Sıçanlarda Farklı Elektroakupunktur Bağlantı Modlarının Elektrokardiyogram ve Sinir Boşalması Üzerine Etkileri

Özet

Şimdiye kadar, klinik ve temel araştırmalarda elektroakupunktur bağlantısı için tek tip bir yöntem yoktur. Elektroakupunktur cihazını bağlamanın en uygun yolunu keşfetmek için farklı bağlantı yöntemlerinin sıçanlarda elektrokardiyogram (EKG) ve nöral deşarj üzerindeki etkilerini karşılaştırmaya çalışan bir protokol sunuyoruz.

Özet

Elektroakupunktur (EA), akupunkturda en sık kullanılan yöntemlerden biridir ve ağrı, depresyon, duyusal hareket bozuklukları ve diğer hastalıklar üzerinde iyi bir etkiye sahiptir. EA'nın etkinliği, akupunktur noktası seçiminin doğruluğu, EA tedavisinin süresi ve seyri ve EA parametreleri gibi birçok faktörden etkilenir. Bununla birlikte, EA cihazının farklı konumlarda ve mesafelerde akupunktur noktalarına sahip pozitif ve negatif elektrotlarının iyileştirici etki üzerinde bir etkisi olup olmadığı nadiren tartışılmıştır. Bu deneyde, EA cihazının farklı pozisyon ve mesafelerdeki akupunktur noktalarına bağlanmasının sıçanlarda EKG ve belirsiz sinir deşarjı üzerindeki etkilerini gözlemledik ve farklı EA bağlantı modlarının oluşturduğu elektrik alanının vücudun işlevi üzerinde bir etkisi olup olmadığını ön olarak açıkladık. Bu deneydeki EA'nın bağlantı modları, vücudun her iki tarafında aynı akupunktur noktalarını, vücudun aynı tarafında aynı meridyen veya farklı meridyen akupunktur noktalarını ve aynı akupunktur noktası alanında iki iğneyi içeriyordu. Sonuçlar, pozitif ve negatif kutuplar vücudun her iki tarafındaki akupunktur noktalarına bağlandığında, EKG ve vagal sinir aktivitesinin kaydının bozulduğunu gösterdi (aynı ön ve arka bacaklar); akupunktur noktaları vücudun aynı tarafına bağlandığında, iki iğne arasındaki mesafe ne kadar küçükse, EKG ve vagal sinir aktivitesi kaydı üzerindeki etki o kadar küçük olur ve etki artan akımla artar; akupunktur noktaları aynı akupunktur noktası alanında olduğunda, iki iğne kısa devre oluşturmadıysa EKG ve vagal sinir aktivitesinin kaydı bozulmadı.

Giriş

Elektroakupunktur (EA), insan vücudunun meridyen noktalarına bir aletten darbeli akım çıkışı uygulanarak hastalıkların tedavisi için yapılan bir tür akupunktur tedavisidir. EA, nicelleştirilebilen, zamanlanabilen ve emek tasarrufu sağlayabilen kararlı ve ayarlanabilir stimülasyon parametrelerinin avantajlarına sahiptir ve çeşitli nevralji ve akupunktur anestezisi, akupunktur analjezisi ve benzeri için tedavi mekanizmasının incelenmesi gibi belirli hastalıkların tedavisi ve bilimsel araştırmalarında özel avantajlara^sahiptir.

Akupunktur noktası doğruluğu, tedavi süresi ve dalga formu, nabız yoğunluğu ve frekansı gibi EA parametreleri gibi EA'nın etkinliğini etkileyen bazı faktörler vardır. Yaygın olarak kullanılan klinik EA, daha az doku hasarına neden olan ve insan vücudunun normal fizyolojik işlevlerine daha az müdahale eden iki yönlü bir EA'dır. Ayrıca hastalıkları önleyebilir ve tedavi edebilir. İnsan dokuları, su, inorganik tuzlar ve yüklü kolloidlerden oluşan kompleks elektrolitlerin iletkenleridir². EA insan vücuduna uygulandığında, elektrik alanındaki yüklü parçacıklar hareket edecek ve insan vücudunun işlevini etkileyen konsantrasyon ve dağılımda değişikliklere neden olacaktır. Hareket, konsantrasyon ve partikül dağılımındaki değişiklikler EA tedavisinin temelini oluşturur¹.

