Bu cihazın geliştirilmesi LISA Co, Louisville, Kentucky tarafından desteklenmiştir. Ayrıca Norton Sağlık, Louisville, CBS için KY ve NIH NS050243, NS052290 ve XMX için NS059622 devam eden desteği kabul.

1. Omurga Sabitleyici hayvan Hazırlama ve Uygulama Fare servikal ventral olarak lateral görünümü görüldüğü içbükey olduğunu. C3 ila T1 spinöz proses küçük ve hassastır ve genellikle 3,4 tarif edildiği gibi, bu nedenle vertebra stabilizasyonu için uygun değildir. Biz omurga stabilizasyonu yan faset sabitleme tarafından yapılmalıdır öneririz. Tesbit yanal olarak her bir düzlük için kelepçe fare ve ayarlanabilen iki paslanmaz çelik kol desteklemek için bir U-şekilli metal kanal oluşur. Bu hedef vertebra mükemmel immobilizasyon sağlar. Spinal fiksasyon sonra, omurga biraz omurilik daha iyi poz sağlamak için servikal eğrilik düzleştirmek için yükselir. <ol><li> Forseps, microscissors 2 çift, bir 30 G iğne, dikiş ve iğne tutucu, cilt klipleri ve klip aplikatör 2-3 çiftleri: Aşağıdaki cerrahi aletler sterilize edin. Omurga sabitleyici dezenfekte edin. AnesKetamin / Ksilazin (100 mg / 10 mg / kg) intraperitoneal kokteyl kullanarak fare thetize. Fare boynundan saç tıraş. </li><li> Bir povidon-iyot çözeltisi ve% 70 alkol ile cilt temizliği sonra, bir ısıtma yastığı ile ısındı ameliyat masası üzerine fareyi hareket ettirin. Kornea kurumasını önlemek için oftalmik merhem ile hayvan gözleri Kapak. </li><li> Anestezi (fare bir kuyruk tutam cevap vermediğinde ulaştı) oluşturulduktan sonra, alt servikal deri altı yağ-pad için oksiput bir posterior servikal orta hat cilt kesi yapmak. Büyütme altında, C2 de trapez kasları arasında bir orta hat kesi yapmak ve semispinalis kapitis kasları bölünmüş. Submüsküler yağ yastığı belirlenmesi doğru katmanda diseksiyonu kolaylaştırır. </li><li> Güvenilir bir dönüm noktası olarak hizmet veren T2 spinöz proses için kaudal orta hat kas diseksiyonu uzatın. T2 vertebra bağlı kas kesin ve T2 kıkırdak kısmını çıkarınspinöz proses. </li><li> Mikro bir makas kullanarak T2 lamina aracılığıyla C2 paraspinal kaslar parçalara ayır. Kas diseksiyonu spinöz süreçleri bitişik başlar ve faset eklem iki taraflı uzanır. Kanamayı en aza indirmek için, spinöz süreçleri ve lamina (periosteal katmanında) hemen bitişiğinde kasları ayırın. Lateral yönleri maruz sonra LISA aşamasının U-şekilli kanal üzerinde fare. </li><li> Bilateral maruz yönü altında paslanmaz çelik kolları takın. Silah devreye girdikten sonra, omurga hareketsiz çelik silah başparmak vidaları sıkın. Bu hedef vertebra firma tespit korur ve mükemmel pozlama sağlar. Kollar omurga tam yatay yönünü sağlamak için ayarlanabilir. </li><li> Dura altında yatan ortaya çıkarmak için, C5 