Kentucky Üniversitesi, Biyoloji Bölümü, Lisans ve College of Arts &amp; Sciences Ofisi tarafından desteklenir.

1) GİRİŞ Proprioseptörlere eklem pozisyon, yön, hız ve kas gerilmesine tespit nöronlar. Proprioseptörlere dış dünya yerine vücut içinde interoceptors anlamda uyaranlara çünkü Propriyoseptör, eşsiz bir duyusal yöntemidir. Omurgalı sistemi, eklem ve gerginlik alıcıları brüt proprioseptif bilgileri tespit etmek için pek çok gerekli olmadığını görünür. Propriosepsiyon için gerekli iki temel reseptör gruplar ablasyon yanı sıra titreşim ve anestezi çalışmalar kas lifleri annulospiral ve flowerspray (duyusal sinir uçlarının) reseptörleri gösterilmiştir (Burgess ve ark. Eleştiri, 1982). Ancak, bu hareketleri ince kontrolü için kullanılan diğer eklemlerde gibi reseptörleri tarafından toplanan gereksiz bilgiler olduğunu dikkate değerdir. Eklembacaklılar omurgalılar gibi eklemli uzantıları var. Bu nedenle, omurgalılar için açıklanan proprioseptörlere eklembacaklı bacaklarda ve eklemlerde muhataplarıyla olması şaşırtıcı değildir. Yengeçler chordotonal organların anatomik düzenleme işlevine göre her bir nöronun analizi sağlar. Buna ek olarak hayvan büyüdükçe, gelişim sorular ele ya da hayvan bir uzuv (Cooper ve Govind, 1991; Hartman ve Cooper, 1993) yeniler. Yengeçler bazı ortak chordotonal organların primer duyu nöronlarının yüzlerce içeren (Cooper, 2008) ve bu nöronların, eklem hareketleri ve pozisyonları ile aralık fraksiyonasyon yönlerini izlemek. , Eklem hareketleri ve pozisyonları izleme daha az karmaşık proprioseptif sistem kerevit karın kas reseptör organlar (MROs) (McCarthy ve MacMillan, 1995 Eckert, 1961a, b). Kerevit karın MROs mechanoreceptors kademeli bir reseptör potansiyel bir kas içine gömülü duyusal sonları, bir streç uyaran transduce. Potansiyel bir eşiği aştığında, bir aksiyon potansiyeli akson üssünde neden olacaktır. Bu nörobiyoloji &quot;başak inisiyasyon site&quot; olarak tanımlanır ve bilinir. Bu sistemde hücre gövdesi izler kas yakın apozisyon bulunur. İki ayrı tipte gerilme reseptörleri bu duyu sistemi mevcut: yavaş adapte ve hızla adapte reseptör. Aktivite, mekanik gerilme gücüne bağlıdır. Kerevit MRO sistemi, memelilerde intrafusal kas mili benzer ve memelilerde intrafusal kaslar için bilinen kaslarının gergin doğasını korumak için kasları da efferent kontrolü var. Memelilerde kas mili duyusal nöronlar çünkü duyusal uçları küçük doğa elektrofizyolojik araştırmak için meydan okuyorlar. Periferik sonlar dorsal kök ganglion hücre organlarının yerini takip etmek de oldukça zordur. Buna karşılık, kerevit de MRO nöronlar, uzun süreli kayıtlar için ekstrasellüler ve intrasellüler elektrotlar için kolayca erişilebilir. MRO duyu nöronlarının hücre gövdeleri nispeten büyük (çapı 50-100 mikron). Edwards ve ark, 1981;. Erxleben, 1989 Duyu nöronları da nöronların fonksiyonu kanalları, duyu nöronlarının iyonik akış kanal dağılımı, ve yoğunluğu (Brown ve ark, 1978 &quot;streç aktif&quot; nasıl ele bir model olarak hizmet etmiş; Hunt ve ark, 1978; Purali ve Rydqvist, 1992; Rydqvist ve Purali, 1991; Rydqvist ve Swerup, 1991; Cooper ve ark, 2003). Bir segmentinde MRO duyusal girdi entegrasyonu diğer komşu kesimleri (Eckert, 1961a, b) etkileyebilir. Duyusal girdi modülasyon birkaç raporlar vardır MRO (Pasztor ve Macmillan, 1990; Cooper ve ark, 2003). Modülasyon nöral devrelerin temel bilim gelecekteki araştırmalar için zengin bir alan ve bu hazırlık potansiyel omurgalıların omurilik, gelecekteki uygulamalar için memelilerde bir temel olarak hizmet edebilir (Rossignol ve ark, 2001, 2002; Donnelan, 2009) 1.1) Öğrenme çıktıları Bu laboratuvar, bir kerevit karın incelemek ve ilgili anatomi ve fizyoloji MRO öğrenmek. Bir ekstrasellüler kayıtları ile nöron aktivitesini izlemek için nasıl öğrenecek ve elektrofizyolojik ortak ekipman kullanımı. Bir grafik ve duyusal stimülasyon dayalı veri elde yorumlamak. Duyusal stimülasyon statik pozisyonları yanı sıra izlenmekte olan segment dinamik hareketler aralığı olacaktır. Bir bu duyu sistemi ve önemi propriosepsiyon kavramı ele alınacaktır. Duyusal adaptasyon bir dizi deney görülecektir. Önemi yanı sıra potansiyel duyusal adaptasyon arkasında mekanizması öğrenciler tarafından ele alınacaktır. 2) yöntemleri 2.1) Malzeme <ol&gt; <li> Faraday Kafesi </li><li> Mikromanipülatör </li><li> Emme Elektrod </li><li> Diseksiyon Mikroskop </li><li> Yüksek Yoğunluklu Aydınlatıcı (ışık kaynağı) </li><li> Mikroskop Platformu </li><li> AC / DC Diferansiyel Amplifikatör (AM Systems Inc Model 3000) </li><li> PowerLab 26T (AD Aletleri) </li><li> Baş sahne </li><li> LabChart 7 (ADI Instruments, Colorado Springs, CO, USA) </li><li> Kerevit Tuzlu (mM: NaCl 205; 5.3 KCl; 13.5 CaCl 2 .2 H 2 O; 2.45 MgCl 2 .6 H 2 O 5 Hepes pH 7.4 &#39;e ayarlanmış) </li><li> Metilen mavisi: Bu% 0.25 &#39;lik bir konsantrasyon kerevit salin </li><li> Sylgard kaplı yemekleri (Dow Corning, SYLGARD 184 silikon elastomer kiti; Dow Corning Corporation, Midland, MI, USA) </li><li> Diseksiyon araçları </li><li> Böcek pimleri </li></ol> 2.2) Kurulum <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1: donatım <ol><li> Faraday kafesi Kur. Mikroskop, yüksek yoğunluklu aydınlatma, mikromanipülatör, ve tuzlu su banyosu kafes (Faraday kafesi elektrik kayıt etkileyebilecek dış elektrik alanları engellemek için kullanılır) içinde kurulacaktır. </li><li> Mikroskop aşamasında bakan bir konumda mikroskop Kur. </li><li> Yüksek yoğunluklu aydınlatma, uygun bir pozisyonda yerleştirin. </li><li> Bir Sylgard tabak içinde kerevit tuzlu su ile tuzlu su hazırlayın ve (bu disseke kerevit karın nerede alınacaktır) mikroskop altında yerleştirin. </li><li> Mikromanipülatör tuzlu su emme elektrot kolay erişimi olan bir konuma yerleştirin. </li><li> Emme Emme elektrot içindeki gümüş tel ile temas kadar tuzlu kadar. Elektrot ucu yakın emme elektrot kesim tarafında diğer tel düzenlemek, hem teller tuzlu su ile temas halinde olacak. </li><li> Güç Lab 26T AC / DC Diferansiyel Amplifikatör (Amfi) bağlayın. PowerLab 26T Giriş 1 amplifikatör çıkış için uygun bir kablonun bunu. <ul><li> Amplifikatör araç kontrolleri aşağıdaki ayarları ayarlanması gerekir: <ul><li> High Pass-DC </li><li> Notch Filtre-OFF </li><li> Pass-20kHz Düşük </li><li> Kapasite Zorunlu .