Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.
Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal (central) efferent lymph. Importantly, the collection of central lymph from the intestine enables researchers to study both the mechanisms and lipid constitutes associated with lipid metabolism, intestinal inflammation and cancer metastasis, as well as cells involved in immune function and immunosurveillance. A ventral mid-line surgical approach permits excellent surgical exposure to the cranial abdomen and relatively easy access to the intestinal lymph trunk vessel that lies near the pancreas and the right ventral segment of the portal vein underneath the visceral aspect of the right liver lobe. The vessel is meticulously dissected and released from the surrounding fascia and then dilated with sutures allowing for insertion and subsequent securing of the catheter into the vessel. The catheter is exteriorized and approximately 1 L/24 hr of lymph is collected over a 7 day period. While this technique enables the collection of large quantities of central lymph over an extended period of time, the success depends on careful surgical dissection, tissue handling and close attention to proper surgical technique. This is particularly important with surgeries in young animals as the lymph vessels can easily tear, potentially leading to surgical and experimental failure. The video demonstrates an excellent surgical technique for the collection of intestinal lymph.
Lenf sistemi fizyolojisi ilgili yeterli bir alandır. Lenfatik kateterizasyon Klinik öncesi modeller farklı hayvan türleri 1-8 oluşur ve lipid 8-12 ve ilaç metabolizması 13-15, deneysel tedavi 17 kanser metastazı 16 katılan mekanizmaların araştırılması ilaç sanayi ve araştırma kurumları tarafından kullanılan ve bağışıklık fonksiyonu 18 -26. Bu çalışma, lipoprotein metabolizma bileşenlerini ölçmek için bir iç domuz modelinde bağırsak lenf gövde kateterizasyon kullanımını araştırıyor. Lipoprotein metabolizması üretimi ve salgılanması şilomikronlar bölgesinin ve ilişkili lipid ve toplam proteinin değişiklikler yer almaktadır. Yaygın olarak kullanılan kemirgen modellerinde ve insanlar arasında ve gibi lipid metabolizmasında önemli farklılıklar vardır Bunlar beni lipid incelemek için daha karşılaştırılabilir bilgiler verebilir bağırsak lenf toplamak için domuz modelleri kullanılarak, önemli hususlar vardırinsanlar 27-31 yılında tabolism.
Çeşitli cerrahi teknikler büyük hayvan türlerinde bağırsak lenf toplamak için kullanılır: kranial omuz yaklaşımı (yani, göğüs kanal kateterizasyon) 5, lateral üst kanadını yaklaşımı 32-34 ve ventral orta hat veya paramediyan yaklaşım 22,35. Bu video ayrıntılı olarak bağırsak lenf gövde kateterizasyon için ventral orta hat cerrahi yaklaşım kullanılarak domuzlarda cerrahi prosedürü tanımlamaktadır. Dikkatli cerrahi teknik izin lenfatik kateterizasyon bu yöntem, uzun zaman süreleri boyunca büyük lenf miktarlarda ve kendisine hedef toplamak için.
Bu teknik, çeşitli fizyolojik fonksiyonları inceleyerek birçok disiplinlerle uygulamalar sayısız açar. Uygulamalar içerir, ancak tüm vücut lipoprotein ve lipid metabolizması, immüno-tümör oluşumu ve metastaz, bağırsak fonksiyonu ve developm, bunlarla sınırlı değildirent ve bağırsak inflamatuvar hastalığın ilerlemesi.
video ve yazıda hem anlatılan deney hayvanlarında Tüm işlemler Hayvan Bakım Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallar Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve takip edildi.
1. Cerrahi Anestezi ve Neonatal Domuzlar Cerrahi Hazırlık
Bağırsak Lenfatik Trunk 2. Abdominal Cerrahi ve Kateterizasyon
3. Post-cerrahi Kurtarma ve Lenf Koleksiyonu
Lipoprotein ApoB48, Trigliserid, Kolesterol ve toplam Protein 4. Niceleme Lenf Toplanan
Lenf 38 Toplanan Lipoprotein ApoB48 5. miktarının belirlenmesi,
Yenidoğan domuz bağırsak lenfatik gövde lenfatik kateterizasyon 7 günlük süre içinde yaklaşık 1 L merkezi lenf / 24 saat toplanmasını sağlar. Bu deneylerde elde lenf lipid metabolizması, yani toplam lenf protein, ApoB48 kolesterol, trigliserid, toplam protein ve kolesterol bileşenlerini ihtiva etmiştir. Tablo 1 vurgulamaktadır üç domuz toplanmış lenf örneklerinden bu lipit bileşenleri temsil miktarları. Özellikle, lenf akışı ve lipid bileşenleri in-line...
