This work was supported by Interdisciplinary Centre for Clinical Research IZKF Aachen (junior research group to E.A.L.) within the faculty of Medicine at RWTH Aachen University. We are grateful Dr. Rusu and Ashley Christina Vourakis for critical review of the manuscript and Mrs. Roya Soltan for the professional help with immunohistochemistry staining.

NOT: Bu yazıda sunulan deneyler Alman düşüğe ve Avrupa hayvan bakımı kurallarına uygun şekilde yapılmaktadır. hayvanlar Dr. R. Tolba ve Dr A. Teubner (hayvan refahı memuru) gözetiminde, Laboratuar Hayvan Bilimi Enstitüsü, Universiy hastane Aachen, Almanya Hayvan tesisinde yetiştirilmektedir. 1. Hayvan Bakımı <ol><li> Gıda ve uzman veteriner kontrol ve tedaviye uygun erişimi sağlama uzmanlaşmış bakım ünitesinde fareler tutun. Hayvanlar taşınmış veya dışarıdan satın alınması halinde, prosedür girmeden önce bir haftalık konaklama temin edebilirsiniz. </li></ol> 2. Entübasyon <ol><li> , 8-10 haftalık erkek C57BL / 6 vahşi tip fareler anestezi 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile 25-27 gr. Ayak tutam refleksleri ile anestezi düzeyini izleyin. İşlem sırasında kuruluğunu önlemek için gözleri veteriner merhem yerleştirin. </li><li&gt; kurumun hayvan bakımı yönergeleri izleyerek, cerrahi prosedür başlamadan önce buprenophine 0.1 mg / kg vücut ağırlığı subkutan ile ağrı tedavisi yönetin. </li><li> Steril malzeme ve araçları kullanarak ameliyat sırasında enfeksiyonları önlemek için steril koşullarda korunmasını sağlamak. </li><li> Isıtılmış ameliyat masasında sırtüstü pozisyonda anestezi fare yerleştirin. Küçük bir jilet kullanarak ventral boyun bölgesinde ve göğüs kafesinin sol yarısında hem saç kaldırmak ve kesi öncesinde% 70 alkol ile dezenfekte edin. <ol><li> Boyun merkezinde cerrahi makas kullanılarak 0.5 sm&#39;lik bir küçük ortalama kesisi. Deri altında, steril kavisli forseps ile 2 yağlı organları geçmesi ve kaplama kas açıklık yoluyla stereomicroscope altında trakea görselleştirmek. </li></ol></li><li> Stereomikroskopta (Şekil 1A) kullanarak sözlü görünüme altında trakea içine entübasyon kanül tanıtın. Bir uçtan bir uca, metal kanül ayırtşeffaf doku ugh. Ve her an (Şekil 1B) çalışma sırasında, konumunu ve yerini. </li><li> Küçük hayvan ventilatöre kanül bağlayın ve havalandırma ayarları Kullanıma göre ayarlamak ilkelerine uygun (100-150 ul ve min başına 100-150 arasında bir solunum hızı arasındaki tidal hacim) üretmektedir. </li></ol> 3. Miyokard Enfarktüsü İndüksiyon <ol><li> Xiphoid sol axila arasındaki çizginin ortasında bir cilt kesisi az 0,5 cm gerçekleştirin. Altta yatan kaburga kas tabakası ayırmak için forseps kullanabilir. </li><li> Göğüs boşluğu 17 açılana kadar küçük bir makas kullanarak kaburgalar arasında küçük bir kesi yapın. Kronik enfarktüs, 4. interkostal alana (Şekil 1D) &#39;de, 5. interkostal alana (Şekil 1C) ve / veya iskemi / reperfüzyon modeli için kesi gerçekleştirmek: daha kolay bir yöntem numarası 2 inci ve aşağıdan 3 th </sup&gt; interkostal boşluk, sırasıyla). </li><li> Göğüs boşluğu açmak ve kalp görselleştirmek için kesi içine Ekartörleri yerleştirin. </li><li> Dikkatle aşırı fibrotik süreçleri engellemek için perikard çıkarın. </li><li> Derin konumlandırılmış açık kırmızı gemisi olarak sol inen koroner arter (LAD) gözünüzde canlandırın. LAD görüntülenmiştir edilemezse, tekrarlanabilir artırmak için bazı referans noktaları göz önünde bulundurun. <ol><li> Kronik enfarktüs modeli için, Şekil 1C gösterildiği gibi referans olarak ven sahip (kulak kepçesi ve apeks arasında) kalbin ventral tarafında ortasında bitişik harfleri yerleştirin. Bir transmural anterior ve posterior enfarktüsü elde etmek için 0/7 ipek sütür kullanılarak arter hem dallarını Bind. Gri renkli ligature konumunu gösterir (Şekil 1 C) eğer ihtiyaç duyulursa tekrarlanabilir. </li><li> Iskemi / reperfüzyon modelinde, LAD ana gövdenin (Şekil 1D) üzerinden, kulak kepçesi altında bitişik harfleri yerleştirin. ligçalıçtırdıgınızda kap bütünlüğünü korumak için, bir silikon tüpe yer almaktadır. gri renk Enfarktüslü alanı gösterir ve tüm kalp (Şekil 1D) görünmelidir. Iskemi döneminde kaburga temporal sütür koyun ve doku kurumasını önlemek için bir kompres kullanarak nemlendirin. Iskemi sonrasında silikon tüp kaldırmak ve reperfüzyon görselleştirmek için küçük makas ile dikiş kesti. </li></ol></li><li> Prosedürün başında kullanılan anestezik ve analjezik (2.1 ve 2.2 adımları) yanında, hayvanın uygun konfor sağlamak ya da kurumun hayvan bakım kurallara uymayı ameliyat sırasında% 0.5 izofluran kullanın. </li></ol> 4. Sütür ve Kurtarma <ol><li> Sıcak izotonik tuz çözeltisi ile doldurularak toraks kalan havayı ortadan kaldırın. </li><li> 3 dikiş 0/6 (Şekil 2A ve 2B&#39;de gösterildiği gibi) ile boğaz kapatın. Olarak sağlamak için, 90 ° &#39;lik bir açı ile medial dikiş yerleştirinŞekil 2&#39;de gösterildiği gibi, kaburgaların kapatma ealed (Şekil 2A, B). </li><li> 2 dikiş (Şekil 2C) ve 3-4 sütür 0/6 (Şekil 2D) ile deri ile kas tabakası kapatın. Daha fazla ekokardiyografik ölçüm için uygun bir pencere elde etmek için ayrı ayrı bu sütürler gerçekleştirin. </li><li> Ventilatörden entübasyon kanül ayırın ve spontan bir nefes sağlar. Daha sonra kimlik, yerel sistem (Kurumunuzdan hayvan refahı memuru sor) kullanarak fare işaretleyin. </li><li> O uyanana kadar kırmızı lamba altında sol tarafta fare yattı. Yeterli bilinci yerine kadar gözetimsiz bir hayvan bırakmayın. Tamamen iyileşene kadar diğer hayvanların şirket olmak için ameliyat geçirmiş bir hayvan izin vermeyin. </li><li> Kurumunuzun hayvan bakımı yönergeleri izleyerek, önümüzdeki 3 gün boyunca buprenophine 0.1 mg / kg vücut ağırlığı, deri altından ile ağrı tedavisi yönetin. </li&gt; </ol> Miyokard İnfarktüsü 5. Analizi <ol><li> Ejeksiyon fraksiyonu, fraksiyonel kısalma, kalp debisi ve kalp boyutları: Düzenli ekokardiyografi (Şekil 3A) vasıtasıyla kalp fonksiyonlarının izlenmesi. </li><li> 100 mg / kg ketamin ve 10 mg / kg ksilazin intraperitonal enjeksiyonu ile hayvanlar anestezisi. Refleksleri eksikliği tarafından ameliyat öncesi uygun anesthetization onaylayın. </li><li> Göğüs boşluğu açın ve yoğun steril PBS solüsyonu yıkama kalan kanda yerleştirerek, kalp tüketim. </li><li> Gerekirse, göğüs boşluğundan, ya da kalbin çıkarıldıktan sonra infracted bölgelerin yaralanma kaçınarak kalp doğrudan kan toplamak. </li><li> Yıkandıktan sonra, doymuş KCl çözeltisi içinde Diastola kalp stop (steril PBS içinde 3M KCl süzülmüş). Histolojik analiz için% 10 formalin içinde kalbi düzeltmek ve Adım 5.7 ile devam edin. </li><li> Gerekirse, arabayı canlılığını ölçmekEvans-Mavi / Triphenyl tetrazolyum klorür (TTC) boyama ile kardiyak hücreleri. Yıkamadan ilk yerde bitişik harfleri yeniden sonra, aort kanülü kullanılarak 200 ul% 1 Evans mavi solüsyonla kalp serpmek ve -20 ° C&#39;de küçük bir plastik torba içinde kalp dondurma. <ol><li> 2 saat sonra, keskin bir bıçak kullanılarak 5 enine kaydırmaları ve imal tarafından tarif edildiği gibi, 37 ° C&#39;de TTC çözeltisi 10-15 dakika boyunca inkübe. % 10 formalin içinde 10 dakika süreyle slaytlar saptamak ve daha fazla analiz için mikroskopik slaytlar arasında koydu. </li><li> Enine bölümlendirilmeleri gerçekleştirmek için, ucunda kalbi konumlandırarak, parafin kalp dokusu gömün. 5 um&#39;lik bir seri bölümüne gerçekleştirin. İlk 20 bölümden toplayın ve bir sonraki 300 mikron atın. Mitral kapak seviyesi ulaşılıncaya kadar bölüm protokolü devam (Şekil 3A, B). Seri kesitler dışında tüm kalp boyunca 400 mikron toplanır ve f lekeli olabilirveya kalitatif ve kantitatif analiz. </li></ol></li><li> Gomori en tek-adım 6-8 boyama kullanarak enfarktüs boyutunu ölçün. </li><li> Her zamanki immünohistolojik boyama kullanarak seri bölümde anjiogenezisi, kollajen içeriği veya iltihap hücreleri işe analiz edin. </li></ol>

