Jessica Ottmar temsilcisi veri protokol öneri ve katkıları için teşekkür ederiz. Bu protokol gösteren Sabrina Blackledge, Lauren Güneş sisteminde bir kuyruklu ve Kerisa Shelton Özel teşekkürler.

1. Kurmak <ol><li> Tüm araştırmalar, uygun bir Kurumsal Değerlendirme Kurulu ya da veri toplama önce insan denekler inceleme komitesi tarafından onaylanmış olması gerekir. </li><li> İdeal olarak, iki oda TSST yapmak için mevcut olmalıdır. Rahat bir bekleme odası TSST başlangıç ​​ve iyileşme dönemlerinde önce katılımcılara mevcut olmalıdır. Ayrı bir görüşme odası, yenilik ve uncontrolability tanıtmak için konuşma hazırlama, konuşma, performans ve TSST matematik bölümlerini sırasında kullanılmalıdır. </li><li> Katılımcı konfederasyon görüşmeci ve katılımcı görsel alanda pozisyon video ya da ses kayıt cihazları ile karşı karşıya olacağını görüşme odası düzenleyin. Görüşmeci TSST sırasında stres artırmak için TSST sırasında giymek için Lab kat mevcut olmalıdır. Katılımcılar ile göz teması sürdürmek ve TSST sırasında duygusal yüz ifadeleri yapmaktan kaçınmaya görüşmeci bilgilendirin. </li><li> Dikkatle inci düşününe araştırma sorusu (ler) bağımlı ölçümler seçerek. : Stres yanıtı çeşitli ölçümler analiz ve yayın için rehber çeşitli kaynaklardan (psikofizyolojik önlemlerin yayın ve analiz için kılavuzlar Psikofizyolojik Araştırma Derneği tarafından sağlanmaktadır <a href="http://www.sprweb.org/journal/index.cfm#guidelines" target="_blank">http://www.sprweb.org/journal/index</a> tarafından sağlanmaktadır <a href="http://www.sprweb.org/journal/index.cfm#guidelines" target="_blank">. cfm # kurallar</a> ). deney tasarımı sırasında bu kaynakların 5 Danışma tavsiye edilir. </li><li> TSST fizyolojik, psikolojik ya da endokrin yanıtları kaydetmek için gerekli tüm ekipman kurmak. Kağıt ve kalem ya da elektronik versiyonları Bu cihaz (ancak bunlarla sınırlı değildir) elektrotlar ve elektronik ekipman ve / veya yazılım, kalp atış hızı, kardiyovasküler reaktivite, deri iletkenliği veya yanıt, göz kırpma, kas kasılması / ton, solunum hızı kayıt içerebilir Yat Devlet Sürekli Kaygı gibi psikolojik araçlarBu gösteri için entory; 6 tüpleri ve idrar, kan ya da tükürük örnekleri için diğer koleksiyon malzemeleri, ya da video kayıt cihazları, biz üç-kurşun elektrokardiyogram (EKG) TSST sırasında kalp hızını ölçmek için elektrotlar, ve tekrarlanan yönetim kullanarak olacak Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri, stres öncesi ve sonrası psikolojik tepkisini ölçmek için . Biz kalp hızı kayıt fizyolojik tepkileri ölçmek için tasarlanmış basit bir kayıt sistemi (BIOPAC MP36 sistemi) kullanabilir. </li><li> Eğer deney sırasında toplanan kan örnekleri (yerine tükürük dışında), toplama sırasında ağrı ve rahatsızlık en aza indirmek için çalışmalar yapılmalıdır. Kan toplama yöntemleri, ek fiziksel ya da psikolojik stres, TSST karıştırıcı yanıt tanıtabilirsiniz. </li><li> Katılımcı geldiğinde, laboratuara hoş geldiniz. Bilgilendirilmiş onam ve koltuk katılımcı rahatlıkla alın. </li><li> Demografik bilgileri, tarama bilgileri veya additio toplayınnal varış denemenizi tarafından gerekli tedbirler. Katılımcı, yiyecek veya içecek (su dışında) son bir saat içinde tüketilen olmadığını doğrulayın kortizol ölçümleri toplayarak kısa bir açlık dönemi, analiz için tükürük örnekleri toplamaya edilecektir tavsiye edilir. Asitli yiyecek ya da içecek ya da görünür kirlenme ile ilgili pH değişiklikleri doğru tükürük belirteçlerin ölçümü ile müdahale edebilirsiniz . İdrar toksikoloji tarama ilgi tedbirler, ilaç ya da diğer metabolitleri kontamine olabilir eğer gerekli olabilir . Stres yanıtı (örneğin ilaç, hastalık, uyku, son stresli olaylar, sosyal fobi) tarama katılımcılar kabul edilmelidir etkileyebilecek faktörler hakkında bilgiler. </li></ol> 2. Pre-stres Ölçümler <ol><li> Bekleme odasında 45 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek katılımcı bilgilendirin. Emo içeren dergi gibi okuma malzemesi, katılımcı sağlamak için seçebilirsinizizolasyonlu kablo nötr içerik, ya da bu dönemde duygusal olarak nötr bir başka etkinlik. </li><li> 45 dakikalık bekleme süresinden sonra, ön stresin değerlendirmek için Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri yönetmek 6 Alternatif olarak, stres, anksiyete veya rahatlama devlet değişiklikleri değerlendirmek için tasarlanmış diğer araçlar (örneğin, görsel