Farelerde Kalp Kapak Hastalıkları Kapsamlı Fenotipik Karakterizasyonu için ekokardiyografik Yaklaşımlar ve Protokoller

Özet

This protocol provides a detailed description of the echocardiographic approach for comprehensive phenotyping of heart and heart valve function in mice.

Özet

The aim of this manuscript and accompanying video is to provide an overview of the methods and approaches used for imaging heart valve function in rodents, with detailed descriptions of the appropriate methods for anesthesia, the echocardiographic windows used, the imaging planes and probe orientations for image acquisition, the methods for data analysis, and the limitations of emerging technologies for the evaluation of cardiac and valvular function. Importantly, we also highlight several future areas of research in cardiac and heart valve imaging that may be leveraged to gain insights into the pathogenesis of valve disease in preclinical animal models. We propose that using a systematic approach to evaluating cardiac and heart valve function in mice can result in more robust and reproducible data, as well as facilitate the discovery of previously underappreciated phenotypes in genetically-altered and/or physiologically-stressed mice.

Giriş

Yaşlanma Kardiyovasküler kalsifikasyon ¹ ilerici artış ile ilişkilidir. Hemodinamik olarak önemli aort darlığı 65 ² yaşın üzerindeki nüfusun% 3 etkiler ve hatta ılımlı aort darlığı (3-4 m / s pik hız) olan hastaların% 40'tan az bir 5 yıllık olaysız sağkalım ^3.. Halen, orada aort kapak kalsifikasyonu ilerlemesini yavaşlatmak için etkili tedaviler ve cerrahi aort kapak replasmanı ileri aort darlığı ⁴ için kullanılabilir tedavidir.

Başlatılması ve aort kapak kalsifikasyonu ilerlemesine katkıda mekanizmaların daha derin bir anlayış kazanıyor amaçlayan çalışmalar aort kapak darlığı ^{5, 6} yönetmek için farmakolojik ve cerrahi olmayan yöntemlerle doğru hareket önemli bir ilk adımdır. Genetikly-değiştirilmiş fareler çeşitli hastalıklara katkıda bulunmak ve şimdi aort darlığı ^{6, 7, 8} biyolojisi anlamaya yönelik mekanik çalışmalar ön plana geliyor mekanizmaların anlayışımızı geliştirilmesinde önemli bir rol oynamıştır. Gibi diğer kardiyovasküler hastalıklar aksine ateroskleroz ve kalp yetmezliği-damar ve ventrikül fonksiyonunu değerlendirmek için standart protokoller köklü-orada farelerde kalp kapak fonksiyonunun in vivo feno ilişkilendirilmiş benzersiz zorluklar çoğunlukla vardır. Son yorumları sayıda görüntüleme ve kemirgenler ^{9, 10, 11} valf fonksiyonunu değerlendirmek için kullanılan invaziv modalitelere avantajları ve dezavantajları konusunda kapsamlı tartışmalar sağlanan olsa da, bugüne kadar, biz bir COMPRE sağlayan bir yayının farkında değildirmlam, adım-adım farelerde fenotiplendirme kalp kapak fonksiyonu için protokol.

Bu yazının amacı, farelerde kalp kapak işlevi fenotipe yöntem ve protokolleri tanımlamaktır. Tüm yöntemler ve prosedürler Mayo Kliniği Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmıştır. Bu protokolün temel bileşenleri anestezi derinliği, kalp fonksiyonunun değerlendirilmesi ve kalp kapak fonksiyonlarının değerlendirilmesini içerir. Biz bu raporun sadece kalp kapak hastalığı alanında araştırma peşinde ilgilenen araştırmacılar rehberlik hizmet etmeyecek, aynı zamanda bu hızla büyüyen alandaki veri tekrarlanabilirlik ve geçerliliğini sağlamak için protokol standardizasyon ile ilgili ulusal ve uluslararası diyalog başlatmak umuyoruz. Önemli olan, yüksek çözünürlüklü ultrason sistemlerini kullanarak başarılı görüntüleme (yaygın sonografi kullanılan ve terminoloji) sonografi ilkelerinin bir çalışma bilgi, temel Princip bir anlayış gerektirirkalp fizyolojisi ve sonografi ile önemli bir deneyime les kemirgenlerde kardiyak fonksiyonların doğru ve zaman verimli değerlendirilmesi için izin vermek.