Son on yılda, bir dizi hastalık için EA çalışmalarının sayısı artmıştır ^1,2,3. EA'nın pozitif ve negatif elektrotlarının bağlantısı ile ilgili olarak, bunu ayrıntılı olarak açıklığa kavuşturmak için çok az çalışma yapılmıştır. EA sırasında, EA cihazındaki pozitif ve negatif elektrotlar, elektriksel stimülasyon görevi görmesi için iki akupunktur iğnesine bağlanmalıdır. Şu anda, ortak modlar aşağıdaki gibidir: vücudun her iki tarafındaki iki iğne aynı akupunktur noktalarına bağlanır ve vücudun aynı tarafındaki farklı akupunktur noktaları^{bağlanır 1}. Bununla birlikte, bu bağlantı yöntemlerinin etkinliği henüz kanıtlanmamıştır. Bazı bilim adamları, vücudun her iki tarafındaki iki iğnenin pozitif ve negatif kutuplara bağlanamayacağını tahmin etmişlerdir; Aksi takdirde, akım kalp fonksiyonunu etkiler, ancak vücudun aynı tarafındaki iki farklı nokta pozitif ve negatif kutuplara^{bağlanabilir 3}. Bazı araştırmacılar, pozitif ve negatif elektrotları birbirine bağlayan akupunktur iğnelerinin, meridyen algılamasını teşvik etmek için akupunktur noktasında elektriksel stimülasyon oluşturmak için tek akupunktur noktası alanında kullanılması gerektiğine inanmaktadır².

Çeşitli akupunktur noktalarında elektroakupunktur sinir deşarjını aktive edebilir veya inhibe edebilir ^4,5. Birçok çalışma, Tsusanli'deki (ST36) EA'nın vagus siniri^üzerindeki uyarıcı etkisini açıklamaktadır ^6,7,8. Bununla birlikte, bu çalışmalar EA bağlantısı üzerinde ayrıntılı bilgi vermemiş ve farklı EA bağlantı modlarının etkilerindeki farklılıkları açıklamamıştır. Bu araştırmadaki boşluk göz önüne alındığında, bu çalışmada farklı EA bağlantılarının EKG ve sinir aktivitesi üzerindeki etkilerini açıklamak için elektrofizyolojik teknikler kullanılmıştır. Sonuçlar, EA'nın doğru bağlantısı için daha fazla kanıt sağlar.

Protokol

Bu deneysel protokol, Pekin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi'nin Standartlaştırılmış Laboratuvar Hayvanları Etik İncelemesi tarafından onaylanmıştır ve deney protokolüne tam olarak uygun olarak yürütülmüştür (Etik inceleme kodu: BUCM-2023110901-4046).

