Effets des différents modes de connexion de l’électroacupuncture sur l’électrocardiogramme et la décharge nerveuse chez le rat

Résumé

Jusqu’à présent, il n’existe pas de méthode uniforme pour la connexion de l’électroacupuncture dans la recherche clinique et fondamentale. Nous présentons un protocole qui tente de comparer les effets de différentes méthodes de connexion sur l’électrocardiogramme (ECG) et la décharge neurale chez le rat afin d’explorer la manière la plus appropriée de connecter l’instrument d’électroacupuncture.

Résumé

L’électroacupuncture (EA) est l’une des méthodes les plus couramment utilisées en acupuncture et a un bon effet sur la douleur, la dépression, les troubles sensoriels du mouvement et d’autres maladies. L’efficacité de l’EA est influencée par de nombreux facteurs, tels que la précision de la sélection des points d’acupuncture, la durée et le déroulement du traitement par EA, et les paramètres de l’EA. Cependant, il a rarement été discuté si les électrodes positives et négatives de l’instrument EA avec des points d’acupuncture à différents endroits et distances ont un effet sur l’effet curatif. Dans cette expérience, nous avons observé les effets de la connexion de l’instrument EA à des points d’acupuncture à différentes positions et distances sur l’ECG et la décharge nerveuse vague chez le rat et avons expliqué de manière préliminaire si le champ électrique formé par différents modes de connexion EA a un effet sur le fonctionnement du corps. Les modes de connexion de l’EA dans cette expérience comprenaient les mêmes points d’acupuncture des deux côtés du corps, le même méridien ou des points d’acupuncture de méridiens différents du même côté du corps et deux aiguilles dans la même zone de point d’acupuncture. Les résultats ont montré que lorsque les pôles positifs et négatifs étaient connectés aux points d’acupuncture des deux côtés du corps, l’enregistrement de l’ECG et de l’activité du nerf vague était perturbé (les mêmes membres antérieurs et postérieurs) ; lorsque les points d’acupuncture étaient connectés du même côté du corps, plus la distance entre les deux aiguilles était petite, plus l’effet sur l’ECG et l’enregistrement de l’activité nerveuse vague était faible, et l’effet augmentait avec l’augmentation du courant ; lorsque les points d’acupuncture se trouvaient dans la même zone d’acupuncture, l’enregistrement de l’ECG et de l’activité du nerf vague n’était pas perturbé si les deux aiguilles ne formaient pas de court-circuit.

Introduction

L’électroacupuncture (EA) est un type de thérapie d’acupuncture pour le traitement des maladies en appliquant un courant pulsé sortant d’un instrument aux méridiens du corps humain. L’EA présente les avantages de paramètres de stimulation stables et réglables, qui peuvent être quantifiés, chronométrés et permettant d’économiser du travail, et présente des avantages particuliers dans le traitement et la recherche scientifique de certaines maladies, telles que l’étude du mécanisme de traitement de diverses névralgies et anesthésie d’acupuncture, l’analgésie d’acupuncture,^etc.

Certains facteurs influencent l’efficacité de l’EA, tels que la précision des points d’acupuncture, la durée du traitement et les paramètres de l’EA, tels que la forme d’onde, l’intensité de l’impulsion et la fréquence. L’EA clinique couramment utilisé est un EA bidirectionnel, qui cause moins de dommages aux tissus et interfère moins avec les fonctions physiologiques normales du corps humain. Il peut également prévenir et guérir les maladies. Les tissus humains sont des conducteurs d’électrolytes complexes composés d’eau, de sels inorganiques et de colloïdes chargés². Lorsque l’EA est appliqué au corps humain, les particules chargées dans le champ électrique se déplacent et provoquent des changements de concentration et de distribution qui affectent le fonctionnement du corps humain. Les changements dans le mouvement, la concentration et la distribution des particules sont à la base de la thérapie EA¹.

Au cours de la dernière décennie, le nombre d’études d’EA a augmenté pour un certain nombre de maladies ^1,2,3. En ce qui concerne la connexion des électrodes positive et négative de l’EA, peu d’études ont été menées pour clarifier cela en détail. Pendant l’EA, les électrodes positive et négative de l’instrument EA doivent être connectées à deux aiguilles d’acupuncture pour agir comme une stimulation électrique. À l’heure actuelle, les modes courants sont les suivants : deux aiguilles de chaque côté du corps sont connectées aux mêmes points d’acupuncture, et différents points d’acupuncture du même côté du corps sont connectés¹. Cependant, l’efficacité de ces méthodes de connexion reste à prouver. Certains scientifiques ont estimé que les deux aiguilles de chaque côté du corps ne peuvent pas être connectées aux pôles positif et négatif ; Sinon, le courant affecterait la fonction cardiaque, mais les deux points différents du même côté du corps peuvent être connectés aux pôles positif et négatif³. Certains chercheurs pensent que les aiguilles d’acupuncture reliant les électrodes positives et négatives devraient être utilisées dans la zone du point d’acupuncture unique pour former une stimulation électrique dans le point d’acupuncture afin de favoriser la détection du méridien².