Bağırsak lenf Toplama çeşitli deneysel hayvan modellerinde lipid 8-12 ve ilaç 13-15 metabolizması, kanser metastazı 16,17, hücre kaçakçılığı ve bağışıklık fonksiyonu 18-26 katılan mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir yöntemdir. Nitekim, uzun bir süre boyunca ya periferik (afferent) ve merkezi (efferent ve büyük gövde damarlar) lenf büyük miktarlarda hasat yeteneği immün modülasyon ajanları 18-22 ile zorluklar aşağıdaki h?...
The authors have nothing to disclose.
The work was supported in part by funding from Alberta Livestock and Meat Agency and Natural Science and Research Council Discovery grant to S. D. Proctor.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Miller laryngoscope blade | Welch Allyn | 68044 | 182 mm length |
Surgivet advisor: Vital signs monitor | Surgivet | V9203 | |
Rectal temperature probe | Surgivet | V3417 | |
Mono-polar electrosurgery generator | Valley Lab | ||
Metzenbaum scissors | Fine Science | 14518-18 | |
Tuffier retractor | Stevens | 162-11-676 | |
Mosquito forceps | Stevens | 162-7-10 | |
Kelly forceps-curved (14cm) | Stevens | 162-7-38 | |
Allis tissue forceps | Stevens | 162-7-38 | |
Forceps dressing-eye (10.2cm) | Stevens | 162-18-780 | |
Forceps dressing-Adison (12.1cm) | Stevens | 162-17-2510 | |
Needle Drivers | Stevens | 162-V98-42 | |
Iris scissors | Fine science | 14058-11 | |
Circulating water pump | Jorvet | J-783X | |
Maxitherm-Vinyl blanket | Jorvet | J-784C | |
Q tip applicators | Fisher Scientific | 22-037-960 | |
Catheterization tubing (4.06 OD X 2.31 ID) | Braintree Scientific Inc. | MRE-160 | Micro-Renethane implantation tubing |
2-0 silk suture | Ethicon | LA556 | |
2-0 polyglactin suture | Ethicon | J443H | 2-0 vicryl |
Large animal jacket | Lomir Biomedical Inc. | SSJ2YC | |
Polypropylene wash bottles | Fisher Scientific | 03-409-22C | 500 ml |
Penicillin-Streptomycin | Sigma Aldrich | D4333 | |
EDTA | Sigma Aldrich | 60-00-4 | |
Amphotericin B | Sigma Aldrich | A2411 | |
Azaperone | Elanco Animal Health | Stresnil | |
Dexmedetomidine hydrochloride | Zoetis | 6295 | Dexdomitor |
Isoflurane | Abbott Animal Health | 05260-5 | IsoFlo |
Ketamine hydrochloride | Zoetis | 2626 | Ketaset |
Bupenorphine hydrochloride | Champion Alstoe Animal Health | DIN:02347510 | |
6 mm Endotracheal tube | Jorvet | J-165d | |
10% Lidocaine spray | AstraZeneca | DIN:02003767 | |
4 % Chlorhexidine surgical scrub | Partnar Animal Health | PCH-011 | Diluted: 2.0% solution |
3M Surgical steri- drape | 3M Health Care | 1040 | |
SDS page gel | Invitrogen | EA0375BOX | 3-8 % tris acetate |
Polyvinylidene fluoride membrane | Millipore | IPVH00010 | 0.45 μm pore size |
ApoB antibody | EMD Millipore | AB742 | 1:4000 dilution |
Donkey anti-goat IgG-HRP | Santa Cruz Biotechnology | Sc-2304 | |
ECL Prime Western Blotting Reagent | GE Healthcare LifeSciences | RPN2232 | |
Triglyceride Kit | Wako Pure Chemicals | 998-40391/994-40491 | |
Total Cholesterol Kit | Wako Pure Chemicals | 439-17501 | |
Total Protein | Pierce | 23225 | Bicinchoninic Acid Assay |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır