Bu çalışmada, Deutsche Forschungsgemeinschaft (DFG), proje GZ PI 771/1-1 kısmen desteklenen; SFB 656 &quot;Kardiyovasküler Moleküler Görüntüleme,&quot; Münster, Almanya (projeleri C6, Z2, B3 ve PM3); AB NoE &quot;Tanı Moleküler Görüntüleme-Dimi &quot;(WP 11.1 ve 11.2). Çalışmada ayrıca İngiliz Kalp Vakfı, İngiltere tarafından finanse edildi.

1. Kayma gerilmesi değiştirici hazırlanması (manşet) <ol><li> Kayma gerilmesi değiştirici iki boyuna yarı yarıya bir koni şeklinde lümen ile bir silindir oluşur. Yarım kabukları, plastik döküm yöntemi ile üretilen termoplastik polyetherketone yapılır. Hala runner bağlıyken döküm elemanları gönderildi. Bu nedenle, yarım kabukları kullanmadan önce kesilmiş olması. 300 mikron (downstream sonunda en düşük iç çapı) - Her dökme 150 mikron arasında değişen farklı boyutlarda yarısı kabukları içerir. </li><li> Manşet hazırlık, cerrahi mikroskop altında yapılmalıdır. </li><li> Künt forseps ile manşet yarım kabuk tutun ve hafifçe keskin bir neşter kullanılarak dökme kesti. Bu prosedür, daha fazla işlenmek üzere yarım kabuk öncüleri yol açacaktır. </li><li> Yarım kabuk habercisi hatta kaygan olmayan bir plaka üzerine yerleştirin; rem için künt forseps ile düzeltin ve önceden yapılmış kesi boyunca tam kesmekkapalı uç Ove. Bu kullanıma hazır manşet yarım kabuk verecektir. </li><li> Mikroskop altında yarım kabukları Kontrol ve kalan tüm keskin kenarları hafifçe kaldırın. Konik iç lümen, memba ve mansap implante manşet içinde kayma gerilmesi farklı kalitelerde indüklemesi için gerekli. Iç lümen dik çalışan yarım kabukları dış yüzeyinde oluk sonunda fonksiyonel manşet oluşturmak üzere bir araya yarısı kabukları sopalarla parçacığı için bir yol gösterici olarak hizmet vermektedir. </li><li> % 70 etanol içinde, boyutuna göre sınıflandırılır manşet yarısında kabukları, saklayın. </li></ol> 2. Sağ karotis arter çevresinde manşet implantasyon <ol><li> ApoE knockout farelerde yaşı 10 hafta civarında ve en az 20 gram ağırlıkta olmalıdır. Plak gelişimi yüksek kolesterol diyet altında incelenmiştir, bu tür bir batı tipi diyet başlangıç ​​olmalı, 4 hafta önce manşet implantasyonu tavsiye edilir. </li><li> Tüm cerrahi prosedüren azından yarı steril koşullar altında yapılan bir cerrahi önlük, maske ve kapak ve steril eldiven giyin. 30 saniye boyunca bir boncuk enstrüman sterilizatör aletleri sterilize ve steril bir opak levha üzerine yerleştirin. Dikkat edin! Aletleri kullanmadan önce soğumaya var! </li><li> Tamamen anestezi kadar% 3 izofluran ile dolu bir anestezi indüksiyonu odasında fare yerleştirin. Ayak tutam tepki ile anestezi derinliği olun. Alternatif olarak, anestezi, Ketamin (80 mg / kg) ve Xylazine (10 mg / kg) veya IACUC tarafından onaylanmış alternatif anestezikler intraperitoneal (ip) enjeksiyonu ile yapılabilir. Ip enjeksiyon yatar pozisyonda fare tuşunu basılı tutun ve karın sol alt kadranda anestezik enjekte edilir. </li><li> Yatar pozisyonda, ısıtılmış bir cerrahi plaka üzerinde fare yerleştirin. Göz merhem (örneğin Bepanthen göz ve burun losyon) ile nemlendirin kuru çalışan gözleri önlemek için. Plaka ön ve arka pençeleri ve bant onları aşağı yayıldı. Izofluran anestezi, narkotik gaz akışı (% 2 isoflurane), küçük bir kemirgen maske yolu ile temin edilecek varsa. </li><li> Uygulayarak ya da tüy dökücü ajan (örneğin Pilca Med) ya da ince bir elektrikli tıraş makinesi (örneğin, Wella Contura) kullanarak Mandibula ve sternum arasında saç çıkarın. Tıraş cildi tahriş önlemek için dikkatli olmak zorundadır. Tüm saç ve tüy dökücü ajan çıkarılana kadar, tüy dökücü bir ajan kullanılarak, saç nüfuz için 1-2 dakika sonra, hafifçe ovalayın. </li><li> (Her büyüklüğünün iki) farklı boyutlarda ve birbirine 6-0 ipek sütür 2.5 cm uzunluğunda bir parça karotis oklüzyonu yerinde yarım kabukları önceden hazırlanmış hazır