Yazarlar sıçan çalışmaya Meritxell Romeu-Nadal katkısını kabul etmek istiyorum.

1.. Hayvan Prosedürleri <ol><li> Tüm hayvan çalışmaları Home Office Hayvanlar (Scientific Procedures) Act (1986) göre yapılmalıdır. </li><li> Tekeşli ıslah tarafından eski 10 hafta arası Wistar sıçan Mate, ve vajinal tamponun görünümü ile gebelik onaylayın. Gebelik günü 1 olarak kaydedin, ve deneysel diyet başlar. Bakire kadın için, tek tek her bir sıçan ev ve deneysel diyet başlar. </li><li> 20 gün boyunca deney diyetlerinin besleme sonra servikal dislokasyon takiben CO2 ile boğularak sıçan euthanize. </li><li> Karın boşluğu ortaya çıkarmak ve diyaframa karaciğer bağlamak bağ, karın ön duvarı, mide ve onikiparmak bağırsağı keserek karaciğer çıkarılması için diseksiyon forseps ve makas kullanın. -80 ° C&#39;de depolamadan önce PBS içinde karaciğer yıkayın ve sıvı azot içinde dondurularak </li></ol> 2. Bir Toplam Lipid hazırlanması ekstrakte 9 <ol><li> Molekül Eklear elekler &#39;kuru&#39; solventler oluşturmak için tüm solventler (çözücü kabın 1/10 doldurmak için). davlumbaz içindeki tüm solvent çalışmaları yürütmek. </li><li> Yaklaşık 100 mg donmuş karaciğer kesin ve tartın. Bir buz kovası bir tüp içine doku yerleştirin ve 0.8 ml buz gibi soğuk% 0.9 NaCI ekleyin. Doku homojenize. </li><li> Kuru kloroform içinde 1 ml / mg içerisinde çözündürüldü iç standartları ekleyin: metanol (2:1, v / v) butile hidroksitoluen (BHT, 50 mg / l) ihtiva eden bir anti-oksidan olarak. Rat karaciğer 100 mg standart CE 100 mikrogram eklemek için (Kolesteril 17:00 heptadekanoat) Dikkat:. Kloroform ve BHT tehlikelidir. </li><li> 5,0 ml kuru kloroform ekleme: metanol (2:1, v / v), BHT (50 mg / L) ihtiva etmektedir. </li><li> , 1.0 ml 1 M NaCl ekle karışım formasını görünüyor kadar vorteks ile iyice karıştırın. Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> 10 dakika oda sıcaklığında düşük fren 1000 xg&#39;de santrifüj. </li><li> Alt toplayınbir cam Pasteur pipet kullanılarak faz, 40 ° C&#39;de nitrojen altında, yeni vidalı kapaklı cam tüp ve kuru transfer Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li></ol> 3. Katı Faz Ekstraksiyon tarafından Lipid Sınıflar ayrılması (SPE) 10 <ol><li> Bir vakum pompasına SPE tankı bağlayın ve tank aminopropil silis SPE kartuşu yerleştirin. </li><li> İlk fraksiyon toplamak için sütunun altında tankı rafa yeni vidalı kapak cam tüp etiketli TAG ve CE yerleştirin. </li><li> 1.0 ml kuru kloroform ve girdap toplam lipid ekstresi çözülür. </li><li> , Bir cam Pasteur pipet kullanılarak kolona örnek uygulanır ve yerçekimi altında vidalı kapaklı bir tüp içine üzerinden akmasına izin verilir. Başka damlar düştüğünde, vakum kalan sıvı çıkarın. </li><li> Kuru kloroform içinde 2 x 1.0 mi yıkama ile sütun yıkama, vakum altında TAG ve CE fraksiyonu Zehir. </li><li> Tüm sıvı kaldırıldığında, TAG ve CE fractio kuru40 ° C&#39;de azot altında n Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> Sütununda tankı tepsisine yeni vidalı kapak cam tüp etiketli PC yerleştirin. </li><li> 2 x 1.0 ml kuru kloroform ilavesiyle, vakum altında PC fraksiyonu Zehir: metanol (60:40, v / v) tüm sıvı sütundan çıkarılır kadar. </li><li> 40 ° C&#39;de nitrojen altında çıkarın ve kuru PC fraksiyon Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> Tank tepsiye yeni bir vidalı kapak cam tüp PE etiketli yerleştirin ve vakum altında 1.0 ml kuru metanol ilavesiyle PE fraksiyonu elüte. </li><li> 40 ° C&#39;de nitrojen altında çıkarın ve kuru PE fraksiyon Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> Tank tepsiye yeni bir vidalı kapaklı cam tüp etiketli NEFA koyun ve kuru kloroform içinde 2 x 1.0 ml yıkama eklenmesiyle vakum altında NEFA fraksiyonu elüte: metanol: glasiye asetik asit. (100:2:2, v / v / v) Dikkat: Buzlu asetik asit tehlikelidir. </li><li> 40 ° C&#39;de nitrojen altında toplandı NEFA fraksiyonu ve kuru kaldırma Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> SPE tank üzerine yeni bir ammopropil silika SPE kartuşu yerleştirin ve atık toplamak için kartuşun altına tankı tepsisine bir vidalı kapak cam tüp yerleştirin. </li><li> 3, vakum altında kuru heksan ile yıkama ve yer çekiminin etkisi altında daha sonra 1.0 ml nihai bir yıkama ile sütun yıkayın. . Kartuş (hekzan düzeyi kartuş matris yakınken bir kapalı konuma kartuş kolon kanalları açmak) Dikkat kuru olmasına izin vermeyin: Hekzan tehlikelidir. </li><li> Yeni vidalı kapak cam tüp etiketli CE ile atık borusunu değiştirin. </li><li> Kuru heksan ve girdap 1.0 ml (adım 3.6 hazırlandı), kurutuldu ve TAG CE fraksiyonu çözündürülür. , Bir cam Pasteur