analog ölçekleri) uygulanan olabilir . </li><li> Bir &quot;ön-stres&quot; tükürük örneği toplayın. Su ile ağzınızı çalkalayın katılımcı bilgilendirin. Katılımcı içme saman 5-10 cm bölüm ve temiz bir, tek 2.0 ml polipropilen flakon verin. Tükürük ağız katta havuz için şişeciğin içine kamışla tükürük geçmesine izin vermek için yönlendirmeniz onların baş eğmek için katılımcı bilgilendirin. Katılımcının yaklaşık 1.5-2.0 ml tükürük toplayın. Alternatif olarak, tükürük emici diş fitil (veya benzeri malzeme) kullanarak ve tükürük ile malzeme çiğnemek ya da bombalamak için katılımcı tarafından toplanan olabilir. Eğer possible, katılımcı gizlilik sağlamak için odayı terk. Etiket ve -20 ° C&#39;de mümkün olduğunca kısa sürede tüm tükürük örnekleri saklamak. </li><li> 5 dakika öncesi stres fizyolojik ölçümler kaydedin. </li></ol> 3. TSST <ol><li> Ayrı bir görüşme odası (TSST stres etkilerini artırmak için) kullanarak olacaksa, görüşme odasına bekleme salonunda katılımcı getirmek. </li><li> TSST konuşma hazırlık döneminden başlamak için aşağıdaki komut dosyası, katılımcı okuyun: &quot;Bu görevin konuşma hazırlama bölümü, zihinsel, neden sizin için ideal iş için iyi bir aday olacağını açıklayan beş dakikalık bir konuşma hazırlamak için. konuşma, topluluk önünde konuşma konusunda eğitim almış yargıçların bir panel tarafından videoya ve gözden geçirilmelidir. hazırlamak için on dakikanız var ve zaman şimdi başlıyor. &quot; </li><li> 10 dakikalık bir konuşma hazırlık döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin. 10 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk. </li&gt; <li> 10 dakika sonra, bir laboratuvar önlüğü giyen odasına dönün. Katılımcı için aşağıdaki komut dosyası okuyun: &quot;Bu görev konuşma bölümü tüm beş dakikalık bir süre için ideal iş için iyi bir aday olacağını açıklayan bir konuşma konuşmak gerekir. zaman şimdi başlıyor. &quot; Değerlendirmeli / performans stres artırmak için pervane video kamera, şimdi açık olmalıdır. </li><li> 5 dakikalık konuşma performans döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin. Katılımcının konuşması sırasında konuşurken durursa, ona 20 saniye sessiz kalmaya izin verir. O konuşmaya devam etmezse, onlara talimat konuşmaya devam etmek katılımcı istemi: &quot;Hala kalan süre var.&quot; </li><li> 5 dakikalık konuşma performans dönemi sonunda, katılımcı aşağıdaki komut dosyasını okuyun: &quot;1022 sayısı 13 sırayla çıkarmak için istenecektir bu görevin son beş dakikalık matematik bölümü sırasında olacak sözlü.ly yüksek sesle cevaplar rapor ve bir hata yapılmış ise 1.022 başlatmak için istenebilir. Zaman şimdi başlıyor &quot;katılımcı bir hata yaparsa, onları istemi:&quot; Bu yanlış, lütfen 1022 den başlamak &quot;5 dakika için bir dijital zamanlayıcı kurun. </li><li> 5 dakikalık bir matematik performans döneminde fizyolojik ölçümler kaydedin. </li><li> TSST matematik performans dönemi sonunda, bir &quot;post-stres&quot; tükürük örneği toplamak. </li><li> Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri sonrası stres yönetin. </li></ol> 4. Post-stres Kurtarma Ölçümler <ol><li> Orijinal bekleme salonunda katılımcıların dönün. Ilk iyileşme süresi boyunca, 20 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek için katılımcı kapatın. 20 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk. </li><li> 20 dakika sonra bekleme odasına dönün ve &quot;Kurtarma 1&quot; tükürük örneği toplamak. </li><li> Ikinci kurtarma dönemde, yine 20 dakika boyunca rahat bir şekilde beklemek katılımcı talimat. 20 dakika boyunca bir dijital zamanlayıcı kurun ve odayı terk. </li><li> 20 dakika sonra bekleme odasına dönün ve &quot;Kurtarma 2&quot; tükürük örneği toplamak. </li><li> &quot;Kurtarma&quot; Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri tamamlamak için katılımcı bilgilendirin. </li><li> Debrief deneyin gerçek doğasını olarak katılımcı. Onların performansını ve kendi konuşma veya matematik performansı hiçbir analiz yapılacaktır olmadığını katılımcı bilgilendirin. Katılımcı sunulduğu görevleri makul olmayan zor ve katılımcının yetenek ya da beceri üzerine yansıtmak olmadığını açıklayın. </li></ol> 5. Veri Analizi <ol><li> Psikolojik önlemleri analiz etmek için, her öncesi stres, post-stres ve iyileşme süresi noktaları Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri puan 6 </li><li> Fizyolojik