Rakamlar için örnek kültürleri kurmak için resimler hazırlamak ve UCLA Kris Reddi için IROC Tasarımları Cori Sanders özel teşekkürler. Bu proje için finansman HHMI (HHMI Hibe No 52.006.944) tarafından sağlandı.

<ol>
	<li>Barker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> At the Bench: A Laboratory Navigator. , (1998).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological And Biomedical Laboratories (BMBL). , (2009).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique.">Aseptic Technique.</a> Current Protocols in Microbiology. Appendix 4, Appendix 4D (2008).</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique+for+Cell+Culture.">Aseptic Technique for Cell Culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. Chapter 1, Unit 1.3 (2001).</li><li>Grimes, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+basic+laboratory+manual+for+the+small-scale+production+and+testing+of+I-2+Newcastle+disease+vaccine.">A basic laboratory manual for the small-scale production and testing of I-2 Newcastle disease vaccine.</a> RAP Publication. AC802/E, 12-13 (2002).</li><li>Guzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pipetting:+A+Practical+Guide.">Pipetting: A Practical Guide.</a> The American Biology Teacher. 63 (2), 128-131 (2001).</li><li>Jordan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> RESEARCH: National Genomics Research Initiative Phage Resource Laboratory Manual. , (2008).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cloning - A Laboratory Manual. , 978-087969576 (2001).</li><li>Seidman, L. A., Moore, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Basic Laboratory Methods for Biotechnology: Textbook and Laboratory Reference. , (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PIPETMAN P User's Guide. , (2012).</li></ol>

Ben ifşa hiçbir şey yok.

Aseptik teknikle laboratuvar istenmeyen mikroorganizmalar tarafından kontamine olmasını steril çözümleri ve kültürleri önlemek için yapılan rutin bir dizi ifade eder. Bu tür teknikler büyüyen hücreleri gerektiren deneyler için çok önemlidir. Tamamen steril bir iş ortamında elde edilemez olsa da, bu, laboratuvar yüzeylerin dezenfekte Bir Bunsen beki kullanarak steril bir alan yaratarak, hava kapağını açıp kültür ve medya maruz sınırlandırılması, bu şişeler, tüpler ve cam pipetler gibi malzemelerin sterilizasyon gibi prosedürleri, ve steril olmayan yüzeyleri steril aletlerin temastan kaçınarak bir deneyde çözümleri ve kültür kirlenmesi olasılığı azaltır. Amaç ikinci doğa haline aşağıdaki önlem prosedürleri için; bir laboratuarda çalışırken, bu eğitim ve uygulama ile birlikte geliyor. Gibi serolojik pipet ve mikrofon gibi aletler kullanılarak steril çözümleri ve kültürler ile Cilt transferleriropipettors bir laboratuvarda yapılan rutin teknikler birçok türleri vardır. Farklı deneysel uygulamalar farklı, henüz kesin ve doğru cilt aktarabilen araçlar için arayın. Micropipettors çözümleri sadece mikrolitre miktarda ihtiyaç moleküler biyoloji deneyleri için gerekli olan süre Serolojik pipet, mililitre birimleri kapsayan medya hazırlıklar gerektiren hücre kültürleri hazırlamak için mikrobiyoloji laboratuvarlarında kullanılmaktadır. Aseptik teknik bu aletle uygulanan zaman, kirlenme sıvı veya deneme türü ve miktarı ne olursa olsun ses aktarımı sırasında en aza indirilmiştir. Bu protokol ele olmasa da, sık kirlenmeyi önlemek için kullanılan bir başka yollarla bir laminar akım kapağı (Şekil 10) içinde çalışmaktır. Bu cihaz, doku kültürü ve BLS-2 veya daha yüksek olarak sınıflandırılan mikroorganizmalar ile yapılan deneyler için önemlidir. A laminar akım kaput bir HEPA (yüksek verimlilik içerençalışma permeating gelen odasından filtresiz hava önlerken kaputun içine akan hava hava kirleticileri kaldırır partikül hava) filtresi. Alevden ısı kaput işlevselliği için gerekli hava akımını bozar, çünkü not, bir Bunsen beki laminar flow kaput içinde kullanılamaz. Bu deneyler sırasında aseptik teknik kalitesini kontrol etmek için genellikle yararlıdır. Çözümler teyit etmek ve kültür ortamı, deneysel manipülasyonlar sırasında kontamine alamadım, her zaman negatif kontrol hazırlamak. Örneğin, bakteriyel kültür büyümesi için çorbasının tüpler hazırlanması durumunda, tek tüp, sadece steril ortam terk aşılamak değildir. Böyle istemeden tüp içine istenmeyen hücrelerin büyüme bulanıklık gibi kirlilik belirtileri daha sonra kontrol aşılanmamış kontrol tüpü inoküle tüpü boyunca orta inkübe edin. Kontrol tüpü kirli ise, deney tüpübüyük olasılıkla da kontamine ve deneyi tekrarladı gerekecektir. Bu önlemler her deneyde ile yapılmalıdır.