<ol>
	<li>Liehn, E. A., Postea, O., Curaj, A., Marx, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repair+after+myocardial+infarction,+between+fantasy+and+reality:+the+role+of+chemokines.">Repair after myocardial infarction, between fantasy and reality: the role of chemokines.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2357-2362 (2011).</li><li>Liehn, E. A., Radu, E., Schuh, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokine+contribution+in+stem+cell+engraftment+into+the+infarcted+myocardium.">Chemokine contribution in stem cell engraftment into the infarcted myocardium.</a> Curr Stem Cell Res Ther. 8 (4), 278-283 (2013).</li><li>Alexander, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Repetitive+transplantation+of+different+cell+types+sequentially+improves+heart+function+after+infarction.">Repetitive transplantation of different cell types sequentially improves heart function after infarction.</a> J Cell Mol Med. 16 (7), 1640-1647 (2012).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Compartmentalized+protective+and+detrimental+effects+of+endogenous+macrophage+migration-inhibitory+factor+mediated+by+CXCR2+in+a+mouse+model+of+myocardial+ischemia/reperfusion.">Compartmentalized protective and detrimental effects of endogenous macrophage migration-inhibitory factor mediated by CXCR2 in a mouse model of myocardial ischemia/reperfusion.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 33 (9), 2180-2186 (2013).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ccr1+deficiency+reduces+inflammatory+remodelling+and+preserves+left+ventricular+function+after+myocardial+infarction.">Ccr1 deficiency reduces inflammatory remodelling and preserves left ventricular function after myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 12 (2), 496-506 (2008).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+new+monocyte+chemotactic+protein-1/chemokine+CC+motif+ligand-2+competitor+limiting+neointima+formation+and+myocardial+ischemia/reperfusion+injury+in+mice.">A new monocyte chemotactic protein-1/chemokine CC motif ligand-2 competitor limiting neointima formation and myocardial ischemia/reperfusion injury in mice.</a> J Am Coll Cardiol. 56 (22), 1847-1857 (2010).</li><li>Liehn, E. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Double-edged+role+of+the+CXCL12/CXCR4+axis+in+experimental+myocardial+infarction.">Double-edged role of the CXCL12/CXCR4 axis in experimental myocardial infarction.</a> J Am Coll Cardiol. 58 (23), 2415-2423 (2011).</li><li>Oral, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXC+chemokine+KC+fails+to+induce+neutrophil+infiltration+and+neoangiogenesis+in+a+mouse+model+of+myocardial+infarction.">CXC chemokine KC fails to induce neutrophil infiltration and neoangiogenesis in a mouse model of myocardial infarction.</a> J Mol Cell Cardiol. 60, 1-7 (2013).</li><li>Projahn, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Controlled+intramyocardial+release+of+engineered+chemokines+by+biodegradable+hydrogels+as+a+treatment+approach+of+myocardial+infarction.">Controlled intramyocardial release of engineered chemokines by biodegradable hydrogels as a treatment approach of myocardial infarction.</a> J Cell Mol Med. 18 (5), 790-800 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Novel+insights+into+the+mechanism+of+cell-based+therapy+after+chronic+myocardial+infarction.">Novel insights into the mechanism of cell-based therapy after chronic myocardial infarction.</a> Discoveries. 1 (2), e9 (2014).</li><li>Schuh, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+SDF-1+alpha+on+Endogenous+Mobilized+and+Transplanted+Stem+Cells+in+Regeneration+after+Myocardial+Infarction.">Effect of SDF-1 alpha on Endogenous Mobilized and Transplanted Stem Cells in Regeneration after Myocardial Infarction.</a> Curr Pharm Des. 20 (12), 1964-1970 (2013).</li><li>Zaragoza, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+cardiovascular+diseases.">Animal models of cardiovascular diseases.</a> J Biomed Biotechnol. 2011, 497841 (2011).</li><li>Kanzler, I., Liehn, E. A., Koenen, R. R., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anti-inflammatory+therapeutic+approaches+to+reduce+acute+atherosclerotic+complications.">Anti-inflammatory therapeutic approaches to reduce acute atherosclerotic complications.</a> Curr Pharm Biotechnol. 13 (1), 37-45 (2012).</li><li>Liehn, E. A., Zernecke, A., Postea, O., Weber, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines:+inflammatory+mediators+of+atherosclerosis.">Chemokines: inflammatory mediators of atherosclerosis.</a> Arch Physiol Biochem. 112 (4-5), 229-238 (2006).</li><li>Kolk, M. V. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=LAD-Ligation:+A+Murine+Model+of+Myocardial+Infarction.">LAD-Ligation: A Murine Model of Myocardial Infarction.</a> J. Vis. Exp. (32), 1438 (2009).</li><li>Ryu, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Implantation+of+bone+marrow+mononuclear+cells+using+injectable+fibrin+matrix+enhances+neovascularization+in+infarcted+myocardium.">Implantation of bone marrow mononuclear cells using injectable fibrin matrix enhances neovascularization in infarcted myocardium.</a> Biomaterials. 26 (3), 319-326 (2005).</li><li>Frobert, A., Valentin, J., Cook, S., Lopes-Vicente, J., Giraud, M. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-based+Therapy+for+Heart+Failure+in+Rat:+Double+Thoracotomy+for+Myocardial+Infarction+and+Epicardial+Implantation+of+Cells+and+Biomatrix.">Cell-based Therapy for Heart Failure in Rat: Double Thoracotomy for Myocardial Infarction and Epicardial Implantation of Cells and Biomatrix.</a> J. Vis. Exp. (91), e51390 (2014).</li><li>Xu, Z., Alloush, J., Beck, E., Weisleder, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Murine+Model+of+Myocardial+Ischemia-reperfusion+Injury+through+Ligation+of+the+Left+Anterior+Descending+Artery.">A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery.</a> J. Vis. Exp. (86), e51329 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