ve C6 arasındaki ligamentum flavum İnsizyon. Interlaminar alanı arasında, microscissors yerleştirilir, üzerinden küçük bir durotomy oluşturmak için 30 G iğne kullanındurotomy uzatmak. Omurilik şimdi kontrollü laserasyon lezyon geçmesi hazırlanmıştır. </li></ol> 2. LISA Cihaz Kullanımı Servikal Omurilik yırtığı <ol><li> Servikal spinal kord genişleme genişliği farklı seviyelerde değişir. Bir 2.3 mm düz bıçak kullanarak C5-6 bir sırt hemiseksiyona lezyon yapın ve omurilik tüm genişliğini kapsayacak şekilde titreşim genliği ayarlayın. Bıçaklar Güzel Bilim Araçları A.Ş. (Foster City, CA) elde edilen ve omurilik yaralanması için değiştirilir. Düşük genliğe seviyeleri kord yaralanması kolaylığı azalacak şekilde, ≥ 0.5 mm bıçak titreşim genliği koruyun. </li><li> LISA sahnede omurga sabitleme ve fare yerleştirin. Bıçak hareket üç aralıklarının sahip mikro-sürücüleri tarafından kontrol konumu ile Lisa takılır. Lisa ve bunların işlevleri bileşenleri Şekil 1 &#39;de tarif edilmektedir. </li><li> Güç bıçak-titreşimli anahtarı. Magnif altındamaruz omurilik titreşimli bıçak altına doğrudan konumlandırılmış böylece ication, fareyi hareket ettirin. </li><li> Salınan bıçak doğru fareyi destekleyen sahne yükseltmek. Bıçak ancak omurilik dorsal ven dokunduğunda &quot;0&quot; konumuna kaydedilir. &quot;0&quot; pozisyonuna göre, omurilik yaralanması derinliği ölçün. </li><li> Mikro-sürücü kontrolü ile sahne konumunu yükseltmek: mikro-sürücü topuzu bir 360 ° dönüş 0,25 mm sahne yükseltir. Bu nedenle, 0,75 mm sırt hemiseksiyona lezyon mikro sürücü kolu 3 kez çevrilerek oluşturulur. Lezyonun doğruluğu ± 0.01 mm&#39;dir. Bıçak omurilik lacerate başladığında, tuzlu sulama ile cerrahi alan yağlayın. Omurilik kesme derinliği dikey mikro-sürücü tarafından kontrol ve görsel rehberlik bağımsızdır. </li><li> Önceden belirlenmiş derinlik ulaşıldığında, titreşimli anahtarını kapatın. İdeal olarak, salınan bıçak l konumlandırılmışdoku deformasyon delil olmadan esion boşluğu. Kesme bıçağı gelen sahne indirin ve pamuk Q-ipuçlarını kullanarak cerrahi alanında kan ve tuzlu çıkarın. Hemostaz &lt;1 dakika içinde kendiliğinden oluşur. </li><li> Omurga sabitleyici gelen fareyi bırakın. 6-0 ipek sütür ve cilt kapatın kullanarak paraspinal kaslar Yaklaşık paslanmaz çelik Michel klipler kullanarak yara. </li></ol> 3. Hayvan Bakımı <ol><li> Subkutan bilinç kazanmak ise yeterli hidrasyon korumak ve bir ısıtma yastığı kurtarma kafeste fare yerleştirmek için serum fizyolojik 1-2 ml toplam enjekte. </li><li> Su ve yumuşak gıda reklam lib sağlamak ve 48 saat sonrası ameliyat için analjezikler yönetmek. Omurilik dorsal hemiseksiyona sonra mesane bakımı için gerek yoktur. </li></ol>