önlemleri analiz etmek &quot;,&quot; öncesi stres &quot;,&quot; konuşma performans &quot;ve&quot; m konuşma hazırlama, her biri için 5 dakikalık bir ortalama kalp atış hızı puanı hesaplamaksporcudan TSST dönemleri Alternatif olarak, hesaplama TSST sırasında ayrık zaman noktalarında TSST ölçmek veya kalp hızı her dakika için puan ortalamaları &quot;. </li><li> Nöroendokrin önlemler, piyasada mevcut ÇED kitleri kullanılarak hormon konsantrasyonu için tükürük örnekleri tahlil analiz etmek. </li></ol> 6 İsteğe Bağlı: Ek Tükürük Kortizol Testi Protokol Bilgisi (Salimetrics tükürük kortizol tahlil kiti eklemek çoğaltılamaz) <ol><li> Tüm tükürük tahlil kiti reaktifler oda sıcaklığına getirin. </li><li> Tampon yıkama kiti talimatlara göre hazırlayın. </li><li> Yinelenen uygun kuyulara plaka düzeni ve pipet 25 mcL standartlar ve kontroller belirleyin. </li><li> 15 dakika boyunca 1.500 XG (@ 3,000 RPM) Çözülme tükürük örnekleri, vorteks ve santrifüj. </li><li> Pipet 25 plaka uygun kuyuları (çift) santrifüje örneklerinden berrak sıvı mcL. </li><li> Tüm kuyulara enzim konjuge ve pipet 200 mcL hazırlayın. </li&gt; <li> 500 rpm&#39;de 5 dakika plaka karıştırın ve 55 dakika boyunca inkübe edin. </li><li> Yıkama tamponu ile 4 kez plaka yıkayın ve kurulayın. </li><li> Bir çok kanallı pipet kullanarak her bir kuyunun 200 mcL tetramethylbenzidine (TMB) çözeltisi ekleyin. </li><li> 500 rpm&#39;de 5 dakika plaka karıştırın ve ek bir 25 dakika boyunca karanlıkta inkübe edin. </li><li> 50 mcL durdurma, her iyi çözüm ve reaksiyonları durdurmak için 500 rpm&#39;de 3 dakika boyunca karışımı ekleyin. </li><li> Plaka alt durak çözüm ekleyerek 10 dakika içinde 450 nm dalga boyunda bir plaka okuyucu plaka temiz ve okumak silin. </li><li> Kortizol konsantrasyonu hesaplamak için, yinelenen tüm kuyuları için ortalama optik yoğunluk hesaplar. , Ortalaması sıfır, standart, kontrol ve numune kuyuları optik yoğunluk non-spesifik bağlayıcı kuyuların ortalama optik yoğunluk çıkarın. </li><li> Aver bu kuyulardan ortalama optik yoğunluğu (B) bölünmesi ile her bir standart, kontrol ve örnek için bağlı (B / Bo) yüzde hesaplayınsıfır kuyular (Bo) yaş optik yoğunluk. Lojistik uyumlu yazılımlar kullanarak enterpolasyon yoluyla kontrolleri ve numune konsantrasyonunu belirleyin. </li></ol> 7. Temsilcisi Sonuçlar: Burada sunulan temsilcisi verileri, sağlıklı yetişkin bir erkek katılımcı ile öğleden sonra laboratuarımızda yapılmıştır edebiyat ve iki çalışma gözden derlenmiştir . Bu veriler, bu yazıda protokolünü kullanarak olabilir sonuçları yaklaşık olarak temsil etmek için tasarlanmıştır. , Kalp atım hızı (Şekil 3), ve tükürük kortizol konsantrasyonları (Şekil 4) Bu TSST protokolü (Şekil 1) kendi kendine bildirilen anksiyete artar (Şekil 2 Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri ile ölçülen) neden olur. Şekil 1&#39;de gösterildiği deney protokolünde TSST ile bir veri toplama oturumu sırasında çeşitli ölçümler yapılmış olabileceğine dair bir örnek vermek gerekiyordu. ÖLÇME, zamanlamats ve farklı önlemler de dahil, belirli bir araştırma sorusu tarafından dikte olacaktır. Anksiyete ve / veya stres yanıtı, bu önlemler köreldiğini veya zayıflatılmış artış tahmin edilmektedir azaltmak amacıyla, bir müdahale kullanıyorsanız. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig1.jpg" /> Şekil 1. Deneysel protokol Not: Trier Sosyal Stres Testi (TSST), Durumluk Sürekli Kaygı Envanteri (STAI); 5 dakika öncesi Stres döneminde (PS) 10 dakika Geleceğe Stres süresi (konuşma hazırlık) (AS), 5 dakika Konuşma süresi. (S), 5 dakikalık Matematik döneminde (M). <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig2.jpg" /> Şekil 2. Temsilci durumluk kaygı puanları Not: Devlet Anksiyete skoru 20-Iten durumluk kaygı ölçümü, Durumluk Sürekli Kaygı envanteri (STAI) hesaplanır Temsilcisi puanları laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayınlanan verileri yansıtır . Şekil 3. Temsilci kalp hızı verileri Not: dakikadaki atım (BPM) Kalp hızı Temsilcisi değerleri laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayımlanan verileri yansıtmaktadır. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3238/3238fig4.jpg" /> Şekil 4. Temsilci tükürük kortizol verileri Not:. UL / DL kortizol konsantrasyonu Temsilcisi değerleri laboratuarımızda toplanan ve literatürde yayınlanan veriler yansıtmaktadır.

