Biz video düzenleme için hayvancılıkla ilgili Eleut Hernandez, mikroskopi uzmanlık için Gabe Gaidosh ve Khue Tran ve Zhenyang Zhao borçlu olan. Ulusal Göz Enstitüsü tarafından finanse edildi Bu çalışma UM için UCSD ve EY014801 için JLG ve P30 hibe EY022589 için R01-EY022129 verir; Amerikan Kalp Derneği, James ve Esther Kral Vakfı, Fudan Üniversitesi Graduate School (No 2010033) doktora öğrenci değişim programı fonu ve Research sınırsız hibe Körlük, Inc. Önleme

Bütün hayvan prosedürleri Kaliforniya San Diego ve Miami kurumsal hayvan bakımı ve kullanımı komiteleri (IACUC) Üniversitesi Üniversitesi tarafından onaylanmış ve Oftalmik ve Görsel Araştırma Hayvanların Kullanım ARVO Beyanı doğrultusunda yapıldı. Tüm reaktifler ve cerrahi işlemlerde kullanılan enstrümanlar sterildir. 1. anestezisi ve Cerrahisi Rat hazırlayın <ol><li> Prosedüre önce sıçanlara, vücut ağırlığına göre ketamin (60 mg / kg) ve ksilazin (8 mg / kg) intraperitoneal enjeksiyonu ile anestezi uygulanır. Anestezi yeterli derinliği ayak parmağı sıkıştırma uyansına negatif tepki ile belirlenmelidir. </li><li> Anestezi sonra, asfiksi önlemek ve ameliyat sırasında kornealar kurumasını önlemek için her iki göze merhem yağlama uygulamak ileri dilini çekin. </li><li> Bir saç kesme makinesi kullanılarak cerrahi siteleri Tıraş ve parkı% 10 providon-iyot deterjan solüsyonu ve% 70 etanol ile üç kez silin. </li><li> Örtü tsteril alan içinde o hayvan. Steril eldiven ve cerrahi aletler sağkalım ameliyat sırasında kullanılır. Hayvanlar arasında sıcak bir boncuk sterilizatör kullanan araçların ipuçları yeniden sterilize edin. </li></ol> 2. Cerrahi Yaklaşım <ol><li> PION indüksiyon <ol><li> Femoral ven kateterizasyonu <ol><li> Hazırlayın ve cerrahi siteyi temizleyin. Bir saç kesme makinesi kullanılarak sağ uyluk Tıraş ve% 10 providon-iyot deterjan çözeltisi ve% 70 etanol ile parkı üç kez her silin. </li><li> Tüp hazırlayın. % 70 etanol içinde sterilleştirilmiştir polietilen boru 40cm uzunlukta (PE 10) kesin. (20 mg / kg vücut ağırlığı kadar bir doz, sonuçta 1 ul / mg) tuzlu su ile boru yıkayın ve% 2 eritrosin B bir boya önceden ölçülmüş çözelti ihtiva eden bir 1 ml şırınga bağlayın. 600 ul / dakikalık bir oranda ayarlanmış bir ayak anahtarı kontrol edilen bir enfüzyon pompası içine şırınga monte edin. </li><li> Bir No. 15 bıçak kullanarak, küçük bir yatay bir kesi yapmaksağ uyluk tabanı. Kes ve iç zarı yaymak ve steril pamuklu bölgeyi temizleyin. </li><li> Femoral ven dalı görünene kadar forseps ile kas ayırın. Bir kılıf arter, damar ve sinir çevreler. Vannas yaylı makas ile üçgen şekilli kama üssü yakınlarında (2-4 mm genellikle yeterli olmaktadır) sıkın ve forseps (ince uçlu Dumont forseps) ile yukarı bu kılıfı çekin ve küçük bir kesi kesti. Gerektiğinde kesim genişletin. </li><li> Damar yönüne künt mikro cerrahi kanca paralel ven ve arter ayırın. Narin zarı ve damar dalları zarar vermemek için dikkatli olun. Sonra, yavaşça damara kaldırın ve altta yatan bağ dokusu ayırın. </li><li> Bir iğnesiz naylon dikiş elde edilir ve femoral ven yanına koyun. Mikro cerrahi kanca kullanarak, damar yükseltmek ve distal bölgede altındaki ince uçlu forseps geçmektedir. Sütür bir ucunu tut ve altına çekindamar. Sıkıca distal ven Arter. Proksimal ven altında benzer bir şekilde ikinci bir sütür Pass ve gevşek bir düğüm yapın. </li><li> Vannas yaylı makas ile uzak ligasyon yakın damarda küçük bir kesim olun. İnce uçlu forseps ile gerekli delik genişletin. Bazı kan kesim ile sızabilir. Soğuk, steril BSS ve steril pamuklu cerrahi bölgeyi temizleyin. </li><li> Kesme kenarında damar duvarı tutarak, bir iğne tutucu kullanılarak hazırlanan tuzlu-boşaltılan boru ile gemi kateterize. Ven ve boru etrafında proksimal düğüm sıkın. Ardından, uzak sütür onu bağlayarak boru çapa. </li><li> 1 ml yeterli &lt;, tuzlu enjekte ayak anahtarına basarak kateterizasyon kalitesini kontrol edin. Boru engelsiz ve hiçbir sızıntıları sahip olduğundan emin olun. Geçici kateterizasyon ve doku korumak için dikişlerle kesi kapatın. </li></ol></li><li> Optik sinir Pozlama <ol><li> Prepare% 10 providon-iyot deterjan çözeltisi ve% 70 etanol ile sol göz yukarıdaki üç kez her öncesi traş bölgeyi silerek cerrahi alan. </li><li> Bir No. 15 bıçak ile göz arkasında cilt 2-3 mm boyunca bir kesi yapmak. Pinch ve tırtıklı forseps ile bağ dokusu kaldırın ve Vannas yaylı makas ile küçük bir kesi yapmak. Bu küçük insizyon genel uzunluğu yaklaşık 5 mm, ancak eğitim bir cerrah için daha fazla maruz sağlamak için daha uzun olabilir. Kan damarları bozmamak için özen, açık açık yörünge kemik üstün kenarı boyunca bağ dokusu ile incelemek için devam edin. Pamuklu