pipet kullanılarak kolona uygulanır ve bu gr altmda damla izinRavity. </li><li> Başka bir damla düştüğünde, vakum altında kalan sıvı boşaltılır. </li><li> Vakum altında, 40 ° C&#39;de nitrojen altında kuru CE ve toplanan fraksiyonun elüsyonu için kuru heksan 2 x 1.0 mi yıkama ile sütun yıkayın Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li><li> Kuru heksan 2 x 1.0 ml yıkama ilavesi ile tank tepsi ve elute TAG yeni vidalı kapaklı cam tüp etiketli TAG Sıra: metanol: etil asetat (100:5:5), vakum altında. </li><li> 40 ° C&#39;de nitrojen altında kuru fraksiyon toplandı . Numuneler bir hafta kadar Dikkat kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de muhafaza edilebilir: Etil asetat tehlikelidir. </li></ol> 4. FAME hazırlanması CE 10 <ol><li> . Ayrılmış CE fraksiyonu (adım 3.19 toplanan) ve girdap Dikkat kuru toluen içinde 0.5 ml ilave edilir: Toluene tehlikelidir. </li><li> % 2 (v ile metilasyon reaktifi hazırlayın (kuru metanol/ V), 1.0 ml numune başına gerekli olduğu H 2 SO4). Cam veya kapaklı uygun bir plastik kap içine kuru metanol hacmi dağıtın ve SO 4 damla damla sonra Dikkat ters çevirme ile karıştırın H 2&#39;nin gerekli miktarda ekleyin:. Sülfürik asit tehlikelidir. </li><li> Kuru toluen içinde çözüldü numunelere metilleme reaktifi 1.0 ml ilave edilir, güvenli bir şekilde tüpler kapak, yavaşça karıştırın. </li><li> 50 ° C&#39;de 2 saat boyunca ısıtılır örnekleri </li><li> 2 saat sonra ısı tüpleri kaldırmak. . Potasyum bikarbonat ve potasyum karbonat zararlı: Bir kere soğuk çözeltisi (0.25 M KHCO 3 0.5MK 2 CO 3) Dikkat nötralize 1.0 ml. </li><li> 1.0 ml kuru heksan ve vorteks ekleyin. </li><li> 2 dakika, oda sıcaklığında düşük bir fren boyunca 250 x g&#39;de santrifüjleyin. </li><li> FAME içeren üst faz, toplamak ve yeni bir non-vidalı kapak atılabilir cam tüp içine aktarın. </li><li> Altında toplanan FAME Kuru40 ° C&#39;de azot Numuneler bir hafta için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li></ol> 5. CE FAME 14 Free Kolesterol Kirlilik giderimi (Free Kolesterol örnek kontamine edebilir, ve serbest kolesterol çıkarmadan örnek kromatografının izleri bkz. Şekil 1). <ol><li> SPE tanka atık tüp yerleştirin ve tankın üzerine bir silika jel SPE kartuşu yerleştirin. </li><li> Vakum altında kuru heksan, 3 x 1 ml yıkama ve yerçekimi altında 1 x 1 ml &#39;si ile sütun yıkayın. </li><li> Atık yıkar çıkarın ve depoya yeni atık tüp ekleyin. </li><li> 1 ml kuru heksan, girdap CE FAME çözülür. </li><li> , Bir cam Pasteur pipet kullanılarak kolona uygulanır ve yer çekiminin etkisi altında boyunca akmasına izin verilir. </li><li> Vakum altında heksanın 3 x 1 mi yıkama ile sütun yıkayın. </li><li> Atık yıkar çıkarın ve tank etiketli CE FAME yeni olmayan vidalı kapak tüp yerleştirin. </li><li> Zehir2 x 1 ml kuru heksan ile CE FAME: dietil eter (95:5 v / v) yıkama. </li><li> 40 ° C&#39;de nitrojen altında kuru . Numuneler bir hafta kadar Dikkat kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de muhafaza edilebilir: Dietil eter tehlikelidir. </li></ol> 6. GC Otomatik Numune şişenin içine FAME transferi <ol><li> , Vorteks örnek ve bir GC otomatik numune şişesine transfer etmek için 75 ul kuru hekzan ekleyin. </li><li> , Örnek vorteks ve aynı GC otomatik numune şişesine aktarmak için bir başka 75 ul kuru hekzan ekleyin. Numuneler, bir ay kadar için kapatılmış ve bu aşamada -20 ° C&#39;de saklanabilir. </li></ol> 7. Gaz Kromatograf 14 ile Analiz <ol><li> Bir gaz kromatografisinde FAME analiz. Örnek kurmak: 30 mx x 0.25 mm 0.25 mikron BPX-70 sıcaklık protokolü ile erimiş silika kapiler kolon: Başlangıç ​​sıcaklığı 115 ° C, 2 dakika tutma, rampa 10 ° C / dk ila 200 ° C, 245 ° C 18.5 dk, rampa 60 ° C / dk süreyle, hEski 4 dk. Sütun: Helyum gazı, akış hızı 1.0, basınç 14.6 ve hız 29. Enjektör: Sıcaklık = 300 ° C Dedektör: Hidrojen akış 40.0, hava sıcaklığı = 300 ° C, 45,0 akış, gaz Helyum makyaj, 184,0 akış </li><li> (CE FAME analiz için örneğin 25:1) uygun olarak ayarlayın split oranı. </li><li> Uygun bir yazılım kullanarak her bir tepe noktasının altındaki alanın belirlemek ve standartlar ile karşılaştırılarak tespit FAME. Örnek Kromatogramlarda için Şekil 2&#39;ye bakınız. </li><li> Toplam yağ asitlerinin bir yüzdesi olarak tek tek yağlı asitlerin katkı hesaplamak için zirve veri altındaki alanı kullanın. </li><li> Miktarı ile iç standardın alanına bölünmesi ile yağ asitlerinin mutlak konsantrasyonlarını hesaplamak ilave edildi. Kullanılan doku miktarı içinde her yağ asidi mutlak konsantrasyonları elde etmek için, bu sonuç, her bir yağ asidinin alanı bölün. </li></ol>