İşlem sırasında, bazı kritik noktalara dikkat edilmesi vardır: entübasyon, açılış göğüs boşluğu ve LAD bağ. ilk kritik adım denemelerinde önce hayvanın entübasyon olduğunu. Birçok grup trakea içine doğrudan kanül eklemek için fare ve ışık kaynağı sabitleme için dikey destek kullanıyorsunuz. Bu yöntem, belirsizlik trakea içine kanül doğru takılmasını ilişkin vardır ve acemiler tarafından en başarısız eğilimli. Küçük bir kesi yapmak, kanül konumu dolayısıyla varsayılan oranını azaltarak, tüm manevra sırasında kontrol edilebilir. Ayrıca, trakeotomi böylece komplikasyonların azaltılmasında ve çalışma süresini azaltarak, aştı. Bir sonraki adım, kritik göğüs boşluğunun açılması olduğunu. median sternotomi hayvanların kurtarma geciktirerek yüksek risk manevrasını temsil eder. 2-3 kaburgaların 15 kesim ima yanal sol kesi </sup&gt;, eksik toparlanma ve artmış mortalite yol açar. Biz asgari yükü sunan kaburga arasındaki modeli küçük, ayrık kesi kullanılan. Hayvanlar ameliyattan sonra çok hızlı bir şekilde kurtarmak ve mevcut kusurları veya rahatsız şifa yapamaz. Alt arası costal alan bir referans noktası olarak alınır. Bu göz önüne alındığında, kronik ve iskemi / reperfüzyon modeli için bağ yere doğru ve farklılaştırılmış erişim, ciddi sorunlar yükseltmek değil. bağ kendisi en kritik adımı temsil etmektedir. sol inen koroner arter görüntülenmiştir zordur ve genellikle olmadan görünümü bağlı olması gerekir. Bu nedenle, bazı anatomik referans noktaları doğru ligasyonu gerçekleştirmek için cerrah yardımcı işaret edilmektedir. Kronik enfarktüs modeli için, bağ majör ön ven (Şekil 2B) biten üstünde, kulak kepçesi ve apeks arasında, kalbin ventral tarafında ortasında yer alıyor. verim contro edilebiliretkilenen bölgelerde gri renk görünümünü görselleştirme ile lled. Enfarktüslü alan anterior görünür ve arka duvarı içermiyorsa, yeni bir dikiş ilk dikiş soluna yerleştirilebilir. LAD ana kök bu bölümünü tespitinde ciddi sorunlar söz konusu değildir, bu nedenle kulak kepçesi 18 altında her zaman görülebilir ve. Ancak, kulak kepçesi kanama riskini önemli sunar ve dikkatle ele alınması gerekir. prosedür uygun ekipman varlığı ile sınırlıdır. Küçük hayvanlar için bir vantilatör ve uygun anestezi sistemi pahalı ve oda gaz ve havalandırma sistemine bağlantı gerektirir. Dahası, hayvanların yakın bir gözetim prosedürü olası klinik tespit etmek sonra ilk hafta içinde gereklidir. Deney sırasında kalp fonksiyonunu incelemek için, yüksek çözünürlüklü ultrason, karmaşık Langendorf perfüzyon sistemi, ya da küçük intraventriküler kateter ölçümleri gereklidir, invyüksek maliyetler ve ek uzmanlık SORUN. Miyokard infarktüsü göz önüne alındığında, in vitro olayların karmaşıklığını yeniden kullanılabilir hiçbir alternatif yöntemler var. Ilgi alanına bağlı olarak, Langendorff sisteminde izole kalp ex vivo perfüzyon farklı uyaranlara veya ilaçlara yanıt kontraktilite, kalp fonksiyonlarının ve miyokard canlılığı hakkında bilgi sağlar. Bununla birlikte, kan bileşiklerinin ve bağışıklık sisteminin tüm müdahaleler hariç ve miyokardiyal enfarktüs sonrası yeniden modellendirme ve iyileştirme uzun çalışmalar için endike değildir. Miyokard enfarktüsü işlemini gerçekleştirdikten sonra, diğer tüm fonksiyonel analiz intraventriküler basınç ölçümlerinde, ultrason (küçük hayvan ultrason sistemleri) veya izole kalp Langendorff-perfüzyon gibi yapılabilir. Ayrıca, tüm biyolojik ve moleküler analizi, ge hücreleri, proteinler, mRNA&#39;lar, microRNA tespit etmek gerçekleştirilebilirnes veya miyokard enfarktüsü için yeni tedavi stratejileri geliştirmek için terapötik hedefler olarak kullanılabilecek diğer biyobelirteçler.