<ol>
	<li>Blackmore, M., Letourneau, P. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+within+maturing+neurons+limit+axonal+regeneration+in+the+developing+spinal+cord.">Changes within maturing neurons limit axonal regeneration in the developing spinal cord.</a> J. Neurobiol. 66 (4), 348 (2006).</li><li>Blackmore, M. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kruppel-like+Factor+7+engineered+for+transcriptional+activation+promotes+axon+regeneration+in+the+adult+corticospinal+tract.">Kruppel-like Factor 7 engineered for transcriptional activation promotes axon regeneration in the adult corticospinal tract.</a> Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 109 (19), 7517 (2012).</li><li>Carbajal, K. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgical+transplantation+of+mouse+neural+stem+cells+into+the+spinal+cords+of+mice+infected+with+neurotropic+mouse+hepatitis+virus.">Surgical transplantation of mouse neural stem cells into the spinal cords of mice infected with neurotropic mouse hepatitis virus.</a> J. Vis. Exp. (53), e2834 (2011).</li><li>Duhamel, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+lumbar+and+cervical+spinal+cord+blood+flow+measurements+by+arterial+spin+labeling:+sensitivity+optimization+and+first+application.">Mouse lumbar and cervical spinal cord blood flow measurements by arterial spin labeling: sensitivity optimization and first application.</a> Magn. Reson. Med. 62 (2), 430 (2009).</li><li>Hermanns, S., Reiprich, P., Muller, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+reliable+method+to+reduce+collagen+scar+formation+in+the+lesioned+rat+spinal+cord.">A reliable method to reduce collagen scar formation in the lesioned rat spinal cord.</a> J. Neurosci. Methods. 110 (1-2), 141 (2001).</li><li>Hill, R. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomic+and+functional+outcomes+following+a+precise,+graded,+dorsal+laceration+spinal+cord+injury+in+C57BL/6+mice.">Anatomic and functional outcomes following a precise, graded, dorsal laceration spinal cord injury in C57BL/6 mice.</a> J. Neurotrauma. 26 (1), 1 (2009).</li><li>Iannotti, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dural+repair+reduces+connective+tissue+scar+invasion+and+cystic+cavity+formation+after+acute+spinal+cord+laceration+injury+in+adult+rats.">Dural repair reduces connective tissue scar invasion and cystic cavity formation after acute spinal cord laceration injury in adult rats.</a> J. Neurotrauma. 23 (6), 853 (2006).</li><li>Inman, D., Guth, L., Steward, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+influences+on+secondary+degeneration+and+wound+healing+following+spinal+cord+injury+in+various+strains+of+mice.">Genetic influences on secondary degeneration and wound healing following spinal cord injury in various strains of mice.</a> J. Comp Neurol. 451 (3), 225 (2002).</li><li>Onifer, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+rat+forelimb+dysfunction+after+dorsal+cervical+spinal+cord+injury.">Adult rat forelimb dysfunction after dorsal cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 192 (1), 25 (2005).</li><li>Ramer, M. S., Harper, G. P., Bradbury, E. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+spinal+cord+research+-+a+refined+strategy+for+the+International+Spinal+Research+Trust.">Progress in spinal cord research - a refined strategy for the International Spinal Research Trust.</a> Spinal Cord. 38 (8), 449 (2000).</li><li>Seitz, A., Aglow, E., Heber-Katz, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recovery+from+spinal+cord+injury:+a+new+transection+model+in+the+C57Bl/6+mouse.">Recovery from spinal cord injury: a new transection model in the C57Bl/6 mouse.</a> J. Neurosci. Res. 67 (3), 337 (2002).</li><li>Sivasankaran, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=PKC+mediates+inhibitory+effects+of+myelin+and+chondroitin+sulfate+proteoglycans+on+axonal+regeneration.">PKC mediates inhibitory effects of myelin and chondroitin sulfate proteoglycans on axonal regeneration.</a> Nat. Neurosci. 7 (3), 261 (2004).</li><li>Yu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibitor+of+DNA+binding+2+promotes+sensory+axonal+growth+after+SCI.">Inhibitor of DNA binding 2 promotes sensory axonal growth after SCI.</a> Exp. Neurol. 231 (1), 38 (2011).</li><li>Zhang, Y. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dural+closure,+cord+approximation,+and+clot+removal:+enhancement+of+tissue+sparing+in+a+novel+laceration+spinal+cord+injury+model.">Dural closure, cord approximation, and clot removal: enhancement of tissue sparing in a novel laceration spinal cord injury model.</a> J. Neurosurg. 100, 343 (2004).</li></ol>

