Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
Here we present a protocol to assess cardiopulmonary function in awake swine, at rest and during graded treadmill exercise. Chronic instrumentation allows for repeated hemodynamic measurements uninfluenced by cardiodepressive anesthetic agents.
Bu protokol, kronik enstrüman domuz ve bir motorlu koşu bandı üzerinde domuz egzersiz prosedüre cerrahi prosedür açıklanmaktadır. kardiyopulmoner fonksiyon genellikle anestezi gerektiren, invaziv ölçülür erken kardiyopulmoner fonksiyon bozukluğu, özellikle hayvan modellerinde, teşhis edilmesi zordur. Birçok anestezik ajanlar Kardiyodepresif olduğundan, kardiyovasküler fonksiyonu ince değişiklikler maskeli olabilir. ölçümler anestezi ve akut cerrahi travmanın etkileri olmaksızın sakin bir dinlenme koşulları altında elde edilebilir ve böylece zıt durumda, kronik cihazlar, uyanık halde kardiyopulmoner fonksiyonunun ölçülmesini sağlar. hayvanlar düzgün eğitimli zaman Dahası, ölçümler de derecelendirilmiş koşu bandı egzersiz sırasında elde edilebilir.
Akış sondaları Coron ölçümü için inen koroner arter kalp debisi ölçümü ve sol ön etrafında aort veya pulmoner arter etrafına yerleştirilirli kan akışı. Sıvı dolu kateterler basıncı ölçümü ve kan örneklemesi için aort, pulmoner arter, sol atrium, sol ventrikül ve sağ ventrikül implante edilir. Buna ek olarak, bir 20 G kateter koroner venöz kan örnekleme izin vermek için ön interventriküler damar konumlandırılır.
iyileşme bir hafta sonra, 3 dakika süren her aşaması ile, beş kademeli egzersiz protokolüne domuz kateterler basınç ve debi metre bağlandığında, bir motorlu koşu bandı üzerinde yerleştirilir ve domuz tabi tutulur. Hemodinamik sinyalleri sürekli olarak kaydedilir ve kan örnekleri her egzersiz aşamasının son 30 saniye boyunca alınır.
Kronik instrumented hayvanları okuyan büyük avantajı dinlenme değil, aynı zamanda egzersiz gibi fiziksel stres sırasında değil, sadece kardiyopulmoner fonksiyonun seri değerlendirmesini izin vermesidir. Ayrıca, kardiyopulmoner fonksiyon hastalığı geliştirme a sırasında sürekli olarak değerlendirilebilirND, kronik tedavi sırasında, bu şekilde istatistiksel gücünü artırmak ve dolayısıyla çalışma için gerekli hayvan sayısını sınırlar.
Yeterli kardiyopulmoner fonksiyon özellikle de egzersiz 1 sırasında olduğu gibi artan metabolik talep koşulları sırasında, oksijen ve besin ile vücut tedarik esastır. Egzersize kardiyopulmoner tepki kalp fonksiyonu, yani uyarlamalar bir dizi ile karakterizedir., Egzersiz kasları besleyen vasküler yataklarda kalp atım hızı, kontraktilite ve atım hacminde ve mikrovasküler fonksiyon, yani, vazodilatasyon bir artış yanı sıra pulmoner gibi gastrointestinal sistem tedariki vasküler yatak yanı sıra inaktif kasları 1 damar ve vazokonstriksiyon. Bozulmuş egzersiz kapasitesi kardiyopulmoner disfonksiyonun erken özelliğidir ve kardiyopulmoner egzersiz testleri bozulmuş egzersiz kapasitesi 2 olan hastalarda kardiyak disfonksiyon, vasküler disfonksiyon ve / veya pulmoner disfonksiyon arasındaki tanımlamak için etkili bir yöntem olarak kullanılmaktadır. Erken kardiyopulmoner disfonksiyon D,kardiyopulmoner fonksiyon genellikle anestezi gerektiren, invaziv ölçülür olarak ifficult birçok anestezik ajanlar Kardiyodepresif özellikleri 3 haiz olan, özellikle hayvan modellerinde, teşhis etmek.