<ol>
	<li>Kudielka, B. M., Hellhammer, D. H., Kirschbaum, C., Harmon-Jones, E., Winkielman, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ten+years+of+research+with+the+Trier+Social+Stress+Test+-+Revisited.">Ten years of research with the Trier Social Stress Test - Revisited.</a> Social Neuroscience: Integrating Biological and Psychological Explanations. , (2007).</li><li>Dickerson, S. S., Kemeny, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+stressors+and+cortisol+responses:+A+theoretical+integration+and+synthesis+of+laboratory+research.">Acute stressors and cortisol responses: A theoretical integration and synthesis of laboratory research.</a> Psychol. Bull. 130, 355-391 (2004).</li><li>Kirschbaum, C., Pirke, K., Hellhammer, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+"Trier+social+stress+test"+-+a+tool+for+investigating+psychobiological+stress+response+in+a+laboratory+setting.">The "Trier social stress test" - a tool for investigating psychobiological stress response in a laboratory setting.</a> Neuropsychobiology. 28, 76-81 (1993).</li><li>Gruenewald, T. L., Kemeny, M. E., Aziz, N., Fahey, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+threat+to+the+social+self:+shame,+social+self-esteem,+and+cortisol+activity.">Acute threat to the social self: shame, social self-esteem, and cortisol activity.</a> Psychosom. Med. 66, 915-924 (2004).</li><li>Mendes, W. B., Harmon-Jones, E., Beer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+autonomic+nervous+system+activity.">Assessing autonomic nervous system activity.</a> Methods in Social Neuroscience. , 118-147 (2009).</li><li>Spielberger, C. D., Gorsuch, R. L., Lushene, P. R., Vagg, P. R., Jacobs, A. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Manual for the State-Trait Anxiety Inventory (Form Y). , (1983).</li><li>Dawans, B. v. o. n., Kirschbaum, C., Heinrichs, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Trier+Social+Stress+Test+for+groups+(TSST-G):+A+new+research+tool+for+controlled+simultaneous+social+stress+exposure+in+a+group+format.">The Trier Social Stress Test for groups (TSST-G): A new research tool for controlled simultaneous social stress exposure in a group format.</a> Psychoneuroendocrinology. 36, 514-522 (2011).</li><li>Pace, T. W. W., Negi, L. T., Adame, D. D., Cole, S. P., Sivilli, T. I., Brown, T. D., Issa, M. J., Raison, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+compassion+meditation+on+neuroendocrine,+innate+immune+and+behavioral+responses+to+psychosocial+stress.">Effect of compassion meditation on neuroendocrine, innate immune and behavioral responses to psychosocial stress.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 87-98 (2010).</li><li>Kirschbaum, C., W&#252;rst, S., Hellhammer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consistent+sex+differences+in+cortisol+responses+to+psychological+stress.">Consistent sex differences in cortisol responses to psychological stress.</a> Psychosom. Med. 54, 648-657 (1992).</li><li>Therrien, F., Drapeau, V., Lalonde, J., Lupien, S. J., Beaulieu, S., Dore, J., Tremblay, A., Richard, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cortisol+response+to+the+Trier+Social+Stress+Test+in+obese+and+reduced+obese+individuals.">Cortisol response to the Trier Social Stress Test in obese and reduced obese individuals.</a> Biol. Psychol. 84, 325-329 (2010).</li><li>W&#252;st, S., Entringer, S., Federenko, I. S., Schlotz, W., Hellhammer, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Birth+weight+is+associated+with+salivary+cortisol+responses+to+psychosocial+stress+in+adult+life.">Birth weight is associated with salivary cortisol responses to psychosocial stress in adult life.</a> Psychoneuroendocrinology. 30, 591-598 (2005).</li><li>Simeon, D., Yehuda, R., Cunill, R., Knutelska, M., Putnam, F. W., Smith, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+associated+with+resilience+in+healthy+adults.">Factors associated with resilience in healthy adults.</a> Psychoneuroendocrinology. 32, 1149-1152 (2007).</li><li>Quirin, M., Pruessner, J. C., Kuhl, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HPA+system+regulation+and+adult+attachment+anxiety:+Individual+differences+in+reactive+and+awakening+cortisol.">HPA system regulation and adult attachment anxiety: Individual differences in reactive and awakening cortisol.</a> Psychoneuroendocrinology. 33, 581-590 (2009).</li><li>Pierrehumbert, B., Torrisi, R., Glatz, N., Dimitrova, N., Heinrichs, M., Halfon, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+influence+of+attachment+on+perceived+stress+and+cortisol+response+to+acute+stress+in+women+sexually+abused+in+childhood+or+adolescence.">The influence of attachment on perceived stress and cortisol response to acute stress in women sexually abused in childhood or adolescence.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 924-938 (2009).</li><li>Fiocco, A. J., Joober, R., Lupien, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Education+modulates+cortisol+reactivity+to+the+Trier+Social+Stress+Test+in+middle-aged+adults.">Education modulates cortisol reactivity to the Trier Social Stress Test in middle-aged adults.</a> Psychoneuroendocrinology. 32, 1158-1163 (2007).</li><li>Oswald, L. M., Zandi, P., Nestadt, G., Potash, J. B., Kalaydjian, A. E., Wand, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relationship+between+cortisol+responses+to+stress+and+personality.">Relationship between cortisol responses to stress and personality.</a> Neuropsychopharmacology. 31, 1583-1591 (2006).</li><li>Fries, E., Hellhammer, D. H., Hellhammer, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuation+of+the+hypothalamic-pituitary-adrenal+axis+responsivity+to+the+Trier+Social+Stress+Test+by+the+benzodiazepine+alprazolam.">Attenuation of the hypothalamic-pituitary-adrenal axis responsivity to the Trier Social Stress Test by the benzodiazepine alprazolam.</a> Psychoneuroendocrinology. 31, 1278-1288 (2006).</li><li>Kudielka, B. M., Fischer, J. E., Metzenthin, P., Helfricht, S., Preckel, D., von K&#228;nel, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=No+effect+of+5-day+treatment+with+acetylsalicylic+acid+(aspirin)+or+the+beta-blocker+propranolol+(Inderal)+on+free+cortisol+responses+to+acute+psychosocial+stress:+A+randomized+double-blind,+placebo-controlled+study.">No effect of 5-day treatment with acetylsalicylic acid (aspirin) or the beta-blocker propranolol (Inderal) on free cortisol responses to acute psychosocial stress: A randomized double-blind, placebo-controlled study.</a> Neuropsychobiology. 56, 159-166 (2007).</li><li>Gaab, J., Bl&#228;ttler, N., Menzl, T., Pabst, B., Stoyer, S., Ehlert, U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Randomized+controlled+evaluation+of+the+effects+of+cognitive-behavioral+stress+management+on+cortisol+responses+to+acute+stress+in+healthy+subjects.">Randomized controlled evaluation of the effects of cognitive-behavioral stress management on cortisol responses to acute stress in healthy subjects.</a> Psychoneuroendocrinology. 28, 767-779 (2003).</li><li>Khalfa, S., Bella, S. D., Roy, M., Peretz, I., Lupien, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+relaxing+music+on+salivary+cortisol+level+after+psychological+stress.">Effects of relaxing music on salivary cortisol level after psychological stress.</a> Ann. NY Acad. Sci. 999, 374-376 (2003).</li><li>Balodis, I. M., Wynne-Edwards, K. E., Olmstead, M. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+other+side+of+the+curve:+Examining+the+relationship+between+pre-stressor+physiological+responses+and+stress+reactivity.">The other side of the curve: Examining the relationship between pre-stressor physiological responses and stress reactivity.</a> Psychoneuroendocrinology. 35, 1363-1373 (2010).</li><li>Shultheiss, O. C., Stanton, S. J., Harmon-Jones, E., Beer, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+salivary+hormones.">Assessment of salivary hormones.</a> Methods in Social Neuroscience. , 17-44 (2009).</li><li>Kudielka, B. M., Hellhammer, D. H., W&#252;st, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Why+do+we+respond+so+differently?+Reviewing+determinants+of+human+salivary+cortisol+responses+to+challenge.">Why do we respond so differently? Reviewing determinants of human salivary cortisol responses to challenge.</a> Psychoneuroendocrinology. 34, 2-18 (2009).</li><li>Buske-Kirschbaum, A., Jobst, S., Wustmans, A., Kirschbaum, C., Rauh, W., Hellhammer, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Attenuated+free+cortisol+response+to+psychosocial+stress+in+children+with+atopic+dermatitis.">Attenuated free cortisol response to psychosocial stress in children with atopic dermatitis.</a> Psychosom. Med. 59, 419-426 (1997).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Bu makalede, biz sağlıklı bir gönüllü Trier Sosyal Stres Testi yapmak için nasıl gösterdi. TSST, psikolojik, fizyolojik ve nöroendokrin önlemler sağlam ve güvenilir artışlara neden olur standart bir laboratuvar, sosyal stres. TSST için kullanışlı bir alternatif gibi soğuk dikiş testi veya treadmill yürüme fiziksel streslerinin ve değerlendirici bir kitlenin varlığı performans daha natüralist, psikolojik stres üretir. Çeşitli araştırma programları ihtiyaçlar...