<ol>
	<li>Browning, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+of+eicosapentaenoic+and+docosahexaenoic+acids+into+lipid+pools+when+given+as+supplements+providing+doses+equivalent+to+typical+intakes+of+oily+fish.">Incorporation of eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids into lipid pools when given as supplements providing doses equivalent to typical intakes of oily fish.</a> Am. J. Clin. Nutr. 96 (4), 748-758 (2012).</li><li>Cao, J., Schwichtenberg, K. A., Hanson, N. Q., Tsai, M. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incorporation+and+clearance+of+omega-3+fattyacids+in+erythrocyte+membranes+and+plasma+phospholipids.">Incorporation and clearance of omega-3 fattyacids in erythrocyte membranes and plasma phospholipids.</a> Clin. Chem. 52 (12), 2265-2272 (2006).</li><li>Lauritzen, L., Carlson, S. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Maternal+fatty+acid+status+during+pregnancy+andlactation+and+relation+to+newborn+and+infant+status.">Maternal fatty acid status during pregnancy andlactation and relation to newborn and infant status.</a> Matern. Child Health. 7 (2), 41-58 (2011).</li><li>Kelsall, C. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+dysfunction+induced+in+offspring+by+maternal+dietary+fat+involves+altered+arterial+polyunsaturated+fatty+acid+biosynthesis.">Vascular dysfunction induced in offspring by maternal dietary fat involves altered arterial polyunsaturated fatty acid biosynthesis.</a> PLoS One. 7 (4), (2012).</li><li>Karpe, F., Dickmann, J. R., Frayn, K. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acids,+obesity,+and+insulin+resistance:+time+for+a+re-evaluation.">Fatty acids, obesity, and insulin resistance: time for a re-evaluation.</a> Diabetes. 60 (10), 2441-2449 (2011).</li><li>Mossoba, M. M., Moss, J., Kramer, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trans+fat+labelling+and+levels+in+U.S.+foods:+assessment+of+gas+chromatographic+and+infrared+spectroscopic+techniques+for+regulatory+compliance.">Trans fat labelling and levels in U.S. foods: assessment of gas chromatographic and infrared spectroscopic techniques for regulatory compliance.</a> J. AOAC Int. 92 (5), 1284-1300 (2009).</li><li>Chee, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fatty+acid+content+of+marine+oil+capsules.">Fatty acid content of marine oil capsules.</a> Lipids. 25 (9), 523-528 (1990).</li><li>Folch, J., Lees, M., Sloane-Stanley, G. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+method+for+the+isolation+and+purification+of+total+lipids+from+animal+tissues.">A simple method for the isolation and purification of total lipids from animal tissues.</a> J. Biol. Chem. 226 (1), 497-509 (1957).</li><li>Burdge, G. C., Wright, P., Jones, E. A., Wootton, S. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+method+for+separation+of+phosphatidylcholine,+triacylglycerol,+non-esterified+fatty+acids+and+cholesterol+esters+from+plasma+by+solid-phase+extraction.">A method for separation of phosphatidylcholine, triacylglycerol, non-esterified fatty acids and cholesterol esters from plasma by solid-phase extraction.</a> Br. J. Nutr. 84 (5), 781-787 (2000).</li><li>Sepp&#228;nen-Laakso, T., Laakso, I., Hiltunen, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+fatty+acids+by+gas+chromatography,+and+its+relevance+to+research+on+health+and+nutrition.">Analysis of fatty acids by gas chromatography, and its relevance to research on health and nutrition.</a> Anal. Chim. Acta. 465 (1), 39-62 (2002).</li><li>Beesley, T. E., Buglio, B., Scott, R. P. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Quantitative chromatographic analysis. , (2000).</li><li>Bartle, K. D., Myers, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=History+of+gas+chromatography.">History of gas chromatography.</a> Trends Anal. Chem. 21 (9), 9-10 (2002).</li><li>Childs, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The effect of gender, pregnancy and diet upon rat tissue fatty acid composition and immune function. , 378 (2008).</li><li>Harris, S. W., Pottala, J. V., Ramachandran, S. V., Larson, M. G., Robins, S. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+erythrocyte+membrane+Trans+and+marine+fatty+acids+between+1999+and+2006+in+older+Americans.">Changes in erythrocyte membrane Trans and marine fatty acids between 1999 and 2006 in older Americans.</a> J. Nutr. 142 (7), 1297-1303 (2012).</li><li>Roberts, L. D., McCombie, G., Titman, C. M., Griffin, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+matter+of+fat:+An+introduction+to+lipidomic+profiling+method.">A matter of fat: An introduction to lipidomic profiling method.</a> J. Chromatogr. B. 871 (2), 174-181 (2008).</li></ol>