<ol><li> Bazı yazarlar (YPZ, XMX, CBS) Louisville Darbeli System, Inc bir mali ilgi var </li><li> Yazarlar, Yi Ping Zhang, Lisa BE Shields ve Christopher B. Shields, Norton Sağlık, Louisville, KY çalışanlarıdır. Diğer yazarlar IN Indiana Üniversitesi, Indianapolis, tarafından istihdam edilmektedir. </li><li> Yazarlar bu makalede kullanılan reaktifler veya araçlarında herhangi bir şirket fon almadı. </li></ol>

Omuriliğe laserasyon yaralanmaları önce vertebra stabilizasyonu spinöz süreçleri tespit ile elde edilmiştir. Fare T1 ile C3 oynak kısa servikal spinöz süreçlerine kelepçeler servikal lordoz ve eki hem etkili omurga stabilizasyon önlemek. Ayrıca, manuel kontrol lezyonun 6 derinliği değişkenlik oluşturur önemli doku deformasyon neden altında kullanılan bir jilet veya microscissors kullanın. Bu özel yolların aksonal rejenerasyon incelenmiştir özellikle verilerin yanlış yol açabilir. Dorsal kortikospinal yolu tamamen lezyon sırasında nakledilmiştir değildi Örneğin, bağışladı dorsal kortikospinal akson yeniden akson olarak yanlış olabilir. Bu sorunlar tek bir seviyesi ve omuriliğin kesin lezyon de yönleriyle için tespit ile bir omurga stabilizasyon cihazı kullanılarak aşılabilir. Buna ek olarak, ah kullanılaraküksek frekans salınan bıçak komşu omurilik kırma veya contusing olmadan keskin bir kesi oluşturur. Bu yöntem, farenin 6 toraks omurilik laserasyon üretimi için müteakip değişiklikler ile birlikte, 9,12,14 sıçanlarda omurilik yaralanması yaralanmaları üretmek için kullanılmıştır. Mevcut iletişim olarak, fare güvenilir servikal laserasyon lezyonların oluşturma yöntemi açıklanmaktadır. Omurilik ön-arka çapı fare &lt;2 mm olduğu ölçüde, laserasyon lezyonun kesin derinliklerinde güvenilir bir deneysel model oluşturmada önemlidir. Lezyon derinliği minimal değişkenlik önemli ölçüde akson rejenerasyonu yanı sıra hacim ve davranış çalışmaları değerlendirmek deney sonuçları değiştirecektir. Biz kesme bıçağı yerini kontrol etmek için yüksek hassasiyetli mikro-sürücüler kullanılır, çünkü bu yöntemi kullanarak lezyon derinlik hassasiyeti ± 0.01 mm&#39;dir. Bu yöntem, en tutarsızlık azalttıbir yırtık SCI yaratma diğer modellerinde herent. Bu yöntem, kortikospinal sistem, rubrospinal sistem ve dorsal artan sistemi gibi omurilik dorsal yarısında bulunan uzun omurilik yolakların aksonal rejenerasyon inceleyerek özellikle yararlıdır. Bu yöntemle, bu lif yolları tamamen olması ve güvenilir transeksiyon olabilir. Bu bağlamda, veri yorumlama hataları böylece SCI üzerinde deneysel çalışmalar raporlama güvenilirliğini geliştirerek, en aza indirilir. Özetle, biz fare servikal spinal kord yaralanması yırtık in vivo modelinde bir tekrarlanabilir oluşturmak için yeni bir teknik tarif var. Bu teknik bir salınım bıçak kullanarak omurilik servikal yönleri ve yırtık tespit ile omurga stabilizasyon dayanmaktadır. Fareler 6 bir dorsal torasik omurilik kesisi modelinde Bu yöntemi kullanarak, biz laserasyon derinliği, histoloji ve arasında sıkı bir korelasyon gösterdidavranış kurtarma. Böyle bir teknik, ayrıca çok sayıda diğer laboratuar 2,12 ile güvenilir olduğu bulunmuştur.

Genetik olarak değiştirilmiş farelerin durumu SCI mekanizmalarında rol oynayan spesifik genlerin etkilerini belirlemek için güçlü bir araçtır. Yırtığı SCI bu yaralanma 8 sonra etkili bir tedavi sağlayabilir terapötik ajanlar veya moleküller incelemek için kullanılan önemli bir modeldir. Farelerde laserasyon yaralanma oluşturulması sırasında spinöz süreçleri Tespit nedeniyle spinal fiksasyon 5,11 bakımı ile ilgili ince ve kırılgan spinöz süreçleri kavrama zorluk için kesin olmayan. Sadece 0.2 mm (fare omurilik çapının% 10) laserasyon derinliği değişkenlik verilerin yanıltıcı yorumlanması neden olur. Omurilik kesisi lezyonun doğası ve kapsamı tam 10 tanımlanmalıdır. Bu sorunu gidermek için, biz vertebra stabilizasyonu oluşan yeni bir teknik geliştirdi ve Louisville Sakatlık Sistemi Aparatı bağlı fabrikasyon bıçak kullanmış (LISA) bir kesi SCI 7,14 üretmek. Bu yaralanma laserasyon sürecinde doku deformasyon kaçınılması keskin salınan bıçak kullanılarak oluşturuldu. Laserasyon derinliği laserasyon derinliğini kontrol mikro-sürücüleri kullanarak 0.01 mm doğrulukla hassas oldu. Kesme bıçakları istenen laserasyon kontur 9 oluşturmak için belirli şekil ve genişlikleri için-özel yapılır. Biz, 1), servikal omurga maruz kalma, 2&#39;nin yöntemi) karşılıklı bir yönüyle sabitleme cihazı kullanılarak omurga sabitleme tekniği ve titreşen bir bıçak kullanarak bir yırtılma servikal yaralanma 3) oluşturulmasını göstermektedir.