Kronik enstrümantasyon uyanık halde kardiyopulmoner fonksiyon ölçümü için izin verir, ve hayvanlar tamamen laboratuvar koşulları ölçümlere göre ayarlanmıştır zaman anestezi ve akut cerrahi travmanın etkileri olmadan sessiz istirahat koşullarında elde edilebilir. Hayvanlar eğitilmiş Dahası, ölçümler de kademeli koşu bandı egzersizi 4,5 sırasında elde edilebilir. Daha spesifik olarak, sol ve koroner sistemik ve pulmoner mikrosirkülasyondaki vazomotor sesi düzenlenmesi tespit edilebilir ise sağ ventrikül fonksiyonu, değerlendirilmesi ve miyokard perfüzyon ile ilgili olabilir. sıvı dolu kateter kullanımı reklamı empoze olmadan basınç ölçümünü yanı sıra alarak kan örneklerini veriyorHayvanlar üzerinde neksel stresi. Kronik olarak hayvanlar üzerinde çalışılarak bir diğer avantajı, kardiyopulmoner egzersiz testi, bu şekilde istatistiksel gücünü artırmak ve dolayısıyla çalışma için gerekli hayvan sayısını sınırlama hastalık gelişimi esnasında veya kronik tedavi sırasında ya kendi kontrolü olarak bir hayvan kullanımına izin tekrarlanabilir olmasıdır .
Domuz Kardiyopulmoner anatomisi, insanlarda bu benzer ve diyabet 6, miyokard enfarktüsü 7, pulmoner hipertansiyon 8,9 ve ilerleme hızı kaynaklı kalp yetmezliği 10,11 olarak kardiyopulmoner hastalığın çeşitli biçimlerini oluşturmak mümkündür. Ayrıca, domuz boyutu sadece kan gazlan analiz etmek için değil, aynı zamanda nörohumoral ölçümler yapmak için ve / veya hastalığın biyolojik aramak için, kronik aletleri ve yeterli miktarda tekrarlanan kan örnekleme sağlar.
Bu protokol, kronikleştiriyor için kullanılan cerrahi tarifly enstrüman domuz yanı sıra motorlu koşu bandı üzerinde domuz egzersiz için protokol.
Hayvan denekleri Prosedürleri Erasmus Tıp Merkezi Rotterdam Hayvan Bakım Komitesi (NL) tarafından onaylanmıştır. 6 ve 80 kg arasında ağırlıklar ile domuz başarıyla bu protokolü kullanarak Enstrümante edilmiştir.
İnsan Taşıma için Hayvanların 1. Adaptasyon
Cerrahi 2. Hazırlık
3. Cerrahi
Cerrahi Şekil 1. Genel Sol üst paneli:. Traş ve bleu satırlar arasındaki yatıyor sterilize edilmelidir hayvan, steril bir alan. insizyon bölgesi kırmızı noktalı çizgi olarak tasvir edilir. Alt Sol panel: kateterler ve akış sondaları Resim: sıvı dolu kateter (A), lastik bant (B) dahil olmak üzere aort / pulmoner akım probu, 20 G iğne (C) ve koroner akım probu (D) de dahil olmak üzere koroner venöz kateter. Sağ üst panel: kateterler ve akış sondaları yerleştirme şematik bakış. MAP, ortalama arter basıncı; Kor venöz, koroner venöz kateter; LAP, atriyal basınç sol; LVPsol ventrikül basıncı; RVP, sağ ventrikül basıncı; PAP, pulmoner arter basıncı; CO, kardiyak output; CBF, koroner kan akışı. Alt sağ panel: a. Dikişin ve bir düğüm dikiş boyunca yaklaşık 1 cm mesafe ile güvence altına geri çıkarken tünelli kateterler bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen buraya tıklayınız.