Miyokard infarktüsü sanayileşmiş ülkelerde başlıca ölüm nedenlerinden biridir. Tanı ve tedavi yaklaşımlarının yadsınamaz gelişmelere rağmen, kalp damar hastalıkları hala mortalitenin en önemli nedenidir. Geliştirilmiş yaşam beklentisi ve yaşam ile ilgili riskleri göz önüne alındığında, kardiyovasküler hastalıkların görülme sıklığında sürekli bir artış gelecekte bekleniyor. Bu nedenle, kardiyovasküler hastalığın tedavisi için yeni yaklaşımlar kurmak ve doğrulamak için bir ihtiyaç vardır. İnsan çalışmaların bilgi sınırlamalar muzdarip, bu çalışmalar genellikle açıklamak ve bu önemli sağlık problemlerine çözümler sunmak yerine getiremediğini, moleküler düzeyde mekanizmaları anlamak için yeterli değildir. Ayrıca, temel araştırma laboratuarda kardiyovasküler hastalık mekanizmalarını üretmek için karmaşıklığı ve zorluk nedeniyle sınırlıdır. Bu nedenle, kardiyo patofizyolojisi hakkındaki bilgilerimizi artırmak içindamar hastalıkları, bu hayvan modelleri 1,2 doğrulamak için gereklidir. Bununla birlikte, hayvan deneylerinde, çok sayıda neden gerekli olan farklı zaman noktalarında, miyokardiyal enfarktüs, analizden sonra iyileşmesinde rol oynayan moleküler olayların her kaskadlar tespit etmek. Miyokard infarktüsü deneyleri genelde hayvan modelleri kullanılarak yapılmaktadır. Küçük hayvanlarda 3-11 miyokard infarktüsü uyaran büyük hayvan modellerinde daha hücresel ve moleküler olayları incelemek için kullanılan en uygun ve verimli bir modeldir. Dahası, hiçbir diğer türler fareler 12 olarak transgenik ya da nakavt suşları kullanılabilirliğini sunuyor. Bu fare modelleri 13,14 (stent restenozu, ateroskleroz gibi) kalp damar rahatsızlıkları da dahil olmak üzere diğer hastalıklar, son derece yararlıdır. Buna ek olarak, düşük gebelik dönemi ve yavru sayısının yüksek miyokard INFA moleküler mekanizmaları incelemek için en cazip sistem olarak fare modelleri nitelemekrction 12. Bununla birlikte, farelerde kalp boyutu mikrocerrahi sırasında manipülasyon yüksek hassasiyet bekliyor. Böyle nitelikli ve vasıflı personel cerrahi öğretmek bir zaman tüketen ve iş yoğun bir süreçtir. Bu nedenle, biz burada böyle farelerde karmaşık miyokard infarktüsü modeli gerçekleştirmek için öğrenci veya teknisyen olarak bile ortalama niteliklere sahip işbirlikçileri, rehberlik ipuçları ve püf noktaları da dahil olmak üzere ayrıntılı bir mikrocerrahi prosedürü sunuyoruz. Başlangıçta, entübasyon trakeotomi kullanmadan kısa bir kanül vasıtası ile gerçekleştirilir. Torasik kesi kaburga ve / veya çevre dokulara yaralanması kaçınarak, interkostal bölgede yer almaktadır. Bu alt-adım hızlı toparlanma ve iyileşme 15 sağlamak için büyük önem taşımaktadır. hala önemli bir enfarktüs büyüklüğünü korurken bağ, yüksek hayatta kalma oranı, kronik iskemi ve iskemi / reperfüzyon modelleri için diferansiyeli yapılır. Deneyimlerimiz tha gösteriyoripek sütür kullanılarak t kriyo-yaralanmalar 16 kıyasla daha yüksek bir tekrarlanabilirlik sağlar. Sonuç olarak, burada tarif edilen yöntem, küçük hayvanlarda hem kronik iskemi ve iskemi / reperfüzyon modellerinde uygulanabilir. Bu prosedürde sunulan ipuçları ve püf noktaları, küçük hayvan modellerinde uygulamak bile düşük ya da ortalama yeterlilik ile personel sağlamak içindir.

<table><tbody><tr><td>Stereomicroscope</td><td>Olympus</td><td>SZ/X9</td><td></td></tr><tr><td>Mouse ventilator</td><td>Harvard Apparatus</td><td>730043</td><td>Model Minient 845</td></tr><tr><td>Dual Anesthesia System (Tabletop Version)</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td>Selfcontained isofluranebased anesthesia unit for use on lab tables, with a compact 8&quot; x 11&quot; footprint.&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>Intubation cannula</td><td>Harvard Apparatus</td><td>732737</td><td></td></tr><tr><td>Forceps</td><td>FST, Germany</td><td>9119700</td><td>standard tip curved 0.17 mm x 0.1 mm</td></tr><tr><td>Scissors</td><td>FST, Germany</td><td>9146011</td><td>straight</td></tr><tr><td>Vannas scissor</td><td>Aesculap, Germany</td><td>OC 498 R</td><td></td></tr><tr><td>Retractors</td><td>FST, Germany</td><td>1820010</td><td>2.5mm wide</td></tr><tr><td>Retractors</td><td>FST, Germany</td><td>1820011</td><td>5 mm wide</td></tr><tr><td>Wire handles</td><td>FST, Germany</td><td>1820005</td><td>&amp;nbsp;10 cm</td></tr><tr><td>Wire handles</td><td>FST, Germany</td><td>1820006</td><td>&amp;nbsp;14 cm</td></tr><tr><td>Ketamine 10%</td><td>CEVA, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Xylazine 2%</td><td>Medistar, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Bepanthene eye and nose cream</td><td>Bayer, Germany</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Silicon tube</td><td>IFK Isofluor, Germany</td><td>custommade&amp;nbsp; product</td><td>diameter 500 &amp;micro;m</td></tr><tr><td>section thickness 100 &amp;micro;m</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>polytetrafluorethylene catheter</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>PROLENE Suture 6/0&amp;nbsp;</td><td>ETHICON</td><td>8707H</td><td>polypropylene monofilament suture, unresorbable, needle CC1, 13 mm, 3/8 Circle</td></tr><tr><td>7/0 Silk</td><td>Seraflex</td><td>IC 1005171Z</td><td></td></tr><tr><td>Ultrasound&amp;nbsp;</td><td>Vevo, Canada</td><td>770 Vevo</td><td></td></tr></tbody></table>