manşet yarım kabukları var. </li><li> Betadine liberal miktarı ile çalışma alanı dezenfekte edin. Sternum (manubrium) üstten başlayarak 4-5mm medial insizyon ile cilt ve boyun altta yatan fasya açmak için keskin küçük bir makas kullanın. </li><li> Açılış, genişletinkenara sağ parotis bezi hift ve cerrahi dağıtıcısı takın. Titreşimli sağ karotis tespit edebilmek kadar açık açık, sadece sağ sternomastoideus kas sağ omohyoid kas geçen trakea (cerrahlar görünümü), sol, derin teşrih. </li><li> Çok ince, açılı ya da eğri forseps (örneğin Dumont # 5 / 45) kullanarak, çevresindeki bağ dokusu hafifçe kaldırarak sağ karotis arter disseke. Karotis boyunca doğrudan çalışan beyaz, tel nesne - - vagus siniri karotis Ayrı geminin tamamen açığa çıkarmak için bu adımı gerekli olduğu. Dikkatli olun ne karotis yakın bağlantı da sol internal juguler ven, vagus siniri ne de bir şube zarar vermek. </li><li> Doğru manşet boyutu seçmek için, manşet yarısında kabukları iç çapı maruz karotis çapı karşılaştırın: manşet lümen en büyük genişlik karotis dış çapı karşılamak gerekir. </li&gt; <li> Şimdi, dikkatle, karotis altında forseps ucu koymak forseps açmak, iplik, karotis altında 6-0 ipek sütür parça ve bir döngü oluşturur. Karotis altında ve döngü karotis yerinde bir manşet yarım kabuk arasında. En büyük daralması yan downstream olmak zorundadır. </li><li> Karotis üstünde döngü içinde ikinci manşet yarısı kabuğu koyun. </li><li> Sütür forseps ve düğüm iplik kullanarak dikiş döngü hafifçe sıkın. Bunu yaparak işleyen bir kayma gerilmesi değiştirici oluşur. Hassas montaj için manşet manşet dış yüzeyinde dikiş preformed oluk içinde tam olarak çalışıp çalışmadığını gereklidir. </li><li> Sağ parotis bezi yaklaşık orijinal konumuna geri hareket ettirin ve 6-0 prolen sütür küçük bir miktar kullanarak ya da alternatif olarak, yara klipler kullanabilirsiniz cilt yakın. </li><li> Subkutan profilaktik ağrı tedavisi ve yer sağlamak için 5 mg / kg Carprofen (örneğin Rimadyl) bir tek doz enjekte edilirfare ısınma odasında iyileşene kadar. Normalde, bu Ketamin / Xylazine anestezi kullanılarak 30-60 dakika sürer. Izofluran inhalasyon anestezi iyileşme dönemi kullanırken, önemli ölçüde daha kısadır (10-20 dakika). </li><li> Bizim tecrübelerimize göre, hayvanlar, deneyimli bir cerrah tarafından yapılan müdahale ile yeniden manşet implantasyon sonrası ilk 24 saat içinde normal stressiz faaliyet. Hayvan bile bir gün ameliyat sonrası sıkıntı gibi görünen Ancak, analjezik tedavi tekrarlayın ve veteriner kadrosu ile danışın. </li></ol> 3. Manşet ve karotis arterler Explanting <ol><li> Histolojik analiz için karotid arterler gözlem süresi sonunda hasat olmak zorunda. Eksplantasyonu başlamadan önce, hayvan IACUC kurallarına göre öldürülmüş olması gerekir. </li><li> Manşet yarım kabukları yeniden kullanım için tasarlanmıştır, dikkatlice, plastik unsurları, dis tüm doku parçaları ve bağlantı dikiş kaldırmakkarotis arterler secting, yıkayın ve yarım kabukları% 70 alkol solüsyonu saklamak. Bir manşet implantasyonu birkaç hafta sonra bir damar duvarları zarar görmemesi için dikkatli manşet incelemek için bağ dokusu yapışıklıklar gömülü olduğunu akılda tutmak gerekir. </li><li> Alternatif olarak, manşet eksplante ve karotis arter ile birlikte gömülü. Manşet plastik malzemeden parafin gömmek için kullanılan normal fiksasyon çözümleri ve çözücülere dayanıklıdır. Ayrıca, gömülü numuneleri, normal bıçaklarla donatılmış bir normal mikrotom kullanılarak kesilebilir. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar Manşet, her zaman bir hayvan iki karotis arterler (Şekil 1A, 1B) yaklaşık bir konulmalıdır karşı taraf bir kontrol olarak hizmet vermektedir. Manşet (Şekil 1B), iki yarım kabukları görüntü sunan iç lümen konik şekli görünür. Bu konik es için gerekli olanfarklı akış dinamikleri ile üç bölge tablishing. Doppler ölçümleri 11 ve karşılık gelen akım hızları, faz-kontrast hız MR 12 dayalı hesaplanan cast tarafından oluşturulan tipik kayma stres modelleri Şekil 2&#39;de verilmiştir . Manşet ApoE knockout farelerde implante bir batı tipi diyetle beslenen, değişen akış dinamikleri kışkırtmak makası strese bağlı aterosklerotik plak birikimi (Şekil 3): Memba konik daralma düşük laminar shear stress aterosklerotik plakların daha büyük gelişme yol açar merkezi lümen yakın lipid çekirdek tarafından karakterize yatkın fenotipe, sadece ince bir fibröz kapağı (Şekil 3A1) tarafından kapalı. Manşet konik iç lümen akış hızında bir artışa neden olur. Neredeyse hiçbir plak birikimi bu alanda görülmektedir. Doğrudan hemen vortekslerini ve salınım flo bir alanda arter sonuçları genişletilmesi darboğaz site mansapw parametreleri, daha istikrarlı bir fenotip (medya daha yakın lokalize yani daha az lipid çekirdeği) daha uzun plak gelişimine neden olur. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig1.jpg" /> Şekil 1. kayma gerilmesi değiştirici - montaj ve yerleştirme (A) implante manşet şematik çizim:. Manşet sağ karotis arter (RCCA) etrafına yerleştirilir (LCCA = sol karotis arter) karşı taraf kontrol olarak hizmet vermektedir . (B), bir fare, in vivo MR anjiyografi: maksimum yoğunluk projeksiyonu üç boyutlu zaman-cast (beyaz ok) tarafından uyarılan konik bir daralma uçuş MR anjiyografi (Ayrıntılar için: 12 görmek için) görülebilir. (H = kafa, F = ayaklar, R = sağ, L = sol). Iç lümen ve manşet yarısında kabuğu dış yüzeyi üzerinde sağ üst köşesinde bir makroskopik görünümü verilir. Montaj yapıldığında, iki yarım kabuk değiştiren bir konik silindir formutanımlanmış bir şekilde geminin içinde akış dinamiği. Doğru uyum sağlamak için, manşet (sarı ok) dış yüzeyinde bir oluk bağlama sütür için bir yol gösterici olarak hizmet vermektedir. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3308/3308fig2.jpg" /> Şekil 2 farklı akış dinamikleri ve kayma gerilmesi Bölgeleri tanımlanmış bir şekilde daralmış karotis arter manşet değiştirir akım dinamiği ve daha sonra kayma gerilmesi implantasyonu. Üst şematik çizimde farklı akış özellikleri belirtilir ve kayma gerilmesi için yerel yaklaşık değerler (Doppler ölçümleri 11 dayalı verilmektedir). Aşağıda, tek bir hayvan için implante manşet MRG upstream tarafından ölçülen boyun kesitsel T1-ağırlıklı MRG (Ayrıntılar için: 12 görmek için faz-kontrast hız görüntüleme) karşılık gelen akım hızları gösterilmektedir. Şekil 3. Kayma gerilmesi ApoE knockout farelerde plak gelişimini tetiklediği sol üst köşesinde açılan boyun makroskopik görünümü gösterir ve kayma gerilmesi implantasyonu 8 hafta sonra, yüksek yağ (Batı tipi) diyet altında bir ApoE nakavt fare karotis arterler açık sağ karotis arter (RCCA) etrafında değiştirici. Manşet yukarı damar (*) opak beyaz bölgenin kapsamlı aterosklerotik plak birikimi bir site için karşılık gelir. Sarı ok, iki manşet yarıları bir araya getiren iş parçacığı gösterir. Buna karşın, plak birikimi hiçbir belirti ortak sol koroner arter (LCCA) vardır. (A) - (C) Temsilcisi Sayın manşet implantasyonu 8 hafta sonra batı tipi diyet altında bir ApoE nakavt fare sağ karotis arter kesitleri boyandı. Şematik çizimde (noktalı çizgiler) karşılık gelen uçaklar nereye verire bölümleri bulunmaktaydı. (A) manşet ateroskleroz Memba büyük plak birikimine yol açar. Kısmen merkezi lümen (detay A1) yakın bulunmaktadır büyük lipid çekirdek (kırmızı oklar), bu plakların savunmasız karakterini karakterize eder. (B) (C) manşet doğrudan akış aşağı salınımlı akış, daha istikrarlı bir türü (yani az ya da hiç lipid çekirdek) plak gelişim orta yol ise manşet darboğaz düzlemine neredeyse hiç plak gelişimi, açıktır. (C1, C2 = manşet yarım kabukları, p = plaklar, yıldız = damar lümeni)