Yazarlar herhangi bir mali çıkarlarını beyan.

Gaz kromatografisi yağlı asit analizi için kullanılacak doğru bir tekniktir, ve yüksek tekrarlanabilirliği klinik analizler için müsait bu tekniği görmektedir. Uygun GC sütun mevcut sütun durağan faz, kolon uzunluğu ve iç çapı polaritesine varyasyonlara sahip olan, ilgi konusu olan yağlı asitleri tanımlanmasını sağlamak için kullanılmalıdır. Bu analiz yönteminde, bir kaynaşık silika kılcal kolonunun kullanılması, iyi bir termal stabilitesi ve yüksek yüzey inertlik ve iyi çözünürl?...

Gaz kromatografisi (GC) takviyesi veya fizyolojik obezite gibi koşullarda (ve diyabet gibi ilişkili hastalıklar) veya gebelik süresince 3 lipid havuzları ve hücre zarları 1,2 yağ asitlerinin dahil edilmesini belirlemek ve ölçmek için kullanılan bir köklü bir tekniktir - 5. Ayrıca, gıdalarda türleri ve yağların miktarları analiz için uygundur. Deneysel diyetler karakterize yanı sıra, gıda sanayi yönetmeliklerine uygunluğunu sağlamaya yararlıdır. Örneğin, GC etiketleme doğru olan ve düzenlemelerin, 6,7 yapıştırılır sağlamak için bir besin takviyesi olarak bir ürün içinde kimlik ve yağ asitlerinin miktarını doğrulamak için kullanılabilir. Yağ asitlerinin Analizi sağlığı ve hastalıkları, diyet değişikliği etkisi ve fizyolojik durumuna 8 değişikliklerin etkisi lipid metabolizması içine değerli bilgiler sağlayabilir. Gebelikte örnekleri çalışmak için GC kullanımı önemli sağladıyağ asidi ve kompleks lipid homeostazı 3 değişiklikler hakkında bilgi. Kromatografik ayırma öncesinde, yağlar, genellikle kloroform ve metanol çözücü karışımları lipidlerin çözünürlüğünü kullanarak numuneden ekstre edilmiştir. Sodyum klorür fazları 9,10 ihtiva eden sulu ve organik lipid olarak karışımın ayrılmasını kolaylaştırmak üzere eklenir. Ilgi Kompleks lipid sınıfları, katı faz ekstraksiyonu (SPE) ile, toplam lipid ekstreden ayrılabilir. Bu ayırma işlemi, teknik polaritelerine veya bağlanma afinitesine bağlı olarak lipid sınıfları çözülür. Triacyglycerols (TAG) ve kolesteril esterleri (CE) kombine bir fraksiyon, bundan başka sınıfları, fosfatidilkolin (PC) gibi ilk önce elüte edilir, fosfatidiletanolamin (PE) ve esterleşmemiş yağ asitlerinin (NEFA) yıkama çözücünün artan polarite ile taşınacağı . CE gelen TAG ayrılması sadece taze bir SPE cartri için TAG bağlanma yararlananDGE, CE elüt edilmesi için izin verir. TAG daha sonra elüsyon solvent 9,10 polaritesinin artırılması ile elüte edilebilir. Bu yöntem, daha yüksek bir verim ile eş zamanlı olarak ayrılması için çok sayıda örnek, nispeten küçük boyutlu örnekler (örneğin &lt;100 ul plazma ya da serum, &lt;100 mg doku) 11,12 analiz edilebilir, yani, ince tabaka kromatografisi ile elde edilmesine izin verir. GC ilk olarak 1950 de tarif edilen bir köklü bir tekniktir, bu daha sonra, sıvı-sıvı sistemlerinde, mobil faz, buhar ile değiştirilebilir önerildi. Bu, ilk olarak petrol analizi için kullanılabilir, ancak bu tür hızlı bir şekilde, amino asit analizi ve büyük ilgi halen lipid biyokimya gibi başka alanlara genişletilmiştir. Örneğin daha önce kullanılan paketlenmiş sütunlar kılcal sütun gelişme olarak GC ekipman ve teknolojisindeki gelişmeler, yağ asitleri için mümkün olduğu mevcut tekniklere açmıştırGC rutin araştırmalar 13 arasında geniş bir aralıkta yağlı asitleri belirlemek ve ölçmek için kullanılan ile sonuçlanan daha düşük sıcaklıklarda daha verimli bir şekilde ayrılır. GC bunlar termal ayrışma olmadan, makul sıcaklıklarda elüt için yeterince uçucu olabilir bu sırayla türetilebilir için yağ asitleri gerektirir. Bu analiz için, genellikle esterler, tiyoesterler veya amidleri oluşturmak için hidrojen içeren fonksiyonel bir grubun ikamesi içerir. Metil esterleri yaygın metilasyon tarafından üretilen türevleri, incelenmiştir. Bu yöntemde, kompleks lipidler içindeki ester bağları yağlı asit metil esterleri (FAME) oluşturmak için transmethylated olan serbest yağ asitlerini, serbest bırakmak için hidrolize edilmektedir. GC ile belirlendi FAME profili elde edilen, yağlı asit bileşimi olarak adlandırılır ve kolay bir şekilde farklı deney grupları 9,10 arasında karşılaştırılabilir. Teknik olanak Tek sıralamada oranlarını hemual yağ asitleri ve bunların konsantrasyonları, ölçülecek. Beslenme çalışmalarında ve gıda endüstrisi içinde yağ asitleri analiz etmek için GC kullanımına ek olarak, teknik, analitik alanlarda geniş bir aralığında kullanılabilir. Örneğin, GC kullanılarak çevre analizleri böcek ve toprak su kirlenmesini ölçme içerir chlorobenzene içeriğini ölçme analiz eder. Toksikoloji, GC de idrar ve bireylerin kan örneklerinde yasadışı maddeleri tanımlamak için kullanılır olmuştur, bu tür bir spor performans artırıcılar 12 ve hidrokarbonların kompleks karışımlarını ayırmak için yeteneği petrokimya analizi 12 için petrol sektöründe bu tekniği popüler hale getirir. Gebelik, özellikle omega-3 içeriği maternal dokuların yağlı asit bileşimine önemli bir değişiklik, (n-3) ve omega-6 (n-6) çoklu doymamış yağ aci ile ilişkilids (PUFA) 3. Mevcut çalışmada, farklı yağ kaynakları ile, düşük ve yüksek yağlı diyet ile beslenmiştir bakir ve hamile sıçanlardan alınan karaciğer dokusu yağlı asit bileşiminin analizinde kullanımını açıklayan yağ asitlerinin ölçümünde GC kullanımını örnekler. Burada sağlanan deneysel diyetler, düşük yağlı soya yağı bazlı diyet, yüksek yağlı soya yağı bazlı diyet (130.9 g toplam yağ / kg toplam yağ) veya yüksek yağ bezir yağı bazlı diyet (130.9 g toplam yağ / kg idi 20 gün için sağlanan beslenme). Bu diyetler tam besin ve yağlı asit bileşimi, daha önce 14 tarif edilmiştir. Soya fasulyesi yağı diyeti linoleik asit (18:2 n-6) açısından zengindir ve keten tohumu yağı diyeti, α-linolenik asit açısından zengin iken, bir α-linolenik asit (18:03 n-3) içerir. Bu yüksek-yağlı diyetler, linoleik α-linolenik asit için (sırasıyla, 8:01 ve 01:01 arasında katyonları), farklı yem oranlarını temsil eder. Bireysel lipid sınıfları ve GC ile analiz izolasyonu için bir yöntem olup bizll oluşturulmuş ve valide, ve daha önce 10 ama burada bulunan ayrıntılı teknik açıklama olmadan yayımlanmıştır.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Methanol:</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>M/4056/17</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes - HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chloroform:</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>C/4966/17</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes - HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BHT:</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>W218405</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Dust fumes - Anhydrous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NaCl</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>S9888</td>
			<td>Anhydrous</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hexane</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>H/0406/17</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes - HPLC Grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glacial acetic acid</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>695084</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Burns - 99.85%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sulfuric acid</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>339741</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Burns - 99.999%</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium carbonate</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>209619</td>
			<td>99% ACS Reagent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Potassium bicarbonate</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>237205</td>
			<td>99.7% ACS Reasgent grade</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethyl acetate</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>10204340</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes - 99+% GLC SpeciFied</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Toluene</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>T/2300/15</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Diethyl ether</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>309966</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Fumes</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nitrogen (oxygen free) cylinder</td>
			<td>BOC</td>
			<td>44-w</td>
			<td>&#39;CAUTION&#39; Compressed gas - explosion risk</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aminopropyl silica SPE cartridges</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>12102014</td>
			<td>Cartridge - Bead mass 100mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Silica gel SPE cartidges</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>14102010</td>
			<td>Cartridge - Bead mass 100mg</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Molecular seives</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>334324</td>
			<td>Pellets, AW-300, 1.6mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Glass pasteur pipettes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB50251</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Borosilicate glass test tube</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB59527</td>
			<td>Non-screw cap</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw thread glass test tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB59555</td>
			<td>13mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Caps for screw thread test tubes</td>
			<td>Fisher Scientific</td>
			<td>FB51353</td>
			<td>To fit 13mm tube</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Solida phase extraction (SPE) tank</td>
			<td>Agilent</td>
			<td></td>
			<td>VacElut 20 Manifold</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Luer stopcocks for SPE tank</td>
			<td>Agilent</td>
			<td>12131005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vacuum pump</td>
			<td>Sigma- Aldrich</td>
			<td>2656-194GB-1EA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GC vials</td>
			<td>Kinesis</td>
			<td>STV 12-03TS</td>
			<td>Short thread 9mm, TPX 0.2ml fused glass insert</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GC vial lids</td>
			<td>Kinesis</td>
			<td>SCC09-0.2B</td>
			<td>Short thread 9mm blue</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GC inlet liners</td>
			<td>SGE Analytical science</td>
			<td>092002</td>
			<td>Split/splitless Focus liner ID 4mm, OD 6.3mm length 78.5mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GC septa</td>
			<td>SGE Analytical science</td>
			<td>041856</td>
			<td>11mm, MN material</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GC column</td>
			<td>SGE Analytical science</td>
			<td>054612</td>
			<td>Length 30m, ID 0.22mm, Film thickness 0.25&#181;m</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gas chromatograph</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>HP 6890 series</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the use of gas chromatography to analyze compositional changes of fatty acids in rat liver tissue during pregnancy