- saat yönünün tersine </li><li> DC ofset topuzu-saat yönünün tersine Güzel ve Ders </li><li> DC ofset (+ OFF-) - KAPALI </li><li> Gain-50 </li><li> Giriş (DIFF MONO GND) - FARK </li><li> MODE (STIM-GATE-REC) - REC </li><li> ΩTEST-off </li></ul></li></ul></li><li> &#39;Giriş-prob amplifikatör başkanı aşamasında bağlayın. </li><li> Elektrik telleri kafa aşamasına emme elektrot bağlayın. Tellerin ortasında siyah yeşil (zemin), (altta negatif, sol üst köşede kırmızı (pozitif) bağlı olmalıdır. Şekil 2&#39;de gösterilmiştir. Topraklama kablosu sadece tuzlu su bulunan konabilir. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2: Baş sahne Yapılandırma </li><li> Şimdi dizüstü bilgisayar, PowerLab 26T USB kablosu bağlayın. Amplifikatör ve PowerLab26T hem de takılı ve bilgisayara LabChart7 açmadan önce açık olun. </li><li> LabChart7 açın. <ul><li> LabChart Welcome Center kutusu açılır. Kapatın. </li><li> Kur&#39;a tıklayın </li><li> Kanal ayarları tıklayın. Tamam&#39;a basın 1 (kutunun sol alt) kanal numarasını değiştirin. </li><li> Grafiğin sol üst 2k hakkında saniyede döngüleri ayarlayın. 500 veya 200mV volt (y-ekseni) ayarlayın. </li><li> Kanal 1 grafiğin sağ tıklayın. Giriş Amplifikatör tıklayın. Emin olun ayarları: ac birleştiğinde, tek uçlu ve invert (gerekirse sinyali ters çevirir) ve anti-alias, kontrol edilir. </li><li> Kaydetmeye başlamak başlamak için. </li></ul></li></ol> 2.3) Diseksiyon <ol><li> Kerevit (Procamarus clarkii) vücut uzunluğu ölçme 6-10 cm zaten diseksiyonu başlamadan önce hayvan uyutmak için buz üzerinde yer almalıdır. </li><li> Anestezi kerevit pençeleri arkasından tek elle tutun. Çabuk, göz yuvası, her iki tarafta baş orta kesim, kerevit (Not: kan hazırlanması tamamlanmış zaman kurur, bu yüzden araçları yıkamak yapışkan olacaktır) ve sonra kafasını uçurma. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3: kerevitler Decapitation </li><li> Bir zamanlar kerevit ventral tarafta Göğüs ve karın (kuyruk) arasında kesilen, kafası kesildi. Toraks karın ayırmak için daha kolay olacaktır. Not: kerevit erkek ise, styl kesmekkapalı, karın ve göğüs ayıran önce ETS (erkek üreme parçalar). (Şekil 4A aşağıda gösterilmiştir). </li><li><img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig4.jpg" alt="Şekil 4" /> Şekil 4: karın İzolasyon </li><li> Karın içinde ve makas ipuçları lateral sınırı boyunca kesilen hazırlık, uzak işaret makas bir bıçak yerleştirin. Karşı tarafta tekrarlayın. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig5.jpg" alt="Şekil 5" /> Şekil 5: karın Boyuna diseksiyon </li><li> Cımbız arka uç (# 3) alın ve hazırlanması dorsal tarafına uzak kaslar ve gastrointestinal sistem itin. Kasları aşağı itmek için değil emin olun. </li><li> Kuyruk ventral yan (lateral tarafına lateral) son kaburga üzerinden kaldırmak için kesin. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig6.jpg" alt="Şekil 6" /> Şekil 6: karnın ventral kısmının Kaldırma </li><li> Kerevit salin (Van modifiye Harreveld çözümü) hazırlanmasında ortaya çıkar. </li><li> Hazırlık mikroskop altında bakıldığında, lineer elyaf ile bir sarmal içinde bükülmüş lifler, ve derin ekstansör lateral kasları, derin ekstansör medial kas (DEM) yer ayırt edilebilir (bkz. Şekil 1 ve 2 Ek). Midsagittal bölgede birinci ve ikinci kaburga (Şekil 7) DEM kaslar arasındaki karın distal kısmında iki iğneli. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig7.jpg" alt="Şekil 7" /> Şekil 7: güvenliğini içeren, duyusal MRO sinir sinir kayıt için hazırlık . </li><li> Kütikül (Şekil 7) yanındaki lateral kenarı boyunca uzanan kaydetmek için kullanılan olacak sinir demetleri. (Hazırlanması darbe ya da hareketini sinir bulmak için bir damlalık kullanarak banyo içine serum fizyolojik damla gerekli olabilir) </li></ol> Not: Her karın segment, sağ ve sol hemisegments hızlı ve yavaş adapte MROs iki grup vardır. Ilişkili sinir demetleri kütikül yanında lateral kenarı boyunca çalıştırın. Bu bir kayıt olacak ki sinir demetidir. DEL1 ve 2 kasları (Ek Şekil 1 ve 2) altında bulunması nedeniyle Bir MROs görüntülemek mümkün olmayacaktır. Şekil 8 karın izole etmek için yapılması diseksiyonları genel bir bakış sağlar. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig8.jpg" alt="Şekil 8" /> Şekil 8: karın izole etmek için, genel bir diseksiyon bakış . A, B ve C serisi kerevit diseksiyon adım. 3) idi.Sonuçlar 3.1) Kayıt Yavaş ve germe ve bir streç korurken MROs hızla adapte elde Genelleştirilmiş yanıtları Şekil 9&#39;da tasvir edilmektedir. Bu alıştırmada bir aksonlar aynı sinir demeti bulunan iki MROs birlikte kayıt olacak. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig9.jpg" alt="Şekil 9" /> Şekil 9: kerevit MRO nöronların iki çeşidi vardır. Hızlı motor aksonlar ve yavaş motor aksonlar tarafından innerve tonik tarafından innerve fazik. (A) bir tonik reseptör uyarıldığında yavaş yavaş uyarana adapte olur ve aksiyon potansiyelleri sabit bir atış paterni devam ediyor. (B) fazik reseptör stimüle olduğunda uyaran hızla adapte olur ve sadece kısa bir aksiyon potansiyelleri desen ateşler. (Şekil 10), motor ve duysal nöron içeren tüm sinir kaydedilir. Ancak tek motor sürücü hayvan ventral sinir kablosu kopmuş olduğu gibi duyusal nöronlar algılar. <img src="/files/ftp_upload/2323/2323fig10.jpg" alt="Şekil 10" /> Şekil 10: kayıt elektrot içine emdi sinir demeti. (A) serbest sinir disseke karın üzerinde yüzen gösterilmiştir. (B) sinir sinir demeti ve plastik emme elektrot yakın özetliyor. (C) segmental sinir mavi ana hatlarıyla emme elektrot, içine çekilir. Bir MROs elektrik cevaplarını kaydetmek için hazır. <ol><li> Diseksiyon kapsamında hazırlık yerleştirin ve kayıt kurmak hazırlamak. </li><li> Elektrikle, banyo ve ortak bir zemin, diğer ucunu bir gümüş klorür topraklama kablosu koyarak banyo zemin. Not: Bazen bu kayıt sırasında elektriksel parazite neden olabilir. Bu durumda, banyo yere yok. </li><li> Kaydedilecek sinir bulmak için mikroskop kullanın. Not: en kolay sinir segmenti için bak. Sinir beyaz, ya da sinir etrafında tuzlu su püskürtme pipet kullanarak tarafından görülebilir<html> hazırlık hafifçe üfleyerek. Bu hareket için sinir nedenleri ve tespit etmek daha kolay hale getirir. </li><li> Sinir sinir üzerinde doğrudan mikromanipülatör (Şekil 10) emme elektrot yer tespit edilmiştir Şimdi. </li><li> Elektrot (bir mikroskop kullanımı ile elektrot içine çekilir sinir görebilirsiniz) sinir çekmek için şırınga yavaşça çekin. </li><li> Labscope7 başlangıç ​​düğmesine basın. </li><li> Cımbız kullanarak 180 için 45 ve 90 açılardan kerevit kuyruk hafifçe yukarı taşımak ve aşağı. Her biri farklı bir açıyla kayıtlarında farka dikkat edin. (Açıları pozisyon değiştirirken ekranda ilgili nöronal aktivite ile açı değişiklikleri not etmek emin olun. Bu yazılım yorum kalem kullanarak yapılabilir.) </li><li> Aşağıdaki grafikte de çeşitli statik hareketlere tepki hareketleri kaydedin. <ul><li> Kerevit kuyruk on beş saniye süreyle 45 ° açıyla tutun. </li><li> LabChart7 ekranda stop. Kaydedilen son saniyede sırasında meydana gelen aksiyon potansiyelleri numarasını kaydedin. </li><li> Kerevit kuyruk bir dakika süreyle 45 ° açıyla tutun. </li><li> LabChart7 ekranda stop. Kaydedilen son saniyede sırasında meydana gelen aksiyon potansiyelleri numarasını kaydedin. </li></ul> Açıklama: Grafik Lab ekran vs saniye (x-ekseni) milivolt içinde hareket eden bir grafik (y-ekseni). Zaman belli bir miktar meydana kaç aksiyon potansiyelleri ölçer. Aynı zamanda her bir aksiyon potansiyeli veya ekstraselüler alanda potansiyeli genliği volt ölçer. Genlik ekstrasellüler kaydedilen aksiyon potansiyelleri farklı boyutu mevcut olup olmadığını belirlemek için kullanılabilecek bir göreceli ölçüsüdür. Ekstraselüler alanda potansiyeli tarafından kaydedilen bir aksiyon potansiyeli &quot;başak&quot; olarak adlandırılır. Uzağa sinirden küçük başak olacak. Gevşek emme uydurma akımı düşük mühür sinir demeti etrafında direnci ve emme elektrot açılış ile kaybolur küçük başak olacak elektrodu. </li></ol> Grafik 1: <table border="1"><tbody><tr><td> Açısı (°) </td><td> # 1 saniye 3 saniye sonra Aksiyon Potansiyelinin </td><td> Aksiyon Potansiyelinin # 1 saniye 10 saniye sonra </td></tr><tr><td> 180 ° (düz) </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 45 ° </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td> 90 ° </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td></tr></tbody></table> Bu deneyler yapılırken düşünmek sorular şunlardır: bir desen ve eklem ekstansiyon ve fleksiyon hareketleri tutarlı bir yanıt var mı? Telzon çeşitli sabit pozisyonlarda tutarak bağlantılarını veya uyarılmış yanıtların ne tür? Tekrarlanan bu tepki tutarlı mı? Gözlenen yanıtların türlü dikkatli notlar alın. Gözlemler memnun sonra, veri dosyaları kaydederek, bu faaliyetin sürekli kayıt olun. Segmentinde 3 yaptığınız gözlemleri ile memnun, sonra 4 veya 5 segmentleri sinirler daha da kayıtları veya aktivitesini izlemek için 3 segmentinde diğer tarafında taşıyın. Bir nöromodülatör (octopamine, serotonin ve proctolin) veya diğer bileşikler veya serum fizyolojik iyonik yapısı değiştirilmiş bir kompozisyon tanımlanan tuzlu su elde edilen çeşitli tepkiler üretir belirlemek isteyebilirsiniz. Metilen mavisi ile 3.2) Boyama Bir MROs bir boyama tekniği ile (bakınız Ek) kas incelemek mümkün olabilir. Hazırlanması ve kerevit tuzlu su dökeceğim. Metilen mavisi çözeltisinin yaklaşık 5 mL hazırlanması ve tabak birkaç dakika hafifçe girdap içine yerleştirin. Ardından çöp konteyner içine aşırı metilen mavisi dökün ve taze tuzlu su hazırlanması üzerine dökün. Şimdi MROs görmek için kas diseksiyon başlatmak için mikroskop altında çanak yerleştirin. (Midsagittal lateral) kaburga kas altına makas bir parçası yerleştirerek ve kas boyunca kesilmiş gibi yukarı çekerek boyunca segment kesin. DEL 1 ve 2 kasları, ardından kas geri soyma kesilir ve ince bir kas tabakası (SEM) dikkat edilmelidir. MROs sarmal kas (Şekil 11) paralel uzanan son iki medial lifleri vardır. &quot;Alt =&quot; Şekil 11 &quot;/&gt; Şekil 11: Şemanın bir karın segment kas gruplarının (A) ve mavi (B) sağlam bir hazırlık kas gruplarını tanımlamak için yardımcı olur metilen lekeli bir hazırlık göstermektedir . B, A ana hatlarıyla alanı genişlemiş bir görünümü ile gösterilir. Şematik alt yarısında görüldüğü gibi B A&#39;da görüldüğü gibi, DEL1 ve 2 kas gruplarını kesip değildir Bir öğrenci egzersizleri için öğrenciler aşağıdaki sorulara cevap isteyebilirsiniz: <ol><li> Interoceptive reseptör nedir? </li><li> Interoceptive reseptörleri proprioseptörlere nasıl bir ilgisi var? </li><li> Duyusal adaptasyon ve nasıl bu laboratuvar ile ilgili açıklayın. </li><li> Aralığı fraksiyonasyon nedir? Ne MSS yapmaya olanak sağlar? </li><li> Nöron fazik veya tonik tip nöron kaydetti mi? Neden? (İpucu: motor nöron aktivitesi içinde duyusal nöron aktivitesi ile ilgili sağlam bir hayvan gibi görünecektir ne önerme) </li><li> AP frekans vs kerevit kuyruk açısı kağıt ayrı bir sayfada bir grafik çizin. </li><li> Grafikte gözlemlemek olabilir herhangi bir eğilim açıklayın </li></ol>