minimal invasive surgical procedure of inducing myocardial infarction in mice

Miyokard infarktüsü hala son yıllarda stent geliştirme alanında önemli ilerlemelere rağmen, batı ülkelerinde ölüm ana nedeni olmaya devam etmektedir. Altında yatan mekanizmaların aydınlatılması ve yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesi için, geçerli hayvan modellerinde durumu zorunludur. Biz miyokard enfarktüsü mücadele in vivo koşullarda altında kalp ve damar hastalıkları patomekanizmaların yeni anlayışlar gerektiğinden, hayvan modelinin geçerliliği önemli bir yönüdür. Bununla birlikte, hayvan koruma, bu bağlamda oldukça önemlidir. Bu nedenle, bir yüksek tekrarlanabilirlik ve hayvanların hayatta kalma oranını garanti farelerde miyokard infarktüsü minimal invaziv ve basit bir model kurmak. Böylece, bu modeller hayvan deneyleri için 3R prensibi gereksinimlerini (Yedek, Sadeleştirme ve Azaltma) yerine getirir ve cardiov için terapötik stratejilerin daha gelişmekte için gerekli olan bilimsel bilgileri teminascular hastalıkları.

miyokard enfarktüsü prosedürü 25-30 dakika içinde meydana gelir ve% 10 mortalite oranını gösterir. Ameliyattan sonra, fareler sonraki 15 dakika içinde anestezi kurtarmak. Hiçbir fiziksel bozukluk işletilen fare gözlendi. Tamir işlemleri inflamatuar aşamasında rahatsız Ancak, post-kronik miyokard enfarktüsü sonrası kalp rüptürü riski daha yüksek bir hafta var. Kalp pompalama sırasında önemli ölçüde boyutlarını değiştirmek mümkün olduğundan, tüm toplanan kalpleri Diastola örneğin, aynı pozisyonda durdurulması için, önemlidir. Bu, doymuş KCI çözeltisi ile kalp perfüze ile elde edilebilir. Hücre-dışı K + konsantrasyonu blokları iyonik pompalar artan kalp aktivitesinin diyastolik durması ile sonuçlanan kardiyak hücreler membran dinlenme potansiyelini azaltır. enfarktüs alanı ultrason analizi (Şekil 3A, alt panel) görülebilir. KıyaslaNormal miyokard, iskemik bölgeler ince ve hipokinetik (Şekil 3A, üst panel) görünür. Kullanılan modele bağlı olarak, enfarktüs boyutu değişir. İskemi / reperfüzyon, ince, orta duvar indükler ve kalp (Şekil 3C) içinde ise, kronik enfarktüs modeli, apeks (Şekil 3B), dairesel, transmural enfarktüs indükler. Enfarktüs boyutunu belirlemek için birçok yöntem vardır. Amaç kalp canlılığı üzerinde doğrudan etkisi analiz ise, 18 boyama bir Evans-Mavi / TTC miyokardiyumun herhangi bir değişiklik görmek mümkün, en az 2 saat reperfüzyon sonrasında yapılması gösterilir. Bölümler boyama hemen sonra (Şekil 3B, orta panel) analiz edilebilir veya 2-3 gün (Şekil 3C, orta panel) için formalin içerisinde, cam slaytlar arasında tutulabilir. mavi alan iskemi etkilenmez sağlıklı miyokardı, temsil eder. kırmızı alan th içinde canlı miyokard temsile iskemik alanı (risk miyokard), beyaz alan ölü dokuyu temsil eder. Genellikle, enfarktüs boyutu risk alanından yüzdesi olarak ifade edilir. işlemleri biçimlenme sonra elde edilen, olgun yara kolayca Gomori en tek-aşamalı bir boyası ile immunohistolgy ile ölçülebilir. Blue lekeli enfarkte ve kırmızı lekeli sağlıklı ventriküler alanları (Şekil 3B ve C, sağ panel), mitral kapak kadar her düzeyde ilk bölümünde belirlenmiştir. , Farklı seviyelerde LAD bağlanması ile değişimini önlemek için, tüm bölümünden enfarktüsü olarak kabul edilir ve toplam sol ventrikül hacminin bir yüzdesi olarak ifade edilir. Kronik enfarktüs modelinde ve% 10-15 iskemi / reperfüzyon modelinde sonra% 15-20 arasında bir enfarktüs hacmi elde edilebilir. Bundan başka, kronik enfarkt modeli abartılı şekilde genişleme neden olacaktır, iskemi / reperfüzyon modelinde gözlemlenmemiştir (Şekil 3B ve C right panel). Gibi kullanılabilir geleneksel boyama işlemleri: CD31 anjiyojenezi ortaya çıkarmak için kullanılan boyama (kırmızı, Şekil 4A) veya düz kas aktini boyama miyofibroblastlar (yeşil, Şekil 4B) belirlemek gerekmektedir. Çift floresan boyama, aynı zamanda kardiyomiyositlerin mevcut olmaması otomatik immünofloresan (Şekil 4C) verir, enfarktüs alanında farklı hedef molekülleri tanımlamak için uygulanabilir. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/52197/52197fig1.jpg" /> Şekil 1: Medial insizyon ve entübasyon en kanül (A) ekleme. doku (B) açıklık yoluyla metal kanül stereomicroscopic görselleştirme. trakea halkaları (mavi oklar) ve kanül (siyah ok) işaret edilmektedir. Kronik enfarktüs mo için interkostal insizyondel ve LAD bağ (C). bağ referans olarak (mavi şematik, alt panel) ven ucunu alarak (kulak kepçesi ve apeks, alt panelde siyah arasında) kalbin ortasında yer almaktadır. Arterin iki kol (alt panelde kırmızı) bağlı olması. gri renk Enfarktüslü alanı gösterir ve kalbin (sağ alt panel) alt yarısı kısmında görünür. iskemi / reperfüzyon modeli için bağ, bir silikon tüpe (sağ taraf) (D) üzerindeki LAD ana gövdesini (alt panel kırmızı) bağlanma, kulak kepçesi altında yapılır. gri renk, tüm kalp (sağ alt panel) üzerindeki mevcut infracted alanı gösterir. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig2.jpg" /> Şekil 2: </strOng&gt; kaburga dikiş contalar göğüs medial dikiş hem kronik (A) 90 ° &#39;lik bir açı ile konumlandırılmıştır halinde insizyon ve iskemi / reperfüzyon (B, sol panel) kaburga dikiş., in vivo görüntüleme (Cı, sol panel ), kas sütür (C orta panel) ve cilt sütür (C sağ panel). <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 3," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig3.jpg" /> Şekil 3: Ekokardiyografik görüntüler. Normal (A, üst panel) ve enfarkte alanlar (A, alt panel) görüntüleri, uzun eksende edinilen (boyuna, sol paneller) veya kısa eksen (enine, sağ paneller) &#39;de .. İnfarkt kronik dikilen tarafından uyarılan(B) ve reperfüzyon (C) ile, ardından bir saat iskemi. Evans Mavi / TTC lekelemesi perfüze (mavi) tanımlanmasını / perfüze olmayan alanlar gibi canlı (kırmızı) / ölü (beyaz) miyokard (B, C, orta paneller) sağlar. Gomori en tek adım boyama enfarkte alanlar (mavi) belirlenmesini sağlar ve normal bölgeler (kırmızı) (B, C, sağ paneller) onları ayırır. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/52197/52197fig3large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="Şekil 4," src="/files/ftp_upload/52197/52197fig4.jpg" /> Şekil 4: Farklı renklendirmeler gibi tarif edilen yeni-anjiyogenez ile CD31 (A, kırmızı, basit oklar) veya miyofibroblastlar için düz kas aktini (B, g, infracted bölgede gerçekleştirilebilirReen basit oklar) yanı sıra çift boyama (Cı-CD31-kırmızı / düz kas aktin-yeşil)) çekirdek (mavi DAPI ile karşıt. Miyofibroblastlar daima endotel tabakasının (C oklar) eşlik küçük ya da büyük arterlerden düz kas hücreleri, kolayca ayırt edilebilir. Çift oklar eritrosit otofloresans etmektedir. Ölçek 50 mikron barlar.