<table border="1"><tbody><tr><th> Ekipman / Tedarik Adı </th><th> Şirket </th><th> Katalog numarası </th></tr><tr><td> BSL Psikofizyoloji Sistemi, Mac OS MP36 Veri Toplama Birimi ve üç kurşun elektrokardiyogram elektrotlar </td><td> BIOPAC Systems Inc. </td><td> BSLPSY-M </td></tr><tr><td> Durumluk Sürekli Anksiyete Envanteri </td><td> Zihin Bahçe, Inc. </td><td> Ağırbaşlı-B </td></tr><tr><td> Tükürük Kortizol Enzim İmmüno Testi Kiti </td><td> Salimetrics </td><td> 1-3002 </td></tr><tr><td> 2.0 ml polipropilen flakon </td><td> Fisher Scientific </td><td> 05 40B 146 </td></tr><tr><td> BioRad Mikroplaka Okuyucu Mikroplaka Manager yazılımı ile Model 680, </td><td> BioRad </td><td> Plaka Okuyucu: 168 1000 Yazılım: 1706800 </td></tr></tbody></table>

the trier social stress test protocol for inducing psychological stress

Bu makale, bir laboratuvar ortamında kullanmak için bir psikolojik stres protokolü göstermektedir. Araştırmacılar, sağlık ve hastalık stres yanıtı biyolojik yollar çalışma izin Protokolleri stres ve anksiyete araştırmanın ilerlemesi için temel 1 laboratuvarda stres yanıtı inducing için çok sayıda protokoller bulunmasına rağmen, pek çok ihmal natüralist bir bağlam veya sağlamak için , sosyal ve psikolojik stres yönleri dahil etmek. Psikolojik stres protokolleri, meta-analiz Trier Sosyal Stres Testi (TSST) TSST özgün açıklamasını stres hormonu reaktivite 2 çalışmaları için en yararlı ve en uygun standart bir protokol olduğunu göstermektedir, araştırmacılar bir prosedür tasarım ve değerlendirmek için aradı sağlıklı gönüllülerin çoğu güvenilir bir stres yanıtı 3 inducing yeteneğine Bu araştırmacılar, kalp hızı, kan basıncı ve bazı endokrin stres m yükselme bulundu .TSST yanıt arkers (psikolojik stres) tuzlu bir enjeksiyon (fiziksel bir stres) göre 3 TSST çeşitli araştırma gruplarının ihtiyaçlarını karşılamak için değiştirilmiş olmasına rağmen, genellikle varışta bir bekleme süresi, beklenti konuşma oluşur bir veya daha fazla toparlanma dönemleri izledi hazırlama, konuşma performans ve sözel aritmetik performans süreleri,. TSST katılımcılara bir konuşma hazırlamak ve sunmak için gerektirir ve sosyal değerlendirmeli seyircinin huzurunda sözlü zorlu bir aritmetik problemi cevap 3 Sosyal değerlendirme ve kontrol edilemezliği TSST stres indüksiyon anahtar bileşenleri olarak tespit edilmiştir. 4 için kullanmak TSST amacı, on yılı aşkın bir görev sırasında (HPA) hipotalamus-hipofiz-adrenal veya sempatik-adrenal-medüller (SAM) eksen reaktivite, anksiyete ve aktivasyon farklılıkları ölçmek amacıyla sistematik bir stres yanıtı ikna etmek için ... 1 Researconun genellikle kendi kendine bildirilen anksiyete değişiklikler, fizyolojik tedbirler (örneğin kalp hızı) ve / veya TSST yanıt nöroendokrin indeksleri (stres hormonu kortizol gibi) değerlendirir. Birçok araştırmacı, karıştırıcı kan toplama teknikleri stresi azaltmak için kan örneklemesi için bir alternatif olarak kortizol ve alfa-amilaz (otonom sinir sistemi aktivasyonu bir belirteç) olarak stres belirteçler için tükürük örnekleme kabul ettiler. TSST tamamladıktan bir kişi tarafından yaşanan değişikliklerin yanı sıra, araştırmacılar, farklı tedavi grupları (örneğin klinik karşı sağlıklı kontrol örneklerinde) veya stres azaltılması müdahalelerin etkinliğini arasında değişiklik karşılaştırabilirsiniz 1

Watch this Scientific Journal Video about The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress at JoVE.com

The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Bu makalede, araştırmacılar sağlar tek katılımcılar içinde veya gruplar arasında stres, psikolojik, fizyolojik ve nöroendokrin yanıtları ölçmek için katılımcılara, psikolojik stres inducing için bir protokol tanımlamaktadır.

Psikolojik Stres Başlatmaya Trier Sosyal Stres Testi Protokolü

This article demonstrates a psychological stress protocol for use in a laboratory setting.  Protocols that allow researchers to study the biological ...

the-trier-social-stress-test-protocol-for-inducing-psychological

Research

JoVE Journal

Medicine

55.6K Görüntüleme.  Northern Arizona University. Bu makalede, araştırmacılar sağlar tek katılımcılar içinde veya gruplar arasında stres, psikolojik, fizyolojik ve nöroendokrin yanıtları ölçmek için katılımcılara, psikolojik stres inducing için bir protokol tanımlamaktadır.

Video: The Trier Social Stress Test Protocol for Inducing Psychological Stress

Using Visual and Narrative Methods to Achieve Fair Process in Clinical Care

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is respect for patient's values, preferences, and expressed needs. Yet specific approaches to gaining this understanding and translating it to quality care in the clinical setting are lacking. From a patient perspective quality is not a simple concept but is best understood in terms of five dimensions: technical outcomes; decision-making efficiency; amenities and convenience; information and emotional support; and overall patient satisfaction. Failure to consider quality from this five-pronged perspective results in a focus on medical outcomes, without considering the processes central to quality from the patient's perspective and vital to achieving good outcomes. In this paper, we argue for applying the concept of fair process in clinical settings. Fair process involves using a collaborative approach to exploring diagnostic issues and treatments with patients, explaining the rationale for decisions, setting expectations about roles and responsibilities, and implementing a core plan and ongoing evaluation. Fair process opens the door to bringing patient expertise into the clinical setting and the work of developing health care goals and strategies. This paper provides a step by step illustration of an innovative visual approach, called photovoice or photo-elicitation, to achieve fair process in clinical work with acquired brain injury survivors and others living with chronic health conditions. Applying this visual tool and methodology in the clinical setting will enhance patient-provider communication; engage patients as partners in identifying challenges, strengths, goals, and strategies; and support evaluation of progress over time. Asking patients to bring visuals of their lives into the clinical interaction can help to illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships with patients living with chronic conditions such as brain injury, and identify patient-centered goals and possibilities for healing. The process illustrated here can be used by clinicians, (primary care physicians, rehabilitation therapists, neurologists, neuropsychologists, psychologists, and others) working with people living with chronic conditions such as acquired brain injury, mental illness, physical disabilities, HIV/AIDS, substance abuse, or post-traumatic stress, and by leaders of support groups for the types of patients described above and their family members or caregivers.

This paper illustrates an innovative visual approach (photovoice or photo-elicitation) to achieve fair process in clinical care for patients living with chronic health conditions, illuminate gaps in clinical knowledge, forge better therapeutic relationships, and identify patient-centered goals and possibilities for healing.