<ol>
	<li>Alexandrowicz, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+receptor+organs+in+the+abdomen+of+Homarus+vulgaris+and+Palinurus+vulgaris.">Muscle receptor organs in the abdomen of Homarus vulgaris and Palinurus vulgaris.</a> Q. J. Microsc. Sci. 92, 163-199 (1951).</li><li>Brown, H. M., Ottoson, D., Rydqvist, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crayfish+stretch+receptor:+An+investigation+with+voltage-clamp+and+ion-sensitive+electrodes.">Crayfish stretch receptor: An investigation with voltage-clamp and ion-sensitive electrodes.</a> J. Physiol. 284, 155-179 (1978).</li><li>Burgess, P. R., Wei, J. Y., Clark, F. J., Simon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signaling+of+kinesthetic+information+by+peripheral+sensory+receptors.">Signaling of kinesthetic information by peripheral sensory receptors.</a> Ann. Rev. Neurosci. 5, 171-187 (1982).</li><li>Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Proprioceptive+neurons+of+chordotonal+organs+in+the+crab,+Cancer+magister+Dana+Decapoda,+Brachyura).">Proprioceptive neurons of chordotonal organs in the crab, Cancer magister Dana Decapoda, Brachyura).</a> Crustaceana. 81, 447-475 (2008).</li><li>Cooper, R. L., Govind, C. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axon+composition+of+the+proprioceptive+PD+nerve+during+growth+and+regeneration+of+lobster+claws.">Axon composition of the proprioceptive PD nerve during growth and regeneration of lobster claws.</a> J. Exp. Zool. 260, 181-193 (1991).</li><li>Cooper, R. L., Ward, E., Braxton, R., Li, H., Warren, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effects+of+serotonin+and+ecdysone+on+primary+sensory+neurons+in+crayfish.">The effects of serotonin and ecdysone on primary sensory neurons in crayfish.</a> Microscopy Res. Technique. 60, 336-345 (2003).</li><li>Donelan, J. M., McVea, D. A., Pearson, K. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Force+regulation+of+ankle+extensor+muscle+activity+in+freely+walking+cats.">Force regulation of ankle extensor muscle activity in freely walking cats.</a> J. Neurophysiol. 101, 360-371 (2009).</li><li>Eckert, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflex+relationships+of+the+abdominal+stretch+receptors+of+the+crayfish.+I.+Feedback+inhibition+of+the+receptors.">Reflex relationships of the abdominal stretch receptors of the crayfish. I. Feedback inhibition of the receptors.</a> J. Cell. Comp. Physiol. 57, 149-162 (1961).</li><li>Eckert, R. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reflex+relationships+of+the+abdominal+stretch+receptors+of+the+crayfish.+II.+Stretch+receptor+involvement+during+the+swimming+reflex.">Reflex relationships of the abdominal stretch receptors of the crayfish. II. Stretch receptor involvement during the swimming reflex.</a> J. Cell. Comp. Physiol. 57, 163-174 (1961).</li><li>Edwards, C., Ottoson, D., Rydqvist, B., Swerup, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+permeability+of+the+transducer+membrane+of+the+crayfish+stretch+receptor+to+calcium+and+other+divalent+cations.">The permeability of the transducer membrane of the crayfish stretch receptor to calcium and other divalent cations.</a> Neurosci. 6, 1455-1460 (1981).</li><li>Elekes, K., Florey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+types+of+synaptic+connections+in+crayfish+stretch+receptor+organs:+an+electron+microscopic+study.">New types of synaptic connections in crayfish stretch receptor organs: an electron microscopic study.</a> J. Neurocytol. 16, 613-626 (1987).</li><li>Elekes, K., Florey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Immunocytochemical+evidence+for+the+GABAergic+innervation+of+the+stretch+receptor+neurons+in+crayfish.">Immunocytochemical evidence for the GABAergic innervation of the stretch receptor neurons in crayfish.</a> Neurosci. 22, 1111-1122 (1987).</li><li>Erxleben, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stretch-activated+current+through+single+ion+channels+in+the+abdominal+stretch+receptor+organ+of+the+crayfish.">Stretch-activated current through single ion channels in the abdominal stretch receptor organ of the crayfish.</a> J. Gen. Physiol. 94, 1071-1083 (1989).</li><li>Fields, H. L., Mill, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Crustacean+abdominal+and+thoracic+muscle+receptor+organs.">Crustacean abdominal and thoracic muscle receptor organs.</a> Structure and function of proprioceptors in the invertebrates. , 65-114 (1976).</li><li>Florey, E., Florey, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microanatomy+of+the+abdominal+stretch+receptors+of+the+crayfish+Astacus+fluviatilis+L.">Microanatomy of the abdominal stretch receptors of the crayfish Astacus fluviatilis L.</a> J. Gen. Physiol. 39, 69-85 (1955).</li><li>Hartman, H. B., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regeneration+and+molting+effects+on+the+proprioceptor+organ+in+the+Dungeness+crab,+Cancer+magister.">Regeneration and molting effects on the proprioceptor organ in the Dungeness crab, Cancer magister.</a> J. Neurobiol. 25, 461-471 (1994).</li><li>Hunt, C. C., Wilkerson, R. S., Fukami, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ionic+basis+of+the+receptor+potential+in+primary+endings+of+mammalian+muscle+spindles.">Ionic basis of the receptor potential in primary endings of mammalian muscle spindles.</a> J. Gen. Physiol. 71, 683-698 (1978).</li><li>Kuffler, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+activation+and+motor+control+of+stretch+receptors+in+lobster+and+crayfish.">Mechanisms of activation and motor control of stretch receptors in lobster and crayfish.</a> J. Neurophysiol. 17, 558-574 (1954).</li><li>Kuffler, S. W., Eyzaguirre, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synaptic+inhibition+in+an+isolated+nerve+cell.">Synaptic inhibition in an isolated nerve cell.</a> J. Gen. Physiol. 39, 155-184 (1955).</li><li>Macmillan, D. L., Patullo, B. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insights+for+robotic+design+from+studies+of+the+control+of+abdominal+position+in+crayfish.">Insights for robotic design from studies of the control of abdominal position in crayfish.</a> Biol. Bull. 200, 201-205 (2001).</li><li>Marino, B. F., Stucchi, N., Nava, E., Haggard, P., Maravita, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distorting+the+visual+size+of+the+hand+affects+hand+pre-shaping+during+grasping.">Distorting the visual size of the hand affects hand pre-shaping during grasping.</a> Exp. Brain Res. , 202-202 (2010).</li><li>McCarthy, B. J., MacMillian, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+the+muscle+receptor+organ+in+the+control+of+the+abdominal+extension+in+the+crayfish+Cherax.">The role of the muscle receptor organ in the control of the abdominal extension in the crayfish Cherax.</a> J. Exp. Biol. 198, 2253-2259 (1995).</li><li>Mill, P. J., Lowe, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fine+structure+of+the+PD+proprioceptor+of+Cancer+pagurus.I.+The+receptor+strand+and+the+movement+sensitive+cells.">The fine structure of the PD proprioceptor of Cancer pagurus.I. The receptor strand and the movement sensitive cells.</a> Proc. R. Soc. Lond. B. 184, 179-197 (1973).</li><li>Nakajima, Y., Onodera, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Membrane+properties+of+the+stretch+receptor+neurons+of+crayfish+with+particular+reference+to+mechanisms+of+sensory+adaptation.">Membrane properties of the stretch receptor neurons of crayfish with particular reference to mechanisms of sensory adaptation.</a> J. Physiol. 200, 161-185 (1969).</li><li>Nakajima, Y., Takahashi, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Post-tetanic+hyperpolarization+and+electrogenic+Na+pump+in+stretch+receptor+neurone+of+crayfish.">Post-tetanic hyperpolarization and electrogenic Na pump in stretch receptor neurone of crayfish.</a> J. Physiol. 187, 105-127 (1966).</li><li>Pasztor, V. M., MacMillan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+actions+of+proctolin,+octopamine+and+serotonin+on+the+crustacean+proprioceptors+show+species+and+neurone+specificity.">The actions of proctolin, octopamine and serotonin on the crustacean proprioceptors show species and neurone specificity.</a> J. Exp. Biol. 152, 485-504 (1990).</li><li>Patel, M., Fransson, P. A., Karlberg, M., Malmstrom, E. M., Magnusson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Change+of+body+movement+coordination+during+cervical+proprioceptive+disturbances+with+increased+age.">Change of body movement coordination during cervical proprioceptive disturbances with increased age.</a> Gerontol. 56, 284-290 (2010).</li><li>Patullo, B., Faulkes, Z., Macmillan, D. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+receptor+organs+do+not+mediate+load+compensation+during+body+roll+and+defense+response+extensions+in+the+crayfish+Cherax+destructor.">Muscle receptor organs do not mediate load compensation during body roll and defense response extensions in the crayfish Cherax destructor.</a> J. Exp. Zool. 290, 783-790 (2001).</li><li>Purali, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Mechanisms of adaptation in a mechanoreceptor. A study of mechanical and ionic factors in the crayfish stretch receptors [dissertation]. , (1988).</li><li>Purali, N., Rydqvist, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Block+of+potassium+outward+currents+in+the+crayfish+stretch+receptor+neurons+by+4-aminopyridine,+tetraethylammonium+chloride+and+some+other+chemical+substances.">Block of potassium outward currents in the crayfish stretch receptor neurons by 4-aminopyridine, tetraethylammonium chloride and some other chemical substances.</a> Acta Physiol. Scand. 146, 67-77 (1992).</li><li>Rabin, E., Muratori, L., Svokos, K., Gordon, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tactile/proprioceptive+integration+during+arm+localization+is+intact+in+individuals+with+Parkinson's+disease.">Tactile/proprioceptive integration during arm localization is intact in individuals with Parkinson's disease.</a> Neurosci. Lett. 470, 38-42 (2010).</li><li>Rydqvist, B., Purali, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential-dependent+potassium+currents+in+the+rapidly+adapting+stretch+receptor+neuron+of+the+crayfish.">Potential-dependent potassium currents in the rapidly adapting stretch receptor neuron of the crayfish.</a> Acta Physiol. Scand. 142, 67-76 (1991).</li><li>Rydqvist, B., Swerup, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stimulus-response+properties+of+the+slowly+adapting+stretch+receptor+neuron+of+the+crayfish.">Stimulus-response properties of the slowly adapting stretch receptor neuron of the crayfish.</a> Acta Physiol. Scand. 143, 11-19 (1991).</li><li>Rossignol, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Locomotion+and+its+recovery+after+spinal+injury.">Locomotion and its recovery after spinal injury.</a> Curr. Opin. Neurobiol. 10, 708-716 (2000).</li><li>Rossignol, S., Giroux, N., Chau, C., Marcoux, J., Brustein, J., Reader, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+aids+to+locomotor+training+after+spinal+injury+in+the+cat.">Pharmacological aids to locomotor training after spinal injury in the cat.</a> J. Physiol. 533, 65-74 (2001).</li><li>Rossignol, S., Bouyer, L., Barthelemy, D., Langlet, C., Leblond, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+of+locomotion+in+the+cat+following+spinal+cord+lesions.">Recovery of locomotion in the cat following spinal cord lesions.</a> Brain Res. Rev. 40, 257-266 (2002).</li><li>Sohn, J., Mykles, D. L., Cooper, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+anatomical,+physiological+and+biochemical+characterization+of+muscles+associated+with+the+articulating+membrane+in+the+dorsal+surface+of+the+crayfish+abdomen.">The anatomical, physiological and biochemical characterization of muscles associated with the articulating membrane in the dorsal surface of the crayfish abdomen.</a> J. Exp. Zool. 287, 353-377 (2000).</li><li>Svensson, E., Woolley, J., Wikstr&#246;m, M., Grillner, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endogenous+dopaminergic+modulation+of+the+lamprey+spinal+locomotor+network.">Endogenous dopaminergic modulation of the lamprey spinal locomotor network.</a> Brain Res. 970, 1-8 (2003).</li><li>Swerup, C., Rydqvist, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+abdominal+stretch+receptor+organ+of+the+crayfish.">The abdominal stretch receptor organ of the crayfish.</a> Comp. Biochem. Physiol. A. 103, 433-431 (1992).</li><li>Vargas, J. G., Yu, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Audio+aided+electro-tactile+perception+training+for+finger+posture+biofeedback.">Audio aided electro-tactile perception training for finger posture biofeedback.</a> Conf. Proc. IEEE Eng. Med. Biol. Soc. 2008, 4230-4233 (2008).</li><li>Vedel, J. P., Clarac, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combined+reflex+actions+by+several+proprioceptive+inputs+in+the+rock+lobster+legs.">Combined reflex actions by several proprioceptive inputs in the rock lobster legs.</a> J. Comp. Physiol. 130, 251-258 (1979).</li></ol>

