Başlamak için, MES tamponunda amin işlevli polistiren boncukları ve TCPP'yi içeren 15 mililitrelik bir polipropilen tüpe taze hazırlanmış 4.5 mililitre EDC çalışma çözeltisi ekleyin. Tüpü, ışıktan korunan oda sıcaklığında 16 saat boyunca 35 RPM'de bir ters çevirici rotatöre yerleştirin. Ardından, 10 dakika boyunca santrifüj yapın.
Süpernatantı aspire edin ve boncukları 0.8 mililitre Hank'in Dengeli Tuz Çözeltisinde yeniden askıya alın. Daha sonra, bir mililitrelik bir pipet kullanarak, boncuk çözeltisini kehribar renkli bir polipropilen şişeye aktarın ve dört santigrat derecede saklayın. Partikül oluşumu, medyan, floresan yoğunluğu veya MFI ile boncuk TCPP / EDC oranı arasındaki ilişki, artan oranlarla, MFI'nın bir plato oluşturana kadar arttığını göstermiştir.
Partiküller sadece EDC etiketleme prosedürü sırasında bir bağlantı reaktifi olarak kullanıldığında ortaya çıktı. Boncukların yalnızca TCPP ile etiketlenmesi çok daha düşük floresan yoğunluğu ile sonuçlandı. TCPP etiketli boncuklar 300 gün sonra test edildiğinde, MFI'da veya partikül içeriğinde önemli bir değişiklik gözlenmedi.
TCPP'nin boncuklara bağlanması, floresan emisyon spektrumu üzerinde minimum bir etkiye sahipti. Bununla birlikte, spektrumu TCPP etiketli A549 akciğer kanseri hücrelerinden daha farklıydı. Çok floralı dört etiketli balgam örneğinde, TCPP etiketli boncuklar, TCPP boyalı A549 hücreleri ile eşit derecede iyi çalıştı.