1. Hayvanlar ve gruplandırma

1. Hayvan
   1. Yaklaşık 200-240 g ağırlığında 48 sağlıklı erkek SPF sıçanı (8 haftalık) elde edin.
      NOT: Bu çalışma için hayvanlar Vital River Company [Lisans numarası: SYXK (Pekin) 2020-0033] tarafından sağlanmıştır.
   2. Tüm fareleri Pekin Geleneksel Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Deney Merkezi'nde barındırın. Deney sırasında, farelerin yiyecek ve suya serbestçe erişebildiğinden emin olun.
   3. Besleme ortamını 12 saatlik bir sirkadiyen ritim değişimine göre koruyun ve ortam sıcaklığını 23 ± 2 °C'de kontrol edin.
   4. Tüm cerrahi aletleri% 75 alkol ve otoklavda bekletin. Hayvan taşıma odalarını UV lambaları ile sterilize edin.
   5. Tüm hayvan ameliyatlarını anestezi altında gerçekleştirin. Sıçanı %20 intraperitoneal üretan enjeksiyonu (1 g / kg) ile uyuşturun ve sıçanın kendiliğinden nefes almaya devam etmesini sağlayın.
   6. Ameliyat sırasında sıçanın vücut ısısını termostatik plakalarla 37 ° C'de tutun.
   7. Deney sırasında farenin gözlerini eritromisin merhem ile nemli tutun.
   8. Deneyin sonunda anestezi altında farelerin kafasını kesin ve öldürün ve numuneleri/numuneleri gerektiği gibi saklayın.
2. Grup
   1. Fareleri bağlantı modlarına göre rastgele gruplandırın. Her gruba rastgele 8 sıçan ayırın.
   2. Kontrol grubu (akupunktur yok): Fareyi herhangi bir tedavi olmadan normal şekilde besleyin.
   3. Grup A, sol ön ayak grubunda tek akupunktur noktası: Pozitif ve negatif EA elektrotlarını sırasıyla Quchi noktasına ve Quchi noktasından 3 mm uzağa bağlayın (bkz. Şekil 1A). Dirsek ekleminin lateral ön çöküntüsündeki Quchi noktasını (LI11) bulun ve konumlandırmadan sonra iğneyi ~5 mm derinliğe dik olarak sokun.
   4. Grup B, sol ön ekstremite grubunda iki akupunktur noktası: Pozitif ve negatif EA elektrotlarını sırasıyla Quchi (LI11) ve Waiguan (TE5) noktalarına bağlayın (bkz. Şekil 1B). Radyal ve ulnar dikişlerde ön kolun alt 1/6 kat noktasının dışındaki Waiguan (TE5) noktasını bulun. İğneyi 2 mm derinliğe kadar yerleştirin.
   5. Grup C, sol ön ve arka ekstremite grubundaki iki akupunktur noktası: Pozitif ve negatif EA elektrotlarını Quchi (LI11) ve Tsusanli'ye (ST36) bağlayın (bkz. Şekil 1C). Fibula başının 5 mm altında ve dizin arka tarafında Tsusanlı (ST36) noktasını bulun ve iğneyi ~1 cm derinliğe dik olarak sokun.
   6. Grup D, her iki arka bacakta aynı akupunktur noktaları: Pozitif ve negatif EA elektrotlarını bilateral Tsusanli (ST36) ile bağlayın (bkz. Şekil 1D).
   7. Grup E, her iki ön ayakta aynı akupunktur noktaları: Pozitif ve negatif EA elektrotlarını bilateral Quchi'ye bağlayın (bkz. Şekil 1E).

2. EKG bağlantısı

1. İyice anestezi uygulandıktan sonra fareleri sırtüstü pozisyonda tutun.
2. 1/2 inç akupunktur iğnelerini, sıçanların sağ ön ayak bileğinin, sağ arka ayağının ve farelerin sol arka ayağının derisine paralel olarak sokun, kastan kaçının.
3. İğne kollarını kayıt elektrotlarına bağlayın: sağ ön ayaktaki pozitif (beyaz) elektrot, sol arka ayaktaki negatif (kırmızı) elektrot ve sıçanın sağ arka ayağına referans elektrot (siyah) (bkz. Şekil 2).
4. Sıçanların standart ekstremite kurşun II yüzey EKG'sini gerçek zamanlı olarak kaydetmek için fizyolojik bir sinyal kaydedici kullanın (örnekleme hızı: 1 KHz, filtreleme aralığı: düşük kesim filtresi, 200 Hz; yüksek kesim filtresi, 0,8 Hz).