Protokol

1. Malzemeler ve Ekipmanları (Tablo 1 ve Şekil 1) hazırlayın

1. ultrason Makineyi açın. hayvan kimliği, tarihi ve saati (seri görüntüleme deneyleri için) ve diğer ilgili bilgileri girin.
2. Bir yüksek frekanslı ultrason transdüktörü, ~ 20 g ya da 20 g ~ daha büyük fareler için 30 MHz daha az görüntüleme fareler için 40 MHz kullanın.
3. elektrokardiyogram platformu bağlayın (EKG) bazı yöntemleri için görüntüleme EKG yolluk izlemek.
   Not: Kritik olarak, bu aynı zamanda, anestezi içinde uygun bir derinlikte birçok endeksten birini olarak kullanılabilir, kalp hızı (HR), anlık hesaplanmasına izin verir.
4. 37 ° C'ye kadar bir platform ön ısıtınız.
   NOT: Tüm ticari olarak bulunabilen ultrason makineleri B-mod, M-mode ve Doppler ekokardiyografi için görüntü alma kontrolleri ve çalışma yönetimi denetimleri sağlayan bir kontrol paneli var. Bir kalp ölçüm aracı otomatik ölçümü için makine gömülürkalp ve kapak fonksiyonları ortak ekokardiyografik parametrelerin ve hesaplama.

2. Anestezi Görüntüleme ve İndükleme Fare hazırlayın

1. Yavaşça kuyruğunu tarafından fare pick up ve sıkıca enseden hayvan tutun.
2. burun konisi içine hayvanın burun rehberlik eder. % 1 izofluran de anestezi akışını başlayın. Hayvan gazına maruz kalma 3-5 saniye içinde sedasyon emin olun.
3. Hızlı ve doğru ön ayaklar ile arka ayakları platformu EKG sensörleri yalan emin, bir yatar pozisyonda platformda hayvan yatıyordu.
4. Yavaşça hafifçe burun konisi aparatı kafa stabilize ve kuyruk stabilize etmek için yapışkan bant uygulamak için yapışkan bant uygulamak, tüm dört bacağı üzerinde yapışkan bant ile hayvan sabitleyin. Her iki arka ayakları ve ön ayaklar fizyolojik görüntüleme sistemi ile istikrarlı ve net EKG sinyal edinimi sağlamak için düz durmalıdır.
5. HR kontrol edin. Bu bir ima kullanarak bunuEKG yetenekleri ile veya harici EKG cihazları ile ging platformu. Bazal HR 700 bpm 600 arasında olduğundan emin olun. İK hiçbir koşulda 450 bpm altına düşmemesi emin olun.
   NOT: İşlem sırasında, İK hafifçe anestezi nedeniyle azalabilir, ancak çoğu durumda 500 bpm üzerinde olmalıdır.
6. buna göre küçük artışlarla (~% 0.1 artışlarla her 15 s anestezi stabil bir duruma ulaşana kadar) tarafından anestezi akışını ayarlayın.
   NOT: anestezi istikrarlı bir devlet yukarıda belirtilen kardiyak parametreler tutulur (adım 2.5) ve hayvan açıkça çeşitli görüntüleme windows prob yerleştirme uyaranlara yanıt vermiyor hangi bir durumdur. Önemli olarak, bu farelerde belirgin kardiyodepresyona sonuçlanan anestezi cerrahi düzlem değildir. Uzun süreli görüntüleme oturumları için kuruluğunu önlemek için gözlere veteriner merhem uygulaması tavsiye edilir.
7. rektal termometre ile vücut sıcaklığını kontrol edin. 36.5 ° C ve 38 ° C arasında sıcaklık tutun.
   Not: uygun bir şekilde çevreye kontrollü bir odada ve ısıtılmış platform üzerinde, vücut sıcaklığı (rektal olarak ölçülmüş) Sonuç olarak, zaman içinde, kardiyovasküler hemodinamik etki karıştırıcı bir faktör değildir, tüm işlem boyunca sabit kalır ve.
8. İnce saçlar ile kullanılmak üzere tasarlanmış bir elektrikli makası kullanarak göğüs kıllarını tıraş. nemli bir kağıt havlu ile temiz göğüs silin. Hayvan görüntüleme için hazır hale gelir.
   NOT: saç kimyasal çıkarılması da gerçekleştirilebilir birlikte uzun süreli deneyler zaman içinde önemli cilt tahrişine neden olabilir, bu bileşiklerin kullanımından kaçınılmalıdır. Ayrıca, uygun uygulama ve kimyasal bazlı epilasyon ürünlerinin çıkarılması 2-3 dk (~% 10-20) tarafından anestezi kalma sürelerinin uzatabilir. cilt hazırlığının tamamlanması için anestezi indüksiyonu toplam süre en az 3 dakika sürer.