Gaz kromatografisi (GC), yüksek hassasiyet ve yüksek ölçüde tekrarlanabilirliği ile sonuçlar alındı, dokular, hücreler ve plazma / serum Lipidlerin yağlı asit içeriğini belirlemek ve ölçmek için kullanılan bir çok hassas bir yöntemdir. Metabolik ve beslenme çalışmaları GC sağlar müdahaleleri aşağıdaki yağ asidi konsantrasyonlarında veya gebelik gibi fizyolojik durumuna değişiklikleri sırasında değişikliklerin değerlendirilmesi. Aminopropil silis kartuşları kullanılarak katı faz ekstraksiyon (SPE) sağlar Triasilgliserollerin, farklı fosfolipidler ve kolesteril esterleri (CE) de dahil olmak üzere başlıca lipid sınıflarının ayrılması. SPE ile birlikte GC çeşitli yüksek ve düşük yağlı diyetler ile beslenmiş olan bakir ve hamile sıçanların karaciğerlerinde CE fraksiyonun yağ asidi bileşimi değişiklikleri analiz etmek için kullanıldı. Karaciğer CE omega-3 ve omega-6 yağ asit içeriği üzerine önemli beslenme / gebelik etkileşim etkileri hamile kadın diyet manipulat farklı bir tepki olmadığını belirten vardırdaha iyon bakire kadınlarda görülür.

Bu yöntemin başarısı tam protokolü takip ve &quot;gürültü&quot; ve kromatogramda görünebilir kirlenmesini azaltmak amacıyla temiz çözücüler ve reaktifler kullanılarak bağlıdır. Kirlenmiş örnekleri eğri hesaplamaları altındaki alanın doğruluğunu düşürücü, analiz etmek için daha zor bulunmaktadır. Açık protokol simetrik, iyi tanımlanmış zirveler ve minimal arka plan gürültüsü ile başarılı bir kromatogramını takip edilirse, Şekil 3&#39;te gösterildiği gibi...

Watch this Scientific Journal Video about The Use of Gas Chromatography to Analyze Compositional Changes of Fatty Acids in Rat Liver Tissue during Pregnancy at JoVE.com

The Use of Gas Chromatography to Analyze Compositional Changes of Fatty Acids in Rat Liver Tissue during Pregnancy

Gebelik maternal dokuların yağlı asit bileşimine önemli değişikliklere yol açmıştır. Lipid profilleri sıçanlarda, kimlik ve tek tek lipid sınıflarında yağlı asitlerin ölçümü gebelik sırasında çeşitli yüksek ve düşük yağlı diyetler beslenmiştir izin vermek için gaz kromatografisi ile elde edilebilir.

Hamilelik sırasında Sıçan Karaciğer dokusunda yağ asitleri arasında kompozisyon değişiklikleri analiz Gaz Kromatografi Kullanımı

Gas chromatography (GC) is a highly sensitive method used to identify and quantify the fatty acid content of lipids from tissues, cells, and plasma/serum, ...

the-use-gas-chromatography-to-analyze-compositional-changes-fatty

Research

JoVE Journal

Chemistry

29.9K Görüntüleme.  University of Southampton.  Gebelik maternal dokuların yağlı asit bileşimine önemli değişikliklere yol açmıştır. Lipid profilleri sıçanlarda, kimlik ve tek tek lipid sınıflarında yağlı asitlerin ölçümü gebelik sırasında çeşitli yüksek ve düşük yağlı diyetler beslenmiştir izin vermek için gaz kromatografisi ile elde edilebilir. 