Watch this Scientific Journal Video about Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice at JoVE.com

Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Farelerde Miyokard İnfarktüsü Oluşturan Minimal İnvaziv Cerrahi Prosedür

Myocardial infarction still remains the main cause of death in western countries, despite considerable progress in the stent development area in the last ...

minimal-invasive-surgical-procedure-inducing-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

27.5K Görüntüleme.  RWTH Aachen University, Germany. A highly reproducible model for myocardial infarction in mice with minimal invasive manipulations is described. The model can be easily performed, resulting in a high reproducibility and survival rate. Thus, the described model will reduce the number of required animals as requested by the 3R principle (Replacement, Refinement and Reduction).

Video: Minimal Invasive Surgical Procedure of Inducing Myocardial Infarction in Mice

Coronary Artery Ligation and Intramyocardial Injection in a Murine Model of Infarction

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo. With the advent of genetic modifications to the whole organism or the myocardium and an array of biological and/or synthetic materials, there is great potential for any combination of these to assuage the extent of acute ischemic injury and impede the onset of heart failure pursuant to myocardial remodeling. 
Here we present the methods and materials used to reliably perform this microsurgery and the modifications involved for temporary (with reperfusion) or permanent coronary artery occlusion studies as well as intramyocardial injections. The effects on the heart that can be seen during the procedure and at the termination of the experiment in addition to histological evaluation will verify efficacy. 
Briefly, surgical preparation involves anesthetizing the mice, removing the fur on the chest, and then disinfecting the surgical area. Intratracheal intubation is achieved by transesophageal illumination using a fiber optic light. The tubing is then connected to a ventilator. An incision made on the chest exposes the pectoral muscles which will be cut to view the ribs. For ischemia/reperfusion studies, a 1 cm piece of PE tubing placed over the heart is used to tie the ligature to so that occlusion/reperfusion can be customized. For intramyocardial injections, a Hamilton syringe with sterile 30gauge beveled needle is used. When the myocardial manipulations are complete, the rib cage, the pectoral muscles, and the skin are closed sequentially. Line block analgesia is effected by 0.25% marcaine in sterile saline which is applied to muscle layer prior to closure of the skin. The mice are given a subcutaneous injection of saline and placed in a warming chamber until they are sternally recumbent. They are then returned to the vivarium and housed under standard conditions until the time of tissue collection. At the time of sacrifice, the mice are anesthetized, the heart is arrested in diastole with KCl or BDM, rinsed with saline, and immersed in fixative. Subsequently, routine procedures for processing, embedding, sectioning, and histological staining are performed. 
Nonsurgical intubation of a mouse and the microsurgical manipulations described make this a technically challenging model to learn and achieve reproducibility. These procedures, combined with the difficulty in performing consistent manipulations of the ligature for timed occlusion(s) and reperfusion or intramyocardial injections, can also affect the survival rate so optimization and consistency are critical.

Numerous genetic manipulations and/or intramyocardial injections of genes, proteins, cells, and/or biomaterials are superimposed upon the dimension of time in studies of acute ischemia/ reperfusion injury and chronic remodeling in mice. This video illustrates the microsurgical procedures for ischemia/reperfusion, permanent coronary artery ligation, and intramyocardial injection studies.

Enfarktüsü bir murin Model Koroner Arter ligasyon ve intramiyokardiyal Enjeksiyon

Mouse models are a valuable tool for studying acute injury and chronic remodeling of the myocardium in vivo.  With the advent of genetic modifications to ...