4. Koşu Bandı Deneyi (Şekil 2)
Şekil 2. Koşu Bandı Deneyi. Sol bölmedels: koşu bandı üzerinde domuz Enstrümanlı. Sıvı doldurulmuş kateter domuz arkasına yerleştirilmiş basınç dönüştürücüler, bağlanır. Sağ üst panel: koşu bandı, amplifikatör ve kayıt bilgisayara dahil toplam deneysel set-up, genel bakış. Alt sağ panel: kaydedilen hemodinamik veriler, tipik bir örneği. Baştan aşağı; Aort basıncı (AoP, mavi) ve sol ventrikül basıncı (LVP, kırmızı); Sol atriyal basınç (LAP, mavi) ve sol ventrikül basıncı (kırmızı); pulmoner arter basıncı (PAB, mavi) ve sağ ventrikül basıncı (RVP, kırmızı); Aort akım / kardiyak output (AoF, mavi); koroner kan akımı (CBF kırmızı). Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.
5 km / saat egzersiz kadar prensip olarak birlikte per min 137 ± 7-256 ± 8 atım kalp hızında artış gerçekleştirildi 8.5 ± 0.7 L / dk 4.3 ± 0.3 den kalp debisi iki katına sonuçlandı 36 ± 3 ml (Şekil 3) 32 ± 2 ila inme hacminde küçük bir artış. Sol ventriküler basınç birinci türevinin maksimum bir artışla kanıtlandığı gibi inme hacmindeki artış, sol ventrikül büzülebilirliğinde bir artış ile kolaylaştırıldı dP / dtmax birlikte, s...
Bu çalışmada domuz kronik enstrümantasyon nedeniyle ameliyat yanı sıra hemodinamiğini ölçüm yaparken bir motorlu koşu bandı üzerinde aletli domuz egzersiz ve arteriyel, venöz karışık ve koroner venöz kandaki oksijen miktarının ölçümü için kan örneklerini almak için protokol tanımlamaktadır.
Protokol çerçevesinde kritik adımlar
entübasyon işlemi sırasında zaten başlangıç protokolü içinde birkaç kritik adımlar vardır. Tiyopental (2.1.5),...
Yazarlar ifşa hiçbir şey yok.
Bu çalışma (DJ Duncker için) Hollanda Kalp Vakfı hibe 2000T038 (D. Merkus kadar) hibe 2000T042 tarafından desteklenen, Avrupa Komisyonu FP7-Sağlık-2010 hibe MEDYA-261409, Hollanda Kardiyovasküler Araştırma Girişimi (DJ Duncker D. Merkus için): Hollandalı Kalp Vakfı, Üniversitesi Tıp Merkezleri Hollanda Federasyonu, Sağlık Araştırma ve Geliştirme ve Kraliyet Bilimler Akademisi Hollanda Hollanda Örgütü CVON- ARENA KVON 2011-11, (D. Merkus için) KVON-Phaedra CVON2012-08 ve KVON-RECONNECT KVON 2014-11 (DJ Duncker için), Sophia Vakfı (DJ Duncker D. Merkus için) (D. de için Wijs-Meijler, D. Merkus ve IKM Reiss).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
3-way stopcocks | B. Braun | 16496 | |
Perfusor lines PVC (DEHP-free) 150 cm/2.6 ml | B. Braun | 8722960 | Used for fluid filled catheters |
“python “ silicontubing | Rubber BV | 1757 ID 1 mm, OD 2 mm | Used for fluid filled catheters |
Sodium Chloride 0.9% | Baxter | TKF7124 | |
Glucose 10% | Baxter | WE0163 | |
Suction device | |||
Slim-Line electrosurgical pencil with 2 buttons | ERBE ELEKTROMEDIZIN GMBH | 20190-066 | |
Servo Ventilator SV900C | Siemens-Elema AB | ||
Laryngoscoop | Vererinary Technics Int. | 11.02.47 | |
Sterile surgical gloves | |||
tie-on surgical mask | 3M | 1818FS | |
surgical hat | Klinidrape | 621301 | |
Procedure pack | Molnlycke Health Care | 97027809 | Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc |
Droptears | Alcon | 288-28282-01 | |
Betadine scrub 75 mg/ml Povidone-iodine | Meda Pharma BV | RVG08939 | |