Ilgili film ve metin sağlanan detayları in situ yeterince kerevit MRO faaliyet kaydetmek için önemli adımlar sağladı. Bir gol raporu duyu fizyolojisi temel kavramları öğretmek için soruşturma laboratuvarlarda çalışacak öğrenci bu hazırlık için potansiyel bilincini artırmak. Minimal bir tuzlu su yıkanıyor hazırlıkları canlılığı çok sağlam. MRO kasları üzerinde motor kontrol tanımlanan ancak iletim ve eksitatör ve inhibitör nöronlar için iletim etkinliğinin yanı sıra, sinaptik plastisite potansiyeli düzenleme için açık bir araştırma alanı (Elekes ve Florey, 1987a, b kalır; Florey ve Florey, 1955; Kuffler, 1954; Kuffler ve Eyzaguirre, 1955). Bu preparat, birincil araştırma yanı sıra, gösterim amaçlı MRO biyolojisi daha iyi anlamak için deneysel koşulların yanı sıra çok sayıda hayvan içinde hareketin doğal aralık araştırmak için kullanılabilir. Edwards ve ark, 1981;. Purali, 1997; Rydqvist ve Purali, 1991; Rydqvist bu duyusal nöron biyofiziksel özelliklerini kısmen muhafaza uyaran (Brown ve ark, 1978 ile nöral aktivitede uyum doğaları ele olmuştur Swerup, 1991). Ancak, bu duyu reseptörleri ve ilişkili kas lifleri (Cooper ve ark, 2003; Pasztor ve Macmillan, 1990) sadece birkaç raporları adresi nöromodülasyon. Raporlar hemolimf mevcut olduğu bilinen birçok bileşikler sadece birkaç anlaşma. Birçok modülatörlerin modülatörleri ve kokteyller MRO kompleks (kas ve nöronlar) incelenmek üzere kalır. Pasztor ve Macmillan (1990), çeşitli kabuklu türler arasında MROs faaliyet nöromodülatör 5-HT ve octopamine incelemek ve türler farklılıklar olduğunu fark etti. MRO farklı statik pozisyonlarda bu nöromodülatör uzun dönemli etkileri de faaliyet üzerindeki etkilerini ayrıntılı incelemek vermedi. Rabin ve ark, 2009;. Marino ve ark hazırlık Bu tip motor ünitesi abnormities (Patel ve ark, 2009 ile insanlar için rehabilitasyon ve hastalık yönetimi için önemli olan nöral işleme duyusal algı ve düzenleme temelini anlamada yardımcı olabilir , 2010). Giriş ve erişilebilir omurgasız hazırlıkları eklem hareketlerinin izlenmesi için ateş desenler çeşitli türleri robotik / protez (Macmillan, Patullo 2001) içinde kullanılabilir. Şekillerde bir dizi faydalı olabilir bu hazırlık cevap bekleyen birçok soru hala vardır.