Klinik Bakımı Fuar Süreci elde Görsel ve Anlatı Yöntemlerle

The Institute of Medicine has targeted patient-centeredness as an important area of quality improvement. A major dimension of patient-centeredness is ...

Tıp

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson's Disease

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our understanding of the mechanisms underlying parkinsonian symptoms, since it recapitulates the changes in basal ganglia circuitry and pharmacology observed in parkinsonian patients1-4. However, the precise cellular and molecular changes occurring at cortico-striatal synapses of the output pathways within the striatum, which is the major input region of the basal ganglia remain elusive, and this is believed to be site where pathological abnormalities underlying parkinsonian symptoms arise3,5.
In PD, understanding the mechanisms underlying changes in basal ganglia circuitry following degeneration of the nigro-striatal pathway has been greatly advanced by the development of bacterial artificial chromosome (BAC) mice over-expressing green fluorescent proteins driven by promoters specific for the two striatal output pathways (direct pathway: eGFP-D1; indirect pathway: eGFP-D2 and eGFP-A2a)8, allowing them to be studied in isolation. For example, recent studies have suggested that there are pathological changes in synaptic plasticity in parkinsonian mice9,10. However, these studies utilised juvenile mice and acute models of parkinsonism. It is unclear whether the changes described in adult rats with stable 6-OHDA lesions also occur in these models. Other groups have attempted to generate a stable unilaterally-lesioned 6-OHDA adult mouse model of PD by lesioning the medial forebrain bundle (MFB), unfortunately, the mortality rate in this study was extremely high, with only 14% surviving the surgery for 21 days or longer11. More recent studies have generated intra-nigral lesions with both a low mortality rate &gt;80% loss of dopaminergic neurons, however expression of L-DOPA induced dyskinesia11,12,13,14 was variable in these studies. Another well established mouse model of PD is the MPTP-lesioned mouse15. Whilst this model has proven useful in the assessment of potential neuroprotective agents16, it is less suitable for understanding mechanisms underlying symptoms of PD, as this model often fails to induce motor deficits, and shows a wide variability in the extent of lesion17, 18.
Here we have developed a stable unilateral 6-OHDA-lesioned mouse model of PD by direct administration of 6-OHDA into the MFB, which consistently causes &gt;95% loss of striatal dopamine (as measured by HPLC), as well as producing the behavioural imbalances observed in the well characterised unilateral 6-OHDA-lesioned rat model of PD. This newly developed mouse model of PD will prove a valuable tool in understanding the mechanisms underlying generation of parkinsonian symptoms.

Development of a Unilaterally-lesioned 6-OHDA Mouse Model of Parkinson&#039;s Disease

A protocol for performing unilateral 6-OHDA lesions of the medial forebrain bundle in mice is described. This method has a low mortality rate (13.3 %) with 89% of the surviving animals showing &#62;95% loss of striatal dopamine and 90.63&#177;-4.02 % ipsiversive rotational bias towards the side of the lesion.

Parkinson Hastalığının tek taraflı lezyonlanmıştır 6-OHDA Mouse Model Geliştirme

The unilaterally lesioned 6-hyroxydopamine (6-OHDA)-lesioned rat model of Parkinson's disease (PD) has proved to be invaluable in advancing our ...

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce atherosclerosis (reviewed in 1 and 2). The role of shear stress has been extensively studied in vitro investigating the influence of flow dynamics on cultured endothelial cells 1,3,4 and in vivo in larger animals and humans 1,5,6,7,8. However, highly reproducible small animal models allowing systematic investigation of the influence of shear stress on plaque development are rare. Recently, Nam et al. 9 introduced a mouse model in which the ligation of branches of the carotid artery creates a region of low and oscillatory flow. Although this model causes endothelial dysfunction and rapid formation of atherosclerotic lesions in hyperlipidemic mice, it cannot be excluded that the observed inflammatory response is, at least in part, a consequence of endothelial and/or vessel damage due to ligation.
In order to avoid such limitations, a shear stress modifying cuff has been developed based upon calculated fluid dynamics, whose cone shaped inner lumen was selected to create defined regions of low, high and oscillatory shear stress within the common carotid artery 10. By applying this model in Apolipoprotein E (ApoE) knockout mice fed a high cholesterol western type diet, vascular lesions develop upstream and downstream from the cuff. Their phenotype is correlated with the regional flow dynamics 11 as confirmed by in vivo Magnetic Resonance Imaging (MRI) 12: Low and laminar shear stress upstream of the cuff causes the formation of extensive plaques of a more vulnerable phenotype, whereas oscillatory shear stress downstream of the cuff induces stable atherosclerotic lesions 11. In those regions of high shear stress and high laminar flow within the cuff, typically no atherosclerotic plaques are observed.
 
In conclusion, the shear stress-modifying cuff procedure is a reliable surgical approach to produce phenotypically different atherosclerotic lesions in ApoE-deficient mice.

The constricting cuff presented in this article is designed to induce atherosclerosis in the murine common carotid artery. Due to the conical shape of its inner lumen the implanted cuff generates well-defined regions of low, high and oscillatory shear stress triggering the development of atherosclerotic lesions of different inflammatory phenotypes.

Fare Shear stres İndüklenmiş Ateroskleroz Tetikleme Karotis Kol İmplantasyonu

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

Biomarkers in an Animal Model for Revealing Neural, Hematologic, and Behavioral Correlates of PTSD

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for objective diagnosis but also for the evaluation of therapeutic efficacy and resilience to trauma. Ongoing research is directed at identifying molecular biomarkers for PTSD, including traumatic stress induced proteins, transcriptomes, genomic variances and genetic modulators, using biologic samples from subjects' blood, saliva, urine, and postmortem brain tissues. However, the correlation of these biomarker molecules in peripheral or postmortem samples to altered brain functions associated with psychiatric symptoms in PTSD remains unresolved. Here, we present an animal model of PTSD in which both peripheral blood and central brain biomarkers, as well as behavioral phenotype, can be collected and measured, thus providing the needed correlation of the central biomarkers of PTSD, which are mechanistic and pathognomonic but cannot be collected from people, with the peripheral biomarkers and behavioral phenotypes, which can.
Our animal model of PTSD employs restraint and tail shocks repeated for three continuous days - the inescapable tail-shock model (ITS) in rats. This ITS model mimics the pathophysiology of PTSD 17, 7, 4, 10. We and others have verified that the ITS model induces behavioral and neurobiological alterations similar to those found in PTSD subjects 17, 7, 10, 9. Specifically, these stressed rats exhibit (1) a delayed and exaggerated startle response appearing several days after stressor cessation, which given the compressed time scale of the rat's life compared to a humans, corresponds to the one to three months delay of symptoms in PTSD patients (DSM-IV-TR PTSD Criterian D/E 13), (2) enhanced plasma corticosterone (CORT) for several days, indicating compromise of the hypothalamopituitary axis (HPA), and (3) retarded body weight gain after stressor cessation, indicating dysfunction of metabolic regulation.
The experimental paradigms employed for this model are: (1) a learned helplessness paradigm in the rat assayed by measurement of acoustic startle response (ASR) and a charting of body mass; (2) microdissection of the rat brain into regions and nuclei; (3) enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for blood levels of CORT; (4) a gene expression microarray plus related bioinformatics tools 18. This microarray, dubbed rMNChip, focuses on mitochondrial and mitochondria-related nuclear genes in the rat so as to specifically address the neuronal bioenergetics hypothesized to be involved in PTSD.

