Burada sunulan araştırma Charles River tarafından desteklenmiştir.

<ol>
	<li>Jacobson, R. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Principles+of+validation+of+diagnostic+assays+for+infectious+diseases.">Principles of validation of diagnostic assays for infectious diseases.</a> Manual of Standards for Diagnostic Tests and Vaccines. , 8-15 (1996).</li><li>Wright, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+standards+for+test+methods+and+reference+sera+for+diagnostic+tests+for+antibody+detection.">International standards for test methods and reference sera for diagnostic tests for antibody detection.</a> Rev. sci. tech. Off. int. Epiz. 17 (2), 527-533 (1998).</li><li>Pepe, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Statistical Evaluation of Medical Tests for Classification and Prediction. , (2003).</li><li>Barr, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+and+interpretation+of+diagnostic+tests+for+feline+immunodeficiency+virus+infection.">Comparison and interpretation of diagnostic tests for feline immunodeficiency virus infection.</a> J. Am. Vet. Med. Assoc. 199, 1377-1381 (1991).</li></ol>

Charles River RADS, hayvan seroloji test hizmetleri ve reaktifler önemli bir sağlayıcısı için tüm yazarlar iş.

MFIA test süreci geleneksel singleplex testlerine göre daha az ekipman ve küçük numune ve reaktif hacimlerini gerektiren, son derece verimlidir. Multipleks sisteminin işlevselliği kullanıcı laboratuvar kemirgenler ortak ajanların birden fazla suşları veya serotipler (yani Coronavirüs, parvovirüsler vb) için eş zamanlı olarak taranması için esneklik sağlar. Bu da faiz (yani belirli virüs ailesi) alanında dayalı özelleştirilmiş boncuk paneller tasarımı, bize sağlar ve sitokinler ve diğer biyobelirteçlerin gibi biyomoleküllerin tarama diğer türleri uyarlanabilir. Buna ek olarak, bize örnek sistem ve uygunluk doğrulamak için çeşitli iç kontrol deneyleri birleştirmek ve böylece sonuçlarının doğruluğunu sağlamak için olanak sağlar. Bu doku, kontrol ve numune uygunluğunu değerlendirmek için IgG anti-test serumu türler immunglobulin (αIg) kaplı boncuk seti bulunmaktadır. Bir doku kontrol boncuk serum immunoglobulin spesifik olmayan bağlanma ve αIg boncuk kontrol teyit algılarserum ilave edilir ve yeterli bir immünoglobülin konsantrasyon içermemektedir. Serum immünglobulin türleri ile kaplı diğer bir kontrolü boncuk, etiketli reaktifler ve tahlil okuyucu düzgün çalıştığını gösteriyor. Diğer ticari multipleks biçimi serolojik testler (yani microarrays, ImmunoComb) sonucu teyit Bu aynı düzeyde satışa sunmamış olabilir. Önceden deneye için tahlil başarısızlık olası kaynak daraltmak için yeteneği bir araştırmacı zaman ve malzeme tasarrufu yardımcı olabilir. MFIA Kritik yönlerini başarısız bir örnek tekrarlanmadan önce teyit edilmelidir. Tahlil çevre sıcaklığında gerçekleştirilmektedir yana laboratuar sıcaklığında yaklaşık 27 olduğunu teyit edilmelidir ° C ± 2 ° C, daha yüksek sıcaklıklar kontrol ve numune için beklenen ölçüme göre daha düşük olmasına yol açan olabilir. Yıkama belki tayininde en önemli adımdır. Test plakası düzgün yıkanmış olduğundan sigorta, lekelenen ve ortadan kaldırabilir tekrar süspanseDüşük boncuk sayısı (toplu boncuk nedeniyle) veya yetersiz reaktif ekleme (testi plaka filtresi alt dışarı ıslanma tarafından kayıp) nedeniyle örnekleme hataları büyük çoğunluğu. Biz rutin tahlil başına 25 boncuk (ajan) saymak ve ayrıca plaka için uzun bir okuma zaman götürecek boncuk yüksek sayarak sonuçları arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark bulduk. Biz bilinen pozitif ve negatif serum örneklerinde çok sayıda test ederek tanısal doğruluk, tekrarlanabilirlik ve sağlamlık göstermek için sık kullanılan laboratuar hayvanlarının çeşitli türler (Fare, Sıçan, hamster, kobay ve tavşan) üzerinde MFIA kapsamlı validasyon çalışmaları yapılmıştır ve adres Onların ELISA, IFA ve MFIA sonuçları karşılaştırarak. MFIA ve tespit limitleri (örneğin, standart immün serum titrasyon bitiş noktası) karşılaştırılabilir ve bazı durumlarda ilgili ELISA olanlar aştı. SPF kemirgen sera ile ölçülen Teşhis özgüllük,% 99 aştı; genel yazışmalar between ELISA ve MFIA% 95 daha fazlaydı bilinen pozitif ve bilinen negatif kontrol serumları uygulandı. Özetle, bu sonuçlar multipleks MFIA singleplex ELISA için iyi bir alternatif olduğunu ve laboratuvar hayvanı kolonileri rutin serosurveillance kullanım amacına, yani için uygun olduğunu kanıtladı.