<ol>
	<li>Chiu, J. J., Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+disturbed+flow+on+vascular+endothelium:+pathophysiological+basis+and+clinical+perspectives.">Effects of disturbed flow on vascular endothelium: pathophysiological basis and clinical perspectives.</a> Physiol. Rev. 91, 327-387 (2011).</li><li>Cunningham, K. S., Gotlieb, A. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+shear+stress+in+the+pathogenesis+of+atherosclerosis.">The role of shear stress in the pathogenesis of atherosclerosis.</a> Lab. Invest. 85, 9-23 (2005).</li><li>Ali, F., Zakkar, M., Karu, K., Lidington, E. A., Hamdulay, S. S., Boyle, J. J., Zloh, M., Bauer, A., Haskard, D. O., Evans, P. C., Mason, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+the+cytoprotective+enzyme+heme+oxygenase-1+by+statins+is+enhanced+in+vascular+endothelium+exposed+to+laminar+shear+stress+and+impaired+by+disturbed+flow.">Induction of the cytoprotective enzyme heme oxygenase-1 by statins is enhanced in vascular endothelium exposed to laminar shear stress and impaired by disturbed flow.</a> J. Biol. Chem. 284, 18882-18892 (2009).</li><li>Hastings, N. E., Simmers, M. B., McDonald, O. G., Wamhoff, B. R., Blackman, B. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerosis-prone+hemodynamics+differentially+regulates+endothelial+and+smooth+muscle+cell+phenotypes+and+promotes+pro-inflammatory+priming.">Atherosclerosis-prone hemodynamics differentially regulates endothelial and smooth muscle cell phenotypes and promotes pro-inflammatory priming.</a> Am. J. Physiol. Cell. Physiol. 293, C1824-C1833 (2007).</li><li>Zheng, J., Abendschein, D. R., Okamoto, R. J., Yang, D., McCommis, K. S., Misselwitz, B., Gropler, R. J., Tang, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-based+biomechanical+imaging:+initial+study+on+early+plaque+progression+and+vessel+remodeling.">MRI-based biomechanical imaging: initial study on early plaque progression and vessel remodeling.</a> Magn. Reson. Imaging. 27, 1309-1318 (2009).</li><li>Stone, P. H., Coskun, A. U., Kinlay, S., Clark, M. E., Sonka, M., Wahle, A., Ilegbusi, O. J., Yeghiazarians, Y., Popma, J. J., Orav, J., Kuntz, R. E., Feldman, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+endothelial+shear+stress+on+the+progression+of+coronary+artery+disease,+vascular+remodeling,+and+in-stent+restenosis+in+humans:+in+vivo+6-month+follow-up+study.">Effect of endothelial shear stress on the progression of coronary artery disease, vascular remodeling, and in-stent restenosis in humans: in vivo 6-month follow-up study.</a> Circulation. 108, 438-444 (2003).</li><li>Pedersen, E. M., Oyre, S., Agerbaek, M., Kristensen, I. B., Ringgaard, S., Boesiger, P., Paaske, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+of+early+atherosclerotic+lesions+in+the+human+abdominal+aorta+correlates+with+wall+shear+stresses+measured+in+vivo.">Distribution of early atherosclerotic lesions in the human abdominal aorta correlates with wall shear stresses measured in vivo.</a> Eur. J. Vasc. Endovasc. Surg. 18, 328-333 (1999).</li><li>Buchanan, J. R., Kleinstreuer, C., Truskey, G. A., Lei, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Relation+between+non-uniform+hemodynamics+and+sites+of+altered+permeability+and+lesion+growth+at+the+rabbit+aorto-celiac+junction.">Relation between non-uniform hemodynamics and sites of altered permeability and lesion growth at the rabbit aorto-celiac junction.</a> Atherosclerosis. 143, 27-40 (1999).</li><li>Nam, D., Ni, C. W., Rezvan, A., Suo, J., Budzyn, K., Llanos, A., Harrison, D., Giddens, D., Jo, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Partial+carotid+ligation+is+a+model+of+acutely+induced+disturbed+flow,+leading+to+rapid+endothelial+dysfunction+and+atherosclerosis.">Partial carotid ligation is a model of acutely induced disturbed flow, leading to rapid endothelial dysfunction and atherosclerosis.</a> Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 297, 1535-1543 (2009).</li><li>Cheng, C., van Haperen, R., de Waard, M., van Damme, L. C., Tempel, D., Hanemaaijer, L., van Cappellen, G. W., Bos, J., Slager, C. J., Duncker, D. J., van der Steen, A. F., de Crom, R., Krams, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Shear+stress+affects+the+intracellular+distribution+of+eNOS:+direct+demonstration+by+a+novel+in+vivo+technique.">Shear stress affects the intracellular distribution of eNOS: direct demonstration by a novel in vivo technique.</a> Blood. 106, 3691-3698 (2005).</li><li>Cheng, C., Tempel, D., van Haperen, R., van der Baan, A., Grosveld, F., Daemen, M. J., Krams, R., de Crom, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Atherosclerotic+lesion+size+and+vulnerability+are+determined+by+patterns+of+fluid+shear+stress.">Atherosclerotic lesion size and vulnerability are determined by patterns of fluid shear stress.</a> Circulation. 113, 2744-2753 (2006).</li><li>van Bochove, G. S., Straathof, R., Krams, R., Nicolay, K., Strijkers, G. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=MRI-determined+carotid+artery+flow+velocities+and+wall+shear+stress+in+a+mouse+model+of+vulnerable+and+stable+atherosclerotic+plaque.">MRI-determined carotid artery flow velocities and wall shear stress in a mouse model of vulnerable and stable atherosclerotic plaque.</a> MAGMA. 23, 77-84 (2010).</li><li>Cuhlmann, S., Van der Heiden, K., Saliba, D., Tremoleda, J. L., Khalil, M., Zakkar, M., Chaudhury, H., Luong, L. A., Mason, J. C., Udalova, I., Gsell, W., Jones, H., Haskard, D. O., Krams, R., Evans, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disturbed+Blood+Flow+Induces+RelA+Expression+via+c-Jun+N-Terminal+Kinase+1:+A+Novel+Mode+of+NF-{kappa}B+Regulation+That+Promotes+Arterial+Inflammation.">Disturbed Blood Flow Induces RelA Expression via c-Jun N-Terminal Kinase 1: A Novel Mode of NF-{kappa}B Regulation That Promotes Arterial Inflammation.</a> Circ. Res. 108, (2011).</li></ol>

