Un ringraziamento speciale a Cori a Sanders Designs IROC per la preparazione di illustrazioni e di Kris Reddi presso la UCLA per la creazione di colture di esempio per le figure. Il finanziamento per questo progetto è stato fornito dal HHMI (HHMI Grant No. 52006944).

<ol>
	<li>Barker, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> At the Bench: A Laboratory Navigator. , (1998).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Biosafety in Microbiological And Biomedical Laboratories (BMBL). , (2009).</li><li>Bykowski, T., Stevenson, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique.">Aseptic Technique.</a> Current Protocols in Microbiology. Appendix 4, Appendix 4D (2008).</li><li>Cot&#233;, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aseptic+Technique+for+Cell+Culture.">Aseptic Technique for Cell Culture.</a> Current Protocols in Cell Biology. Chapter 1, Unit 1.3 (2001).</li><li>Grimes, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+basic+laboratory+manual+for+the+small-scale+production+and+testing+of+I-2+Newcastle+disease+vaccine.">A basic laboratory manual for the small-scale production and testing of I-2 Newcastle disease vaccine.</a> RAP Publication. AC802/E, 12-13 (2002).</li><li>Guzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pipetting:+A+Practical+Guide.">Pipetting: A Practical Guide.</a> The American Biology Teacher. 63 (2), 128-131 (2001).</li><li>Jordan, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> RESEARCH: National Genomics Research Initiative Phage Resource Laboratory Manual. , (2008).</li><li>Sambrook, J., Russell, D. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Molecular Cloning - A Laboratory Manual. , 978-087969576 (2001).</li><li>Seidman, L. A., Moore, C. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Basic Laboratory Methods for Biotechnology: Textbook and Laboratory Reference. , (2000).</li><li>. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> PIPETMAN P User's Guide. , (2012).</li></ol>

Non ho nulla da rivelare.

Una tecnica asettica si riferisce ad una serie di procedure di routine fatte per evitare soluzioni sterili e culture subisca contaminazioni da microrganismi indesiderati in laboratorio. Tali tecniche sono essenziali per esperimenti che richiedono cellule in crescita. Sebbene un ambiente di lavoro che è completamente sterile non può essere realizzato, procedure come la disinfezione di superfici di laboratorio, creando un campo sterile utilizzando un becco di Bunsen, limitando l&#39;esposizione di colture livellate e mezzi per l&#39;aria, sterilizzazione materiali quali flaconi e pipette di vetro, ed evitando il contatto con strumenti sterili non sterili superfici riduce la possibilità di contaminazione soluzioni e culture in un esperimento. L&#39;obiettivo è che queste procedure precauzionali per diventare una seconda natura, questo viene con l&#39;allenamento e la pratica mentre si lavora in un laboratorio. Trasferimenti di volume con soluzioni sterili e culture che utilizzano strumenti quali pipette sierologiche e microfonoropipettors sono uno dei molti tipi di tecniche di routine eseguite in laboratorio. Diverse applicazioni sperimentali richiedono strumenti in grado di trasferire volumi distinti, ma precise e accurate. Pipette sierologiche vengono utilizzati nei laboratori di microbiologia per preparare colture cellulari che richiedono preparazioni dei media che coinvolga volumi millilitro, mentre Micropipettatrici sono essenziali per esperimenti di biologia molecolare che hanno bisogno solo quantità microlitro di soluzioni. Quando una tecnica asettica è praticata con questi strumenti, la contaminazione è ridotto al minimo durante i trasferimenti di volume indipendentemente dalla quantità di liquido o del tipo di esperimento. Anche se non discusse in questo protocollo, un altro mezzo comunemente usati per prevenire la contaminazione è quello di lavorare all&#39;interno di una cappa a flusso laminare (Figura 10). Questa apparecchiatura è fondamentale per la cultura dei tessuti e per gli esperimenti condotti con microrganismi classificati come BLS-2 o superiore. Una cappa a flusso laminare contiene un (HEPA alta efficienzaParticulate Air) filtro che rimuove gli agenti contaminanti presenti nell&#39;aria dal dell&#39;aria che fluisce nella cappa evitando aria non filtrata dalla stanza di permeare di lavoro. Da notare, un becco Bunsen non può essere utilizzato all&#39;interno di una cappa a flusso laminare in quanto il calore della fiamma interrompe il flusso d&#39;aria indispensabili per la funzionalità della cappa. È spesso utile per verificare la qualità della vostra tecnica asettica durante l&#39;esecuzione di esperimenti. Per confermare soluzioni e terreni di coltura non vengano contaminati durante le manipolazioni sperimentali, sempre preparare un controllo negativo. Per esempio, se la preparazione di tubi di brodo di crescita di colture batteriche, non inoculare un tubo lasciando solo supporto sterili. Incubare il terreno accanto alle provette inoculate poi ispezionare tubo di controllo non inoculato per i segni di contaminazione quali torbidità dalla crescita di cellule indesiderate involontariamente introdotto nel tubo. Se il tubo di controllo è contaminato, il tubo sperimentales probabilmente sono contaminati come pure, e l&#39;esperimento dovrà essere ripetuto. Queste misure precauzionali dovrebbe essere fatto con ogni esperimento.