<ol>
<li><a href="http://www.adinstruments.com/products/hardware/corporate/product/ML856/" target="_blank">PowerLab 26T (AD Instruments)</a> </li>
<li><a href="http://www.adinstruments.com/products/software/research/LabChart-Software/" target="_blank">LabChart 7 (ADI Instruments, Colorado Springs, CO, USA)</a> </li>
</ol>

muscle receptor organs in the crayfish abdomen: a student laboratory exercise in proprioception

Bu deneyin temel amacı, bir hayvan için proprioseptif bilgi olarak eklem hareketleri ve pozisyonları ile primer duyu nöron taşıma bilgi göstermektir. Bu deneyde ek bir amacı, boyama, diseksiyon ve nöron ve duysal yapıları inceleyen bir diseksiyon mikroskobu altında hazırlanması anatomisini öğrenmek için. Bu, ortak bir reseptör organ ve boyama teknikleri elektriksel aktivite kayıt temel nörofizyolojik ekipmanlar kullanılarak yapılır. Kerevit kas reseptör organ (MRO) sistemi, memelilerde elektrofizyolojik kayıtlar için daha kolay erişilebilir karşılaştırmalı bir model olarak hizmet veren yardımcı intrafusal kas mil, benzer. Ayrıca, bu hazırlıklar arasında tanımlanabilir duyusal nöronlar. Hazırlık öğrenci laboratuvar çalışmaları için müsait olan en az bir saat boyunca tuzlu su içinde yaşayabilir. MRO, ayrıca düzenleyici eylem ve entegrasyon hareketleri ve bir kazanç sistemi değiştirilebilir ile birlikte statik konumu dinamik sinyaller sitelerinde ilginç sorular teşvik eder nöromodülasyon duyarlı.

Watch this Scientific Journal Video about Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception at JoVE.com

Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception

Bu deneyin temel amacı, primer duyusal nöronlar bir hayvan için proprioseptif bilgi olarak eklem hareketleri ve pozisyonları bilgi iletmek nasıl anlamak için. Bu raporun ek bir amacı diseksiyon mikroskobu altında diseksiyon ve nöron inceleyen hazırlık anatomi mevcuttur.

Kerevit Karın kas Reseptör Organlar: Propriyoseptör Öğrenci Laboratuvar Egzersiz

The primary purpose of this experiment is to demonstrate primary sensory neurons conveying information of joint movements and positions as proprioceptive ...

muscle-receptor-organs-crayfish-abdomen-student-laboratory-exercise

Research

JoVE Journal

Neuroscience

22.1K Görüntüleme.  University of Kentucky. Bu deneyin temel amacı, primer duyusal nöronlar bir hayvan için proprioseptif bilgi olarak eklem hareketleri ve pozisyonları bilgi iletmek nasıl anlamak için. Bu raporun ek bir amacı diseksiyon mikroskobu altında diseksiyon ve nöron inceleyen hazırlık anatomi mevcuttur.

Video: Muscle Receptor Organs in the Crayfish Abdomen: A Student Laboratory Exercise in Proprioception

Recording Behavioral Responses to Reflection in Crayfish

Social behavior depends on sensory input from the visual, mechanical and olfactory systems. One important issue concerns the relative roles of each sensory modality in guiding behavior. The role of visual inputs has been examined by isolating visual stimuli from mechanical and chemosensory stimuli. In some studies (Bruski &amp; Dunham, 1987: Delgado-Morales et al., 2004) visual inputs have been removed with blindfolds or low light intensity, and effects of remaining sensory modalities have been elucidated. An alternative approach is to study the effects of visual inputs in the absence of any appropriate mechanical and chemosensory cues. This approach aims to identify the exclusive role of visual inputs. 
We have used two methods to provide visual stimuli to crayfish without providing chemical and mechanical cues. In one method, crayfish are videotaped in an aquarium where half of the walls are covered in mirrors to provide a reflective environment, and the other half are covered in a non-reflective (matte finish) plastic. This gives the crayfish a choice between reflective and non-reflective environments. The reflective environment provides visual cues in the form of reflected images of the crayfish as it moves throughout half of the tank; these visual cues are missing from the non-reflective half of the tank. An alternative method is to videotape the behavior of crayfish in an aquarium separated by a smaller chamber at each end, with a crayfish in one small chamber providing visual cues and an inert object in the opposite small chamber providing visual input from a non-moving, non-crayfish source. 
Our published results indicate that responses of crayfish to the reflective environment depend on socialization and dominance rank. Socialized crayfish spent more time in the reflective environment and exhibited certain behaviors more frequently there than in the non-reflective environment; isolated crayfish showed no such differences. Crayfish that were housed in same-sex pairs developed a social rank of either dominant or subordinate. Responses to reflection differed between dominant and subordinate crayfish (May &amp; Mercier, 2006; May &amp; Mercier, 2007). Dominant crayfish spent more time on the reflective side, entered reflective corners more frequently and spent more time in reflective corners compared to the non-reflective side. Subordinate crayfish walked in reverse more often on the reflective side than on the non-reflective side. Preliminary data suggest similar effects from visual cues provided by a crayfish in a small adjoining chamber (May et al., 2008).

We have developed two methods for studying effects of visual cues on behavior in the absence of tactile and chemical cues. One method involves videotaping responses of crayfish to reflective walls in an aquarium; the other examines effects of visual inputs provided by a live crayfish behind a transparent partition.

Kerevit Yansıma Davranış Yanıtları kaydedilmesi

Social behavior depends on sensory input from the visual, mechanical and olfactory systems.  One important issue concerns the relative roles of each ...