Yazarlar ifşa etmek başka bir şey var.

Deneysel varyasyonu en aza indirmek için, bu hemen hemen aynı yaştaki hayvanlar ve aynı diyet geçmişi ile çalışmak tavsiye edilir. Geçenlerde yayımlanan bir araştırma, yabani-tip farelerden uygulanan kayma gerilmesi değiştirici değişen akım dinamiği 13 ile indüklenen endotel disfonksiyonu ve erken inflamatuar yanıtlar araştırma için iyi bir model olabileceğini gösteriyor . Ancak, aterosklerotik plak gelişimi transgenik hiperlipidemik fare modelleri, soruşturma için gerekli olan (?...

<table border="1"><tbody><tr><td> Isim </td><td> Şirket </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Kesme gerilmesi değiştirici (polyetherketone) </td><td> Promolding BV <a href="http://promolding.nl">http://promolding.nl</a> </td><td> Hala runner bağlıyken atmalarını gönderilir. Böylece, tek öğeleri kullanmadan önce kesilmiş olması. </td></tr></tbody></table>

implantation of a carotid cuff for triggering shear-stress induced atherosclerosis in mice

Bu yaygın vasküler kayma gerilmesi değişiklikler, endotel hücreleri inflamatuar genlerin ifadesi tetikleyebilir ve böylece (1 ve 2 gözden) ateroskleroz neden kabul edilir . Shear stresin rolü kapsamlı in vitro kültür endotel hücreleri 1,3,4 akış dinamiklerinin etkisini araştıran ve büyük hayvanlar ve insanlar 1,5,6,7,8 in vivo olarak çalışılmıştır. Ancak, plak gelişimi üzerinde kayma gerilmesi etkisi sistematik soruşturma sağlayan yüksek tekrarlanabilir küçük hayvan modellerinde nadirdir. Son zamanlarda, Nam ve ark. 9, karotis arter dallarının ligasyonu, düşük ve salınımlı akış bir bölge oluşturur, bir fare modelini tanıttı. Bu model, endotel disfonksiyonu ve hiperlipidemik farelerde aterosklerotik lezyonların hızlı oluşumu neden olsa da, gözlenen inflamatuvar yanıt, en azından kısmen bir sonucu o olduğunu dışlanmış değildirf endotel ve / veya ligasyonu nedeniyle damar hasarı. Bu sınırlamalar önlemek için, kayma gerilmesi değiştirerek manşet olan koni biçimli iç lümen, 10 karotis arter içinde yüksek, düşük ve salınımlı shear stresin tanımlanmış bölgeleri oluşturmak üzere seçildi hesaplanır akışkanlar dinamiği üzerine geliştirilmiştir . Apolipoprotein E (Apo E) knockout farelerde bu modeli uygulayarak, yüksek kolesterol, batı tipi diyetle beslenen, vasküler lezyonlar manşet memba ve mansap gelişir. Onların fenotip in vivo Manyetik Rezonans Görüntüleme (MRG) 12 tarafından onaylandıktan sonra bölgesel akış dinamikleri 11 ile ilişkilidir: Düşük ve laminar shear stres yukarı manşet daha yatkın fenotipe geniş plaklar oluşmasına neden olur ise salınım kayma stres mansap manşet istikrarlı aterosklerotik lezyonların 11 neden olur. Yüksek kayma gerilmesi ve manşet içinde yüksek laminar flow bu bölgelerde,genellikle herhangi bir aterosklerotik plakların görülmektedir. Sonuç olarak, kayma gerilmesi değiştirerek manşet prosedürü ApoE eksikliği olan farelerde fenotipik farklı aterosklerotik lezyon üretmek için güvenilir bir cerrahi yaklaşımdır.