cerrahi bölgeyi temizleyin. </li><li> Üst rektus kası görünene kadar konjonktiva aşağı doğru parçalara ayır. Pinch ve kas yoluyla teşrih; kas yörünge içinde derin kurtarılmış olacaktır. Şimdi, çevre dokular görselleştirme kolaylığı için göz geri çekilmesi ve yükseklik yardımcı olmak için kullanılabilir. </li><li> Yenidenyanal ve aşağı deri ve bağ dokusu kapağını cezbet ve sütür ve hemostatla yerinde tutun. Bu optik sinir çevreleyen yağ içeren kılıf ortaya çıkarmak için ileri ve dışa doğru göz dönecektir. </li><li> Dikkatle keskin forseps bir çift eklemek ve kılıf çevreleyen bağ dokusu ayırmak için optik sinir paralel genişletin. Forseps keskin uçları ile optik sinir dokunmayın. </li><li> Optik sinir ve çevresindeki kılıfın A 5 mm uzunluk şimdi görünür olmalıdır. Kılıf yüzeyinde mikrodamarlar ağı optik sinir çevreler. Bu lazer ışınlama sırasında hedef olacaktır. </li></ol></li><li> Eritrosin Yatak ve lazer ışınlama intravenöz enjeksiyon <ol><li> Yeşil lazer ışığı kendinizi korumak için lazer ışınlama cihazı kullanırken her zaman turuncu renkli güvenlik gözlükleri takın. , Lazer açın deklanşör açın ve zirve ve ortalama powe ayarlamaklazer sc gerekli. Deklanşörü kapatın. </li><li> Lazer ışını aparatı içinde sıçan yerleştirin. Doğru ışın yerleştirilmesini sağlamak için, zayıf hedefleme ışını mekansal kapalı panjur bıçak delinmiş 100 mikron çaplı delikten lazer filtreleme ile üretilir. Ince uçlu forseps bir çift ile optik sinir Re-maruz ve 3 mm ve optik sinir başının arkasında 4 mm arasında intraorbital optik sinir üzerine amaçlayan ışını yerleştirin. </li><li> Infüzyon pompası aktivasyonu yoluyla% 2 eritrosin B çözümü enjekte edilir. Cerrah optik sinirin yüzeyini nemlendirmek için BSS küçük bir damla ekler iken birkaç saniye süreyle sirküle edebilir. </li><li> Amaçlayan ışının pozisyonunu kontrol edin ve ardından radyoterapi başlatmak için ayak anahtarı tıklatın. Mikroskop optik yol eklenir bir turuncu renkli Emniyet filtre, hemen 1 sn gecikme ile kapağın açılması ve ardından tetiklenir. </li><li> 9 için optik sinir saçmakBir 135mW pik güç ve% 15 görev döngüsü ile 250 Hz&#39;de dönen bir ışın kıyıcı tarafından üretilen 18mW ortalama gücü 0 sn (bu termal etkilerini en aza indirir). Güvenlik filtre ile parlak turuncu olarak görünür sarı floresan, optik sinirin üst yüzeyinden çıkar ve kiriş simetrik sinir ışıma yapmaktadır sağlamak için yeterli olacaktır. </li><li> Işınlama sonra, turuncu renkli emniyet filtresi otomatik olarak açılacaktır. Mikrokanamalar bazı durumlarda gözlenebilir. </li><li> Ekstra oküler kaslarda çekiş tahliye ve nötr konuma göz dönün. Sütürler ile kesi kapatın. Ardından kateteri ve sızıntıyı önlemek için sıkıca femoral ven kapalı kravat; sütürler ile kapatın. Her iki kesiler antibiyotik merhem sürün. Santral retinal ven ve arter damar bütünlüğünü doğrulamak için fundus edin. </li></ol></li></ol></li><li> Retrograd Etiketleme. Retina Ganglion Hücreleri (RGCs) NOT of: RGC hayatta kalma, Fluorogold (FG) ile retrograd etiketleme değerlendirmek amacıyla PION bir hafta önce tamamlanması gerekmektedir. Yöntem, jove protokolü 819 13 detaylı bir şekilde tarif edilmektedir. <ol><li> Kısacası: ketamin (60 mg / kg) ve xylazine (8 mg / kg) ile hayvan uyutmak ve tıraş. </li><li> Cerrahi kesi sitesine fırçalayın ve baş genelinde bir orta hat kesi kafatası açığa çıkarmak için yapmak. </li><li> Kafatası yoluyla ikili delikleri (ø 2x2 mm) hem sagital ve transvers dikişlerle 0.5 mm delin. </li><li> Dikkatle bir vakum pompası kullanılarak üstün colliculus (SC) dorsal yüzeyi üzerinde yatıyor serebral içeriği aspire. Ardından, SC yüzeyine% 4 FG ile ıslatılmış gelfoam küçük bir parça koyun. </li><li> Standart ameliyat sonrası bakım ile hayvan için dikişlerle kesi kapatın ve bakım. </li></ol></li><li> Post-operatif bakım ve Ötenazi <ol><li> Hayvan kurtarıldı kadar Ameliyattan sonra, bir devri daim ısıtılan su yastığı üstünde ayrı bir temiz kafeste hayvan yerleştirin. </li><li> Cerrahi sonrası analjezikler (buprenorfin HCL, 0.01 mg / kg) rahatsızlığı en aza indirmek için birbirini izleyen üç gün boyunca günde iki defa tatbik edilmelidir. </li><li> Sıçan ayrı tutulur ve sternum yatma korumak ve yeterli bilince yeniden edebiliyoruz kadar dikkat edilmelidir. </li><li> Kurtarma ve sağlık belirtileri ameliyat sonrası ya da sütür çıkarılması ve son hangisi cerrahi sitenin, yeterli iyileşme kadar en az 5 gün boyunca günlük olarak takip edilmektedir. </li><li> Araştırmacı ilgi alanlarına göre ameliyat sonrası bilimsel uygun zaman noktalarında% 4 PFA ile perfüzyon ile hayvanların Euthanize. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Wang, Y., Brown, D. P., Duan, Y., Kong, W., Watson, B. D., Goldberg, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+rodent+model+of+posterior+ischemic+optic+neuropathy..">A novel rodent model of posterior ischemic optic neuropathy..</a> JAMA Ophthalmology. 131, 194-204 (2013).</li><li>Rucker, J. C., Biousse, V., Newman, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+optic+neuropathies.">Ischemic optic neuropathies.</a> Curr Opin Neurol. 17, 27-35 (2004).</li><li>Hayreh, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Posterior+ischaemic+optic+neuropathy:+clinical+features,+pathogenesis,+and+management..">Posterior ischaemic optic neuropathy: clinical features, pathogenesis, and management..</a> Eye (Lond). 18, 1188-1206 (2004).</li><li>Hayreh, S. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inter-Individual+Variation+in+Blood-Supply+of+the+Optic-Nerve+Head..">Inter-Individual Variation in Blood-Supply of the Optic-Nerve Head..</a> Doc Ophthalmol. 59, 217-246 (1985).</li><li>Jacobson, D. M., Vierkant, R. A., Belongia, E. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nonarteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy+-+A+case-control+study+of+potential+risk+factors..">Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy - A case-control study of potential risk factors..</a> Arch Ophthalmol-Chic. 115, 1403-1407 (1997).</li><li>Kosmorsky, G., Straga, J., Knight, C., Dagirmanjian, A., Davis, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+transcranial+Doppler+in+nonarteritic+ischemic+optic+neuropathy..">The role of transcranial Doppler in nonarteritic ischemic optic neuropathy..</a> Am J Ophthalmol. 126, 288-290 (1998).</li><li>Hayreh, S. S., Zimmerman, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Non-arteritic+anterior+ischemic+optic+neuropathy:+role+of+systemic+corticosteroid+therapy..">Non-arteritic anterior ischemic optic neuropathy: role of systemic corticosteroid therapy..</a> Graefe's archive for clinical and experimental ophthalmology. 246, 1029-1046 (2008).</li><li>Prado, R., Dietrich, W. D., Watson, B. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+Induced+Graded+Spinal-Cord+Infarction+-+Behavioral,+Electrophysiological,+and+Morphological+Correlates..">Photochemically Induced Graded Spinal-Cord Infarction - Behavioral, Electrophysiological, and Morphological Correlates..</a> J Neurosurg. 67, 745-753 (1987).</li><li>Dietrich, W. D., Busto, R., Watson, B. D., Scheinberg, P., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+cerebral+infarction.+II.+Edema+and+blood-brain+barrier+disruption..">Photochemically induced cerebral infarction. II. Edema and blood-brain barrier disruption..</a> Acta Neuropathologica. 72, 326-334 (1987).</li><li>Watson, B. D., Dietrich, W. D., Busto, R., Wachtel, M. S., Ginsberg, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+reproducible+brain+infarction+by+photochemically+initiated+thrombosis..">Induction of reproducible brain infarction by photochemically initiated thrombosis..</a> Annals of Neurology. 17, 497-504 (1985).</li><li>Watson, B. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+photochemically+induced+brain+ischemia+and+stroke..">Animal models of photochemically induced brain ischemia and stroke..</a> Cerebrovascular Disease - Pathophysiology, Diagnosis and Treatment. , 52-73 (1998).</li><li>Watson, B. D., Prado, R., Dietrich, W. D., Ginsberg, M. D., Green, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photochemically+induced+spinal+cord+injury+in+the+rat..">Photochemically induced spinal cord injury in the rat..</a> Brain Research. 367, 296-300 (1986).</li><li>Chiu, K., Lau, W. M., Yeung, S. C., Chang, R. C., So, K. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retrograde+labeling+of+retinal+ganglion+cells+by+application+of+fluoro-gold+on+the+surface+of+superior+colliculus..">Retrograde labeling of retinal ganglion cells by application of fluoro-gold on the surface of superior colliculus..</a> Journal of visualized experiments : JoVE. , (2008).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Here we describe in detail a method for inducing PION in a rat model. The most critical part of the protocol is the exposure and irradiation of the optic nerve &#8211; to expose the nerve as long as possible while avoiding damage caused by the sharp fine tip forceps or from stretching. In rats, the ophthalmic artery enters the optic nerve &#8804;1 mm from the optic nerve head. Therefore, irradiation of the optic nerve 3-4 mm away from the optic nerve head should only result in ischemia of the capillaries feeding the nerv...