Nörobilim

A Procedure for Studying the Footshock-Induced Reinstatement of Cocaine Seeking in Laboratory Rats

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse. Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the neurobiology and phenomenology of relapse to drug use. Although procedural variations have emerged over the past several decades, the most conventional reinstatement procedures are based on the drug self-administration (SA) model. In this model, an animal is trained to perform an operant response to obtain drug. Subsequently, the behavior is extinguished by withholding response-contingent reinforcement. Reinstatement of drug seeking is then triggered by a discrete event, such as an injection of the training drug, re-exposure to drug-associated cues, or exposure to a stressor 1.
Reinstatement procedures were originally developed to study the ability of acute non-contingent exposure to the training drug to reinstate drug seeking in rats and monkeys 1, 2. Reinstatement procedures have since been modified to study the role of environmental stimuli, including drug-associated cues and exposure to various forms of stress, in relapse to drug seeking 1, 3, 4.
Over the past 15 years, a major focus of the reinstatement literature has been on the role of stress in drug relapse. One of the most commonly used forms of stress for studying this relationship is acute exposures to mild, intermittent, electric footshocks. The ability of footshock stress to induce reinstatement of drug seeking was originally demonstrated by Shaham and colleagues (1995) in rats with a history of intravenous heroin SA5. Subsequently, the effect was generalized to rats with histories of intravenous cocaine, methamphetamine, and nicotine SA, as well as oral ethanol SA 3, 6.
Although footshock-induced reinstatement of drug seeking can be achieved reliably and robustly, it is an effect that tends to be sensitive to certain parametrical variables. These include the arrangement of extinction and reinstatement test sessions, the intensity and duration of footshock stress, and the presence of drug-associated cues during extinction and testing for reinstatement. Here we present a protocol for footshock-induced reinstatement of cocaine seeking that we have used with consistent success to study the relationship between stress and cocaine seeking.

Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been used extensively to study the role of stress in relapse to drug seeking. Here, we report on a method for inducing the reinstatement of cocaine seeking in laboratory rats via acute exposures to mild, intermittent electric footshock.

Laboratuar Farelerinde Aradığınız Kokain Footshock Bağlı Yürürlüğe Girmesi incelenmesi için Usulü

The most insidious aspect of drug addiction is the high propensity for relapse.  Animal models of relapse, known as reinstatement procedures, have been ...

Physiological Recordings of High and Low Output NMJs on the Crayfish Leg Extensor Muscle

We explain in detail how to expose and conduct electrophysiological recordings of synaptic responses for high (phasic) and low (tonic) output motor neurons innervating the extensor muscle in the walking leg of a crayfish. Distinct differences are present in the physiology and morphology of the phasic and tonic nerve terminals. The tonic axon contains many more mitochondria, enabling it to take a vital stain more intensely than the phasic axon. The tonic terminals have varicosities, and the phasic terminal is filiform. The tonic terminals are low in synaptic efficacy but show dramatic facilitated responses. In contrast, the phasic terminals are high in quantal efficacy but show synaptic depression with high frequency stimulation. The quantal output is measured with a focal macropatch electrode placed directly over the visualized nerve terminals. Both phasic and tonic terminals innervate the same muscle fibers, which suggests that inherent differences in the neurons, rather than differential retrograde feedback from the muscle, account for the morphological and physiological differentiation.

This article demonstrates how to conduct electrophysiological recordings of synaptic responses on the extensor muscle in the walking leg of a crayfish and how the nerve terminals are visualized to show the gross morphological differences of high- and low-output nerve terminals.

Kerevit Bacak ekstansör kas Yüksek ve Düşük Çıkış NMJs Fizyolojik Kayıtlar

We explain in detail how to expose and conduct electrophysiological recordings of synaptic responses for high (phasic) and low (tonic) output motor ...

Membrane Potentials, Synaptic Responses, Neuronal Circuitry, Neuromodulation and Muscle Histology Using the Crayfish: Student Laboratory Exercises

The purpose of this report is to help develop an understanding of the effects caused by ion gradients across a biological membrane. Two aspects that influence a cell's membrane potential and which we address in these experiments are: (1) Ion concentration of K+ on the outside of the membrane, and (2) the permeability of the membrane to specific ions. The crayfish abdominal extensor muscles are in groupings with some being tonic (slow) and others phasic (fast) in their biochemical and physiological phenotypes, as well as in their structure; the motor neurons that innervate these muscles are correspondingly different in functional characteristics. We use these muscles as well as the superficial, tonic abdominal flexor muscle to demonstrate properties in synaptic transmission. In addition, we introduce a sensory-CNS-motor neuron-muscle circuit to demonstrate the effect of cuticular sensory stimulation as well as the influence of neuromodulators on certain aspects of the circuit. With the techniques obtained in this exercise, one can begin to answer many questions remaining in other experimental preparations as well as in physiological applications related to medicine and health. We have demonstrated the usefulness of model invertebrate preparations to address fundamental questions pertinent to all animals.

The experiments demonstrate an easy approach for students to gain experience in examining muscle structure, synaptic responses, the effects of ion gradients and permeability on membrane potentials. Also, a sensory-CNS-motor-muscle circuit is presented to show a means to test effects of compounds on a neuronal circuit.

Membran Potansiyelleri, Synaptic Yanıtları, Sinir Devresi, Nöromodülasyon ve Kerevit kullanarak kas Histoloji: Öğrenci Laboratuvarı Egzersizler

The purpose of this report is to help develop an understanding of the effects caused by ion gradients across a biological membrane. Two aspects that ...

Physiological Experimentation with the Crayfish Hindgut: A Student Laboratory Exercise

The purpose of the report is to describe dissection techniques for preparing the crayfish hindgut and to demonstrate how to make physiological recordings with a force transducer to monitor the strength of contraction. In addition, we demonstrate how to visually monitor peristaltic activity, which can be used as a bioassay for various peptides, biogenic amines and neurotransmitters. This preparation is amenable to student laboratories in physiology and for demonstrating pharmacological concepts to students. This preparation has been in use for over 100 years, and it still offers much as a model for investigating the generation and regulation of peristaltic rhythms and for describing the mechanisms underlying their modulation. The pharmacological assays and receptor sub-typing that were started over 50 years ago on the hindgut still contribute to research today. This robust preparation is well suited to training students in physiology and pharmacology.

In this report we demonstrate techniques that can be used to investigate the biology of the crayfish hindgut. We show how to dissect a crayfish abdomen and study the associated anatomy, physiology and modulation of activity. The peristaltic activity and strength of contractions are measured using a force transducer.

Kerevit Hindgut Fizyolojik Deney: Öğrenci Laboratuvar Egzersiz

The purpose of the report is to describe dissection techniques for preparing the crayfish hindgut and to demonstrate how to make physiological recordings ...