_title "> 3. Kardiyak Ultrason Görüntüleri Kazanılması Temel İlkeleri ve Yönergeleri takip

NOT: B-mod / 2-D, M-mode ve Doppler (spektral pulsed-wave Doppler ve renkli Doppler görüntüleme): görüntüleri elde kullanılan üç ultrason yöntemleri vardır. Parasternal ve apikal pencereler (Şekil 2): Kalp ve kalp kapakçıklarının görüntüler elde etmek için kullanılan iki temel dönüştürücü pozisyonu vardır.

1. Her dönüştürücü konumundan, elle dönen ve transdüser angulating ederek uzun ve kısa eksenleri kalp göreceli birden tomografik görüntüleri elde edebilir.
   NOT: açılanma göğüs duvarında sabit bir noktadan transdüser yan-yan hareketi ifade ederken Rotasyon, dönme ya da göğüs duvarında sabit konumdan dönüştürücüyü büküm anlamına gelir. Tüm ultrason dönüştürücüler bir oluk (çentik), dış azarlama, ya da düğme şeklinde bir görüntü dizin işaretleyici var.
2. Emin olun ultrason sigNAL Buna göre transdüser konumunu ayarlayarak hedef yapıya diktir.
3. akışına aktarılan ultrason ışını paralel hizalayarak renk akışı ve pik hız sinyalleri optimize edin. ultrason ışınına ve akış arasındaki açı en az 60 ° olmalıdır.
4. Kontrol paneli kontrollerini kullanarak görüntü kalitesini optimize. Sadece sorgulama alanı görüntü ekranı doldurmak gerekir.
   NOT: dönüştürücü ve platform pozisyonlarda İnce ayarlar hemen hemen her zaman net görüntüler elde etmek için gereklidir. Hatta iç anatomi optimal koşullar, solunum hareketleri, göğüs duvarı anatomisi (örneğin, küçük kaburga aralığı) ve varyasyonları sırasında (doğal ve hastalık kaynaklı her ikisi) akustik pencere sınırlamak ve görüntü elde etme çok zor yapabilirsiniz.
5. M-mode ve 2-D / B-modunda sol ventrikül boyutları ölçerken, en sürekli yankı hattında ölçüm kumpas yerleştirin.
6. Renkli Doppler sektörünün ayarlayınpanelde bulunan sektör denetimi, ayarlayarak sorgulama alanına d numune hacmi.
   NOT: Doppler çalışmalarında renk kodlama şeması hızını ve kan akışının yönünü gösterir. kırmızı Doppler sinyalleri transdüser doğru laminer kan akımını belirtir. mavi Doppler sinyalleri uzağa transdüktörden laminer akışını gösterir. Bir "mozaik" renk desen (genellikle kapak darlığı veya kapak yetersizliklerinin oluşur) çalkantılı veya non-laminer kan akımının bölgeleri gösterir.
7. İki 5 s şeritler (veya 100 kare), gerçek zamanlı B-mod en az kaydedin / 2D çevrimdışı analiz için her bir görüntüleme penceresinden yankı.
   NOT: Piyasada satılan eko makineler çerçeveleri veya sine-döngü boyutları önceden ayarlanmış numarayı yakalama görüntü elde etme ayarları vardır. uzun cine döngüler elde edilebilir ve böylece görüntü elde etme ayarları değiştirilebilir. yüksek kaliteli görüntülerin elde edilmesi geniş deneyimi ve deney gerektirir. Investigators birçok görüş ve akustik pencerelerden görüntüler elde etmek için dönüştürücü yerleştirme ve platform açısı doğru kombinasyonunu bulmak gerekir.