<table border="1"><tbody><tr><td> Nome del reattivo </td><td> Azienda </td><td> Numero di catalogo </td><td> Comments </td></tr><tr><td> LB Broth </td><td> Difco </td><td> 244620 </td><td> Ricetta disponibile anche in riferimento 6 </td></tr><tr><td colspan="4"> TE Buffer: </td></tr><tr><td> EDTA sale disodico diidrato </td><td> Sigma </td><td> E5134 </td><td></td></tr><tr><td> Trizma-HCl </td><td> Sigma </td><td> T-3253 </td><td></td></tr><tr><td> CiDecon </td><td> Decon Laboratories, Inc. </td><td> 8504 </td><td> Disinfettante </td></tr><tr><td> Etanolo </td><td> Fisher Scientific </td><td> A406 </td><td> Per l&#39;uso come disinfettante, preparare 70% (v / v) con acqua distillata </td></tr></tbody></table>

aseptic laboratory techniques: volume transfers with serological pipettes and micropipettors

I microrganismi sono ovunque - nell&#39;aria, nel suolo, e il corpo umano, nonché su superfici inanimate come i banchi di laboratorio e tastiere di computer. L&#39;ubiquità dei microbi crea una copiosa fornitura di potenziali contaminanti in un laboratorio. Per assicurare il successo sperimentale, il numero di contaminanti sulle superfici degli impianti e di lavoro deve essere minimizzata. Comune tra molti esperimenti in microbiologia sono tecniche che comportano la misurazione e il trasferimento delle colture contenenti cellule batteriche o particelle virali. Per farlo senza contatto con superfici non sterili o contaminazione dei media richiede sterili (1) preparare uno spazio di lavoro sterile, (2) definiscono con precisione e con precisione di lettura degli strumenti per il trasferimento asettico di liquidi, e (3) correttamente manipolare strumenti, culture, fiaschi e bottiglie tubi all&#39;interno di un campo sterile. L&#39;apprendimento di queste procedure richiede per la formazione e la pratica. In un primo momento, le azioni dovrebbero essere lento, deliberato e controllato con l&#39;obiettivo di essere per t asettichetecnica a tiristori affermata a diventare una seconda natura quando si lavora al banco. Qui vi presentiamo i passi per misurare i volumi che utilizzano pipette sierologiche e Micropipettatrici all&#39;interno di un campo sterile creato da un becco Bunsen. I volumi vanno da microlitri (ul) a millilitri (ml) a seconda dello strumento utilizzato. I liquidi comunemente trasferite includono brodo sterile o soluzioni chimiche, nonché colture batteriche e le scorte fagi. Seguendo queste procedure, gli studenti dovrebbero essere in grado di: <ul><li> I lavori all&#39;interno del campo sterile creato dalla fiamma del bruciatore Bunsen. </li><li> Usare pipette sierologiche senza compromettere la sterilità dello strumento. </li><li> Aspirare liquidi con pipette sierologici, precisamente lettura volumi calibrati allineando il menisco formato dal liquido alle tacche sul pipetta. </li><li> Conservare le bottiglie di cultura, fiaschi, tubi e dei loro rispettivi tappi sterili durante i trasferimenti liquidi. </li><li> Identificare le diverse applicazioni di peduncolo di plastica rispetto al vetro sierologicaettes. </li><li> Precisione le limitazioni statali per Micropipettatrici. </li><li> Proprio ed esattamente impostare volumi Micropipettatrici. </li><li> Saper usare correttamente la prima tappa e la seconda su un micropipettatore per aspirare e trasferire volumi corretti. </li></ul>

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Aseptic Laboratory Techniques: Volume Transfers with Serological Pipettes and Micropipettors

Quando si lavora in un laboratorio, è indispensabile ridurre al minimo le fonti di contaminazione. Una tecnica asettica si riferisce a procedure che permettono il trasferimento di culture e di reagenti, evitando il contatto con superfici non sterili. Pipette sierologiche e Micropipettatrici sono utilizzati per misurare i volumi precisi, senza compromettere la sterilità delle soluzioni utilizzati a fini sperimentali.

Tecniche asettiche di laboratorio: Trasferimenti Volume con pipette sierologiche e Micropipettatrici

Microorganisms are everywhere - in the air, soil, and human body as well as on inanimate surfaces like laboratory benches and computer keyboards. The ...

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161.5K Views.  University of California, Los Angeles. Quando si lavora in un laboratorio, è indispensabile ridurre al minimo le fonti di contaminazione. Una tecnica asettica si riferisce a procedure che permettono il trasferimento di culture e di reagenti, evitando il contatto con superfici non sterili. Pipette sierologiche e Micropipettatrici sono utilizzati per misurare i volumi precisi, senza compromettere la sterilità delle soluzioni utilizzati a fini sperimentali.