Imaging pHluorin-tagged Receptor Insertion to the Plasma Membrane in Primary Cultured Mouse Neurons

A better understanding of the mechanisms governing receptor trafficking between the plasma membrane (PM) and intracellular compartments requires an experimental approach with excellent spatial and temporal resolutions. Moreover, such an approach must also have the ability to distinguish receptors localized on the PM from those in intracellular compartments. Most importantly, detecting receptors in a single vesicle requires outstanding detection sensitivity, since each vesicle carries only a small number of receptors. Standard approaches for examining receptor trafficking include surface biotinylation followed by biochemical detection, which lacks both the necessary spatial and temporal resolutions; and fluorescence microscopy examination of immunolabeled surface receptors, which requires chemical fixation of cells and therefore lacks sufficient temporal resolution1-6 . To overcome these limitations, we and others have developed and employed a new strategy that enables visualization of the dynamic insertion of receptors into the PM with excellent spatial and temporal resolutions 7-17 . The approach includes tagging of a pH-sensitive GFP, the superecliptic pHluorin 18, to the N-terminal extracellular domain of the receptors. Superecliptic pHluorin has the unique property of being fluorescent at neutral pH and non-fluorescent at acidic pH (pH &lt; 6.0). Therefore, the tagged receptors are non-fluorescent when within the acidic lumen of intracellular trafficking vesicles or endosomal compartments, and they become readily visualized only when exposed to the extracellular neutral pH environment, on the outer surface of the PM. Our strategy consequently allows us to distinguish PM surface receptors from those within intracellular trafficking vesicles. To attain sufficient spatial and temporal resolutions, as well as the sensitivity required to study dynamic trafficking of receptors, we employed total internal reflection fluorescent microscopy (TIRFM), which enabled us to achieve the optimal spatial resolution of optical imaging (~170 nm), the temporal resolution of video-rate microscopy (30 frames/sec), and the sensitivity to detect fluorescence of a single GFP molecule. By imaging pHluorin-tagged receptors under TIRFM, we were able to directly visualize individual receptor insertion events into the PM in cultured neurons. This imaging approach can potentially be applied to any membrane protein with an extracellular domain that could be labeled with superecliptic pHluorin, and will allow dissection of the key detailed mechanisms governing insertion of different membrane proteins (receptors, ion channels, transporters, etc.) to the PM.

By tagging the extracellular domains of membrane receptors with superecliptic pHluorin, and by imaging these fusion receptors in cultured mouse neurons, we can directly visualize individual vesicular insertion events of the receptors to the plasma membrane. This technique will be instrumental in elucidating the molecular mechanisms governing receptor insertion to the plasma membrane.

Görüntüleme İlköğretim Kültürlü Fare Nöronlar içinde Plazma Membran Reseptör Yerleştirme pHluorin etiketli

A better understanding of the mechanisms governing receptor trafficking between the plasma membrane (PM) and intracellular compartments requires an ...

Proprioception and Tension Receptors in Crab Limbs: Student Laboratory Exercises

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons responsible for proprioception as they are detecting joint position and movement, and muscle tension. Electrical activity from crustacean proprioceptors and tension receptors is recorded by basic neurophysiological instrumentation, and a transducer is used to simultaneously measure force that is generated by stimulating a motor nerve. In addition, we demonstrate how to stain the neurons for a quick assessment of their anatomical arrangement or for permanent fixation. Staining reveals anatomical organization that is representative of chordotonal organs in most crustaceans. Comparing the tension nerve responses to the proprioceptive responses is an effective teaching tool in determining how these sensory neurons are defined functionally and how the anatomy is correlated to the function. Three staining techniques are presented allowing researchers and instructors to choose a method that is ideal for their laboratory.

Physiological and anatomical techniques are demonstrated to address function and structure for joint proprioceptors and muscle tension receptors in crustacean walking limbs.

Yengeç Parmak Propriyoseptör ve Gerilim reseptörleri: Öğrenci Laboratuvarı Egzersizler

The primary purpose of these procedures is to demonstrate for teaching and research purposes how to record the activity of living primary sensory neurons ...

Measuring Oral Fatty Acid Thresholds, Fat Perception, Fatty Food Liking, and Papillae Density in Humans

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty acid receptors housed on taste cells. Previous research has shown that an individual&#39;s oral sensitivity to fatty acid, specifically oleic acid (C18:1) is associated with body mass index (BMI), dietary fat consumption, and the ability to identify fat in foods. We have developed a reliable and reproducible method to assess oral chemoreception of fatty acids, using a milk and C18:1 emulsion, together with an ascending forced choice triangle procedure. In parallel, a food matrix has been developed to assess an individual&#39;s ability to perceive fat, in addition to a simple method to assess fatty food liking. As an added measure tongue photography is used to assess papillae density, with higher density often being associated with increased taste sensitivity.

Oral chemoreception of fatty acids and the association with diet and fatty food preferences may enable the identification of mechanisms involved with the development of obesity and why dietary changes may be difficult for many individuals.

Oral Yağ Asidi eşikleri, Fat Algı, Yağ Gıda sevme, ve İnsanlardaki Papillalar Yoğunluğu Ölçme

Emerging evidence from a number of laboratories indicates that humans have the ability to identify fatty acids in the oral cavity, presumably via fatty ...

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this information to the brain. As such, determining how olfactory information is transferred to the brain, modifying both perception and behavior, merits investigation. Interestingly, there is emerging evidence that cellular transduction and transcriptional factors are involved in the diversification of olfactory receptor neuron. Here we provide a robust whole mount immunological labeling method to assay in vivo olfactory receptor neuron organization. Using this method, we identified all olfactory receptor neurons with anti-ELAV antibody, a known pan-neural marker and Or49a-mCD8::GFP, an olfactory receptor neuron specifically expressed in Nba neuron using anti-GFP antibody.

Whole Mount Immunolabeling of Olfactory Receptor Neurons in the Drosophila Antenna

Herein we describe the process of whole mount immunostaining of Drosophila antennae, which enables us to better understand the molecular mechanisms involved in the diversification of olfactory receptor neurons (ORN)s.

In Koku Reseptör Nöronlar Tüm Dağı ile immün<em&gt; Drosophila</em&gt; Anten

Odorant molecules bind to their target receptors in a precise and coordinated manner. Each receptor recognizes a specific signal and relays this ...

Adaptation of Microelectrode Array Technology for the Study of Anesthesia-induced Neurotoxicity in the Intact Piglet Brain

Every year, millions of children undergo anesthesia for a multitude of procedures. However, studies in both animals and humans have called into question the safety of anesthesia in children, implicating anesthetics as potentially toxic to the brain in development. To date, no studies have successfully elucidated the mechanism(s) by which anesthesia may be neurotoxic. Animal studies allow investigation of such mechanisms, and neonatal piglets represent an excellent model to study these effects due to their striking developmental similarities to the human brain.
This protocol adapts the use of enzyme-based microelectrode array (MEA) technology as a novel way to study the mechanism(s) of anesthesia-induced neurotoxicity (AIN). MEAs enable real-time monitoring of in vivo neurotransmitter activity and offer exceptional temporal and spatial resolution. It is hypothesized that anesthetic neurotoxicity is caused in part by glutamate dysregulation and MEAs offer a method to measure glutamate. The novel implementation of MEA technology in a piglet model presents a unique opportunity for the study of AIN.

This study explores the novel use of enzyme-based microelectrode array (MEA) technology to monitor in vivo neurotransmitter activity in piglets. The hypothesis was that glutamate dysregulation contributes to the mechanism of anesthetic neurotoxicity. Here, we present a protocol to adapt MEA technology to study the mechanism of anesthesia-induced neurotoxicity.

Elektrot dizi teknoloji adaptasyon anestezi kaynaklı nörotoksisite sağlam Piglet beyinde incelenmesi için

Every year, millions of children undergo anesthesia for a multitude of procedures. However, studies in both animals and humans have called into question ...