L’électroacupuncture à divers points d’acupuncture peut activer ou inhiber la décharge nerveuse ^4,5. De nombreuses études expliquent l’effet stimulant de l’EA chez Tsusanli (ST36) sur le nerf vague ^6,7,8. Cependant, ces études n’ont pas approfondi le lien entre les EA et n’ont pas expliqué les différences dans les effets des différents modes de connexion EA. Compte tenu de l’lacune de cette recherche, cette étude a utilisé des techniques électrophysiologiques pour expliquer les effets de différentes connexions EA sur l’ECG et l’activité nerveuse. Les résultats fournissent des preuves supplémentaires de la connexion correcte de l’EA.

Protocole

Ce protocole expérimental a été approuvé par l’examen standardisé de l’éthique des animaux de laboratoire de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Pékin et a été mené en pleine conformité avec le protocole expérimental (code d’éthique : BUCM-2023110901-4046).

1. Animaux et regroupement

1. Animaux
   1. Obtenez 48 rats mâles sains (âgés de 8 semaines) pesant environ 200 à 240 g.
      REMARQUE : Pour cette étude, les animaux ont été fournis par la Vital River Company [Numéro de permis : SYXK (Beijing) 2020-0033].
   2. Hébergez tous les rats dans le Centre d’expérimentation animale de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Pékin. Pendant l’expérience, assurez-vous que les rats ont libre accès à la nourriture et à l’eau.
   3. Maintenir l’environnement d’alimentation sur la base d’un décalage du rythme circadien de 12 h et contrôler la température ambiante à 23 ± 2 °C.
   4. Faites tremper tous les instruments chirurgicaux dans de l’alcool à 75 % et de l’autoclave. Stérilisez les salles de manipulation des animaux avec des lampes UV.
   5. Effectuez toutes les chirurgies animales sous anesthésie. Anesthésier le rat avec une injection intrapéritonéale d’uréthane à 20 % (1 g/kg) et s’assurer que le rat continue de respirer spontanément.
   6. Maintenez la température corporelle du rat à 37 °C avec des plaques thermostatiques pendant l’opération.
   7. Gardez les yeux du rat humides avec une pommade à l’érythromycine pendant l’expérience.
   8. Décapitez et tuez les rats sous anesthésie à la fin de l’expérience et stockez les échantillons/échantillons si nécessaire.
2. Groupe
   1. Regroupez les rats de manière aléatoire selon les modes de connexion. Attribuez 8 rats à chaque groupe au hasard.
   2. Groupe témoin (pas d’acupuncture) : Nourrir le rat normalement sans aucun traitement.
   3. Groupe A, point d’acupuncture unique dans le groupe du membre antérieur gauche : Connectez les électrodes EA positive et négative au point Quchi et à 3 mm du point Quchi, respectivement (voir Figure 1A). Localisez le point Quchi (LI11) dans la dépression antérieure latérale de l’articulation du coude et insérez l’aiguille perpendiculairement à une profondeur de ~5 mm après le positionnement.
   4. Groupe B, deux points d’acupuncture dans le groupe du membre antérieur gauche : Connectez les électrodes EA positives et négatives aux points Quchi (LI11) et Waiguan (TE5), respectivement (voir Figure 1B). Localisez le point de Waiguan (TE5) à l’extérieur du point inférieur 1/6 de pli de l’avant-bras dans les sutures radiales et ulnaires. Insérez l’aiguille à une profondeur de 2 mm.
   5. Groupe C, les deux points d’acupuncture dans le groupe des membres antérieurs et postérieurs gauches : Connectez les électrodes EA positives et négatives à Quchi (LI11) et Tsusanli (ST36) (voir Figure 1C). Localisez le point Tsusanli (ST36) à 5 mm sous la tête fibulaire et postérolatéralement au genou et insérez l’aiguille perpendiculairement à une profondeur de ~1 cm.
   6. Groupe D, les mêmes points d’acupuncture dans les deux membres postérieurs : Connectez les électrodes EA positives et négatives avec du Tsusanli bilatéral (ST36) (voir Figure 1D).
   7. Groupe E, les mêmes points d’acupuncture sur les deux membres antérieurs : Connectez les électrodes EA positives et négatives à Quchi bilatéral (voir Figure 1E).