Tıp

Modified Technique for Coronary Artery Ligation in Mice

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI we need better knowledge about pathophysiology of myocardial ischemia. This knowledge may be valuable to define new therapeutic targets for innovative cardiovascular therapies4. Experimental MI model in mice is an increasingly popular small-animal model in preclinical research in which MI is induced by means of permanent or temporary ligation of left coronary artery (LCA)5. In this video, we describe the step-by-step method of how to induce experimental MI in mice.
The animal is first anesthetized with 2% isoflurane. The unconscious mouse is then intubated and connected to a ventilator for artificial ventilation. The left chest is shaved and 1.5 cm incision along mid-axillary line is made in the skin. The left pectoralis major muscle is bluntly dissociated until the ribs are exposed. The muscle layers are pulled aside and fixed with an eyelid-retractor. After these preparations, left thoracotomy is performed between the third and fourth ribs in order to visualize the anterior surface of the heart and left lung. The proximal segment of LCA artery is then ligated with a 7-0 ethilon suture which typically induces an infarct size ~40% of left ventricle. At the end, the chest is closed and the animals receive postoperative analgesia (Temgesic, 0.3 mg/50 ml, ip). The animals are kept in a warm cage until spontaneous recovery.

The surgical procedure used to induce experimental myocardial infarction in mice begins with left thoracotomy between the third and the fourth ribs in order to visualize the anterior surface of the heart and left lung. The left coronary artery is ligated, the chest is closed and the mouse is allowed to recover spontaneously.

Fare Koroner Arter Ligasyonu için Modifiye Tekniği

Myocardial infarction (MI) is one of the most important causes of mortality in humans1-3. In order to improve morbidity and mortality in patients with MI ...

A Murine Model of Myocardial Ischemia-reperfusion Injury through Ligation of the Left Anterior Descending Artery

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms at work during MI and developing effective therapeutic approaches requires methodology to reproducibly simulate the clinical incidence and reflect the pathophysiological changes associated with MI. Here, we describe a surgical method to induce MI in mouse models that can be used for short-term ischemia-reperfusion (I/R) injury as well as permanent ligation. The major advantage of this method is to facilitate location of the left anterior descending artery (LAD) to allow for accurate ligation of this artery to induce ischemia in the left ventricle of the mouse heart. Accurate positioning of the ligature on the LAD increases reproducibility of infarct size and thus produces more reliable results. Greater precision in placement of the ligature will improve the standard surgical approaches to simulate MI in mice, thus reducing the number of experimental animals necessary for statistically relevant studies and improving our understanding of the mechanisms producing cardiac dysfunction following MI. This mouse model of MI is also useful for the preclinical testing of treatments targeting myocardial damage following MI.

We introduce a surgical method to induce experimental ischemia/reperfusion (I/R) injury to simulate myocardial infarction (MI) in mouse models that allows for more clarity in positioning of the ligation on the left anterior descending artery (LAD) to increase the reproducibility of MI experiments in mice.

Sol ön inen arter ligasyonu ile Miyokard İskemi-reperfüzyon Hasarı bir fare modeli

Acute or chronic myocardial infarction (MI) are cardiovascular events resulting in high morbidity and mortality. Establishing the pathological mechanisms ...

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that MicroCT provides quantitative high-resolution three-dimensional (3D) anatomical data non-destructively and longitudinally. Most importantly, with the development of a novel preclinical iodinated contrast agent called eXIA160, functional and metabolic assessment of the heart became possible. However, prior to the advent of commercial MicroCT scanners equipped with X-ray flat-panel detector technology and easy-to-use cardio-respiratory gating, preclinical studies of cardiovascular disease (CVD) in small animals required a MicroCT technologist with advanced skills, and thus were impractical for widespread implementation. The goal of this work is to provide a practical guide to the use of the high-speed Quantum FX MicroCT system for comprehensive determination of myocardial global and regional function along with assessment of myocardial perfusion, metabolism and viability in healthy mice and in a cardiac ischemia mouse model induced by permanent occlusion of the left anterior descending coronary artery (LAD).

In Vivo Quantitative Assessment of Myocardial Structure, Function, Perfusion and Viability Using Cardiac Micro-computed Tomography

This method outlines the use of Quantum Micro-Computed Tomography (MicroCT) to assess cardiac morphology, function, perfusion, metabolism and viability with iodinated contrast agent in mice with experimentally-induced myocardial ischemia. The technique can be applied for non-destructive high-throughput longitudinal in vivo imaging of various animal models of human heart disease.

Miyokard Yapı, Fonksiyon Vivo Kantitatif Değerlendirilmesi yılında Perfüzyon ve Canlılık Kardiyak Mikro-bilgisayarlı Tomografi ile

The use of Micro-Computed Tomography (MicroCT) for in vivo studies of small animals as models of human disease has risen tremendously due to the fact that ...

Biyomühendislik

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine models of MI with permanent ligation of left-anterior descending (LAD) coronary artery closely mimics MI in humans. Murine models benefit from the extensive genetic engineering available nowadays. Here we propose a reproducible murine surgical model of myocardial infarction by permanent LAD coronary ligation. Our technique comprises anesthesia with ketamine/xylazine that can be rapidly reversed by administration of an antagonist, intubation without tracheotomy for mechanical-assisted ventilation, ventilation with application of extrinsic positive end-expiratory pressure (PEEP) to avoid alveolar collapse, a thoracotomy method limiting to the minimum surgical lesions made to skeletal muscles, and lung inflation without thoracentesis. This method is sparsely invasive, reproducible and reduces post-surgery mortality and complications.

Herein we describe a surgical procedure showing how to achieve permanent ligation of the left-anterior descending coronary artery in mice. This model is of high relevance to investigate the pathophysiology of myocardial infarction and the concomitant biological processes.

Sol Anterior İnen Koroner Arterin Kalıcı Ligasyonu ile Murine Miyokard Enfarktüsü Modeli

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...

Semi-Minimal Invasive Method to Induce Myocardial Infarction in Rats and the Assessment of Cardiac Function by an Isolated Working Heart System

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily and highly reproducible MI induction procedure is required to obtain further insight and better understanding of the underlying pathological changes. This procedure can also be used to evaluate the effects or potency of new and promising treatments (as drugs or interventions) in acute MI, subsequent remodeling and heart failure (HF). After intubation and pre-operative preparation of the animal, an anesthetic protocol with isoflurane was performed, and the surgical procedure was conducted&#160;quickly. Using a minimally invasive approach, the left anterior descending artery (LAD) was located and occluded by a ligature. The occlusion can be performed acutely for subsequent reperfusion (ischemia/reperfusion injury). Alternatively, the vessel can be ligated permanently to investigate the development of chronic MI, remodeling or HF. Despite common pitfalls, the drop-out rates are minimal. Various treatments such as remote ischemic conditioning can be examined for their cardioprotective potential pre-, peri- and post-operatively. The post-operative recovery was quick as the anesthesia was precisely controlled and the duration of the operation was short. Post-operative analgesia was administered for three days. The minimally invasive procedure reduces the risk of infection and inflammation. Furthermore, it facilitates rapid recovery. The &#8220;working heart&#8221; measurements were performed ex vivo and enabled precise control of preload, afterload and flow. This procedure requires specific equipment and training for adequate performance. This manuscript provides a detailed step-by-step introduction for conducting these measurements.