Video: The Use of Gas Chromatography to Analyze Compositional Changes of Fatty Acids in Rat Liver Tissue during Pregnancy

Determination of the Gas-phase Acidities of Oligopeptides

Amino acid residues located at different positions in folded proteins often exhibit different degrees of acidities. For example, a cysteine residue located at or near the N-terminus of a helix is often more acidic than that at or near the C-terminus 1-6. Although extensive experimental studies on the acid-base properties of peptides have been carried out in the condensed phase, in particular in aqueous solutions 6-8, the results are often complicated by solvent effects 7. In fact, most of the active sites in proteins are located near the interior region where solvent effects have been minimized 9,10. In order to understand intrinsic acid-base properties of peptides and proteins, it is important to perform the studies in a solvent-free environment.
We present a method to measure the acidities of oligopeptides in the gas-phase. We use a cysteine-containing oligopeptide, Ala3CysNH2 (A3CH), as the model compound. The measurements are based on the well-established extended Cooks kinetic method (Figure 1) 11-16. The experiments are carried out using a triple-quadrupole mass spectrometer interfaced with an electrospray ionization (ESI) ion source (Figure 2). For each peptide sample, several reference acids are selected. The reference acids are structurally similar organic compounds with known gas-phase acidities. A solution of the mixture of the peptide and a reference acid is introduced into the mass spectrometer, and a gas-phase proton-bound anionic cluster of peptide-reference acid is formed. The proton-bound cluster is mass isolated and subsequently fragmented via collision-induced dissociation (CID) experiments. The resulting fragment ion abundances are analyzed using a relationship between the acidities and the cluster ion dissociation kinetics. The gas-phase acidity of the peptide is then obtained by linear regression of the thermo-kinetic plots 17,18.
The method can be applied to a variety of molecular systems, including organic compounds, amino acids and their derivatives, oligonucleotides, and oligopeptides. By comparing the gas-phase acidities measured experimentally with those values calculated for different conformers, conformational effects on the acidities can be evaluated.

The determination of the gas-phase acidities of cysteine-containing oligopeptides is described. The experiments are performed using a triple quadrupole mass spectrometer. The relative acidities of the peptides are measured using collision-induced dissociation experiments, and the quantitative acidities are determined using the extended Cooks kinetic method.

Oligopeptidlerin Gaz fazlı asitliğe belirlenmesi

Amino acid residues located at different positions in folded proteins often exhibit different degrees of acidities. For example, a cysteine residue ...

Kimya

Isolation and Preparation of Bacterial Cell Walls for Compositional Analysis by Ultra Performance Liquid Chromatography

The bacterial cell wall is critical for the determination of cell shape during growth and division, and maintains the mechanical integrity of cells in the face of turgor pressures several atmospheres in magnitude. Across the diverse shapes and sizes of the bacterial kingdom, the cell wall is composed of peptidoglycan, a macromolecular network of sugar strands crosslinked by short peptides. Peptidoglycan&#8217;s central importance to bacterial physiology underlies its use as an antibiotic target and has motivated genetic, structural, and cell biological studies of how it is robustly assembled during growth and division. Nonetheless, extensive investigations are still required to fully characterize the key enzymatic activities in peptidoglycan synthesis and the chemical composition of bacterial cell walls. High Performance Liquid Chromatography (HPLC) is a powerful analytical method for quantifying differences in the chemical composition of the walls of bacteria grown under a variety of environmental and genetic conditions, but its throughput is often limited. Here, we present a straightforward procedure for the isolation and preparation of bacterial cell walls for biological analyses of peptidoglycan via HPLC and Ultra Performance Liquid Chromatography (UPLC), an extension of HPLC that utilizes pumps to deliver ultra-high pressures of up to 15,000 psi, compared with 6,000 psi for HPLC. In combination with the preparation of bacterial cell walls presented here, the low-volume sample injectors, detectors with high sampling rates, smaller sample volumes, and shorter run times of UPLC will enable high resolution and throughput for novel discoveries of peptidoglycan composition and fundamental bacterial cell biology in most biological laboratories with access to an ultracentrifuge and UPLC.

The bacterial cell wall is composed of peptidoglycan, a macromolecular network of sugar strands crosslinked by peptides. Ultra Performance Liquid Chromatography provides high resolution and throughput for novel discoveries of peptidoglycan composition. We present a procedure for the isolation of cell walls (sacculi) and their subsequent preparation for analysis via UPLC.

Ultra Performanslı Sıvı Kromatografisi ile Bileşimsel Analiz için Bakteriyel Hücre Duvarlarının İzolasyonu ve Hazırlanması

The bacterial cell wall is critical for the determination of cell shape during growth and division, and maintains the mechanical integrity of cells in the ...

Quantitative Detection of Trace Explosive Vapors by Programmed Temperature Desorption Gas Chromatography-Electron Capture Detector

The direct liquid deposition of solution standards onto sorbent-filled thermal desorption tubes is used for the quantitative analysis of trace explosive vapor samples. The direct liquid deposition method yields a higher fidelity between the analysis of vapor samples and the analysis of solution standards than using separate injection methods for vapors and solutions, i.e., samples collected on vapor collection tubes and standards prepared in solution vials. Additionally, the method can account for instrumentation losses, which makes it ideal for minimizing variability and quantitative trace chemical detection. Gas chromatography with an electron capture detector is an instrumentation configuration sensitive to nitro-energetics, such as TNT and RDX, due to their relatively high electron affinity. However, vapor quantitation of these compounds is difficult without viable vapor standards. Thus, we eliminate the requirement for vapor standards by combining the sensitivity of the instrumentation with a direct liquid deposition protocol to analyze trace explosive vapor samples.

Trace explosive vapors of TNT and RDX collected on sorbent-filled thermal desorption tubes were analyzed using a programmed temperature desorption system coupled to GC with an electron capture detector. The instrumental analysis is combined with direct liquid deposition method to reduce sample variability and account for instrumentation drift and losses.

Programlı Sıcaklık Sızdırma Gaz Kromatografi-Elektron Yakalama Dedektörü tarafından Trace Patlayıcı Buharlar Nicel Saptanması

The direct liquid deposition of solution standards onto sorbent-filled thermal desorption tubes is used for the quantitative analysis of trace explosive ...