50 yaş üzeri hastalarda, iskemik optik nöropati (ION) Akut optik nöropati 2 en yaygın türüdür. Anterior (AION) ya da posterior (PION) 3: durum belirli etkilenen kan temini ve klinik sunum kaynağına göre olarak bir veya iki alt tiplerinin sunabilirim. AION patogenezi ve ders yoğun 4-7 olarak çalışılırken, PION kötü nedeniyle düşük yaygınlık, değişken sunum, kötü tanımlanmış tanı ölçütlerine ve hayvan modelinin eksikliği anlaşılmaktadır kalmıştır etti. Ayrıca, hiçbir tedavi etkili bir şekilde engellemek veya AION veya PION gelen görme kaybının tersine kanıtlanmıştır. Bu nedenle, pion bir tekrarlanabilir ve güvenilir bir hayvan modeli, in vivo olarak hastalık sürecini incelemek ve nöro ve akson rejenerasyonu için yeni tedavi rejimleri test etmek için büyük bir değer taşımaktadır. Fotokimyasal vasog sonuçlanan mikrovasküler iskemik yaralanmaya neden olduğuENIC ödem ve tromboz etkili bir bölgesel doku iskemisini 8-12 oluşturur. Vasküler dolaşıma enjeksiyonundan sonra, ışığa boya eritrosin B hedef damarların lazer ışınlaması ile aktivasyon üzerine reaktif tekli moleküler oksijen üretir. Tekli oksijen doğrudan trombosit yapışması / toplanmasını uyarıcı ve trombüs oluşumunu tıkayıcı lider, vasküler endoteli peroxidizes. İskemik hasar komşu bölgelere yayıldı ve daha nedeniyle vazojenik ödem mikrovasküler kompresyon ile şiddetlenir. Bu protokolün genel amacı fotokimyasal PION yol açtığı hasarı ayna retrobulber optik sinir iskemi ikna etmek olduğunu. Bildiğimiz kadarıyla, bu arka optik sinir 1 iskemik hasarın ilk modelidir. Fiziksel travma kaçınarak bu model iskemi üretir gibi, posterior iskemik optik nöropati fizyolojik süreçleri daha iyi taklit ve okudu vardır. Ayrıca, bu model optik nöropati ve diğer merkezi sinir sistemi hastalığı, iskemik aday terapötiklerinin tarama için yeni bir platform sunuyor. Burada, bir sıçan PION modelinde femoral ven kateterizasyonu, optik sinir pozlama, Eritrosin B intravenöz enjeksiyon ve lazer ışınlama için detaylı bir protokol tanımlanmıştır.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>532-nm Nd:YAG laser&#160;</td>
			<td>Laser glow</td>
			<td>LRS-532-KM-200-3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Beam chopper</td>
			<td>custom-made</td>
			<td>custom-made</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Mechanical shutter and corresponding shutter drive timer</td>
			<td>AAM Vincent Associates</td>
			<td>SD-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>25-cm focal length spherical lens</td>
			<td>CVI/Mellles-Griot</td>
			<td>01 LPX 293</td>
			<td>plano-convexBK7 glass lens with HEBBARTM antireflection coating</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Erythrosin B&#160;</td>
			<td>MP Biomedicals</td>
			<td>190449</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fluorogold</td>
			<td>Fluorochrome,LLC</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gelfoam</td>
			<td>Cardinal Health</td>
			<td>CAH1203421</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyethylene tubing (PE10)</td>
			<td>BD Intramedic</td>
			<td>427400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 10 Blade</td>
			<td>Miltex</td>
			<td>4-110</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fine Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>91150-20</td>
			<td>DUMONT #5 RUSTLESS NON-MAGNETIC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps with Teeth</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>11153-10</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forceps</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>18025-10&#160;</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vannas spring scissors</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>2-220&#160;</td>
			<td>JJECK Stainless</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Polyglactin suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>J488G</td>
			<td>7-0 suture</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>hemostat</td>
			<td>F.S.T.</td>
			<td>12075-12&#160;</td>
			<td>Germany stainless</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