Aort Valve 4. Değerlendirme (AV) Fonksiyon

NOT: aort kapak fonksiyonunun değerlendirmeler vananın nitel değerlendirmeler (örneğin, algılanan doruk kalınlığı artmış nedeniyle kapak kalsifikasyon ekojenite ve varlığı ya da renkli Doppler kullanılarak mitral yetersizlik jetleri yokluğu) ve kapak fonksiyonu nicel tedbirler içermektedir (örneğin, zirve transvalvüler hız ve doruk ayrım mesafesi).

1. görüntüye B-mod görüntü toplama seçerek aort kapak başlayın.
2. Güvenli platform ve uzak araştırmacı dönük kafasına tutturulmuş hayvan ile, sola tablo 15-20 ° eğin. Bu göğüs duvarına yakın ileri kalp ve sola, getirecektir. a doğrudan transdüser ultrason jeli bol miktarda uygulayın veyaNimal göğüs.
3. Posteriorde işaret transdüser (Şekil 2) görüntü indeksi işaretleyici ile kalbin uzun ekseni ile yaklaşık 90 ° dik parasternally dönüştürücüyü, yerleştirin. AV görünümüne gelinceye kadar 2B / B-modunda iken, dönüştürücü sefalad kaydırın. Bu aort kapak "kısa eksen" görünümüdür.
   NOT: Normal aort kapak sistol sırasında yaygın açıp kan hiçbir yetersizlik geri sol ventrikül içine olacak şekilde diyastol sırasında yeterince yakın üç ince dişçiklidir. tüberkülü, çok hızlı hareket çok ince ve sık sık görselleştirmek için zor olabilir.
4. caudad görüntü indeks işaretleyici noktaları kadar dönüştürücü saat yönünde döndürün. Aort kökü, aort kapak, sol ventrikül çıkış yolu, mitral kapak, sol atrium ve görüntü ekranda sağ ventrikül çıkış yolu kısmını gözlemleyin.
   Not: Bu AV "parasternal uzun eksen" görünümüdür. sonograf gerekirsonraki M-Mode görüntüleme ve analiz (aşağıya bakınız) için izin verir B-mod görüntülerde kardiyak döngü boyunca görünür iki aort kapak tüberkülü, olduğunu tespit.
5. Bu görünümde aort kökü değerlendirin. aort kökü görüntüleri aort kökü büyük boyutlara içerecek şekilde dikkatlice ileri ve geri hareket ettirin. Makinenin gömülü ölçüm aracıyla ilişkili elektronik kumpas kullanarak aort büyük anteroposterior boyut ölçün.
6. Uzun eksende aort kapak bulun. Sadece aort kapak kontrol panelinde görüntü genişliği düğmesini ayarlayarak görüntü ekranda olacak şekilde görüntü genişliğini azaltır. doğru bir aort kapak doruk ayrımı değerlendirmek için aort kapağının ipuçları kesişen sorgulama M-mod hattını yerleştirin.
7. aort kapağı M-mode ekranında, Ağırlık, hacim, ilişkili elektronik kumpas kullanarak doruk ayırma mesafesi (sistolde kutu benzeri bir görünüm) ölçmekMakinenin gömülü ement aracı.
   Not: M-kipi görüntüleme en büyük avantajı, aort kapak işlevinin değerlendirilmesi için gerekli olan çok yüksek bir zamansal çözünürlüğü vardır. AV M-mod görüntüleri kısa ve uzun eksen görüntüden hem de elde edilebilir olsa da görüntüleme uçağı kolaylıkla ipuçları yönünü ve yerini belirlemek için sonograf uzmanına izin verir, çünkü parasternal uzun eksen görünümü genel olarak tercih edilir sistol sırasında tüberkülü,.
8. hala aort kapak parasternal uzun eksen görünümünde, kontrol panelindeki renkli Doppler kontrol tuşuna iken. aort kapak bölgeye renkli Doppler uygulayın.
   NOT: sistol sırasında aort kapağı ile sol ventrikül Normal akış transdüser doğru olduğunu ve bu nedenle kırmızı kodlanmıştır.
9. aort kapak yetersizliğinin varlığını ya da yokluğunu Belge.
   NOT: Aort kapak yetmezliği diyastol sırasında meydana gelir ve uzak det yönlendirildiği anormal akışer; Bu nedenle, yeşil kodlanır.
10. darbeli dalga Doppler kontrol tuşuna basın. Kontrol panelinde bulunan parça topu kullanarak, ultrason ışını ve kan akımı arasındaki açı eğerek az 60 ° olduğundan emin olduktan hemen aort kapak üzerinde, proksimal çıkan aorta pulsed numune hacmi yerleştirin Platform ve / veya transdüser. Mümkünse, suprasternal penceresinden aort kapak karşısında zirve hızı elde edin.
11. Makinenin (Şekil 3C ve 3F) gömülü ölçüm aracıyla ilişkili elektronik kaliperler kullanılarak spektral ekrandan Zirve hızını ölçmek.
    NOT: Bir mozaik renk olmayan laminer akış modelleri bulunma olasılığı yüksek akış hızı gösterir.

