Bu çalışma NIH hibe 1RO1DK74566 ve 1RO1AM52984 kısmen desteklenmiştir. Yazarlar, Dr, ameliyat sırasında ona yardım için RRC Ms Jacqueline McCarty teşekkür etmek istiyorum. Bazı tavşan, onun histolojisi çalışmaları için Dr Rong Wan ve yüksek enerjili fosfatların onun HPLC ölçümleri için Bayan Ming Li cerrahi ve postoperatif bakım yardım ettikleri için Jianpu Wang ve Harshini Sarojini.

1. Anatomik Dayanak Tavşan kulak 20. yüzyıldan beri yara bakımı için tercih edilen bir çalışma malzemesi olmuştur. Kulağın üç damar demetleri (merkezi, kranial ve kaudal) tarafından sağlanır; kranial ve kaudal demetler halinde gemilerin büyüklüğü değişiklik gösterir merkezi paket, en büyüğüdür. Bazen, kaudal arter eksik olabilir. Bu gemilerin 1 Tüm kulak (Şekil 1) traş sonra kolayca sırt tarafında tanımlanır. Ventral tarafında, distal cilt proksimal damarlardan kan temini almaz. Dorsal kulakta üç damar demetleri distal ventral deri (Şekil 2) kan akımı sağlamak için kıkırdak yoluyla nüfuz sayıda şubesi var. Bazı tavşanlarda, çok küçük bir deri altı damar da daha fazla ventral cilt 1/3 &#39;den kan sağlar ventral tarafında meydana gelir. Açık bir çevresel cilt kesisi olarak, essen varbir ventral kesiden tially hiç kanama. 2. Cerrahi Prosedür <ol><li> Tavşan tartılır ve kulak boyun geri birlikte, traş edilir. </li><li> Buprenorfin (0.01 mg / kg) bir premedikasyon ameliyat öncesi İM bir saat verilir. </li><li> Anestezi ketamin (50 mg / kg) ve Xylazine (5 mg / kg) İM bir karışımı ile indüklenen edilir. </li><li> Tavşan ameliyat sırasında bir ısıtma yastığı ile korunur, göz merhemi ile korunur, ve vital bulguları ameliyat sırasında izlenir. </li><li> Cerrahi alan bir cerrahi fırçalayın aseptik hazırlanan ve iki kulak maruz böylece bol dökümlü edilir. </li><li> Diğer kulak eşleştirilmiş bir non-iskemik kontrol olarak hizmet verirken Bir kulak, iskemik işlenir. </li><li> Üç vasküler pedikülleri arter ve venler ile tanımlanır. </li><li> Bir # 15 bıçak kullanarak, üç küçük dikey kesi (1-15 cm) kulak tabanından 1-2 cm hakkında, vasküler pedikül yapılır. </li><li> Santral ven olduğuçevreleyen dokudan ayrılmış ve geri çekilmesi için bir dikiş çeviren için kullanılır. Ana arteri 4-0 sütürler ile bağlandı ve bölünür. </li><li> Eşlik eden merkezi sinir de kesilir. </li><li> Bütün kafa pedikül bağlandı ve ayrılır. </li><li> Kaudal pedikül korunur. </li><li> Bir subkutan tünel 3 kesilerden yapılır. Bu, bir bıçak ve makas ile bir kelepçe ve keskin diseksiyonlar ile künt diseksiyon ile gerçekleştirilir. Derialtı dokular, kaslar, sinirler ve küçük damar dalları tüm kesilir. Dermis altında küçük vasculatures tamamen ayrılır. Subkutan dokular All bıçak ile kıkırdak seviyesine kesilir. </li><li> Daha keskin ve künt diseksiyonu 5-10 mm çıplak kıkırdak geniş bırakarak, tabanı temizlemek için kullanılır. </li><li> Bu prosedür kesmeleri subkutan vasküler tüm dallarını hızla teminat tesis engellemek için. </li><li> Kanama olduğuminimal. Eğer varsa, kolayca elektrokoter için gerek kalmadan, gazlı bir sıkıştırma ile kontrol edilir. </li><li> Kulak içinde cilt fazla kan tedarik taşımıyor ve bu nedenle insize değildir. </li><li> 3 cilt kesileri 4-0 veya 5-0 sütürler kullanılarak kapalı ve steril gazlı bez ile kaplıdır. </li><li> 3 küçük cilt kesileri ve gerçekleştikçe bir açık cerrahiye göre daha az deri hasara prosedürü sonuçları. </li><li> Dört dairesel tam kalınlıkta deri yaraları, 6 mm paslanmaz çelik yumruk ile her bir kulak ventral tarafında oluşturulur. Yaralar arasındaki mesafe en az 20-30 mm. Yumruk yara içindeki deri kıkırdak kaldırılır. Perikondriuma ayrıca deri veya ayrı olarak, kaldırılır. Granülasyon ve epitelizasyonu gerçekleştiği hakkında tabanı kıkırdağı, fakat kıkırdak (Şekil 3) perfore değildir. </li><li> Kontrol ilaç