multiplexed fluorometric immunoassay testing methodology and troubleshooting

Biyomedikal araştırmalarda kullanılan hayvan modellerinin kalitesini sağlamak için biz hayvanlar adventif enfeksiyöz ajanlar (mycoplasma virüsler, ve diğer titiz mikroorganizmalar) maruz kalmış olmadığını belirlemek için tanısal test stratejileri ve yöntemleri bir dizi geliştirdik. Immünkompetan hayvanların Enfeksiyonlar genellikle geçicidir, henüz enfeksiyona serum antikor yanıtları genellikle hafta için gün içinde tespit edilebilir ve konağın ömrü boyunca devam etmektedir. Seroloji laboratuvar hayvanları izlenmektedir hangi birincil tanısal yöntemdir. Tarihsel dolaylı enzim-linked immunosorbent assay (ELISA) serosurveillance için temel tarama yöntemi olmuştur. ELISA bir mikrobik antijen-antikor reaksiyonu başına iyi ölçüldüğü, bir singleplex olarak gerçekleştirilir. Buna karşılık MFIA bir çoklanmış tahlil olarak gerçekleştirilir. Mikroküreler 100 farklı renk kümeleri gelir bu yana, 100 kadar farklı deneyler eş zamanlı olarak yapılabilireously tek bir mikroplak iyi. Bu yenilik de, tek bir testten elde edilen bilgi miktarını artırırken rutin testler için gerekli serum, reaktifler ve disposables miktarını azaltır. Buna ek olarak, örnek sistem ve uygunluk doğrulamak için birden fazla iç kontrol boncuk birleştirmek ve böylece sonuçlarının doğruluğunu sağlamak mümkündür. Bu doku, kontrol ve numune uygunluğunu değerlendirmek için IgG anti-test serumu türler immunglobulin (αIg) kaplı boncuk seti bulunmaktadır. ELISA ve IFA içinde olduğu gibi, doku ve serum immunoglobulin spesifik olmayan bağlanma tespit eder. ΑIg kontrol (serum kontrol) serum eklendi onaylar ve serum immünglobulin türleri ile kaplı IgG kontrol boncuk (Sistem uygunluğu kontrol), etiketli reaktifler ve Luminex okuyucu düzgün çalıştığını gösteriyor ise yeterli immünoglobulin konsantrasyonu içerir.

Watch this Scientific Journal Video about Multiplexed Fluorometric ImmunoAssay Testing Methodology and Troubleshooting at JoVE.com

Multiplexed Fluorometric ImmunoAssay Testing Methodology and Troubleshooting

Luminex Corporation Xmap mikroküre teknolojisini kullanarak, çeşitli laboratuvar hayvanı türlerinin serosurveillance için Multiplexed Florometrik immunoassay (MFIA) geliştirdik. MFIA antijeni, doku kontrolü veya immünglobulin kovalent renk kodlu polistiren mikroküreler bağlantılı bir süspansiyon mikroarray olduğunu. MFIA test yöntemi hem de çeşitli giderme konularını ele almaktadır.

Multiplexed Florometrik immunoassay Test Metodolojisi ve Sorun Giderme

To ensure the quality of animal models used in biomedical research we have developed a number of diagnostic testing strategies and methods to determine if ...

multiplexed-fluorometric-immunoassay-testing-methodology

Research

JoVE Journal

Biology

28.2K Görüntüleme.  Charles River. Luminex Corporation Xmap mikroküre teknolojisini kullanarak, çeşitli laboratuvar hayvanı türlerinin serosurveillance için Multiplexed Florometrik immunoassay (MFIA) geliştirdik. MFIA antijeni, doku kontrolü veya immünglobulin kovalent renk kodlu polistiren mikroküreler bağlantılı bir süspansiyon mikroarray olduğunu. MFIA test yöntemi hem de çeşitli giderme konularını ele almaktadır.