Watch this Scientific Journal Video about Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice at JoVE.com

Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

Bu yazıda daraltıcı manşet fare karotis arter ateroskleroz ikna etmek için tasarlanmıştır. Implante manşet farklı inflamatuvar fenotip aterosklerotik lezyon gelişimi tetikleyen yüksek, düşük ve salınımlı shear stresin iyi tanımlanmış bölgeler oluşturur, kendi iç lümen konik şekli nedeniyle.

Fare Shear stres İndüklenmiş Ateroskleroz Tetikleme Karotis Kol İmplantasyonu

It is widely accepted that alterations in vascular shear stress trigger the expression of inflammatory genes in endothelial cells and thereby induce ...

implantation-carotid-cuff-for-triggering-shear-stress-induced

Research

JoVE Journal

Medicine

20.0K Görüntüleme.  Westfälische Wilhelms-University Münster. Bu yazıda daraltıcı manşet fare karotis arter ateroskleroz ikna etmek için tasarlanmıştır. Implante manşet farklı inflamatuvar fenotip aterosklerotik lezyon gelişimi tetikleyen yüksek, düşük ve salınımlı shear stresin iyi tanımlanmış bölgeler oluşturur, kendi iç lümen konik şekli nedeniyle.

Video: Implantation of a Carotid Cuff for Triggering Shear-stress Induced Atherosclerosis in Mice

A Model of Disturbed Flow-Induced Atherosclerosis in Mouse Carotid Artery by Partial Ligation and a Simple Method of RNA Isolation from Carotid Endothelium

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified version of carotid partial ligation methods [1,2] to show that it acutely induces low and oscillatory flow conditions, two key characteristics of disturbed flow, in the mouse common carotid artery. Using this model, we have provided direct evidence that disturbed flow indeed leads to rapid and robust atherosclerosis development in Apolipoprotein E knockout mouse [3]. We also developed a method of endothelial RNA preparation with high purity from the mouse carotid intima [3]. Using this mouse model and method, we found that partial ligation causes endothelial dysfunction in a week, followed by robust and rapid atheroma formation in two weeks in a hyperlipidemic mouse model along with features of complex lesion formation such as intraplaque neovascularization by four weeks. This rapid in vivo model and the endothelial RNA preparation method could be used to determine molecular mechanisms underlying flow-dependent regulation of vascular biology and diseases. Also, it could be used to test various therapeutic interventions targeting endothelial dysfunction and atherosclerosis in considerably reduced study duration.

This describes a partial carotid ligation surgery, which causes disturbed flow conditions and subsequent atherosclerosis development (in two weeks) with intraplaque neo-vascularization (in four weeks) in the mouse common carotid artery. We also describe a novel method of RNA isolation from the carotid intima, providing high purity endothelial RNA.

Kısmi ligasyon Fare Karotis Arter Disturbed Akış Kaynaklı Ateroskleroz ve Karotis Endotel RNA İzolasyonu Basit Bir Yöntem Bir Model

Despite the well-known close association, direct evidence linking disturbed flow to atherogenesis has been lacking. We have recently used a modified ...

Tıp

A Murine Model of Stent Implantation in the Carotid Artery for the Study of Restenosis

Despite the considerable progress made in the stent development in the last decades, cardiovascular diseases remain the main cause of death in western countries. Beside the benefits offered by the development of different drug-eluting stents, the coronary revascularization bears also the life-threatening risks of in-stent thrombosis and restenosis. Research on new therapeutic strategies is impaired by the lack of appropriate methods to study stent implantation and restenosis processes. Here, we describe a rapid and accessible procedure of stent implantation in mouse carotid artery, which offers the possibility to study in a convenient way the molecular mechanisms of vessel remodeling and the effects of different drug coatings.

A model of stent implantation in mouse carotid artery is described. Compared to other similar methods, this procedure is very rapid, simple and accessible, offering the possibility to study in a convenient way the vascular wall reaction to different drug-eluting stents and the molecular mechanisms of restenosis.

Restenoz Çalışmaları Karotis Arter Stent İmplantasyonu bir murin Modeli

Despite  the considerable progress made in the stent development in the last decades,  cardiovascular diseases remain the main cause of death in western ...

Tibial Nerve Transection - A Standardized Model for Denervation-induced Skeletal Muscle Atrophy in Mice

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. Although originally developed and used extensively in the rat due to its larger size, the tibial nerve in mice is big enough that it can be easily manipulated with either crush or transection, leaving the peroneal and sural nerve branches of the sciatic nerve intact and thereby preserving their target muscles. Thus, this model offers the advantages of inducing less morbidity and impediment of ambulation than the sciatic nerve transection model and also allows investigators to study the physiologic, cellular and molecular biologic mechanisms regulating the process of muscle atrophy in genetically engineered mice. The tibial nerve supplies the gastrocnemius, soleus and plantaris muscles, so its transection permits the study of denervated skeletal muscle composed of fast twitch type II fibers and/or slow twitch type I fibers. Here we demonstrate the tibial nerve transection model in the C57Black6 mouse. We assess the atrophy of the gastrocnemius muscle, as a representative muscle, at 1, 2, and 4 weeks post-denervation by measuring muscle weights and fiber type specific cross-sectional area on paraffin-embedded histologic sections immunostained for fast twitch myosin.