Mitral Kapak 5. Değerlendirme (MV) Fonksiyon

NOT: mitral kapak fonksiyonunun değerlendirilmesi vananın nitel değerlendirmeler (örneğin, başına içerirnedeniyle kapak kalsifikasyonu, varlığı veya renkli Doppler kullanılarak yetersizlik jetleri) ve kapak fonksiyonu nicel tedbirlerin yokluğu Alınan doruk kalınlığı artmış ekojenite.

1. B-modunda apikal pozisyonda dönüştürücüyü yerleştirin. Bu fare (Şekil 2C) başına doğru açılı şekilde güç çevirici pozisyonunu gösterir. görüntü ekranda sağ ventrikül (RV), sol ventrikül (LV), sağ atrium (RA) ve sol atrium (LA) dikkat edin. hayvanın LV içine açar gibi mitral kapak görselleştirmek için bir "baş aşağı" konumunda olacak şekilde elle hafifçe platformu eğin.
   NOT: Apikal 4 odacık görünümü mitral ve triküspit kapaklarda yanı sıra mitral anulus doku hızı karşısında kan hızının incelenmesi için en uygun görünümdür. Bu aynı zamanda RV ve interventriküler septum hareket ve büyüklüğünü değerlendirmek için iyi bir görünümüdür.
2. apikal 4-boşluk görünümünde, görüntü genişliği azaltarak odakta mitral kapak getir.mitral kapak broşürler iki ince, mobil filamentler açılması ve her kardiyak döngüsü sırasında kapatılması gibi görünen gözlemleyin.
   NOT: Bir "normal" bir fare Mitral bildiriler görüntüleme fizyolojik HR (yani> 450 bpm) olarak yapılırsa görselleştirmek için zor olabilir.
3. Bildirilerin kalınlığını değerlendirmek için mitral kapak genelinde M-mod imleci yerleştirin.
   NOT: ultrason ışınının (Şekil 4) dik olduğunda ön broşür iyi sistolde görüntülenmiştir.
4. apikal 4-boşluk görünümünü kullanarak, diyastol sırasında mitral kapaktan görüntüye sol atrium gelen akış renkli Doppler uygulayın. mitral kapak yetmezliği için gözlemleyin.
   Not: Akış transdüser doğru yönlendirilir ve bu nedenle kırmızı kodlanır. Yetersizlik akım mavi kodlanmış ve sistol (Şekil 5) sırasında oluşur edilecektir.
5. apikal uzun eksen görünümünü kullanarak, darbeli dalga moduna geçin. ipuçları Doppler örnek hacmi Taşımitral kapakçıkların. mitral spektral ekranın iki tepe unutmayın. bildiriler iyi görüntülenmiştir değilseniz, parlak kırmızı veya mozaik renkli desenler ile bölgeleri belirlemek ve bu noktada örnek hacmi yerleştirmek için renkli Doppler kullanın.
   NOT: Mitral akışının spektral ekran yavaş HR (<450 bpm) iki zirveleri vardır. Normal saat içinde (> 450 bpm), başları (E) ve geç-dolgu (A) akımları kaynaşmış. mitral kapak genelinde akış spektral Doppler görüntüleme sol ventrikül diyastolik fonksiyonun değerlendirilmesinde kullanılan (adım 7.5).