rat model of photochemically-induced posterior ischemic optic neuropathy

Posterior İskemik optik nöropati (PION) klinik pratikte görme-yıkıcı bir hastalıktır. Ancak, patogenezi ve doğal seyri tam olarak anlaşılamamıştır kalmıştır. Son zamanlarda, plON güvenilir, yeniden üretilebilir bir hayvan modelinin geliştirilmesi ve bu modelde 1 bazı nörotrofik faktörlerin tedavi etkisini test ettik. Bu videonun amacı posterior iskemik optik nöropati bizim fotokimyasal kaynaklı modeli göstermek için, ve retina ganglion hücrelerinin retrograd etiketleme ile etkilerini değerlendirmektir. Posterior optik sinir bir ışığa boya, eritrosin B cerrahi maruz bırakılmasının ardından, damar içine enjekte edilir ve bir lazer ışını optik sinir yüzeyi üzerine odaklanmıştır. Trombosit tromboz ve ödemli sıkıştırma aracılık mikrovasküler oklüzyon isteyen ışınlama zararlardan damar endotel sırasında eritrosin B ve lazer fotokimyasal etkileşim. Ortaya çıkan iskemik yaralanma kademeli ama pronounc verimleriBir uzaktan kumanda, hasar kaynaklı ve klinik olarak önemli bir sonuç - aksonal girdi bir kaybına bağlı retinal ganglion hücre tepe kurumalarına ed. Bu nedenle, bu model plON patofizyolojik ders çalışma için yeni bir platform sağlar ve ayrıca optik nöropati gibi diğer merkezi sinir sistemi işemik hastalıklar için terapötik yaklaşımları test etmek için optimize edilebilir.

Bu teknikle tarafından uyarılan ortaya çıkan iskemik hasar iskemik akson yaralanma sonrası retina ganglion hücrelerinin yavaş yavaş ama belirgin ölümü verir. Bu, insan hastalığında gözlenen benzer klinik olarak anlamlı bir sonuçtur. FG retrograd etiketleme PION sonra RGH hayatta kalma ölçmek için kullanılır. Aynı yöntem başarılı bir model oluşturma doğrulamak yanı sıra farklı tedavi rejimlerinin etkilerini değerlendirmek için kullanılır. 1 kontrolünde retina düz ba?...

Watch this Scientific Journal Video about Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy at JoVE.com

Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Bu protokolün amacı, fotokimyasal sıçan posterior optik sinir iskemik hasara yol etmektir. Bu model arka iskemik optik nöropati patofizyolojisi çalışmaları ve bunun için tedavi yaklaşımları ve diğer optik nöropatiler kritik yanı sıra diğer MSS iskemik hastalıklar.

Fotokimyasal Bağlı Posterior İskemik Optik Nöropati Rat Modeli

Posterior Ischemic optic neuropathy (PION) is a sight-devastating disease in clinical practice. However, its pathogenesis and natural history ...

rat-model-photochemically-induced-posterior-ischemic-optic

Research

JoVE Journal

Medicine

8.5K Görüntüleme.  University of Miami Miller School of Medicine.  Bu protokolün amacı, fotokimyasal sıçan posterior optik sinir iskemik hasara yol etmektir. Bu model arka iskemik optik nöropati patofizyolojisi çalışmaları ve bunun için tedavi yaklaşımları ve diğer optik nöropatiler kritik yanı sıra diğer MSS iskemik hastalıklar. 

Video: Rat Model of Photochemically-Induced Posterior Ischemic Optic Neuropathy

Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and affect the nutritional status and surgical outcomes. Study of the pathophysiological changes occurring in the liver and other organs is of importance. Various studies have been done in cholestatic rat models.
We used a reversible cholestatic rat model in our recent study looking at the role of methylprednisolone in the ischemia reperfusion injury. Various techniques for creation of a reversible cholestatic model have been described. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.
This model can be used in various studies, such as looking at the changes in nutritional, physiological, pathological, histological and immunological changes in the gastrointestinal tract. This model can also be used to see the effects of cholestasis and various therapeutic interventions on major hepatic surgeries.

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.

Tersinir kolestatik Rat Modeli Yaratılış

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

Tıp

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine their efficacy and safety.
Gene therapy using viral vectors is one of the most promising approaches for treating cardiac diseases. Viral delivery of various different genes by changing the carrier gene has immeasurable therapeutic potential.
In this video, the full process of an animal model of heart failure creation followed by gene transfer is presented using a swine model. First, myocardial infarction is created by occluding the proximal left anterior descending coronary artery. Heart remodeling results in chronic heart failure. Unique to our model is a fairly large scar which truly reflects patients with severe heart failure who require aggressive therapy for positive outcomes. After myocardial infarct creation and development of scar tissue, an intracoronary injection of virus is demonstrated with simultaneous nitroglycerine infusion. Our injection method provides simple and efficient gene transfer with enhanced gene expression. This combination of a myocardial infarct swine model with intracoronary virus delivery has proven to be a consistent and reproducible methodology, which helps not only to test the effect of individual gene, but also compare the efficacy of many genes as therapeutic candidates.

A method of gene transfer for the treatment of ischemic heart failure is described using a swine model of myocardial infarction. Our simple and reproducible method enables us to readily evaluate the efficacy of various gene transfers with a very simple and reproducible way.

Klinik öncesi Model İskemik Kalp Yetmezliği Gen Transferi

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work well in non-ischemic wounds may not work in human diabetic wounds because vasculopathy is one major factor that hinders healing of these wounds. We published an article in 2007 describing a rabbit ear ischemic wound model created by a minimally invasive surgical technique. Since then, we have further simplified the procedure for easier operation. On one ear, three small skin incisions were made on the vascular pedicles, 1-2 cm from the ear base. The central artery was ligated and cut along with the nerve. The whole cranial bundle was cut and ligated, leaving only the caudal branch intact. A circumferential subcutaneous tunnel was made through the incisions, to cut subcutaneous tissues, muscles, nerves, and small vessels. The other ear was used as a non-ischemic control. Four wounds were made on the ventral side of each ear. This technique produces 4 ischemic wounds and 4 non-ischemic wounds in one animal for paired comparisons. After surgery, the ischemic ear was cool and cyanotic, and showed reduced movement and a lack of pulse in the ear artery. Skin temperature of the ischemic ear was 1-10 &deg;C lower than that on the normal ear and this difference was maintained for more than one month. Ear tissue high-energy phosphate contents were lower in the ischemic ear than the control ear. Wound healing times were longer in the ischemic ear than in the non-ischemic ear when the same treatment was used. The technique has now been used on more than 80 rabbits in which 23 were diabetic (diabetes time ranging from 2 weeks to 2 years). No single rabbit has developed any surgical complications such as bleeding, infection, or rupture in the skin incisions. The model has many advantages, such as little skin disruption, longer ischemic time, and higher success rate, when compared to many other models. It can be safely used in animals with reduced resistance, and can also be modified to meet different testing requirements.

