted wires and 1.5 mm TP connectors.	Alpine Biomed	9013S0312	recording electrodes
Helping Hands alligator clip with iron base	Radio Shack	64-079	Maintaining recording electrode placement
Spectra 360 Electrode Gel	Parker Laboratories	9013G5012	applied to reduce skin impedance
monoject curved tip irrigating syringe	Covidien	81412012	utilized for application of electrode gel
EMG needle cable	Teca	902-RLC-TP	to connect monopolar electrodes to electrodiagnostic stimulator
Disposable 2" x 2" Electrode or similar trimmed as needed	Carefusion	019-415000	ground electrode
Small Heating Plate with built-in RTD sensor, 15x10cm	World Precision Instruments	61830	warming plate used with animal temperature controller to transmit heat to animal
Silicone pad for use with ATC2000	World Precision Instruments	503573	conductive removable pad to cover warming plate for easy cleaning
Animal temperature controller	World Precision Instruments	ATC2000	low noise animal heating system for maintaining animal temperature
Veterinarian petroleum-based ophthalmic ointment	Puralube	26870	applied during anesthesia to avoid corneal injury