Appl ise her iki kulak yaralar tamamlandığında, test ilacı, iki yaralar bir tarafında uygulanırdiğer tarafta yaralar ied. Oklüzif örtü (tegaderm, 3M) yara kapatmak için kullanılmaktadır. Bu kurutulmuş haline gelen yaralar engeller. </li><li> Kulak alt kısmında yaralar normal kulak üst kısmında daha fazla yaralar iyileşir. Yara iyileşmesi karşılaştırma çalışması için, diğer tarafta, iki yaraları olan bir tarafında, iki yaralar karşılaştırmak için, ya da ayrı ayrı üst ve alt yaralar karşılaştırmak için tavsiye edilir. </li></ol> 3. Ameliyat Sonrası Bakım <ol><li> A Duragesic yama mümkün ağrısı azaltmak için 2-3 gün süreyle fentanil (25 ug / saat) serbest bırakmak için geri cilt eklenir. </li><li> Tavşan yiyecek ve içecek ücretsiz erişime izin verilir. </li><li> Pansuman değişiklikleri günlük yapılmaktadır. Eski pansuman çıkartılır ve yara steril pamuklu çubukla temizlenir. Dijital fotoğraf karşılaştırma için alınır. Yeni soslarında uygulanır, ve yara tegaderm tekrar kaplanmıştır. Anestezi ch giyinme esnasında gerekli olananges. </li><li> Cilt ısısı, karşılaştırma için her bir kulak günlük ölçülür. </li><li> Ek kulak kan dolaşımını bir transkutanöz oksijen gerilim ölçer veya lazer Doppler debimetre ile ölçülebilir. </li><li> Dikişler bir hafta sonra kaldırılabilir. </li><li> Diyabetik olmayan hayvanlar için kulak yaraların çoğu genellikle 2-3 hafta içinde iyileşir. </li></ol> 4. Potansiyel komplikasyonları ve bunlardan kaçınmanın yolları Bu minimal invaziv cerrahi güvenli ve komplikasyonlar nadirdir. Dışında bir geçiş sonrası hafif kulak ödemi, bizim tavşan hiçbiri ciddi cerrahi komplikasyon olmuştur. Bununla birlikte, bu işlem için pek çok potansiyel komplikasyonları vardır: <ol><li> Kanama. Hemostaz yetersiz ise veya daha büyük bir kan damarı (örneğin ana pedikül damarlarından biri gibi) bozuksa Kanama kesiler oluşabilir. Bu kolayca dikkatli diseksiyon ile önlenir. Orada üç büyük damar demetleri, bir ek olarakBirçok küçük subkutan vasküler dal yeniden. Subkutan tünel yapıldığında, bu damarların kesilmiş ama hiçbir bağlama gerekli ediliyor. Hemostatis gazlı basarak basitçe elde edilebilir. Bu kolayca birkaç dakika için tünelin içine gazlı bez bir köşesinde ekleyerek yapabilirsiniz. Kesi kapatılmadan önce, aktif kanama mevcut olduğundan emin olun. </li><li> Kesi enfeksiyon ve ayrışma: kesiler kontamine olmuşsa bu komplikasyonlar oluşabilir. Bu katı aseptik tekniğin kullanılması ile önlenebilir ve herhangi bir antibiyotik ihtiyaç duyulmaktadır. Ancak, bulaşma yoksa, uygun drenaj ve pansuman değişiklikler gereklidir. </li><li> Kulak ödem: vasküler ligasyon ve lenf dolaşımının bozulması nedeniyle, hafif kulak ödemi birkaç gün karşımıza çıkabilir. Bununla birlikte, kendi başına kaybolur ve tedavi gereklidir. </li></ol> 5.. Temsilcisi Sonuçlar 2007 yılından bu yana, biz 23 diyabetik bir de dahil olmak üzere, 70&#39;den fazla tavşanlarda bu prosedür kullanmışimals. Diyabetik grupta cerrahisi farklı diyabetik zamanlarda yapıldı: yedi tavşanın diyabetik zaman iki hafta, dördü 12 ay vardı on iki ay vardı ve 2 diyabetik süresi 24 ay vardı. Hemen ameliyat sonrası, iskemik kulak hafif ödem, serin ve siyanotik çıktı. En önemli kulak arter-arter-merkez vardı, normal kulak güçlü bir darbe, ancak bu darbe iskemik kulak mevcut değildi. Kulak hareketi azalmıştır, ama tamamen yok olmadı. Cilt tüneli üzerinden açık çukurluklar gösterdi, ancak iskemi veya nekroz (Şekil 4) herhangi bir hayvan bulundu. Normal ve iskemik kulak deri sıcaklıkları (Omron Healthcare, Bannockburn veya Fisher Scientific, Pittsburgh, PA tarafından kızılötesi nokta termometre K Tip tarafından Omron) bir dijital termometre ile ölçüldü. Iskemik olmayan ve iskemik kulak arasındaki sıcaklık farkı 1 ila 10 ° C, w arasında değişiyordu2-6 ° C&#39;ye Şekil aralığında düşen i en tavşan. 5 30 tavşan ortalama sıcaklık farklılıkları gösterir. Sıcaklık farkı, ameliyat sonrası ilk günlerde yüksek olduğu gün 15 sonra yavaş yavaş azaldı, ama yine de bir ay sonunda tutuldu. Bunlar feda edildi sonra doku yüksek enerjili fosfat içerik bazı hayvanların ölçüldü. Altı doku örnekleri her bir kulak alınmış ve yüksek enerjili fosfat içerik HPLC ile tayin edildi. ATP ve toplam enerji konsantrasyonları iskemik kulakları daha normal kulaklara daha yüksek bulunmuştur. Şekil. 6 23 gün ameliyattan sonra kurban bir tavşan bir örneğini göstermektedir. Ortalama doku ATP içeriğini 0.349 idi ± 0.047 0.237 vs normal kulak mmol / g (± SD) ± 0.059 iskemik kulak (p &lt;0.005) olarak mmol / g. Toplam enerji (ATP + ADP + AMP) ortalama 0,882 idi ± 0,137 0,556 vs normal kulak mmol / g ische içinde ± 0.115 mmol / g<html> mikrofon kulak (p &lt;0,001). Yara iyileşmesi kez tüm gruplarda iskemik olmayan kulak (non-diyabetik veya diyabetik) daha iskemik kulak için her zaman daha uzundu. Şekil. 7 iskemik ve iskemik olmayan kulaklara yaraların 26 çift arasında şifalı bir karşılaştırma gösterir. Şifa kez iskemik kulakları (p = 0.001) 17 on 27 gün vs normal kulaklara (ortalama 20.5 ± 3.4 gün) 13 ile 18 gün (ortalama 14.9 ± 1.6 gün) değişmekteydi. Yaşlı ve diabetik tavşanlarda yara iyileşmesi kez diyabetik süresi 12 aydan fazla oldu, özellikle de çok daha uzun idi. Bu tavşanlar, diyabetik süresi 24 ay ile tavşan da dahil olmak üzere herhangi bir komplikasyon olmadan normal iyileşti bütün kesiler. Şekil 8 kas yoktur ve fibröz dokular tarafından değiştirildiği iyileşti subkutan tünel gösteren bir histoloji örneğidir. Ancak cildin sağlam. / 3341fig1.jpg &quot;/&gt; Şekil 1. Tavşan kulak üç damar demetleri tarafından sağlanır. Merkezi büyük olduğu, kafa küçüktür ve kaudal paket küçüktür. Kulak traş edildikten sonra, bu kaplar kolayca yüzeyinde görülür. <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig2.jpg" /> Şekil 2. Dorsal cilt değil, aynı zamanda penetran damarları aracılığıyla ventral deri değil sadece dorsal kulak kaynağı kan üç damar demetleri. Ok kıkırdak vasıtasıyla nüfuz eden kaplar gösterir. Inset gösterileri bu damarların kesiti. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig3.jpg" /> Şekil 3. Dört 6 mm yaralar kulak ventral tarafta oluşturulur ve perikondriuma de kaldırılır. Granülasyon ve epitelizasyonu gerçekleştiği hakkında tabanı kıkırdağı, fakat kıkırdak delikli değildir. 3 smal<html> l cilt kesileri çok az cilt bozulması ile kapatılır. <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig4.jpg" /> Cilt insizyonu kapatılır sonra Şekil 4., Subkutan tünel üzerinde girinti açıkça görülmektedir. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/3341/3341fig5.jpg" /> Şekil 5. 30 tavşanlarda normal ve iskemik kulak arasındaki ortalama cilt sıcaklık farkı. Erken farkı aralıkları 7 ° C ila 10 ° C arasında ameliyat sonrasında. Farkı bir ay sonunda yavaş yavaş azalır ama yine de sürdürdü. <img alt="Şekil 6" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig6.jpg" /> Ameliyattan sonra 23 gün (p &lt;0.001) non-iskemik kulak ile karşılaştırıldığında Şekil 6. Kulak doku yüksek enerjili fosfat içeriği iskemik kulak azaltıldı. 41/3341fig7.jpg &quot;/&gt; Şekil 7. Yara iyileşmesi zaman iskemik olmayan kulaklar (26 yaralar her biri) daha iskemik kulaklarında uzundur. Healing yaralı dokuya bütünlüğünün restorasyonu, yani, yara siteleri arasında tam reepithelialization olarak tanımlanır. <img alt="Şekil 8" src="/files/ftp_upload/3341/3341fig8.jpg" /> Şekil 8. Subkutan tünel içeren kulak kısmını gösteren Histoloji örnek. Iyileşmiş doku, normal kulak daha incedir, orijinal iskelet kası yoktur ve fibröz doku ile değiştirilir. Ancak cildin sağlam.

<ol>
	<li>Ninomiya, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+vascular+bed+in+the+rabbit+ear:+microangiography+and+scanning+electron+microscopy+of+vascular+corrosion+casts.">The vascular bed in the rabbit ear: microangiography and scanning electron microscopy of vascular corrosion casts.</a> Anat. Histol. Embryol. 29, 301-305 (2000).</li><li>Sen, C. K., Gordillo, G. M., Roy, S., Kirsner, R., Lambert, L., Hunt, T. K., Gottrup, F., Gurtner, G. C., Longaker, M. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+skin+wounds:+a+major+and+snowballing+threat+to+public+health+and+the+economy.">Human skin wounds: a major and snowballing threat to public health and the economy.</a> Wound Repair. 17, 763-771 (2009).</li><li>Boulton, A. J., Vileikyte, L., Ragnarson-Tennvall, G., Apelqvist, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+global+burden+of+diabetic+foot+disease.">The global burden of diabetic foot disease.</a> Lancet. 366, 1719-1724 (2005).</li><li>Edwards, J., Stapley, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Debridement+of+diabetic+foot+ulcers.">Debridement of diabetic foot ulcers.</a> Cochrane Database Syst. Rev. 1, 1-40 (2010).</li><li>Werdin, F., Tennenhaus, M., Schaller, H. E., Rennekampff, H. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence-based+Management+Strategies+for+Treatment+of+Chronic+Wounds.">Evidence-based Management Strategies for Treatment of Chronic Wounds.</a> Eplasty. 9, 169-179 (2009).</li><li>Wu, Y., Chen, L., Scott, P. G., Tredget, E. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+stem+cells+enhance+wound+healing+through+differentiation+and+angiogenesis.">Mesenchymal stem cells enhance wound healing through differentiation and angiogenesis.</a> Stem Cells. 25, 2648-2659 (2007).</li><li>Bennett, J. P., Matthews, R., Faulk, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+chronic+ulceration+of+the+legs+with+human+amnion.">Treatment of chronic ulceration of the legs with human amnion.</a> Lancet. 1, 1153-1156 (1980).</li><li>Gottrup, F., Agren, M. S., Karlsmark, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+for+use+in+wound+healing+research:+a+survey+focusing+on+in+vitro+and+in+vivo+adult+soft+tissue.">Models for use in wound healing research: a survey focusing on in vitro and in vivo adult soft tissue.</a> Wound Repair. 8, 83-96 (2000).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+wound+healing+research:+do+we+need+more.">Animal models in wound healing research: do we need more.</a> Wound Repair. 8, 81-82 (2000).</li><li>LoGerfo, F. W., Gibbons, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Vascular+disease+of+the+lower+extremities+in+diabetes+mellitus.">Vascular disease of the lower extremities in diabetes mellitus.</a> Endocrinol. Metab. Clin. North Am. 25, 439-445 (1996).</li><li>Gottrup, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Oxygen,+wound+healing+and+the+development+of+infection.+Present+status.">Oxygen, wound healing and the development of infection. Present status.</a> Eur. J. Surg. 168, 260-263 (2002).</li><li>Niinikoski, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+blood+and+oxygen+supply+on+the+biochemistry+of+repair.">The effect of blood and oxygen supply on the biochemistry of repair.</a> , 56-71 (2002).</li><li>Schaffer, M., Witte, M., Becker, H. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Models+to+study+ischemia+in+chronic+wounds.">Models to study ischemia in chronic wounds.</a> Int. J. Low Extrem. Wounds. 1, 104-111 (2002).</li><li>Niinikoski, J., Gottrup, F., Hunt, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+role+of+oxygen+in+wound+repair.">The role of oxygen in wound repair.</a> , 165-174 (1991).</li><li>Harding, K. G., Morris, H. L., Patel, G. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Science,+medicine+and+the+future:+healing+chronic+wounds.">Science, medicine and the future: healing chronic wounds.</a> BMJ. 324, 160-163 (2002).</li><li>Lindblad, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Editorial:+How+should+one+study+wound+healing.">Editorial: How should one study wound healing.</a> Wound Repair. 14, 515-515 (2007).</li><li>Chien, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ischemic+rabbit+ear+model+created+by+minimally+invasive+surgery.">Ischemic rabbit ear model created by minimally invasive surgery.</a> Wound Repair Regen. 15, 928-935 (2007).</li><li>Joseph, J., Townsend, F. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+healing+of+defects+in+immobile+skin+in+rabbits.">The healing of defects in immobile skin in rabbits.</a> Br. J. Surg. 48, 557-564 (1961).</li><li>James, G. A., Swogger, E., Wolcott, R., Pulcini, E., Secor, P., Sestrich, J., Costerton, J. W., Stewart, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biofilms+in+chronic+wounds.">Biofilms in chronic wounds.</a> Wound Repair Regen. 16, 37-44 (2008).</li><li>Niitsuma, J., Yano, H., Togawa, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+study+of+decubitus+ulcer+formation+in+the+rabbit+ear+lobe.">Experimental study of decubitus ulcer formation in the rabbit ear lobe.</a> J. Rehabil. Res. Dev. 40, (2003).</li><li>Salcido, R., Popescu, A., Ahn, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+pressure+ulcer+research.">Animal models in pressure ulcer research.</a> J. Spinal Cord Med. 30, 107-116 (2007).</li></ol>

Bu çalışmada yer alan ilgi hiçbir maddi çıkar yok.

Diyabet ABD, 2,3 23,6 milyon kişiyi etkilediği ve bu hastaların% 15-20 daha fazla $ 25 milyar bir yıllık tedavi maliyeti de 4,5 yaşamları boyunca ayak ülserleri gelişir. 3,6 Ancak, hatta mevcut en iyi tedaviler sadece% 50&#39;lik bir iyileşme oranı elde etmek ve bu, sık sık diyabetiklerde% 66 gibi yüksek nüks oranları ile 7 geçici. 3,6 ülserleri diyabetik hastalarda, enfeksiyon ve dramatik amputasyon artış gibi önemli komplikasyonlar ortaya çı...

Ameliyat sırasında izlenmesi için <ol><li> Bir ısıtma pedi normal sıcaklıkta korumak için. </li><li> Bir transkutanöz oksijen monitörü. </li><li> Bir sıcaklık monitör. </li></ol> Cerrahi için <ol><li> # 15 bıçak ile A # 3 bıçak. </li><li> Forseps İki çift (diğer yumuşak dokular için bir cilt için ve başka). </li><li> Küçük kelepçeler 2-3 çift. </li><li> Mikro makas bir ya da iki çift (doku kesme işlemi için). </li><li> Küçük makaslar bir çift (sütür kesim için). </li><li> Bir iğne tutucu. </li><li> Birkaç paslanmaz çelik delgeçler (yaralar yapmak için). </li></ol>

a simplified technique for producing an ischemic wound model

Mevcut diyabetik yara araştırma Bir diğer önemli engel güvenle diyabetik hayvanlarda kullanılan bir iskemik yara modeli bir eksikliğidir. Vaskülopati bu yaraların iyileşmesini engelleyen en önemli etmenlerden biridir, çünkü non-iskemik yara iyi çalışan ilaçlar insan diyabetik yaralar çalışmayabilir. Biz minimal invaziv cerrahi tekniği ile oluşturulan bir tavşan kulak iskemik yara modeli açıklayan 2007 yılında bir makale yayınladı. O zamandan beri, daha kolay kullanım için basitleştirilmiş prosedür var. Bir kulakta günü, üç küçük cilt kesileri vasküler pediküller, kulak tabanından 1-2 cm yapıldı. Merkezi arter bağlandı ve sinir ile birlikte kesildi. Bütün kranial paket sadece kaudal şube zedelemeden, kesilmiş ve bağlandı. Bir çevresel subkutan tünel deri altı dokuları, kaslar, sinirler ve küçük damarları kesmek için, insizyon ile yapıldı. Diğer kulak, bir non-iskemik kontrol olarak kullanılmıştır. Dört yaralar ventral tarafta o yapılmıştırf her kulak. Bu teknik eşleştirilmiş karşılaştırma için 4 iskemik yara ve bir hayvan 4 iskemik olmayan yaralar üretir. Ameliyattan sonra, iskemik kulak serin ve siyanotik, ve azalmış hareket ve kulak arterde nabız eksikliği gösterdi. Iskemik kulak cilt sıcaklığında 1-10 ° C idi normal bir kulak daha düşüktür ve bu fark daha fazla bir ay boyunca sürdürüldü. Kulak doku yüksek enerjili fosfat içeriği kontrol kulağa göre iskemik kulak düşüktü. Yara iyileşme zamanları aynı tedavi kullanılan non-iskemik kulak göre iskemik kulağa daha uzundu. Tekniğin şimdi 23 (diyabet süresi 2 hafta ile 2 yıl arasında değişen) diyabetik edildiği 80&#39;den fazla tavşanlar üzerinde kullanılmıştır. Tek başına hiç bir tavşan gibi kanama, enfeksiyon veya cilt kesilerde rüptür gibi herhangi bir cerrahi komplikasyon geliştirdi. Modeli, küçük bir deri bozulması, uzun iskemik süre ve birçok diğer modellere göre daha yüksek başarı oranı gibi pek çok avantajı vardır. Can güvenle düşük direnci ile hayvanlarda kullanılan ve aynı zamanda farklı test gereksinimlerini karşılamak için değiştirilebilir.

Watch this Scientific Journal Video about A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model at JoVE.com

A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Biz santral arter ve sinir ve beyin nörovasküler demet bölerek bir tavşan kulağı iskemik yara modeli oluşturmak için minimal invaziv bir teknik geliştirdik. Bir subkutan tünel sonra tüm cilt altı dokuları keser. Bu prosedür, minimal deri bozulmasına neden olmakta ve güvenli bir şekilde, diyabetik hayvanlarda kullanılabilir.

Bir İskemik Yara Model üretmek için Basitleştirilmiş Tekniği

One major obstacle in current diabetic wound research is a lack of an ischemic wound model that can be safely used in diabetic animals. Drugs that work ...

a-simplified-technique-for-producing-an-ischemic-wound-model

Research

JoVE Journal

Medicine

17.1K Görüntüleme.  University of Louisville. Biz santral arter ve sinir ve beyin nörovasküler demet bölerek bir tavşan kulağı iskemik yara modeli oluşturmak için minimal invaziv bir teknik geliştirdik. Bir subkutan tünel sonra tüm cilt altı dokuları keser. Bu prosedür, minimal deri bozulmasına neden olmakta ve güvenli bir şekilde, diyabetik hayvanlarda kullanılabilir.

Video: A Simplified Technique for Producing an Ischemic Wound Model

Gene Transfer for Ischemic Heart Failure in a Preclinical Model

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine their efficacy and safety.
Gene therapy using viral vectors is one of the most promising approaches for treating cardiac diseases. Viral delivery of various different genes by changing the carrier gene has immeasurable therapeutic potential.
In this video, the full process of an animal model of heart failure creation followed by gene transfer is presented using a swine model. First, myocardial infarction is created by occluding the proximal left anterior descending coronary artery. Heart remodeling results in chronic heart failure. Unique to our model is a fairly large scar which truly reflects patients with severe heart failure who require aggressive therapy for positive outcomes. After myocardial infarct creation and development of scar tissue, an intracoronary injection of virus is demonstrated with simultaneous nitroglycerine infusion. Our injection method provides simple and efficient gene transfer with enhanced gene expression. This combination of a myocardial infarct swine model with intracoronary virus delivery has proven to be a consistent and reproducible methodology, which helps not only to test the effect of individual gene, but also compare the efficacy of many genes as therapeutic candidates.

A method of gene transfer for the treatment of ischemic heart failure is described using a swine model of myocardial infarction. Our simple and reproducible method enables us to readily evaluate the efficacy of various gene transfers with a very simple and reproducible way.

Klinik öncesi Model İskemik Kalp Yetmezliği Gen Transferi

Various emerging technologies are being developed for patients with heart failure. Well-established preclinical evaluations are necessary to determine ...

Tıp

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the retrieval of ocular tissues, especially cornea, by cutting it separate from the ocular globe. Evisceration is the process of removing the internal organs referred here as retina. The ocular globe consists of the cornea, the sclera, the vitreous body, the lens, the iris, the retina, the choroid, muscles etc (Suppl. Figure 1). When a patient is suffering from corneal damage, the cornea needs to be removed and a healthy one must be transplanted by keratoplastic surgeries. Genetic disorders or defects in retinal function can compromise vision. Human ocular globes can be used for various surgical procedures such as eye banking, transplantation of human cornea or sclera and research on ocular tissues. However, there is little information available on human corneal and retinal excision, probably due to the limited accessibility to human tissues. Most of the studies describing similar procedures are performed on animal models. Research scientists rely on the availability of properly dissected and well-conserved ocular tissues in order to extend the knowledge on human eye development, homeostasis and function. As we receive high amount of ocular globes out of which approximately 40% (Table 1) of them are used for research purposes, we are able to perform huge amount of experiments on these tissues, defining techniques to excise and preserve them regularly.
The cornea is an avascular tissue which enables the transmission of light onto the retina and for this purpose should always maintain a good degree of transparency. Within the cornea, the limbus region, which is a reservoir of the stem cells, helps the reconstruction of epithelial cells and restricts the overgrowth of the conjunctiva maintaining corneal transparency and clarity. The size and thickness of the cornea are critical for clear vision, as changes in either of them could lead to distracted, unclear vision. The cornea comprises of 5 layers; a) epithelium, b) Bowman's layer, c) stroma, d) Descemet's membrane and e) endothelium. All layers should function properly to ensure clear vision4,5,6. The choroid is the intermediate tunic between the sclera and retina, bounded on the interior by the Bruch's membrane and is responsible for blood flow in the eye. The choroid also helps to regulate the temperature and supplies nourishment to the outer layers of the retina5,6. The retina is a layer of nervous tissue that covers the back of the ocular globe (Suppl. Figure 1) and consists of two parts: a photoreceptive part and a non-receptive part. The retina helps to receive the light from the cornea and lens and converts it into the chemical energy eventually transmitted to the brain with help of the optic nerve5,6.
The aim of this paper is to provide a protocol for the dissection of corneal and retinal tissues from human ocular globes. Avoiding cross-contamination with adjacent tissues and preserving RNA integrity is of fundamental importance as such tissues are indispensable for research purposes aimed at (i) characterizing the transcriptome of the ocular tissues, (ii) isolating stem cells for regenerative medicine projects, and (iii) evaluating histological differences between tissues from normal/affected subjects. In this paper we describe the technique we currently use to remove the cornea, the choroid and retinal tissues from an ocular globe. Here we provide a detailed protocol for the dissection of the human ocular globe and the excision of corneal and retinal tissues. The accompanying video will help researchers to learn an appropriate technique for the retrieval of precious human tissues which are difficult to find regularly.

A Simplified Technique for In situ Excision of Cornea and Evisceration of Retinal Tissue from Human Ocular Globe

The paper describes a simplified technique to excise corneal and to eviscerate retinal tissues from the ocular globe of human cadaveric donors. The technique described here will help to excise good quality tissues to be used for transplantation, surgical or research purposes without damaging other tissues of the ocular globe.

Için Basitleştirilmiş Tekniği<em&gt; Yerinde</emİnsan Oküler Globe gelen Kornea ve Retina Doku Eviserasyon of&gt; eksizyonu

Enucleation is the process of retrieving the ocular globe from a cadaveric donor leaving the rest of the globe undisturbed. Excision refers to the ...

Murine Model of Wound Healing

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. Impaired wound healing, which occurs in diabetic patients for example, can lead to severe unfavorable outcomes such as amputation. There is, therefore, an increasing impetus to develop novel agents that promote wound repair. The testing of these has been limited to large animal models such as swine, which are often impractical. Mice represent the ideal preclinical model, as they are economical and amenable to genetic manipulation, which allows for mechanistic investigation. However, wound healing in a mouse is fundamentally different to that of humans as it primarily occurs via contraction. Our murine model overcomes this by incorporating a splint around the wound. By splinting the wound, the repair process is then dependent on epithelialization, cellular proliferation and angiogenesis, which closely mirror the biological processes of human wound healing. Whilst requiring consistency and care, this murine model does not involve complicated surgical techniques and allows for the robust testing of promising agents that may, for example, promote angiogenesis or inhibit inflammation. Furthermore, each mouse acts as its own control as two wounds are prepared, enabling the application of both the test compound and the vehicle control on the same animal. In conclusion, we demonstrate a practical, easy-to-learn, and robust model of wound healing, which is comparable to that of humans.

A murine model of cutaneous wound healing that can be used to assess therapeutic compounds in physiological and pathophysiological settings.

Yara Şifa murin Modeli

Wound healing and repair are the most complex biological processes that occur in human life. After injury, multiple biological pathways become activated. ...

Remote Limb Ischemic Preconditioning:  A Neuroprotective Technique in Rodents

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. Sublethal ischemia has also been shown to upregulate protective mechanisms in remote tissues. A brief period of ischemia (5-10 min) in the hind limb of mammals induces self-protective responses in the brain, lung, heart and retina. The effect is known as remote ischemic preconditioning (RIP). It is a therapeutically promising way of protecting vital organs, and is already under clinical trials for heart and brain injuries. This publication demonstrates a controlled, minimally invasive method of making a limb &#8211; specifically the hind limb of a rat &#8211; ischemic. A blood pressure cuff developed for use in human neonates is connected to a manual sphygmomanometer and used to apply 160 mmHg pressure around the upper part of the hind limb. A probe designed to detect skin temperature is used to verify the ischemia, by recording the drop in skin temperature caused by pressure-induced occlusion of the leg arteries, and the rise in temperature which follows release of the cuff. This method of RIP affords protection to the rat retina against bright light-induced damage and degeneration.

Remote ischemic preconditioning (RIP) is a method of conditioning tissues against damaging stress. We have established a method of remote ischemia at the hind limb, by inflating a sphygmomanometer cuff for 5-10 min. The neuroprotective capabilities of RIP have been demonstrated in a model of retinal degeneration in rodents.

Uzaktan Ekstremite İskemik Önkoşullanma: Kemirgenler Bir Nöroprotektiftir Tekniği

Sublethal ischemia protects tissues against subsequent, more severe ischemia through the upregulation of endogenous mechanisms in the affected tissue. ...

A Mouse Fetal Skin Model of Scarless Wound Repair

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs across species but is age dependent. The transition from a scarless to scarring phenotype occurs in the third trimester of pregnancy in humans and around embryonic day 18 (E18) in mice. However, this varies with the size of the wound with larger defects generating a scar at an earlier gestational age. The emergence of lineage tracing and other genetic tools in the mouse has opened promising new avenues for investigation of fetal scarless wound healing. However, given the inherently high rates of morbidity and premature uterine contraction associated with fetal surgery, investigations of fetal scarless wound healing in vivo require a precise and reproducible surgical model. Here we detail a reliable model of fetal scarless wound healing in the dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

During mammalian development, early gestational skin wounds heal without a scar. Here we detail a reliable and reproducible model of fetal scarless wound healing in the cutaneous dorsum of E16.5 (scarless) and E18.5 (scarring) mouse embryos.

Scarless Yara Repair Fare Fetal Cilt Modeli

Early in utero, but not in postnatal life, cutaneous wounds undergo regeneration and heal without formation of a scar. Scarless fetal wound healing occurs ...

A Piglet Model of Neonatal Hypoxic-Ischemic Encephalopathy

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the world&#8217;s 2.9 million neonatal deaths. Animal models of HIE have contributed to the understanding of the pathophysiology in HIE, and have highlighted the dynamic process that occur in brain injury due to perinatal asphyxia. Thus, animal studies have suggested a time-window for post-insult treatment strategies. Hypothermia has been tested as a treatment for HIE in pdiglet models and subsequently proven effective in clinical trials. Variations of the model have been applied in the study of adjunctive neuroprotective methods and piglet studies of xenon and melatonin have led to clinical phase I and II trials1,2. The piglet HIE model is further used for neonatal resuscitation- and hemodynamic studies as well as in investigations of cerebral hypoxia on a cellular level. However, it is a technically challenging model and variations in the protocol may result in either too mild or too severe brain injury. In this article, we demonstrate the technical procedures necessary for establishing a stable piglet model of neonatal HIE. First, the newborn piglet (&#60; 24 hr old, median weight 1500 g) is anesthetized, intubated, and monitored in a setup comparable to that found in a neonatal intensive care unit. Global hypoxia-ischemia is induced by lowering the inspiratory oxygen fraction to achieve global hypoxia, ischemia through hypotension and a flat trace amplitude integrated EEG (aEEG) indicative of cerebral hypoxia. Survival is promoted by adjusting oxygenation according to the aEEG response and blood pressure. Brain injury is quantified by histopathology and magnetic resonance imaging after 72 hr.

Hypoxic-ischemic encephalopathy following perinatal asphyxia can be studied using animal models. We demonstrate the procedures necessary for establishing a piglet model of neonatal hypoxic-ischemic encephalopathy.

Yenidoğan Hipoksik-İskemik Ensefalopati A Piglet Modeli

Birth asphyxia, which causes hypoxic-ischemic encephalopathy (HIE), accounts for 0.66 million deaths worldwide each year, about a quarter of the ...

