Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir.

Protocol for Measuring Mitophagy in Hep-3B Cancer Cells 17

Transkript

Başlamak için,% 70 ila% 80 oranında birleşen Hep-3B hücreleri alın. Kuyucukların her birinden 250 mikrolitre ortamı çıkarın ve uygun işlem veya araçla 50 mikrolitre ortam ekleyin. Boyama reaktifini içeren her bir oyuğa 50 mikrolitre ortam ekleyin ve hücreleri boya ile inkübe edin.

Ortamı çıkardıktan ve hücreleri önceden ısıtılmış PBS ile yıkadıktan sonra, hücreleri oda sıcaklığında 15 dakika boyunca 200 mikrolitre sabitleme çözeltisi ile sabitleyin. Daha sonra, fiksatif çözeltiyi boşaltın ve 200 mikrolitre PBS ile kısaca yıkayın. Son olarak, 200 mikrolitre PBS ekleyin.

Hücreleri dört santigrat derecede kapalı tutun ve ışıktan koruyun ve 24 saat içinde görüntü alın.

Daha Fazla Video Keşfet

Sitemizdeki deneyiminizi iyileştirmek için çerezleri kullanıyoruz

Sitemizi kullanmaya devam ederek ya da "Devam et" butonuna tıklayarak, çerezleri kabul edebilirsiniz.