Use of Stopped-Flow Fluorescence and Labeled Nucleotides to Analyze the ATP Turnover Cycle of Kinesins

The kinesin superfamily of microtubule associated motor proteins share a characteristic motor domain which both hydrolyses ATP and binds microtubules. Kinesins display differences across the superfamily both in ATP turnover and in microtubule interaction. These differences tailor specific kinesins to various functions such as cargo transport, microtubule sliding, microtubule depolymerization and microtubule stabilization. To understand the mechanism of action of a kinesin it is important to understand how the chemical cycle of ATP turnover is coupled to the mechanical cycle of microtubule interaction. To dissect the ATP turnover cycle, one approach is to utilize fluorescently labeled nucleotides to visualize individual steps in the cycle. Determining the kinetics of each nucleotide transition in the ATP turnover cycle allows the rate-limiting step or steps for the complete cycle to be identified. For a kinesin, it is important to know the rate-limiting step, in the absence of microtubules, as this step is generally accelerated several thousand fold when the kinesin interacts with microtubules. The cycle in the absence of microtubules is then compared to that in the presence of microtubules to fully understand a kinesin&#8217;s ATP turnover cycle. The kinetics of individual nucleotide transitions are generally too fast to observe by manually mixing reactants, particularly in the presence of microtubules. A rapid mixing device, such as a stopped-flow fluorimeter, which allows kinetics to be observed on timescales of as little as a few milliseconds, can be used to monitor such transitions. Here, we describe protocols in which rapid mixing of reagents by stopped-flow is used in conjunction with fluorescently labeled nucleotides to dissect the ATP turnover cycle of a kinesin.

Kinesins are characterized by nucleotide-dependent interaction with microtubules: a cycle of ATP turnover coupled to a cycle of microtubule interaction. Here, we describe protocols to analyze the kinetics of individual nucleotide transitions in the ATP turnover cycle of a kinesin using fluorescently labeled nucleotides and stopped-flow fluorescence.

Floresan-Akış durdu ve Etiketli Nükleotidlerinin Kullanım kinesinlerin ATP Ciro Döngüsü Analiz için

The kinesin superfamily of microtubule associated motor proteins share a characteristic motor domain which both hydrolyses ATP and binds microtubules. ...

Radiolabeling and Quantification of Cellular Levels of Phosphoinositides by High Performance Liquid Chromatography-coupled Flow Scintillation

Phosphoinositides (PtdInsPs) are essential signaling lipids responsible for recruiting specific effectors and conferring organelles with molecular identity and function. Each of the seven PtdInsPs varies in their distribution and abundance, which are tightly regulated by specific kinases and phosphatases. The abundance of PtdInsPs can change abruptly in response to various signaling events or disturbance of the regulatory machinery. To understand how these events lead to changes in the amount of PtdInsPs and their resulting impact, it is important to quantify PtdInsP levels before and after a signaling event or between control and abnormal conditions. However, due to their low abundance and similarity, quantifying the relative amounts of each PtdInsP can be challenging. This article describes a method for quantifying PtdInsP levels by metabolically labeling cells with 3H-myo-inositol, which is incorporated into PtdInsPs. Phospholipids are then precipitated and deacylated. The resulting soluble 3H-glycero-inositides are further extracted, separated by high-performance liquid chromatography (HPLC), and detected by flow scintillation. The labeling and processing of yeast samples is described in detail, as well as the instrumental setup for the HPLC and flow scintillator. Despite losing structural information regarding acyl chain content, this method is sensitive and can be optimized to concurrently quantify all seven PtdInsPs in cells.

Phosphoinositides are signaling lipids whose relative abundance rapidly changes in response to various stimuli. This article describes a method to measure the abundance of phosphoinositides by metabolically labeling cells with 3H-myo-inositol, followed by extraction and deacylation. Extracted glycero-inositides are then separated by high-performance liquid chromatography and quantified by flow scintillation.

Yüksek Performanslı Sıvı Kromatografi-birleştiğinde Akış Parıldama tarafından Radyoetiketleme ve Fosfoinosititler Hücresel Düzeylerinin Quantification

Phosphoinositides (PtdInsPs) are essential signaling lipids responsible for recruiting specific effectors and conferring organelles with molecular ...

Facile Preparation of 4-Substituted Quinazoline Derivatives

Reported in this paper is a very simple method for direct preparation of 4-substituted quinazoline derivatives from a reaction between substituted 2-aminobenzophenones and thiourea in the presence of dimethyl sulfoxide (DMSO). This is a unique complementary reaction system in which thiourea undergoes thermal decomposition to form carbodiimide and hydrogen sulfide, where the former reacts with 2-aminobenzophenone to form 4-phenylquinazolin-2(1H)-imine intermediate, whilst hydrogen sulfide reacts with DMSO to give methanethiol or other sulfur-containing molecule which then functions as a complementary reducing agent to reduce 4-phenylquinazolin-2(1H)-imine intermediate into 4-phenyl-1,2-dihydroquinazolin-2-amine. Subsequently, the elimination of ammonia from 4-phenyl-1,2-dihydroquinazolin-2-amine affords substituted quinazoline derivative. This reaction usually gives quinazoline derivative as a single product arising from 2-aminobenzophenone as monitored by GC/MS analysis, along with small amount of sulfur-containing molecules such as dimethyl disulfide, dimethyl trisulfide, etc. The reaction usually completes in 4-6 hr at 160 &#186;C in small scale but may last over 24 hr when carried out in large scale. The reaction product can be easily purified by means of washing off DMSO with water followed by column chromatography or thin layer chromatography.

A protocol for facile preparation of 4-substituted quinazoline derivatives from 2-aminobenzophenones, thiourea and dimethyl sulfoxide is presented.

4-Değiştirildi Kinazolin Türev kolay hazırlanması

Reported in this paper is a very simple method for direct preparation of 4-substituted quinazoline derivatives from a reaction between substituted ...