Sağ taraflı Kalp Kapak Fonksiyon 6. Değerlendirme

NOT: triküspit ve pulmoner vanalar sağ taraflı kalp kapakçığı içermektedir. pulmoner kapak Parasternal uzun ve kısa eksen hem görünümlerde görüntülenebilir ise triküspid kapak kolayca, apikal uzun eksen görünümünde görülebilir.

1. apikal uzun eksen görünümünde, tilt veya dönüştürücü bir uca u işaretSağ ventrikül görüntü ekranın merkezinde olacak şekilde bir sallanma hareketini şarkı. Sadece sağ ventrikül görüntü ekranda görünür böylece görüntü genişliğini azaltır.
2. Aynı görüntü düzleminde, sağ atrium ve sağ ventrikül ve açık ve her kalp döngüsü boyunca yakın arasındaki ince mobil filamentler görünen triküspid kapak broşürler, görselleştirmek.
3. triküspit kapağın bölgede renkli Doppler uygulayın. Triküspit kapak yetersizliği için unutmayın.
   NOT: Normal akış diyastol sırasında oluşur transdüktörün yöneliktir ve bu nedenle kırmızı kodlanır. Anormal yetersizlik akım sistol sırasında, uzak dönüştürücüsünden yönlendirilir ve bu nedenle mavi kodlanan oluşur. Regürjitan jet zirve hızı sağ ventrikül sistolik basıncı tahmin etmek için kullanılır.
4. aort kapak düzeyinde parasternal kısa eksen konumuna dönüştürücüyü taşıyın. aort kapak yukarıda sağ ventrikül outf vardırDüşük sistem, pulmoner kapak, proksimal ana pulmoner arter ve sağ ve sol pulmoner arter (Şekil 6).
5. modifiye parasternal uzun eksen konumuna dönüştürücü saat yönünde döndürün. Ardından, pulmoner vananın kısa eksen görünümü elde etmek hafifçe yukarı doğru dönüştürücüyü eğin.
6. Bu görüşe göre, pulmoner kapak cusps (Şekil 7) ayrılması mesafesini değerlendirmek için M-mod görüntüleme uygulayın.
7. kapak yetersizliklerinin (diyastol sırasında bir mozaik desenli, yüksek hız jet) ve darlık (sistol sırasında bir mozaik desenli, yüksek hız jet) değerlendirmek için pulmoner vana bölgede renkli Doppler uygulayın.
8. Darbeli dalga kontrol tuşuna basın ve hemen pulmoner valfi sonra örnek hacmi yerleştirin.
   NOT: akış spektral Doppler ekranın Analizi pulmoner arter basıncı (Şekil 8) hesaplamak için kullanılır.

Kalp Fonksiyonu 7. Değerlendirilmesi

Not: kalp fonksiyonu değerlendirilmesi, sol ventrikül kasılmasının kalitatif değerlendirmeler içeren (örneğin, ejeksiyon fraksiyonu, bölgesel duvar hareket anormalliği ve duvarların algılanan kalınlığı görsel tahmini) ve sol ventrikül kantitatif tedbirler fonksiyonu (örn ejeksiyon fraksiyonu, sol ventrikül kütlesi, sol ventrikül diyastolik fonksiyonu ve miyokard performans indeksleri).