This article presents an efficient method to perform myocardial ischemia and subsequent chronic reperfusion in rats using a minimally invasive approach. In addition, left ventricular hemodynamic function of rats is assessed by echocardiography and isolated working heart methods.&#160;

Sıçanlarda Miyokard İnfarktüsü İndükleyen Yarı-Minimal İnvaziv Yöntem ve İzole Çalışan Kalp Sistemi Ile Kardiyak Fonksiyonun Değerlendirilmesi

Myocardial infarction (MI) remains the main contributor to morbidity and mortality worldwide. Therefore, research on this topic is mandatory. An easily ...

A Modified Simple Method for Induction of Myocardial Infarction in Mice

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI remodeling and evaluation of novel therapeutics. Different methods (e.g., isoproterenol treatment, cryoinjury, coronary artery ligation, etc.) have been used to induce MI. Compared with isoproterenol treatment and cryoinjury, coronary artery ligation may better reflect the ischemic response and chronic remodeling after MI. However, traditional methods for coronary ligation in mice are technically challenging. The current study describes a simple and efficient process for induction of MI in mice with readily available materials. The mouse chest skin was cut open under stable anesthesia. The heart was immediately externalized through the intercostal space after blunt separation of the pectoralis major and pectoralis minor. The left anterior descending branch (LAD) was ligated with a 6-0 suture 3 mm from its origin. Following LAD ligation, staining with 2,3,5-Triphenyltetrazolium chloride (TTC) indicated successful induction of MI and temporal changes of post-MI scar size. Meanwhile, survival analysis results showed overt mortality within 7 days after MI, mainly due to cardiac rupture. Moreover, post-MI echocardiographic assessment demonstrated successful induction of contractile dysfunction and ventricular remodeling. Once mastered, an MI model can be established in mice within 2-3 min with readily available materials.

Under adequate anesthesia, the mouse heart was externalized through the intercostal space, and myocardial infarction was successfully induced by ligating the left anterior descending artery (LAD) using materials readily available in most laboratories.

Farelerde Miyokard Enfarktüsünün İndüksiyonu için Değiştirilmiş Basit Bir Yöntem

Myocardial infarction (MI) represents one of the leading causes of death. MI models are widely used for investigating the pathomechanisms of post-MI ...

Induction of Myocardial Infarction and Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury in Mice

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of heart reflow and induce secondary myocardial injury. A simple and reproducible model of myocardial infarction and myocardial ischemia-reperfusion injury is a good tool for researchers. Here, a customizable method to create a myocardial infarction (MI) model and MIRI by precision ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD) through micromanipulation is described. Accurate and reproducible ligature positioning of the LAD helps obtain consistent results for heart injury. ST-segment changes can help to identify model accuracy. The serum level of cardiac troponin T (cTnT) is used to assess the myocardial injury, cardiac ultrasound is employed to evaluate the myocardial systolic function, and Evans-Blue/triphenyl tetrazolium chloride staining is used to measure infarct size. In general, this protocol reduces procedure duration, ensures controllable infarct size, and improves mouse survival.

Here we describe a simple and reproducible method that can induce myocardial infarction or myocardial ischemia-reperfusion injury in mice by precision ligation of the left anterior descending coronary artery through micromanipulation.

Farelerde Miyokard Enfarktüsü ve Miyokard İskemi-Reperfüzyon Hasarının İndüksiyonu

Acute myocardial infarction is a common cardiovascular disease with high mortality. Myocardial reperfusion injury can counteract the beneficial effects of ...

Ultrasound-Guided Induced Pluripotent Stem Cell-Derived Cardiomyocyte Implantation in Myocardial Infarcted Mice

The key objective of cell therapy after myocardial infarction (MI) is to effectively enhance the cell grafted rate, and human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes (hiPSC-CMs) are a promising cell source for cardiac repair after ischemic damage. However, a low grafted rate is a significant obstacle for effective cardiac tissue regeneration after transplantation. This protocol shows that multiple hiPSC-CM ultrasound-guided percutaneous injections into an MI area effectively increase cell transplantation rates. The study also describes the entire hiPSC-CM culture process, pretreatment, and ultrasound-guided percutaneous delivery methods. In addition, the use of human mitochondrial DNA help detect the absence of hiPSC-CMs in other mouse organs. Lastly, this paper describes the changes in cardiac function, angiogenesis, cell size, and apoptosis at the infarcted border zone in mice 4 weeks after cell delivery. It can be concluded that echocardiography-guided percutaneous injection of the left ventricular myocardium is a feasible, relatively invasive, satisfactory, repeatable, and effective cellular therapy.

Ultrasound-guided cell delivery around the site of myocardial infarction in mice is a safe, effective, and convenient way of cell transplantation.

Miyokard Enfarktüslü Farelerde Ultrason Rehberliğinde İndüklenen Pluripotent Kök Hücre Kaynaklı Kardiyomiyosit İmplantasyonu

The key objective of cell therapy after myocardial infarction (MI) is to effectively enhance the cell grafted rate, and human induced pluripotent stem ...

Left Coronary Artery Ligation: A Surgical Murine Model of Myocardial Infarction

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In order to explore the pathophysiological changes after myocardial infarction and design future treatments, research models of MI are required. Permanent ligation of the left coronary artery (LCA) in mice is a popular model to investigate cardiac function and ventricular remodeling post MI. Here we describe a less invasive, reliable, and reproducible surgical murine MI model by permanent ligation of the LCA. Our surgical model comprises of an easily reversible general anesthesia, endotracheal intubation that does not require a tracheotomy, and a thoracotomy. Electrocardiography and troponin measurement should be performed to ensure MI. Echocardiography at day 28 after MI will discern heart function and heart failure parameters. The degree of cardiac fibrosis can be evaluated by Masson's trichrome staining and cardiac MRI. This MI model is useful for studying the pathophysiological and immunological alterations after MI.

Presented here is a surgical procedure for permanent ligation of the left coronary artery in mice. This model can be used to investigate the pathophysiology and associated inflammatory response after myocardial infarction.

Sol Koroner Arter Ligasyonu: Miyokard Enfarktüsünün Cerrahi Murin Modeli

Ischemic heart disease and subsequent myocardial infarction (MI) is one of the leading causes of mortality in the United States and around the world. In ...