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of skeletal muscle atrophy. The model surgical protocol is described and demonstrated in C57Black6 mice. &#160;

Tibial Sinir transeksiyonu - Farelerde denervasyon bağlı İskelet Kas Atrofi için bir Standart Model

The tibial nerve transection model is a well-tolerated, validated, and reproducible model of denervation-induced skeletal muscle atrophy in rodents. ...

Inducing Myointimal Hyperplasia Versus Atherosclerosis in Mice: An Introduction of Two Valid Models

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque formation and stenosis, as observed for example in ischemic heart disease. Two highly reproducible mouse models&#160;&#8211;&#160;both resulting in artery stenosis but each underlying a different pathway of development&#160;&#8211; are introduced here. The models represent the two most common causes of artery stenosis; namely one mouse model for each myointimal hyperplasia, and atherosclerosis are shown. To induce myointimal hyperplasia, a balloon catheter injury of the abdominal aorta is performed. For the development of atherosclerotic plaque, the ApoE -/- mouse model in combination with western fatty diet is used. Different model-adapted options for the measurement and evaluation of the results are named and described in this manuscript. The introduction and comparison of these two models provides information for scientists to choose the appropriate artery stenosis model in accordance to the scientific question asked.

This video shows two models of intimal plaque development in murine arteries and emphasizes the differences in myointimal hyperplasia and atherosclerosis.

Farelerde Ateroskleroz Karşı miyointimal hiperplazide uyaran: İki Geçerli Modellerinin An Introduction

Various in vivo laboratory rodent models for the induction of artery stenosis have been established to mimic diseases that include arterial plaque ...

Carotid Artery Infusions for Pharmacokinetic and Pharmacodynamic Analysis of Taxanes in Mice

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study model. As the use of mouse models are often a vital step in preclinical drug discovery and drug development1-8, it is necessary to design a system to introduce drugs into mice in a uniform, reproducible manner. Ideally, the system should permit the collection of blood samples at regular intervals over a set time course. The ability to measure drug concentrations by mass-spectrometry, has allowed investigators to follow the changes in plasma drug levels over time in individual mice1, 9, 10. In this study, paclitaxel was introduced into transgenic mice as a continuous arterial infusion over three hours, while blood samples were simultaneously taken by retro-orbital bleeds at set time points. Carotid artery infusions are a potential alternative to jugular vein infusions, when factors such as mammary tumors or other obstructions make jugular infusions impractical. Using this technique, paclitaxel concentrations in plasma and tissue achieved similar levels as compared to jugular infusion. In this tutorial, we will demonstrate how to successfully catheterize the carotid artery by preparing an optimized catheter for the individual mouse model, then show how to insert and secure the catheter into the mouse carotid artery, thread the end of the catheter out through the back of the mouse&#8217;s neck, and hook the mouse to a pump to deliver a controlled rate of drug influx. Multiple low volume retro-orbital bleeds allow for analysis of plasma drug concentrations over time.

This method was developed with the goal of delivering a steady drug solution via the carotid artery, to assess the pharmacokinetics of novel drugs in mouse models.

Farelerde Taksanlar Farmakokinetik ve Farmakodinamik Analiz Karotis Arter İnfüzyonlar

When proposing the use of a drug, drug combination, or drug delivery into a novel system, one must assess the pharmacokinetics of the drug in the study ...

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive astrogliosis. Reactive astrocytes exert both inflammatory and protective effects that inhibit and promote, respectively, neural repair. The mechanisms underlying the diverse functional properties of reactive astrogliosis are not well understood. Achieving a greater understanding of these mechanisms is critical to developing therapeutic strategies to treat the injured CNS. Here we demonstrate a method to trigger reactive astrogliosis in the adult mouse forebrain using a forebrain stab lesion. This lesion model is simple, reliable, and requires only a stereotaxic device and a scalpel blade to produce the injury. The use of stab lesions as an injury model in the forebrain is well established and amenable to studies addressing a broad range of neuropathological outcomes, such as neuronal degeneration, neuroinflammation, and disruptions in the blood brain barrier (BBB). Thus, the forebrain stab injury model serves as a powerful tool that can be applied for a broad range of studies on the CNS response to trauma.

Triggering Reactive Gliosis In Vivo by a Forebrain Stab Injury

This article describes a detailed protocol to produce a forebrain stab injury in adult mice. The stab injury induces severe reactive gliosis and glial scar formation which can be subsequently examined by standard immunohistochemistry methods.