<table border="1">
 <tbody>
 <tr>
 <td>Name of Reagent/Material</td>
 <td>Company</td>
 <td>Catalogue Number</td>
 <td>Comments</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Mice vertebral stabilizer </td>
 <td>Louisville Impactor System</td>
 <td></td>
 <td>Stabilize and expose the cervical vertebra</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>LISA vibraknife </td>
 <td>Louisville Impactor System</td>
 <td></td>
 <td>Produce the laceration injury of the cervical spinal cord</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Spring Scissors</td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>15013-12</td>
 <td>Skin and trapezius muscle incision</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Spring Scissors</td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>15023-10</td>
 <td>Separate muscles from the laminae</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Spring Scissors</td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>15002-08</td>
 <td>Incision of dura</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Graefe forceps </td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>11154-10</td>
 <td>Retract skin</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dumont #7 forceps </td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>11274-20</td>
 <td>Muscle retraction (tip modified)(Fig. A)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Dumont SS forceps </td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>11203-25</td>
 <td>Fixation of vertebra (tip modified )(Fig.B)</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>30G needle </td>
 <td>Becton Dickenson</td>
 <td>305106</td>
 <td>Create a dural opening </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>6-0 suture </td>
 <td>Ethicon </td>
 <td>8806H</td>
 <td>Close muscle and fascial layers </td>
 </tr>
 <tr>
 <td>wound clip </td>
 <td>Fine Science Tools (USA) </td>
 <td>12031-07</td>
 <td>Skin closure</td>
 </tr>
 <tr>
 <td>Tribromoethanol (Avertin)</td>
 <td>Sigma-Aldrich</td>
 <td>90710-10G</td>
 <td>Anesthetic agent</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Louisville Impactor System, Inc, 210 E. Gray St., Suite 1102, Louisville, KY 40202, (502) 629-5510, E-mail: <a href="mailto:cbshields1@gmail.com">cbshields1@gmail.com</a>
 Fine Science Tools (USA), Inc, 373-G Vintage Park Drive, Foster City, CA 94404-1139, (800) 521-2109, E-mail: <a href="mailto:info@finescience.com">info@finescience.com</a> 
 Becton Dickenson, 1 Becton Drive, Franklin Lakes, NJ USA 07417, (201) 847-6800 Ethicon, Route 22 West,
 Somerville, NJ 08876 1-877-ETHICON 
 Sigma-Aldrich Corp. 
 St. Louis, MO, USA, 63178 (314) 771-5765, E-mail: cssorders@sial.com</td>
 </tr>
 <tr>
 <td></td>
 <td></td>
 <td></td>
 <td>Figure A is the modified Dumont #7 forceps; B is the modified Dumont SS forceps.</td>
 </tr>
 </tbody>
 </table>

controlled cervical laceration injury in mice

Genetiği değiştirilmiş farelerin kullanımı böyle bir omurilik yaralanması (SKY) gibi çeşitli nörolojik bozukluklar altında yatan moleküler mekanizmaları anlayışımız artırır. SCI bir laserasyon modeli üretmek için kullanılan serbest manuel kontrol genellikle ezmeyin veya kontüzyon bileşen ve bu nedenle, yeni bir teknik geliştirildi ile ilgili tutarsız yaralanmaları oluşturur. Servikal laserasyon SCI Bizim modeli) vertebra faset sabitleme, 2 ile) gelişmiş omurilik maruz servikal vertebra stabilizasyonu 1 dahil ederek serbest yöntemi ile doğal sorunların ortadan kalktığını ve 3) omurilik bir tekrarlanabilir laserasyon yaratılması salınan bir bıçak kullanarak ilişkili kontüzyon olmadan derinlemesine ± 0.01 mm doğruluk. Böyle bir neşter ya da makas serbest kullanımı gibi bir SCI laserasyon oluşturma standart yöntemlerle karşılaştırıldığında, bizim yöntem tutarlı bir lezyon üretti. Bu yöntem corticosp bir aksonal rejenerasyon çalışmaları için yararlıdırinal, rubrospinal ve dorsal artan yolları.