We have developed a minimally invasive technique to create a rabbit ischemic ear wound model by dividing the central artery and nerve and the cranial neurovascular bundle. A subcutaneous tunnel then cuts all subcutaneous tissues. This procedure causes minimal skin disruption and can be safely used in diabetic animals.

Bir İskemik Yara Model üretmek için Basitleştirilmiş Tekniği

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

Endothelin-1 Induced Middle Cerebral Artery Occlusion Model for Ischemic Stroke with Laser Doppler Flowmetry Guidance in Rat

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in 20091, 2. Several models of cerebral ischemia have been developed to mimic the human condition of stroke. It has been suggested that up to 80% of all strokes result from ischemic damage in the middle cerebral artery (MCA) area3. In the early 1990s, endothelin-1 (ET-1) 4 was used to induce ischemia by applying it directly adjacent to the surface of the MCA after craniotomy. Later, this model was modified 5 by using a stereotaxic injection of ET-1 adjacent to the MCA to produce focal cerebral ischemia. The main advantages of this model include the ability to perform the procedure quickly, the ability to control artery constriction by altering the dose of ET-1 delivered, no need to manipulate the extracranial vessels supplying blood to the brain as well as gradual reperfusion rates that more closely mimics the reperfusion in humans5-7. On the other hand, the ET-1 model has disadvantages that include the need for a craniotomy, as well as higher variability in stroke volume8. This variability can be reduced with the use of laser Doppler flowmetry (LDF) to verify cerebral ischemia during ET-1 infusion. Factors that affect stroke variability include precision of infusion and the batch of the ET-1 used6. Another important consideration is that although reperfusion is a common occurrence in human stroke, the duration of occlusion for ET-1 induced MCAO may not closely mimic that of human stroke where many patients have partial reperfusion over a period of hours to days following occlusion9, 10. This protocol will describe in detail the ET-1 induced MCAO model for ischemic stroke in rats. It will also draw attention to special considerations and potential drawbacks throughout the procedure.

Several animal models of cerebral ischemia have been developed to simulate the human condition of stroke. This protocol describes the endothelin-1 (ET-1) induced middle cerebral artery occlusion (MCAO) model for ischemic stroke in rats. In addition, important considerations, advantages, and shortcomings of this model are discussed.

Rat Lazer Doppler Flowmetri Rehberlik ile İskemik İnme için Endotelin-1 Bağlı Orta Serebral Arter Tıkanıklığı Modeli

Stroke is the number one cause of disability and third leading cause of death in the world, costing an estimated $70 billion in the United States in ...

Angiogenesis in the Ischemic Rat Lung

The adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung pathologies, it is the smaller systemic vasculature that responds to a need for enhanced lung perfusion and shows robust neovascularization. Pulmonary vascular ischemia induced by pulmonary artery obstruction has been shown to result in rapid systemic arterial angiogenesis in man as well as in several animal models. Although the histologic assessment of the time course of bronchial artery proliferation in rats was carefully described by Weibel 1, mechanisms responsible for this organized growth of new vessels are not clear. We provide surgical details of inducing left pulmonary artery ischemia in the rat that leads to bronchial neovascularization. Quantification of the extent of angiogenesis presents an additional challenge due to the presence of the two vascular beds within the lung. Methods to determine functional angiogenesis based on labeled microsphere injections are provided.

The lung is perfused by both the systemic bronchial artery and pulmonary arteries. In most lung pathologies, it is the smaller systemic vasculature that shows robust neovascularization. Cessation of pulmonary blood flow promotes brisk bronchial angiogenesis. We provide surgical details of inducing left pulmonary artery ischemia that promotes bronchial neovascularization.

İskemik Sıçan Akciğer Angiogenezis

The  adult lung is perfused by both the systemic bronchial artery and the entire  venous return flowing through the pulmonary arteries. In most lung ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the world&#8217;s 2.9 million neonatal deaths. Animal models of HIE have contributed to the understanding of the pathophysiology in HIE, and have highlighted the dynamic process that occur in brain injury due to perinatal asphyxia. Thus, animal studies have suggested a time-window for post-insult treatment strategies. Hypothermia has been tested as a treatment for HIE in pdiglet models and subsequently proven effective in clinical trials. Variations of the model have been applied in the study of adjunctive neuroprotective methods and piglet studies of xenon and melatonin have led to clinical phase I and II trials1,2. The piglet HIE model is further used for neonatal resuscitation- and hemodynamic studies as well as in investigations of cerebral hypoxia on a cellular level. However, it is a technically challenging model and variations in the protocol may result in either too mild or too severe brain injury. In this article, we demonstrate the technical procedures necessary for establishing a stable piglet model of neonatal HIE. First, the newborn piglet (&#60; 24 hr old, median weight 1500 g) is anesthetized, intubated, and monitored in a setup comparable to that found in a neonatal intensive care unit. Global hypoxia-ischemia is induced by lowering the inspiratory oxygen fraction to achieve global hypoxia, ischemia through hypotension and a flat trace amplitude integrated EEG (aEEG) indicative of cerebral hypoxia. Survival is promoted by adjusting oxygenation according to the aEEG response and blood pressure. Brain injury is quantified by histopathology and magnetic resonance imaging after 72 hr.