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> LB Broth </td><td> Difco </td><td> 244620 </td><td> Referans 6 da mevcut reçete </td></tr><tr><td colspan="4"> TE Tamponu: </td></tr><tr><td> EDTA disodyum tuzu dihidrat </td><td> Sigma </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HCl </td><td> Sigma </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> Temizlenme Laboratories, Inc </td><td> 8504 </td><td> Dezenfektan </td></tr><tr><td> Etanol </td><td> Fisher Scientific </td><td> A406 </td><td> Dezenfektan olarak kullanımı için, damıtılmış su ile% 70 (v / v) hazırlanması </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

Mikroorganizmalar her yerde vardır - hava, toprak ve insan vücudunda yanı sıra laboratuar tezgahları ve bilgisayar klavyeleri gibi cansız yüzeyler üzerinde. Mikrop ubiquity bir laboratuvar potansiyel kirletici maddelerin bir bol kaynağı oluşturur. Deneysel başarı sağlamak için, ekipman ve iş yüzeyler bulaşanların sayısı en aza indirilmelidir. Mikrobiyoloji birçok deneyler arasında yaygın bakteri hücreleri veya viral partikülleri içeren kültürlerin ölçüm ve transferi ile ilgili teknikleri vardır. Steril bir çalışma alanı hazırlarken steril ortam gerektirir (1), (2) hassas ayar ve doğru sıvıların aseptik transferi için araçlar okuma, ve (3) düzgün, kültür şişeleri, şişe aletleri manipüle steril olmayan yüzeylere temas veya kontamine olmadan bunu yapmak ve steril bir alan içinde tüpler. Bu işlemler Öğrenme eğitim ve uygulama gerektirir. İlk başta, eylemler, yavaş, bilinçli ve aseptik t olma hedefi ile kontrol edilmelidirtezgah üzerinde çalışırken ikinci doğa haline Tekniğine Dayalı Görüşme. Burada bir Bunsen beki tarafından oluşturulan steril bir alan içinde serolojik pipet ve micropipettors kullanarak hacimleri ölçmek için adımları sunuyoruz. Hacimler mikrolitre (ul) ile kullanılan alet bağlı mililitre (ml) arasında değişir. Sık transfer Sıvılar steril suyu veya kimyasal çözümler yanı sıra bakteri kültürleri ve faj stokları bulunmaktadır. Bu işlemleri takiben, öğrenciler gerekir: <ul><li> Bunsen beki alevi tarafından oluşturulan steril alan içinde çalışır. </li><li> Enstrüman sterilite ödün vermeden serolojik pipet kullanın. </li><li> Serolojik pipet ile sıvı aspire, tam pipet üzerinde mezuniyet işaretleri sıvı oluşan menisküs hizalayarak kalibre hacimleri okuma. </li><li> Kültür şişeler, mataralar, tüpler ve sıvı aktarımı sırasında steril kendi kapakları tutun. </li><li> Plastik karşı cam serolojik pip için farklı uygulamalar tespitmak. </li><li> Micropipettors Devlet doğruluğu sınırlamalar. </li><li> Hassas ve doğru micropipettors birimler ayarlayın. </li><li> Doğru düzgün hacimleri aspire ve aktarmak için bir micropipettor üzerindeki birinci ve ikinci durağı nasıl kullanacağımı biliyorum. </li></ul>

Watch this Scientific Journal Video about Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors at JoVE.com

Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

Bir laboratuarda çalışırken, bulaşma kaynakları en aza indirmek için şarttır. Aseptik teknik Steril olmayan yüzeyler ile temas kaçınarak kültürler ve reaktifler transferi izin prosedürleri ifade eder. Serolojik pipet ile micropipettors Deneylerde kullanılan çözeltilerin sterilite bozmadan hassas cilt ölçmek için kullanılır.

Aseptik Laboratuvar Teknikleri: Serolojik Pipetler ve Micropipettors ile Cilt Transferler

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

aseptic-laboratory-techniques-volume-transfers-with-serological

Research

JoVE Journal

Biology

161.7K Görüntüleme.  University of California, Los Angeles. Bir laboratuarda çalışırken, bulaşma kaynakları en aza indirmek için şarttır. Aseptik teknik Steril olmayan yüzeyler ile temas kaçınarak kültürler ve reaktifler transferi izin prosedürleri ifade eder. Serolojik pipet ile micropipettors Deneylerde kullanılan çözeltilerin sterilite bozmadan hassas cilt ölçmek için kullanılır.