Hedef vertebra immobilizasyonu fare omurilik lezyonları hassas üreten büyük önem taşımaktadır. Bizim omurga stabilizasyon cihaz kısa spinöz süreçleri ve fare servikal ventral lordoz anatomik sorunları üstesinden gelir. Servikal vertebra de bizim servikal sabitleyici (Şekil 2) ile maruz kalmaktadır. Cihaz stabilize Bizim fare omurga servikal omurilik işlemleri için omurga hazırlamak için güvenilir bir tekniktir. LISA kullanarak lezyonun derinliği 0.01 mm 6,13 için doğrudur. Kesin laserasyon lezyon / doku arayüzü (Şekil 3) hiçbir kontüzyon neden olur. Dorsal hemiseksiyona lezyonların hassas bir 0.9 mm derinliğinde kesi sadece omurilik 1 patolojik bölümleri ile teyit her numunede merkezi kanal ötesine hangi aksonal rejenerasyon üzerine bir çalışmada C57BL / 6 farelerde gösterilmiştir. Bu hayvanların tüm hareket kurtarmakBu omurilik kesisi yaralanma sonrası ed. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/50030/50030fig1.jpg" /> Şekil 1,. (A) Lisa sahne üzerine yerleştirilen omurga sabitleyici fare. Titreşimli bıçak yırtılmış için omurilik doğru yönlendirilir. Mikro-sürücü kontrol sahne altında bulunan ve uygun site içinde fare konumlandırmak için tasarlanmıştır. Dikey mikro-sürücü lezyon derinliği kontrol ve devirme topuzu yırtık açılanma önlemek için omurilik yatay düzlem kontrol eder. Açma-kapama düğmesi titreşim motoru kontrol eder ve başka bir düğme ile genlik ayarlar. (B) 0.75 mm sırt hemiseksiyona laserasyon lezyon sağlam laminer kemerler altında kesti. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/50030/50030fig2.jpg" /> Şekil 2. </stRong&gt; (A), U-şekilli bir kanalı ve iki kol ve konektörler oluşan fare omurga sabitleyici. Fare servikal SCI için kullanılan C çukur ve göğüs SCI için T çukur yerleştirilir. (B) servikal lateral yönü altında silah yerleştirerek ve sonra başparmak kilitleme vidaları ile sabitlenmiş olduğunu. Dura kemik herhangi bir temizleme olmadan C5-6 lamina, C6-7, ve C7-T1 arasında maruz kalmaktadır. <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/50030/50030fig3.jpg" /> Şekil 3. 0.5 derinliklerinde, 0.8, 1.1, ve sagital görünümü (leke kresil-mor ve eozin) gözlenen 1.4 mm Dört dorsal spinal kord laserasyon bu tekniği kullanarak hassas yüksek derecede tasvir.

Watch this Scientific Journal Video about Controlled Cervical Laceration Injury in Mice at JoVE.com

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Bir tekrarlanabilir oluşturmak için bir roman tekniği<em&gt; In vivo</emFare servikal spinal kord laserasyon hasarı&gt; modeli açıklanmıştır. Bu teknik ± 0.01 mm bir hassasiyetle salınan bir bıçak kullanarak omurilik servikal yönleri ve yırtık tespit ile omurga stabilizasyon dayanmaktadır.

Farelerde Kontrollü Servikal yırtığı Sakatlık

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

controlled-cervical-laceration-injury-in-mice

Research

JoVE Journal

Medicine

16.5K Görüntüleme.  Norton Healthcare. Bir tekrarlanabilir oluşturmak için bir roman tekniği In vivo modeli açıklanmıştır. Bu teknik ± 0.01 mm bir hassasiyetle salınan bir bıçak kullanarak omurilik servikal yönleri ve yırtık tespit ile omurga stabilizasyon dayanmaktadır.

Video: Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Pressure Controlled Ventilation to Induce Acute Lung Injury in Mice

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged mechanical ventilation, contributes to morbidity and mortality of critical illness, and studies on novel genetic or pharmacological targets are areas of intense investigation (1-3, 5, 8, 26, 30, 33-36). ALI is defined by the acute onset of the disease, which leads to non-cardiac pulmonary edema and subsequent impairment of pulmonary gas exchange (36). We have developed a murine model of ALI by using a pressure-controlled ventilation to induce ventilator-induced lung injury (2). For this purpose, C57BL/6 mice are anesthetized and a tracheotomy is performed followed by induction of ALI via mechanical ventilation. Mice are ventilated in a pressure-controlled setting with an inspiratory peak pressure of 45 mbar over 1 - 3 hours. As outcome parameters, pulmonary edema (wet-to-dry ratio), bronchoalveolar fluid albumin content, bronchoalveolar fluid and pulmonary tissue myeloperoxidase content and pulmonary gas exchange are assessed (2). Using this technique we could show that it sufficiently induces acute lung inflammation and can distinguish between different treatment groups or genotypes (1-3, 5). Therefore this technique may be helpful for researchers who pursue molecular mechanisms involved in ALI using a genetic approach in mice with gene-targeted deletion.

A murine model for ventilator induced lung injury is an important tool to study an acute lung injury in vivo. Here, we report an easy applicable in situ model for acute lung injury using high-pressure mechanical ventilation to induce acute failure of the lung.

Farelerde Akut Akciğer Hasarı tetikleyebilecek Basınç Kontrollü Havalandırma

Murine models are extensively used to investigate acute injuries of different organs systems (1-34). Acute lung injury (ALI), which occurs with prolonged ...