2. Connexion ECG

1. Retenir les rats en position couchée après avoir été complètement anesthésiés.
2. Insérez des aiguilles d’acupuncture de 1/2 pouce parallèlement à la peau du poignet du membre antérieur droit, du membre postérieur droit et du membre postérieur gauche des rats, en évitant le muscle.
3. Connectez les poignées de l’aiguille aux électrodes d’enregistrement : l’électrode positive (blanche) sur le membre antérieur droit, l’électrode négative (rouge) sur le membre postérieur gauche et l’électrode de référence (noire) sur le membre postérieur droit du rat (voir Figure 2).
4. À l’aide d’un enregistreur de signaux physiologiques, l’ECG de surface standard de la dérivation II des rats (fréquence d’échantillonnage : 1 KHz, plage de filtrage : filtre coupe-bas, 200 Hz ; filtre coupe-haut, 0,8 Hz).

3. Séparation du nerf vague et enregistrement des signaux de décharge vague

1. Faites une incision de 2 à 4 cm le long de la ligne médiane du cou entre le larynx et le sternum après la fixation en décubitus dorsal des rats anesthésiés.
2. Sectionnez le tronc du nerf vague droit d’environ 1 à 2 cm après avoir localisé la gaine carotide droite (contenant l’artère carotide, le nerf vague et la chaîne sympathique) (voir la figure 3A).
   REMARQUE : Le nerf sympathique est situé latéralement à l’artère carotide et accompagne le nerf vague. Le nerf sympathique cervical est mince par rapport au nerf vague.
3. Connectez le tronc nerveux avec une paire d’électrodes à crochet en cuivre et fixez l’électrode de référence à l’incision pour éliminer les interférences. Utilisez une solution saline pour maintenir l’activité du nerf vague tout au long de l’expérience (voir la figure 3B).
4. Couvrez la surface de la plaie avec de l’huile minérale pour maintenir l’isolation entre l’électrode et le muscle.
5. À l’aide d’un enregistreur de signaux physiologiques, enregistrer en temps réel la décharge nerveuse des rats (fréquence d’échantillonnage : 5 KHz, plage de filtrage : filtre coupe-bas, 100 Hz ; filtre coupe-haut, 1000 Hz).

4. Intervention de l’AE

REMARQUE : L’acupuncture des rats après l’ECG et la décharge du nerf vague étaient stables.

1. Connectez les deux poignées d’aiguille séparément aux clips d’aiguille de l’instrument EA.
2. Réglez la stimulation EA sur une onde carrée bidirectionnelle avec une largeur d’onde de 0,3 ms. Réglez l’intensité de la stimulation sur 0,2 mA, la fréquence sur 10 Hz et le temps de stimulation sur 20 min.
3. Observez en temps réel les changements de l’ECG et de la décharge nerveuse des rats sous différents modes de connexion de l’EA. Collectez les données pendant 30 secondes sans aucune stimulation, 30 secondes avant l’EA et 30 s après l’EA à l’aide de l’enregistreur de signaux physiologiques.
4. Enregistrez les changements dans les fréquences cardiaques, les formes d’onde de l’ECG et les décharges vagales des rats à l’aide d’un logiciel d’enregistrement.

5. Analyse statistique des données

1. Comparez les changements de l’ECG et de la décharge nerveuse chez le rat dans différents modes de connexion EA (avant et après EA).
2. Exprimer toutes les données expérimentales sous forme de moyenne ± d’erreur-type.
3. Effectuez le test t de l’étudiant lorsque les données réussissent le test de distribution normal. Effectuez un test t d’échantillons appariés pour comparer les changements avant et après l’EA et considérez p < 0,05 comme statistiquement significatif.

Résultats

Effets de différents modes de connexion EA sur l’ECG chez le rat
Dans le groupe témoin, l’ECG de rats normaux a été enregistré (voir Figure 4A). Il a été constaté que les conditions de base des rats étaient significativement différentes. La fréquence cardiaque des rats variait de 258 à 473 bpm (voir le tableau supplémentaire 1).

Discussion

Dans cette expérience, nous avons observé les effets des différentes façons de connecter les électrodes positives et négatives, y compris la fréquence cardiaque, la fréquence de l’activité du nerf vagal et l’amplitude de la décharge. Les résultats ont montré que lorsque les pôles positif et négatif étaient connectés aux deux membres antérieurs du corps, cela affectait l’émission de bioélectricité. Lorsque les pôles positif et négatif étaient connectés du mê...

matériels

Name	Company	Catalog Number	Comments
Accupuncture Needle	Hwato	N/A
BL-420N physiological signal recorder	Techman	LAB-0017-0002-CDTM
Electroacupucture instrument	HANS	200A
Erythromycin ointment	Shuangji	N/A
Mineral oil	Solarbio	8012-95-1
Thermostatic rat plate	Techman	JR-30