1. papiller kas düzeyinde parasternal kısa eksen pozisyonunda dönüştürücü ile, 2D / B-modunda LV kısa eksen görünümü elde. tabandan tepeye doğru LV taramak için aşağı yukarı hareket ettirin dönüştürücüyü ve. duvar hareket bozukluğu için gözlemleyin.
2. sol ventrikül bir parasternal kısa eksen görünümünde, kontrol panelinde bulunan M-mod düğmesine basın. parça topu kullanarak, papiller kas ve obtai seviyesinde sol ventrikül boşluğunun merkezinde M-mode imlecin M-mod görüntüler.
3. Ön duvarı ve arka duvar arasındaki mesafe en büyük, hem anterior ve posterior duvarlarının içe hareket maksimal (Şekil 9) ise son sistol, uç-diyastol, sol ventrikül kavite boyutu ölçün.
4. son diyastol ve sonu sistol anterior ve posterior duvar kalınlığını ölçün.
   NOT: papiller kaslar doğru görüntüleme uçağı sağlamak için önemli bir dönüm noktası olmakla birlikte, herhangi bir ölçümlerde ekleyene için dikkatli olun.
5. apikal pencereye dönüştürücüyü taşıyın. adım 5.1 bakınız. apikal uzun eksen görünümünde mitral kapak genelinde kan akışının darbeli dalga Doppler ile sol ventrikül diyastolik fonksiyonu değerlendirmek.
6. mitral kapaktaki ucunda numune hacmi yerleştirin. mitral kapak genelinde darbeli dalga Doppler hızları spektral ekrandan zirve mitral akım hızını ölçmek.
7. LV iltihaplanmaya karşı arasındaki numune hacmi yerleştirinow ve çıkış. mitral ve aort kapak kapama ve açma sinyalleri unutmayın. Izovolümik relaksasyon zamanı, izovolümik kasılma zamanı ve sol ventrikül ejeksiyon zamanı (Şekil 10) ölçün.
8. apikal uzun eksen görünümünde mitral anulus doku Doppler görüntüleme (TDI) gerçekleştirin. TDI kontrol tuşuna basın ve mitral anulus medial numune hacmi yerleştirin. numune hacmi, mitral broşürler tecavüz olmadığından emin olun. 0.21 mm ve 0.27 mm arasında Doppler örnek hacim büyüklüğü tutun. Mitral annulus (Şekil 11) erken diyastolik hız (e ') ölçün.

8. Son Adımlar

1. elde edilen görüntüleri inceleyin. gerekli tüm görüntüler alındı ​​olmasından emin olunmalıdır.
2. fare göğsünden herhangi bir aşırı ultrason jeli çıkarın ve yavaşça yerine hayvan sabitleyen bandı çıkarın. anestezi kapatın.
3. emici kağıt havlu üzerine hayvan yerleştirin(Aspire edilebilir veya iyileşme sırasında hava yollarını bloke edemez yatak). sternum yatma ulaşılana kadar hayvan gözlemleyin. Anestezi uygun tatbik edilirse, iyileşme 30 ila 60 saniye içinde meydana gelmelidir.

Sonuçlar

rutin hayvan kalp ultrason görüntülemede elde edilen görüntü örnekleri Bu yazıda yer almaktadır. Hayvanın göğüs dönüştürücü yerleştirme bir illüstrasyon okuyucu dönüştürücü açıklandığı gibi görüntüler elde etmek için konumlandırılmış nerede net bir anlayış vermek için sağlanmıştır. ultrason laboratuvar set-up bir fotoğraf da uygun ekipman, özellikle kullanılacak ultrason dönüştürücü ve anestezi yönteminin önemini vurgulamak dahild...

Tartışmalar

Anestezi indüksiyonu

Uygun indüksiyon ve anestezi bakım farelerde kalp kapak değişikliklerin doğru değerlendirilmesi ve kalp fonksiyonu için kritik öneme sahiptir. izofluran ve derin anestezi sonrası bu anestezik nispeten uzun wash-out zaman ortaya anestezi hızlı indüksiyon göz önüne alındığında, indüksiyon tek başına anestezi odasına kullanmayın. yukarıda detaylı olarak belirtildiği gibi yerine, hayvanlar anestezi nispeten düşük konsantrasyonlard...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
High resolution ultrasound machine	VisualSonics, Fujifilm	Vevo 2100
Isoflurane diffuser (capable of delivering 1 % to 1.5 % isoflurane mixed with 1 L/min 100% O2	VisualSonics, Fujifilm	N/A
Transducers for small mice (550D) or larger mice (400)	MicroScan, VisualSonics, Fujifilm	MS 550D, MS 400
Animal platform	VisualSonics, Fujifilm	11503
Advanced physiological monitoring unit	VisualSonics, Fujifilm	N/A
Isoflurane	Terrell	NDC 66794-019-10
Nose cone and tubing connected to isoflurane diffuser and 100% O2	Custom Engineered in-house	--
Hair razor	Andis Super AGR+ vet pack clipper	AD65340
Ultrasound gel	Parker Laboratories	REF 01-08
Electrode gel	Parker Laboratories	REF 15-25
Adhesive tapes	Fisher Laboratories	1590120B
Paper towels