3. Vagus sinirinin ayrılması ve vagal deşarj sinyallerinin kaydedilmesi

1. Anestezi uygulanmış sıçanların sırtüstü fiksasyonundan sonra gırtlak ve sternum arasında boynun orta hattı boyunca 2-4 cm'lik bir kesi yapın.
2. Sağ karotis kılıfını (karotis arter, vagus siniri ve sempatik zinciri içeren) yerleştirdikten sonra sağ vagus sinir gövdesini yaklaşık 1-2 cm kesin (bkz. Şekil 3A).
   NOT: Sempatik sinir, karotis arterin lateralinde bulunur ve vagus sinirine eşlik eder. Servikal sempatik sinir, vagus sinirine göre incedir.
3. Sinir gövdesini bir çift bakır kanca elektrotla bağlayın ve paraziti önlemek için referans elektrodu insizyona kelepçeleyin. Deney boyunca vagus siniri aktivitesini sürdürmek için salin kullanın (bkz. Şekil 3B).
4. Elektrot ve kas arasındaki yalıtımı sağlamak için yara yüzeyini mineral yağ ile örtün.
5. Sıçanların sinir deşarjını gerçek zamanlı olarak kaydetmek için fizyolojik bir sinyal kaydedici kullanın (örnekleme hızı: 5 KHz, filtreleme aralığı: düşük kesim filtresi, 100 Hz; yüksek kesim filtresi, 1000 Hz).

4. EA müdahalesi

NOT: EKG sonrası sıçanların akupunkturu ve vagus siniri deşarjı stabildi.

1. İki iğne sapını ayrı ayrı EA cihazının iğne klipslerine bağlayın.
2. EA stimülasyonunu 0,3 ms dalga genişliğine sahip çift yönlü bir kare dalgaya ayarlayın. Stimülasyon yoğunluğunu 0,2 mA'ya, frekansı 10 Hz'e ve stimülasyon süresini 20 dakikaya ayarlayın.
3. EA'nın farklı bağlantı modları altında sıçanların EKG ve sinir deşarjındaki değişiklikleri gerçek zamanlı olarak gözlemleyin. Fizyolojik sinyal kaydediciyi kullanarak verileri herhangi bir stimülasyon olmadan 30 saniye, EA'dan 30 saniye önce ve EA'dan 30 saniye sonra 30 saniye boyunca toplayın.
4. Kayıt yazılımını kullanarak sıçanların kalp atış hızlarındaki, EKG dalga formlarındaki ve vagal deşarjlarındaki değişiklikleri kaydedin.

5. Verilerin istatistiksel analizi

1. Farklı EA bağlantı modlarında (EA öncesi ve sonrası) sıçanlarda EKG ve sinir deşarjındaki değişiklikleri karşılaştırın.
2. Tüm deneysel verileri ortalama ± standart hata olarak ifade edin.
3. Veriler normal dağılım testini geçtiğinde öğrencinin t-testini gerçekleştirin. EA'dan önceki ve sonraki değişiklikleri karşılaştırmak için eşleştirilmiş bir örneklem t-testi yapın ve p < 0.05'i istatistiksel olarak anlamlı olarak kabul edin.

Sonuçlar

Sıçanlarda farklı EA bağlantı modlarının EKG üzerindeki etkileri
Kontrol grubunda, normal sıçanların EKG'si kaydedildi (bkz. Şekil 4A). Sıçanların temel koşullarının önemli ölçüde farklı olduğu bulundu. Sıçanların kalp atış hızları 258 ila 473 bpm arasında değişmektedir (bakınız Ek Tablo 1).

Gr...

Tartışmalar

Bu deneyde, kalp atış hızı, vagal sinir aktivite frekansı ve deşarj genliği dahil olmak üzere pozitif ve negatif elektrotları bağlamanın farklı yollarının etkilerini gözlemledik. Sonuçlar, pozitif ve negatif kutupların vücudun her iki ön ayağına bağlandığında, biyoelektrik emisyonunu etkilediğini gösterdi. Pozitif ve negatif kutuplar vücudun aynı tarafına bağlandığında, iki iğne arasındaki mesafe ne kadar yakınsa, biyoelektrik üzerindeki etki o kadar...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Accupuncture Needle	Hwato	N/A
BL-420N physiological signal recorder	Techman	LAB-0017-0002-CDTM
Electroacupucture instrument	HANS	200A
Erythromycin ointment	Shuangji	N/A
Mineral oil	Solarbio	8012-95-1
Thermostatic rat plate	Techman	JR-30