Tıp

Intraspinal Cell Transplantation for Targeting Cervical Ventral Horn in Amyotrophic Lateral Sclerosis and Traumatic Spinal Cord Injury

Respiratory compromise due to phrenic motor neuron loss is a debilitating consequence of a large proportion of human traumatic spinal cord injury (SCI) cases 1 and is the ultimate cause of death in patients with the motor neuron disorder, amyotrophic laterals sclerosis (ALS) 2.
ALS is a devastating neurological disorder that is characterized by relatively rapid degeneration of upper and lower motor neurons. Patients ultimately succumb to the disease on average 2-5 years following diagnosis because of respiratory paralysis due to loss of phrenic motor neuron innnervation of the diaphragm 3. The vast majority of cases are sporadic, while 10% are of the familial form. Approximately twenty percent of familial cases are linked to various point mutations in the Cu/Zn superoxide dismutase 1 (SOD1) gene on chromosome 21 4. Transgenic mice 4,5 and rats 6 carrying mutant human SOD1 genes (G93A, G37R, G86R, G85R) have been generated, and, despite the existence of other animal models of motor neuron loss, are currently the most highly used models of the disease.
Spinal cord injury (SCI) is a heterogeneous set of conditions resulting from physical trauma to the spinal cord, with functional outcome varying according to the type, location and severity of the injury 7. Nevertheless, approximately half of human SCI cases affect cervical regions, resulting in debilitating respiratory dysfunction due to phrenic motor neuron loss and injury to descending bulbospinal respiratory axons 1. A number of animal models of SCI have been developed, with the most commonly used and clinically-relevant being the contusion 8.
Transplantation of various classes of neural precursor cells (NPCs) is a promising therapeutic strategy for treatment of traumatic CNS injuries and neurodegeneration, including ALS and SCI, because of the ability to replace lost or dysfunctional CNS cell types, provide neuroprotection, and deliver gene factors of interest 9.
Animal models of both ALS and SCI can model many clinically-relevant aspects of these diseases, including phrenic motor neuron loss and consequent respiratory compromise 10,11. In order to evaluate the efficacy of NPC-based strategies on respiratory function in these animal models of ALS and SCI, cellular interventions must be specifically directed to regions containing therapeutically relevant targets such as phrenic motor neurons. We provide a detailed protocol for multi-segmental, intraspinal transplantation of NPCs into the cervical spinal cord ventral gray matter of neurodegenerative models such as SOD1G93A mice and rats, as well as spinal cord injured rats and mice 11.

Neural precursor transplantation is a promising strategy for protecting and/or replacing lost/dysfunctional cervical phrenic motor neurons in spinal cord injury (SCI) and the motor neuron disorder, amyotrophic laterals sclerosis (ALS). We provide a protocol for cell delivery to cervical spinal cord ventral horn in rodent models of ALS and SCI.

Amyotrophic Lateral Sclerosis ve Travmatik Spinal Kord Yaralanması Servikal Ventral Horn Hedefleme intraspinal Hücre Transplantasyonu

Respiratory compromise due to phrenic motor neuron loss is a debilitating consequence of a large proportion of human traumatic spinal cord injury (SCI) ...

A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of spinal cord injury (SCI) in which the thoracic spinal cord is injured. Additionally, because most human cord injuries occur as the result of blunt, non-penetrating trauma (e.g. motor vehicle accident, sporting injury) where the spinal cord is violently struck by displaced bone or soft tissues, the majority of SCI researchers are of the opinion that the most clinically relevant injury models are those in which the spinal cord is rapidly contused.1 Therefore, an important step in the preclinical evaluation of novel treatments on their way to human translation is an assessment of their efficacy in a model of contusion SCI within the cervical spinal cord. Here, we describe the technical aspects and resultant anatomical and behavioral outcomes of an unilateral contusive model of cervical SCI that employs the Infinite Horizon spinal cord injury impactor.
Sprague Dawley rats underwent a left-sided unilateral laminectomy at C5. To optimize the reproducibility of the biomechanical, functional, and histological outcomes of the injury model, we contused the spinal cords using an impact force of 150 kdyn, an impact trajectory of 22.5&deg; (animals rotated at 22.5&deg;), and an impact location off of midline of 1.4 mm. Functional recovery was assessed using the cylinder rearing test, horizontal ladder test, grooming test and modified Montoya's staircase test for up to 6 weeks, after which the spinal cords were evaluated histologically for white and grey matter sparing.
The injury model presented here imparts consistent and reproducible biomechanical forces to the spinal cord, an important feature of any experimental SCI model. This results in discrete histological damage to the lateral half of the spinal cord which is largely contained to the ipsilateral side of injury. The injury is well tolerated by the animals, but does result in functional deficits of the forelimb that are significant and sustained in the weeks following injury. The cervical unilateral injury model presented here may be a resource to researchers who wish to evaluate potentially promising therapies prior to human translation.