Reaktif gliozis Tetikleme<em&gt; In Vivo</em&gt; Bir Önbeyin Stab Yaralanma tarafından

Following injury to the CNS, astrocytes undergo a broad range of biochemical, morphological, and molecular changes collectively referred to as reactive ...

Surgical Approach for Middle Cerebral Artery Occlusion and Reperfusion Induced Stroke in Mice

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ischemic in origin and occur in the territory of the middle cerebral artery (MCA). Currently the only Food and Drug Administration (FDA) approved drug for the treatment of this devastating disease is tissue plasminogen activator (tPA). However, tPA has a small therapeutic window for administration (3 - 6 hr), and is only effective in 4% of the patients who actually receive it. Current research focuses on understanding the pathophysiology of stroke in order to find potential therapeutic targets. Thus, reliable models are crucial, and the MCA occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) is deemed to be the most clinically relevant surgical model of ischemic stroke, and is fairly non-invasive and easily reproducible. Typically the MCAo model is used with rodents, especially with mice due to all the genetic variations available for this species. Here we describe (and present in the video) how to successfully perform the MCAo model (with reperfusion) in mice to generate reliable and reproducible data.

In order to understand the pathophysiology of stroke, it is important to use reliable models. This paper will describe one of the most frequently used stroke models in mice, termed the middle cerebral artery occlusion (MCAo) model (also termed the intraluminal filament or suture model) with reperfusion.

Farelerde Orta Serebral Arter Tıkanıklığı ve Reperfüzyon Kaynaklı İnme Cerrahi Yaklaşım

Stroke is a leading cause of death worldwide and continues to be one of the major causes of long-term adult disabilities. About 87% of strokes are ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The &quot;Wire-Injury&quot; Model

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...

Mouse Model for Pancreas Transplantation Using a Modified Cuff Technique

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the availability of the widest range of molecular probes and reagents to perform in vivo as well as in vitro studies. Based on our experience with various murine transplantation models, we developed a heterotopic pancreas transplantation model in mice with the intent to analyze mechanisms underlying severe ischemia reperfusion injury-associated early graft damage. In contrast to previously described techniques using suture techniques, herein we describe a new procedure using a non-suture cuff technique. 
In recent years, we have performed more than 300 pancreas transplantations in mice with an overall success rate of &gt;90%, a success rate never described before in mouse pancreas transplantation. The backbone of this non-suture cuff technique for graft revascularization consists of two major steps: (I) pulling the recipient vessel over a polyethylene/polyamide cuff and fixing it with a circumferential ligature, and (II) placing the donor vessel over the everted recipient vessel and fixing it with a second circumferential ligature. The resultant continuity of the endothelial layer results in less thrombogenic lesions with high patency rates and, finally, high success rates.
In this model, arterial anastomosis is achieved by pulling the abdominal aorta of the donor graft over the everted common carotid artery of the recipient animal. Venous drainage of the graft is achieved by pulling the portal vein of the graft over the everted external jugular vein of the recipient. This manuscript provides details and crucial steps of the organ recovery and organ implantation procedures, which will allow researchers with microsurgical skills to perform the transplantation successfully in their laboratories.

Among abdominal solid organ transplantation, pancreatic grafts are prone to develop severe ischemia reperfusion injury-associated graft damage, leading eventually to early graft loss. This protocol describes a model of murine pancreas transplantation using a non-suture cuff technique, ideally suited for analyzing these early, deleterious damages.

Fare modeli değiştirilmiş manşet tekniği kullanarak pankreas nakli için

Mouse models have several advantages in transplantation research, including easy handling, a variety of genetically well-defined strains, and the ...

Ferric Chloride-induced Canine Carotid Artery Thrombosis: A Large Animal Model of Vascular Injury

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, we have translated a vascular injury model from a small animal into a large animal (canine), with slight modifications that can be used for pre-clinical screening of prophylactic and thrombolytic agents. In addition to the surgical methods, the modified protocol describes the step-by-step methods to assess carotid artery canalization by angiography, detailed instructions to process both the brain and carotid artery for histological analysis to verify carotid canalization and cerebral hemorrhage, and specific parameters to complete an assessment of downstream thromboembolic events by utilizing magnetic resonance imaging (MRI). In addition, specific procedural changes from the previously well-established small animal model necessary to translate into a large animal (canine) vascular injury are discussed.

Here, we present the modifications necessary to a well characterized and commonly used small animal ferric chloride-induced (FeCl3) carotid artery injury model for use in a large animal vascular injury model. The resulting model can be utilized for pre-clinical trial assessment of both prophylactic and thrombolytic pharmacological and mechanical interventions.

Ferrik klorid kaynaklı köpek karotid arter trombozu: Bir büyük hayvan modeli vasküler yaralanma

Occlusive arterial thrombosis leading to cerebral ischemic stroke and myocardial infarction contributes to ~13 million deaths every year globally. Here, ...