We describe a rat model of post traumatic stress disorder (PTSD) that reveals the persistent alterations in neuroendocrine function and the delayed long-term, exaggerated fear response, characteristic of PTSD patients. The animal model and methods described here are useful for correlating biomarkers in brain nuclei, which are mechanistic but cannot be measured in patients, with biomarkers in peripheral white blood cells, which can.

TSSB, Nöral Hematolojik ve Davranış Bağlantılı Revealing için Hayvan Modelinde Biyobelirteçler

Identification of biomarkers representing the evolution of the pathophysiology of Post Traumatic Stress Disorder (PTSD) is vitally important, not only for ...

Cardiac Stress Test Induced by Dobutamine and Monitored by Cardiac Catheterization in Mice

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the arteries (&beta;2). When systemically administered, it increases cardiac demand. Thus, dobutamine unmasks abnormal rhythm or ischemic areas potentially at risk of infarction. 
Monitoring of heart function during a cardiac stress test can be performed by either ecocardiography or cardiac catheterization. The latter is an invasive but more accurate and informative technique that the former.
Cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization accomplished as described here allows, in a single experiment, the measurement of the following hemodynamic parameters: heart rate (HR), systolic pressure, diastolic pressure, end-diastolic pressure, maximal positive pressure development (dP/dtmax) and maximal negative pressure development (dP/dtmin), at baseline conditions and under increasing doses of dobutamine.
As expected, in normal mice we observed a dobutamine dose-related increase in HR, dP/dtmax and dP/dtmin. Moreover, at the highest dose tested (12 ng/g/min) the cardiac decompensation of high fat diet-induced obese mice was unmasked.

We describe the protocol to perform a cardiac stress test induced by dobutamine and monitored by cardiac catheterization in normal mice. Also we show its application to unmask subclinical cardiac disease in high fat diet-induced obese mice.

Kardiyak Stres Testi Dobutamin İndüklemiş ve Farelerde Kalp Kateterizasyonu tarafından İzlenen

Dobutamine is a &beta;-adrenergic agonist with an affinity higher for receptor expressed in the heart (&beta;1) than for receptors expressed in the ...

Reduction in Left Ventricular Wall Stress and Improvement in Function in Failing Hearts using Algisyl-LVR

Injection of Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently used for the first time in patients who had symptomatic heart failure. In all patients, cardiac function of the left ventricle (LV) improved significantly, as manifested by consistent reduction of the LV volume and wall stress. Here we describe this novel treatment procedure and the methods used to quantify its effects on LV wall stress and function.
Algisyl-LVR is a biopolymer gel consisting of Na+-Alginate and Ca2+-Alginate. The treatment procedure was carried out by mixing these two components and then combining them into one syringe for intramyocardial injections. This mixture was injected at 10 to 19 locations mid-way between the base and apex of the LV free wall in patients.
Magnetic resonance imaging (MRI), together with mathematical modeling, was used to quantify the effects of this treatment in patients before treatment and at various time points during recovery. The epicardial and endocardial surfaces were first digitized from the MR images to reconstruct the LV geometry at end-systole and at end-diastole. Left ventricular cavity volumes were then measured from these reconstructed surfaces.
Mathematical models of the LV were created from these MRI-reconstructed surfaces to calculate regional myofiber stress. Each LV model was constructed so that 1) it deforms according to a previously validated stress-strain relationship of the myocardium, and 2) the predicted LV cavity volume from these models matches the corresponding MRI-measured volume at end-diastole and end-systole. Diastolic filling was simulated by loading the LV endocardial surface with a prescribed end-diastolic pressure. Systolic contraction was simulated by concurrently loading the endocardial surface with a prescribed end-systolic pressure and adding active contraction in the myofiber direction. Regional myofiber stress at end-diastole and end-systole was computed from the deformed LV based on the stress-strain relationship.

This article describes procedures for implanting a novel hydrogel in failing hearts and quantifying its effect on left ventricular wall stress and function. These procedures have been successfully applied in dogs and humans.

Algisyl-LVR kullanarak Hearts başarısız Fonksiyon Sol Ventrikül Duvar Stres ve İyileştirme azalma

Injection of  Algisyl-LVR, a treatment under clinical development, is intended to treat  patients with dilated cardiomyopathy. This treatment was recently ...

A Mouse Tumor Model of Surgical Stress to Explore the Mechanisms of Postoperative Immunosuppression and Evaluate Novel Perioperative Immunotherapies

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to the development of metastatic disease in animal models and in cancer patients. Preclinical work from our group and others has demonstrated a profound suppression of innate immune function, specifically NK cells in the postoperative period and this plays a major role in the enhanced development of metastases following surgery. Relatively few animal studies and clinical trials have focused on characterizing and reversing the detrimental effects of cancer surgery. Using a rigorous animal model of spontaneously metastasizing tumors and surgical stress, the enhancement of cancer surgery on the development of lung metastases was demonstrated. In this model, 4T1 breast cancer cells are implanted in the mouse mammary fat pad. At day 14 post tumor implantation, a complete resection of the primary mammary tumor is performed in all animals. A subset of animals receives additional surgical stress in the form of an abdominal nephrectomy. At day 28, lung tumor nodules are quantified. When immunotherapy was given immediately preoperatively, a profound activation of immune cells which prevented the development of metastases following surgery was detected. While the 4T1 breast tumor surgery model allows for the simulation of the effects of abdominal surgical stress on tumor metastases, its applicability to other tumor types needs to be tested. The current challenge is to identify safe and promising immunotherapies in preclinical mouse models and to translate them into viable perioperative therapies to be given to cancer surgery patients to prevent the recurrence of metastatic disease.