Demonstration of the Rat Ischemic Skin Wound Model

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and unrelieved pressure due to immobility. Animal models have been developed that attempt to mimic these conditions for the purpose of furthering our understanding of the complexity of chronic wounds. The model described herein is a rat ischemic skin flap model that permits a prolonged reduction of blood flow resulting in wounds that become ischemic and resemble a chronic wound phenotype (reduced vascularization, increased inflammation and delayed wound closure). It consists of a bipedicled dorsal flap with 2 ischemic wounds placed centrally and 2 non-ischemic wounds lateral to the flap as controls. A novel addition to this ischemic skin flap model is the placement of a silicone sheet beneath the flap that functions as a barrier and a splint to prevent revascularization and reduce contraction as the wounds heal. Despite the debate of using rats for wound healing studies due to their quite distinct anatomic and physiologic differences compared to humans (i.e., the presence of a panniculus carnosus muscle, short life-span, increased number of hair follicles, and their ability to heal infected wounds) the modifications employed in this model make it a valuable alternative to previously developed ischemic skin flap models.

The rat, due to its size, availability, and rather docile behavior, has been utilized as a research model for many years. The goal of this protocol is to utilize the rat as an ischemic skin wound healing model to provide valuable insight into the pathophysiology of chronic wounds.

Sıçan İskemik Cilt Yara Modeli Gösteri

The propensity for chronic wounds in humans increases with ageing, disease conditions such as diabetes and impaired cardiovascular function, and ...

Murine Left Anterior Descending (LAD) Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by reduced blood supply to the heart, resulting in the loss of oxygen to and the ensuing necrosis of the heart muscle. The MI model has gained popularity for its use as a short-term ischemia-reperfusion model and a long-term permanent ligation model. Below, we describe a reliable method for the permanent ligation of the LAD. With mouse genetic engineering technology becoming more advanced, and with an increasing availability of quality murine surgical instruments, the mouse has become a popular model for MI surgeries. Our surgical model incorporates the use of an easily reversible anesthetic for the rapid recovery of the mouse; a minimally invasive endotracheal intubation without involving a tracheotomy; and a thoracentesis through the original thoracotomy site without creating an additional incision in the chest, as is done in some other methods, to effectively remove excess blood and air from the chest cavity. This method is comparatively less invasive than other methods, which dramatically reduces surgical and post-surgical complications and mortality and improves reproducibility.

Murine Left Anterior Descending LAD Coronary Artery Ligation: An Improved and Simplified Model for Myocardial Infarction

We provide a reliable method for left anterior descending artery (LAD) ligation in a mouse model. This method is comparatively less invasive than other methods, involving endotracheal intubation, a left-sided thoracotomy approach, and thoracentesis. This method can be used as a model for both acute and chronic myocardial infarction (MI).

Kemirgen Sol Ön İnen (LAD) koroner arter ligasyonu: Miyokard İnfarktüsü Yönelik Gelişmiş ve Basitleştirilmiş Modeli

Ischemic heart disease (IHD), or acute coronary syndrome (ACS), is one of the leading causes of death in the United States. IHD is characterized by ...

An Intact Pericardium Ischemic Rodent Model

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to induce myocardial injury). The majority of pre-clinical myocardial infarction models require the disruption of pericardial integrity with loss of the homeostatic cellular milieu. However, recently a methodology has been developed by us to induce myocardial infarction, which minimizes pericardial damage and retains the heart&#39;s resident immune cell population. An improved cardiac functional recovery in mice with an intact pericardial space following coronary ligation has been observed. This method provides an opportunity to study inflammatory responses in the pericardial space following myocardial infarction. Further development of the labeling techniques can be combined with this model to understand the fate and function of pericardial immune cells in regulating the inflammatory mechanisms that drive remodeling in the heart, including fibrosis.

This protocol outlines the steps for inducing myocardial infarction in mice while preserving the pericardium and its contents.

Bozulmamış Bir Perikard İskemik Kemirgen Modeli

This protocol has shown that the pericardium and its contents play an essential anti-fibrotic role in the ischemic rodent model (coronary ligation to ...

A Simplified Model for Heterotopic Heart Valve Transplantation in Rodents

There is an urgent clinical need for heart valve replacements that can grow in children. Heart valve transplantation is proposed as a new type of transplant with the potential to deliver durable heart valves capable of somatic growth with no requirement for anticoagulation. However, the immunobiology of heart valve transplants remains unexplored, highlighting the need for animal models to study this new type of transplant. Previous rat models for heterotopic aortic valve transplantation into the abdominal aorta have been described, though they are technically challenging and costly. For addressing this challenge, a renal subcapsular transplant model was developed in rodents as a practical and more straightforward method for studying heart valve transplant immunobiology. In this model, a single aortic valve leaflet is harvested and inserted into the renal subcapsular space. The kidney is easily accessible, and the transplanted tissue is securely contained in a subcapsular space that is well vascularized and can accommodate a variety of tissue sizes. Furthermore, because a single rat can provide three donor aortic leaflets and a single kidney can provide multiple sites for transplanted tissue, fewer rats are required for a given study. Here, the transplantation technique is described, providing a significant step forward in studying the transplant immunology of heart valve transplantation.

This protocol describes a simple and efficient method for the transplantation of aortic valve leaflets under the renal capsule to allow for the study of alloreactivity of heart valves.