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and unrelieved pressure due to immobility. Animal models have been developed that attempt to mimic these conditions for the purpose of furthering our understanding of the complexity of chronic wounds. The model described herein is a rat ischemic skin flap model that permits a prolonged reduction of blood flow resulting in wounds that become ischemic and resemble a chronic wound phenotype (reduced vascularization, increased inflammation and delayed wound closure). It consists of a bipedicled dorsal flap with 2 ischemic wounds placed centrally and 2 non-ischemic wounds lateral to the flap as controls. A novel addition to this ischemic skin flap model is the placement of a silicone sheet beneath the flap that functions as a barrier and a splint to prevent revascularization and reduce contraction as the wounds heal. Despite the debate of using rats for wound healing studies due to their quite distinct anatomic and physiologic differences compared to humans (i.e., the presence of a panniculus carnosus muscle, short life-span, increased number of hair follicles, and their ability to heal infected wounds) the modifications employed in this model make it a valuable alternative to previously developed ischemic skin flap models.

The rat, due to its size, availability, and rather docile behavior, has been utilized as a research model for many years. The goal of this protocol is to utilize the rat as an ischemic skin wound healing model to provide valuable insight into the pathophysiology of chronic wounds.

Sıçan İskemik Cilt Yara Modeli Gösteri

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their lifetime. NAION results in optic nerve edema, selective loss of the retinal ganglion cell neurons (RGCs) and atrophy of the optic nerve. A rodent model of NAION that expresses most NAION features and sequelae has been developed, which is applicable to both rats and mice. This model utilizes a focal laser application of 532 nm wavelength to illuminate a photoactive dye, Rose Bengal (RB), to cause capillary damage and leakage at the targeted anterior optic nerve (the laminar region). After rNAION induction, there is an early optic nerve ischemia, optic nerve edema, and intraneural inflammation, followed by selective RGC and axonal loss. Since the optic nerve is a CNS white matter tract, the rNAION model is applicable to mechanistic studies of selective white matter ischemia, as well as neuroprotective analyses and short and long-term mechanisms of glial and neuronal response to ischemia.

The Rodent Model of Nonarteritic Anterior Ischemic Optic Neuropathy rNAION

The following report describes how to replicate the rodent model of nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (rNAION), using the appropriate dye, contact lens and laser parameters. We also reveal the appropriate steps for evaluating the rNAION lesion in vivo.

Nonarteritik Anterior İskemik Optik Nöropati Kemirgen Modeli (rNAION)

Nonarteritic anterior ischemic optic neuropathy (NAION) is a focal ischemic lesion of the optic nerve that affects 1/700 individuals throughout their ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

İzometrik Contractility ölçüm tel Myography kullanarak fare mezenterik arter

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Oxygen-Induced Retinopathy Model for Ischemic Retinal Diseases in Rodents

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR model induction and its readouts in both mice and rats. Retinal neovascularization is induced in OIR by exposing rodent pups either to hyperoxia (mice) or alternating levels of hyperoxia and hypoxia (rats). The primary readouts of these models are the size of neovascular (NV) and avascular (AVA) areas in the retina. This preclinical in vivo model can be used to evaluate the efficacy of potential anti-angiogenic drugs or to address the role of specific genes in the retinal angiogenesis by using genetically manipulated animals. The model has some strain and vendor specific variation in the OIR induction which should be taken into consideration when designing the experiments.

Oxygen-induced retinopathy (OIR) can be used to model ischemic retinal diseases such as retinopathy of prematurity and proliferative diabetic retinopathy and to serve as a model for proof-of-concept studies in evaluating antiangiogenic drugs for neovascular diseases. OIR induces robust and reproducible neovascularization in the retina that can be quantified.

Kemirgenlerde İskemik Retina Hastalıkları için Oksijen Kaynaklı Retinopati Modeli

One of the commonly used models for ischemic retinopathies is the oxygen-induced retinopathy (OIR) model. Here we describe detailed protocols for the OIR ...