A mouse tumor model of surgical stress is used to explore how postoperative immune suppression promotes metastatic disease and to evaluate immunostimulatory perioperative therapies.

Ameliyat sonrası Immunosupressjon&#39;un ve Mekanizmaları keşfedin ve Roman Perioperatif İmmünoterapiler Değerlendirmesinde Cerrahi Stres Fare Tümör Modeli

Surgical resection is an essential treatment for most cancer patients, but surgery induces dysfunction in the immune system and this has been linked to ...

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the actual molecules towards which the cells migrate remain elusive. This modified invasion assay has been developed to identify targets which drive cell migration and invasion. This technique compares the invasion index under three conditions to determine whether a specific hormone, growth factor, or cytokine plays a role in mediating the invasive potential of a cancer cell. These conditions include i) normal fetal bovine serum (FBS), ii) charcoal-stripped FBS (CS-FBS), which removes hormones, growth factors, and cytokines and iii) CS-FBS + molecule (denoted &#8220;X&#8221;). A significant change in cell invasion with CS-FBS as compared to FBS, indicates the involvement of hormones, cytokines or growth factors in mediating the change. Individual molecules can then be added back to CS-FBS to assay their ability to reverse or rescue the invasion phenotype. Furthermore, two or more factors can be combined to evaluate the additive or synergistic effects of multiple molecules in driving or inhibiting invasion. Overall, this method enables the investigator to determine whether hormones, cytokines, and/or growth factors play a role in cell invasion by serving as chemoattractants or inhibitors of invasion for a particular type of cancer cell or a specific mutant. By identifying specific chemoattractants and inhibitors, this modified invasion assay may help to elucidate signaling pathways that direct cancer cell invasion.

A Modified In vitro Invasion Assay to Determine the Potential Role of Hormones, Cytokines and/or Growth Factors in Mediating Cancer Cell Invasion

This video article describes a modified in vitro method to examine the role of hormones, cytokines and/or growth factors in driving cancer cell invasion.

Bir Modifiye<em&gt; In vitro</em&gt; Invasion Deneyi Hormonlar, Açan Kanser Hücre Invasion Sitokinlerin ve / veya Büyüme Faktörleri Potansiyel Rolü belirlemek için

Blood serum serves as a chemoattractant towards which cancer cells migrate and invade, facilitating their intravasation into microvessels. However, the ...

Glutamate and Hypoxia as a Stress Model for the Isolated Perfused Vertebrate Retina

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal vascular occlusion, retinal detachment, and diabetic retinopathy. It was the object of this study to introduce a standardized stress model for future preclinical therapeutic testing.
Bovine retinas were prepared and perfused with an oxygen saturated standard solution, and the ERG was recorded. After recording stable b-waves, hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;m glutamate) was exerted for 45 min. To investigate the effects on photoreceptor function alone, 1 mM aspartate was added to obtain a-waves. ERG-recovery was monitored for 75 min.
For hypoxia, a decrease in a-wave amplitude of 87.0% was noted (p &#60;0.01) after an exposition time of 45 min (decrease of 36.5% after the end of the washout p = 0.03). Additionally, an initial decrease in b-wave amplitudes of 87.23% was recorded, that reached statistical significance (p &#60;0.01, decrease of 25.5% at the end of the washout, p = 0.03).
For 250 &#181;m glutamate, an initial 7.8% reduction of a-wave amplitudes (p &#62;0.05) followed by a reduction of 1.9% (p &#62;0.05). A reduction of 83.7% of b-wave amplitudes (p &#60;0.01) was noted; after a washout of 75 min the reduction was 2.3% (p = 0.62). In this study, a standardized stress model is presented that may be useful to identify possible neuroprotective effects in the future.

With this study, we introduce a standardized stress model for the isolated superfused bovine retina for future preclinical therapeutic testing. The effect of either hypoxia (pure N2) or glutamate stress (250 &#181;M glutamate) on retinal function represented by a- and b-wave amplitudes was evaluated.

İzole Perfüze Omurgalı Retina için bir Stres Modeli olarak Glutamat ve hipoksi

Neuroprotection has been a strong field of investigation in ophthalmological research in the past decades and affects diseases such as glaucoma, retinal ...

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 million patients worldwide. It leads to a decrease in retinal pigment epithelium (RPE)-synthesized neuroprotective factors, e.g., pigment epithelium-derived factor (PEDF) and granulocyte-macrophage colony-stimulating factor (GM-CSF), followed by the loss of RPE cells, and eventually photoreceptor and retinal ganglion cell (RGC) death. We hypothesize that the reconstitution of the neuroprotective and neurogenic retinal environment by the subretinal transplantation of transfected RPE cells overexpressing PEDF and GM-CSF has the potential to prevent retinal degeneration by mitigating the effects of oxidative stress, inhibiting inflammation, and supporting cell survival. Using the Sleeping Beauty transposon system (SB100X) human RPE cells have been transfected with the PEDF and GM-CSF genes and shown stable gene integration, long-term gene expression, and protein secretion using qPCR, western blot, ELISA, and immunofluorescence. To confirm the functionality and the potency of the PEDF and GM-CSF secreted by the transfected RPE cells, we have developed an in vitro assay to quantify the reduction of H2O2-induced oxidative stress on RPE cells in culture. Cell protection was evaluated by analyzing cell morphology, density, intracellular level of glutathione, UCP2 gene expression, and cell viability. Both, transfected RPE cells overexpressing PEDF and/or GM-CSF and cells non-transfected but pretreated with PEDF and/or GM-CSF (commercially available or purified from transfected cells) showed significant antioxidant cell protection compared to non-treated controls. The present H2O2-model is a simple and effective approach to evaluate the antioxidant effect of factors that may be effective to treat AMD or similar neurodegenerative diseases.

Induction and Analysis of Oxidative Stress in Sleeping Beauty Transposon-Transfected Human Retinal Pigment Epithelial Cells

We present a protocol for the development and use ofan oxidative stress-model by treating retinal pigment epithelial cells with H2O2, analyzing cell morphology, viability, density, glutathione, and UCP-2 level. It is a useful model to investigate the antioxidant effect of proteins secreted by transposon-transfected cells to treat neuroretinal degeneration.

Uyuyan Güzel Transposon Transposon Transfected İnsan Retina Pigment Epitel Hücrelerinde Oksidatif Stresin İndüksiyonu ve Analizi

Oxidative stress plays a critical role in several degenerative diseases, including age-related macular degeneration (AMD), a pathology that affects ~30 ...