A reliable and repeatable way to produce a cervical unilateral spinal cord injury using the Infinite Horizon impactor is described. The method takes advantage of a custom designed frame and clamp to stabilize the spine. The standardized procedure and biomechanical injury parameters result in sufficient and sustained injuries.

Sonsuz Horizon Darbeli kullanarak tek taraflı Servikal Spinal Kord Yaralanması bir Contusive Modeli

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

Farelerde Akut Böbrek Hasarı ve Post Yaralanma Fibrozis iskemi-reperfüzyon Model

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

Post-lezyonlu Solunum nöroplastisite Eğitim için Servikal Spinal Kord Yaralanması bir fare modeli

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Heterotopic Cervical Heart Transplantation in Mice

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies this model by avoiding challenging suture anastomoses of small vessels thereby reducing warm ischemia time. In comparison to abdominal graft implantation the cervical model is less invasive and the implanted graft is easily accessible for further follow-up examinations. Anastomoses are performed by pulling the ascending aorta of the graft over the cuff with the recipient&#8217;s common carotid artery and by pulling the main pulmonary artery over the cuff with the external jugular vein. Selection of appropriate cuff size and complete mobilization of the vessels are important for successful revascularization. Ischemia-reperfusion (I/R) injury can be minimized by perfusing the graft with a cardioplegic solution and by hypothermia. In this article, we provide technical details for a simplified and improved cuff technique, which should allow surgeons with basic microsurgical skills to perform the procedure with a high success rate.

The cuff technique shortens and facilitates the model of heterotopic cervical heart transplantation in mice by avoiding technically challenging suture anastomoses of small vessels. The technical details shown in this video paper should allow researches to establish this model in their laboratories.

Farelerde Heterotopik Servikal Kalp Nakli

The heterotopic cervical heart transplantation in mice is a valuable tool in transplant and cardiovascular research. The cuff technique greatly simplifies ...

A Repetitive Concussive Head Injury Model in Mice

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of knowledge on the injury and its effects. To develop a better understanding of concussions, animals are often used because they provide a controlled, rigorous, and efficient model. Studies have adapted traditional animal models to perform mTBI to stimulate mild injury severity by changing the injury parameters. These models have been used because they can produce morphologically similar brain injuries to the clinical condition and provide a spectrum of injury severities. However, they are limited in their ability to present the identical features of injuries in patients. Using a traditional impact system, a repetitive concussive injury (rCHI) model can induce mild to moderate human-like concussion. The injury degree can be determined by measuring the period of loss of consciousness (LOC) with a sign of a transient termination of breathing. The rCHI model is beneficial to use for its accuracy and simplicity in determining mTBI effects and potential treatments.

Concussion presents the most common type of traumatic brain injury. Therefore, a repetitive concussive animal model, which replicates the important features of an injury in patients, may provide a means to study concussion in a rigorous, controlled, and efficient manner.

Farelerde Bir Tekrarlanan Concussive Kafa Travması Modeli

Despite the concussion/ mild traumatic brain injury (mTBI) being the most frequent occurrence of traumatic brain injury, there is still a lack of ...

Induction of Accelerated Atherosclerosis in Mice: The "Wire-Injury" Model

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. Moreover, by rupture of the defective vascular wall, atherosclerosis induces occlusive thrombus formation, which represents the main cause of myocardial infarction or stroke and the most frequent cause of death. Despite the advances in the cardiovascular field, many questions remain unanswered, and additional basic research is essential to improve our understanding of the molecular mechanisms during atherosclerosis and its effects. Due to limited clinical studies, there is a need for representative animal models recreating atherosclerotic conditions such as neointima formation after stent implantation, balloon angioplasty, or endarterectomy. Since the mouse presents many advantages and is the most frequently used model for studying molecular processes, the current study proposes an invasive procedure of endothelial denudation, also known as the wire-injury model, which is representative of the human condition of neointima formation in arteries after revascularization procedures.

This study describes an invasive procedure for the induction of accelerated atherosclerosis in mice. In comparison to other methods using electric- or cryo-induced injury, mechanical-induced injury mimics the human condition of restenosis after revascularization therapies and is ideal for the study of the molecular mechanisms involved.

Farelerde Hızlandırılmış Ateroskleroz Indüksiyonu: "Tel-Yaralanma" Modeli

Atherosclerosis is a proliferative fibro-inflammatory disease developing in the arterial wall, inducing a deficient blood flow or a lack of blood flow. ...