Using Capillary Electrophoresis to Quantify Organic Acids from Plant Tissue: A Test Case Examining Coffea arabica Seeds

Carboxylic acids are organic acids containing one or more terminal carboxyl (COOH) functional groups. Short chain carboxylic acids (SCCAs; carboxylic acids containing three to six carbons), such as malate and citrate, are critical to the proper functioning of many biological systems, where they function in cellular respiration and can serve as indicators of cell health. In foods, organic acid content can have significant impact on taste, with increased SCCA levels resulting in a sour or &#34;acid&#34; taste. Because of this, methods for the rapid analysis of organic acid levels are of particular interest to the food and beverage industries. Unfortunately, however, most methods used for SCCA quantification are dependent on time-consuming protocols requiring the derivatization of samples with hazardous reagents, followed by costly chromatographic and/or mass spectrometric analyses. This method details an alternate method for the detection and quantification of organic acids from plant material and food samples using free zonal capillary electrophoresis (CZE), sometimes simply referred to as capillary electrophoresis (CE). CZE provides a cost-effective method for measuring SCCAs with a low limit of detection (0.005 mg/ml). This article details the extraction and quantification of SCCAs from plant samples. While the method provided focuses on measurement of SCCAs from coffee beans, the method provided can be applied to multiple plant-based food materials.

Using Capillary Electrophoresis to Quantify Organic Acids from Plant Tissue: A Test Case Examining Coffea arabica Seeds

This article presents a method for the detection and quantification of organic acids from plant material using free zonal capillary electrophoresis. An example of the potential application of this method, determining the effects of a secondary fermentation on organic acid levels in coffee seeds, is provided.

Bitki Doku Organik Asit belirlememize Kılcal Elektroforez kullanma: Bir Test Case incelenmesi<em&gt; Coffea arabica</em&gt; Tohumlar

Carboxylic acids are organic acids containing one or more terminal carboxyl (COOH) functional groups. Short chain carboxylic acids (SCCAs; carboxylic ...

Raman and IR Spectroelectrochemical Methods as Tools to Analyze Conjugated Organic Compounds

In the presented work, two spectroelectrochemical techniques are discussed as tools for the analysis of the structural changes occurring in the molecule on the vibrational level of energy. Raman and IR spectroelectrochemistry can be used for advanced characterization of the structural changes in the organic electroactive compounds. Here, the step-by-step analysis by means of Raman and IR spectroelectrochemistry is shown. Raman and IR spectroelectrochemical techniques provide complementary information about structural changes occurring during an electrochemical process, i.e. allows for the investigation of redox processes and their products. The examples of IR and Raman spectroelectrochemical analysis are presented, in which the products of the redox reactions, both in solution and solid state, are identified.

A protocol of step-by-step Raman and IR spectroelectrochemical analysis is presented.

Raman ve IR spektroelektrokimyasal yöntemleri araçları olarak konjuge organik bileşikler çözümlemek için

In the presented work, two spectroelectrochemical techniques are discussed as tools for the analysis of the structural changes occurring in the molecule ...

A Two-Step Pyrolysis-Gas Chromatography Method with Mass Spectrometric Detection for Identification of Tattoo Ink Ingredients and Counterfeit Products

Tattoo inks are complex mixtures of ingredients. Each of them possesses different chemical properties which have to be addressed upon chemical analysis. In this method for two-step pyrolysis online coupled to gas chromatography mass spectrometry (py-GC-MS) volatile compounds are analyzed during a first desorption run. In the second run, the same dried sample is pyrolyzed for analysis of non-volatile compounds such as pigments and polymers. These can be identified by their specific decomposition patterns. Additionally, this method can be used to differentiate original from counterfeit inks. Easy screening methods for data evaluation using the average mass spectra and self-made pyrolysis libraries are applied to speed up substance identification. Using specialized evaluation software for pyrolysis GS-MS data, a fast and reliable comparison of the full chromatogram can be achieved. Since GC-MS is used as separation technique, the method is limited to volatile substances upon desorption and after pyrolysis of the sample. The method can be applied for quick substance screening in market control surveys since it requires no sample preparation steps.

This method for two-step pyrolysis online coupled to gas chromatography with mass spectrometric detection and data evaluation protocol can be used for multi-component analysis of tattoo inks and discrimination of counterfeit products.

Dövme mürekkebi maddeleri ve taklit ürünlerin tanımlanması için kütle spektrometrik tespiti ile Iki adımlı Pyrolysis-Gas Kromatografi yöntemi

Tattoo inks are complex mixtures of ingredients. Each of them possesses different chemical properties which have to be addressed upon chemical analysis. ...

Nitrogen Compound Characterization in Fuels by Multidimensional Gas Chromatography

Certain nitrogen-containing compounds can contribute to fuel instability during storage. Hence, detection and characterization of these compounds is crucial. There are significant challenges to overcome when measuring trace compounds in a complex matrix such as fuels. Background interferences and matrix effects can create limitations to routine analytical instrumentation, such as GC-MS. In order to facilitate specific and quantitative measurements of trace nitrogen compounds in fuels, a nitrogen-specific detector is ideal. In this method, a nitrogen chemiluminescence detector (NCD) is used to detect nitrogen compounds in fuels. NCD utilizes a nitrogen-specific reaction that does not involve the hydrocarbon background. Two-dimensional (GCxGC) gas chromatography is a powerful characterization technique as it provides superior separation capabilities to one-dimensional gas chromatography methods. When GCxGC is paired with a NCD, the problematic nitrogen compounds found in fuels can be extensively characterized without background interference. The method presented in this manuscript details the process for measuring different nitrogen-containing compound classes in fuels with little sample preparation. Overall, this GCxGC-NCD method has been shown to be a valuable tool to enhance the understanding of the chemical composition of nitrogen-containing compounds in fuels and their impact on fuel stability. The % RSD for this method is &#60;5% for intraday and &#60;10% for interday analyses; the LOD is 1.7 ppm and the LOQ is 5.5 ppm.

Here, we present a method utilizing two-dimensional gas chromatography and nitrogen chemiluminescence detection (GCxGC-NCD) to extensively characterize the different classes of nitrogen-containing compounds in diesel and jet fuels.

Çok Boyutlu Gaz Kromatografisi ile Yakıtlarda Azot Bileşik Karakterizasyonu

Certain nitrogen-containing compounds can contribute to fuel instability during storage. Hence, detection and characterization of these compounds is ...