Betadine solution 100 mg/ml Povidone-iodine | Meda Pharma BV | RVG01331 | |
Cuffed Endotracheal tube | Emdamed | size depends on animal size | |
Breathing filter Hyrdo therm 3HME | Intersurgical | 1560000 | |
Laryngoscope Handle+ Miller blade size 4 | Kawe Germany | ||
Manual resuscitator- Combibag | Weinmann | 6515-12-313-5596 | |
Perivascular flow probe 3PS | Transonic | For coronary artery; Size 2.5 - 4 mm depending on animal size | |
Confidence flow probe | Transonic | For aorta/pulmonary artery, 16 - 20 mm; size depends on animal size | |
Venflon-Venisystem 20 G x 32 mm | BD | 393224 | For coronary venous catheter |
Blunt Needle 18 G | For coronary venous catheter | ||
Tygon Tubing | Rubber BV | 2802 ID 0.8 mm (1/32’’), OD 2.4 mm (3/32’’) | For coronary venous catheter |
Suction Handle 17 cm 6 6/8 " Coupland 18/8 martinit with tube connector | KLS Martin Group | 18-575-24 | |
Scalple blade | |||
Scalpel Handle 13.5 cm 5 3/8 " Stainless Steel solid | KLS Martin Group | 10-100-04 | |
Vascular Forceps 20.2 cm 8 " De Bakey Stainless Stee | KLS Martin Group | 24-388-20 | ± 14 cm |
Dressing Forceps 17 cm 6 6/8 " Cushing Stainless Steel | KLS Martin Group | 12-189-17 | ± 18 cm |
halsted-musquito straight 12.5 cm - 5" | Rudolf Medical | RU-3100-13 | ± 12 cm |
halsted-musquito curved 12.5 cm - 5" | Rudolf Medical | RU-3101-12 | ± 12 cm |
Dissecting and Ligature Forceps 13 cm 5 1/8 " Gemini Stainless Steel | KLS Martin Group | 13-451-13 | ± 12 cm |
Dissecting and Ligature Forceps 18.5 cm 7 2/8 " Schnidt Stainless Steel | KLS Martin Group | 13-363-18 | |
Rib Retractor Finochietto, Baby Aluminium - | KLS Martin Group | 24-162-01 | |
suture forceps Mayo-Hegar 3 mm 18 cm - 7" | Rudolf Medical | RU-6050-18 | |
Metchenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)" | Rudolf Medical | RU-1311-14M | |
Retrector farabeuf 12 cm - 4 (3/4)" | Rudolf Medical | RU-4497-12 | |
Towel forceps schrädel curved 9cm - 3,5" | Rudolf Medical | RU-3550-09 | |
surgical scissors blunt 13 cm - 5" | Rudolf Medical | RU-1001-13 | |
Gauzes Cutisoft 10 x 10 cm 4-ply | BSN Medical | 45846-00 | |
Gauzes Cutisoft 5 x 5 cm 4-ply | BSN Medical | 45844-00 | |
Flowmeter -CM2 / SF2 - 2gas (O2 and Air) | UNO BV | 180000008 | |
Tec 7 Vaporizer | Datex-Ohmeda | ||
Acederm wound spay | Ecuphar NV | ||
Vaseline Album | Bufa | 165313 | |
silkam 3-0 Natural silk, non-absorbable | B. Braun | F 1134043 | sutures for placement of catheters |
silkam 2-0 Natural silk, non-absorbable | B. Braun | F 1134051 | sutures for muscular approximation |
dagrofil 3-0 Polyester, non-absorbable | B. Braun | C 0842478 | sutures for fluid fille catheters after tunneling |
Vicryl rapide 3-0, 1 x 45 cm FS2, V2930G | Daxtrio medische producten | 15560 | sutures for electrical catheters after tunneling |
Vitafil 6 USP | SMI | 6080 | Ties |
Syringes | 10 ml and 2.5 ml | ||
Heparin LEO (heparin sodium) | LEO Pharma A/S | ||
Zoletil | Virbac | tiletamine / zolazepam | |
Sedazine | AST farma | 108855 | xylazine |
Temgesic | RB Pharmaceuticals | 5429 | buprenorphine |
Tensogrip | BSN Medical | 71522-00 | elastic vest |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır