The authors have nothing to disclose.

Not: Bu çalışma Etik kurul numarası CEEA34.PB.103.12 tarafından yetkilendirilmiştir. Bir Hayvan Modeli olarak Piglets 1. Kullanımı <ol><li> Her iki grup (n = 6 her grupta) gerçekleştirin, cinsiyet, yaş (15 ± 3 ay) ve ağırlık (30 ± 10 kg) (kontrol grubu ve kronik hipoksi (CH) grubunun) cinsinden eşleşti. Ev CH hipobarik odasının (0.4 atm) &#39;de 3 hafta boyunca grubudur ve evin normal Normobarik (1 atm) koşullarda kontrol grubu yer alır. </li><li> Şekil 1 &#39;de gösterildiği gibi, 2 metre kare ayak izi ve 1.6 metre yüksekliğe sahip bir pleksiglas kutuya oluşan hipobarik haznesi. </li><li> Sürekli izlemek ve 18 ° C arasında bir sıcaklık ve 0.4 atm basınç sağlar. 8 m 3 başına saat bir hava yenileme oranı sağlayarak, bir vakum pompası ile yeterli havalandırma sağlayınız. </li><li> Uygun çöp odasında iki hayvan yerleştirin. Her 48 saat, yarısı için Normobarik koşullar kutuya basınç gerikutusu kaçan önlemek closedto tutulan bir saat, iki hayvan mevcudiyetinde, kutu temizlenir. Pulmoner hipertansiyon uyaran Bu yöntem yaygın olarak 13 onaylanmıştır. </li><li> Hayvanlar anestezi <ol><li> Tiyopental bir başlangıç ​​damardan enjeksiyon (10 mg / kg) ile domuz yavrusu anestezisi ve izofluran (1,5-3,5%) sürekli solunum yoluyla anestezi bakımı. Kornea kuruluğunu önlemek için Domuz yavrularının gözlerinin içine Carbopol jel iki damla uygulayın. </li><li> Göğüs ortaya çıkarmak için bir fleksiyonda pozisyonda bağlanmış onların ön ayakları ile sol lateral dekübit pozisyonunda hayvanları yerleştirin. Sabun ve su ile cildinizi temizleyin ve sonra göğsüne ultrason penetrasyonu engelleyen herhangi bir saç kaldırmak için elektrikli tıraş makinesi kullanarak tıraş. </li></ol></li><li> Ekokardiyogram </li><li> Ekokardiyografi ile uzunlamasına ve non-invaziv PAH gelişimini izlemek. 3 MHz transdüser kullanılarak her hafta bir yankı gerçekleştirin. Record sağ ve sol pençeleri ve göğüs sağ tarafında 3 elektrotlar yerleştirerek bir elektrokardiyogram. </li><li> Bir-Doppler probu kullanılarak üç farklı görülme (boyuna, minör ekseni ve apikal) Tutanak iki boyutlu ve M-mod görüntüleme verileri. Dördüncü ve beşinci sol interkostal alanlar arasında sağ el ve yerinde probu tutun. Yavaş yavaş yukarı ve aşağı hareket ettirin probu doğru dönen ve iyi bir resim çözünürlüğü farklı kardiyak yapılar için (yani septum) elde edilene kadar bıraktı. akustik pencere göğüs kalbin konumuna bağlı olarak hafifçe bir hayvandan diğerine farklılık göstermektedir. </li><li> Bu insidansı her biri için aynı zamanda EKG kayıt ve en az 10 kardiyak döngü off-line analiz etkinleştirmek için. Bitiş diyastol EKG&#39;de Q dalgası başlangıcı ile aynı zamana rastlayan kalp döngüsü içinde nokta olarak tanımlanır. Son sistol T dalgasının başlaması ile çakışmaktadır. </li><li> Bir mitral ve triküspid kapak kan akımını ölçünPical görünüm Doppler ultrasonografi. Manubrium Sterni ucundaki Doppler probu yerleştirin; Örnekleme bölge valfini geçen kan akımını kaydetmek için sadece valfin üzerinde bulunan oldu. </li><li> Mitral ve triküspit kapaklarda yoluyla kan akımı ve aort ve pulmoner kapakların ayrılmaz hız-zaman elde etmek Doppler flowmetre ile kardiyak döngüsü sırasında kan hızı kaydedin. Ekografik tarafından sağlanan sabit görüntü veya dizi görüntüleri almak için saniyede 25 kare hızında görüntü saklamak için ekografik video grafik dizisi kullanın. </li><li> Boyutları ve ölçü aletleri kullanarak kalp boşluklarında yüzey alanı ve uluslararası tavsiyelere 14 uyarınca ekografik entegre yazılım tarafından önerilen yüzey alanlarının hatlarını ölçün. </li><li> TM (zaman-hareket) minör eksen insidansında 14 kayıt ile diyastol ve sistol sırasında sağ ventrikül serbest duvar kalınlığını ölçün. </li><li> Meaküçük eksen 14 akciğer vanaların ucunda pulmoner arter kök çapı emin olun. </li><li> Septum ve EKG 14 T dalgasının ucunda EKG&#39;de ve sistolde Q dalgalarının başında boyuna görünümde TM hareket diyastol sırasında sol ventrikül arka duvarı ölçün. </li><li> Sol ventrikül diyastol sonu çapları (LVEDD) ve sol ventrikül sistol sonu çapları (LVESD) ölçün. Fraksiyonel kısalma (FS) formülü FS (%) = (LVEDD-LVESD) / LVEDD kullanarak hesaplayın. Aort çapı ve sağ ve sol atrium yüzey alanını ölçün. </li><li> Süresi, hız-zaman indeksi 14 akış, E ve A dalga E dalgasının deselerasyon yarı zamanlı maksimum genlik: mitral ve triküspit kan akışlarının ayrılmaz hız-zaman, aşağıdaki ölçün. </li><li> Pulmoner arter Doppler ölçümlerinden, aşağıdakileri ölçmek: maksimum hız, yükseliş yarı zamanlı,süresini ve 14 olan ayrılmaz akar. </li><li> Simpson 15 yöntemi kullanılarak sol ventrikül hacmini değerlendirin. </li><li> Bütün grup müteakip istatistiksel analiz için bir veritabanındaki her domuz yavrusu için verileri saklayın. </li></ol> 2. Sağ Kalp Kateterizasyon <ol><li> Hayvan hazırlanması <ol><li> Pulsatil kateter yerleştirilmesinden önce, domuz pulmoner hipertansiyon ikna etmek amacıyla 3 hafta boyunca bir hipobarik odasına yerleştirilir. </li><li> Ameliyat öncesi 24 saat (katı gıda 24 saat, 8 su için saat 12) için hayvanları oruç. </li><li> Önce SKK 24 saat, iyi eğitimli veteriner rektal termometre ile mukoza rengi, kapiller dolum zamanı, küresel akciğer ve stetoskop kullanarak kalp fonksiyonları ve vücut sıcaklığını değerlendirmek için bir ön-anestezi klinik muayene gerçekleştirecektir var. </li><li> İndüksiyon o önce midazolam (kas içine, 0.5 mg / kg) ve morfin hidroklorür (kas içi, 0,1 mg / kg) 15 dakika ila 30 enjeksiyonları yönetmef anestezi. Indüksiyon her 4-6 saat boyunca, morfin hidroklorür (0,05-0,5 mg / kg, kas içine) ve tekrar enjeksiyonu. </li><li> Etkili kadar kısmi bir enjeksiyon ile daha sonra 5 mg / kg bir başlangıç ​​bolus enjeksiyon yoluyla, sodyum tiopental (10 mg / kg, damar içine) uygulayınız. Torba ile bu takip ve entübasyon kadar havalandırma maske. </li><li> Piglet entübasyon <ol><li> Pramocaine jel ile tüp sürün. Bunu pekiştirmek ve entübasyon sürecini kolaylaştırmak için tüp içine bir metal kalemi takın. </li><li> Derin anestezi sağlamak için göz kapaklarını dokunun. Dil yükseltmek ve vokal kord yaralanmasını önlemek için bir laringoskop kullanılarak, gırtlak doğrudan görselleştirme tarafından entübasyon gerçekleştirin. Yetersizliği ile ilgili sorunları önlemek için tüp balonu şişirin. </li></ol></li><li> Dakikada 10-12 soluk alıp solunum hızını kontrol; 7-10 ml / kg mevcut hacmi, pozitif e 25 H2O ve 2 saniyelik bir nefes alma fazı 30 cm insüflasyonu basıncı5 cm H 2 O nd-ekspiratuar basınç </li><li> % 100 oksijen (indüksiyon 2 / dakika, 1 L / dak 1.5-2.5% oksijen akışı bakım L 3 oksijen akışı ile% 3-5) &#39;de izofluran ile hayvan anestezisi. Adım 1.5.1 deki gibi korneaya karbopol jel uygulayın. </li><li> Kuyruk aurikular artere bir kateter heparinli takın, bir dikiş dikiş yerinde sabit yeşil kanül ile deri altı infüzyon yoluyla (% 0.9 tuzlu su 5 ml 5,000 IU / ml heparin ile çivili). </li><li> Laktatlı Ringer çözeltisi (10-20 ml / kg / hr) içine. </li><li> Bir hafif eğimli muayene masasına hayvan yerleştirin. Tükürük akışını teşvik etmek biraz aşağıya doğru eğimli kafa tutun. </li></ol></li><li> İzleme <ol><li> Her 5 dk, kontrol ve bireysel anestezi vaka raporunda aşağıdaki değerleri kayıt: mukoza zarı rengi ve kapiller dolum zamanı, çene kas tonusu ve göz küresi pozisyon, miosis / midriyazis, palpebral refleks. </li><li> Sürekli kalp ve respira izlemektory hızı, pulse oksimetre, vücut ısısı ve elektrokardiyogram. Femoral artere arteriyel introducer yerleştirin. Femoral artere, uzun kateter büyük kalibreli 10 cm yerleştirin ve sistemik kan basıncını izlemek. </li></ol></li><li> Pulsatil kateterin kurma NOT: Bu tıbbi cihaz yan yana yerleştirilir ve birbirine kaynaklanmış iki kateter oluşur. birinci uzak kısmı, 20 mm çapında ve 5 ml&#39;lik bir maksimum hacim kapasiteli standart bir balon bağlanır. ikinci bir kateter, pulmoner arter konumlandırılmasını sağlamak için tel takılmasını sağlar. Cihaz 0.035 bir iç göstergesi ve 12 Fr., dış çapı 750 mm uzunluğunda <ol><li> Deneyler için, her bir darbe için 2.5 ml&#39;lik bir hacmi ile, enflasyon sırasında deflasyon ve pozitif basınç sırasında balon aktif bir vakum uygulayan bir küçük Harvard 683 hayvan ventilatör ile titreşim gerçekleştirin. Top için itici gaz olarak helyum kullanınoon gaz embolisi önlemek için pompa. </li><li> Protokol sırasında herhangi bir kalp ritim bozuklukları belgelemek için sürekli yüzey elektrokardiyografi trase kaydedin. Sol femoral arterde, hemodinamik bir izleme sistemine bağlı bir 20 birimlik bir sonda için bir sensör cihazı, bağlayın. </li></ol></li><li> Sağ kalp kateterizasyonu <ol><li> Yıkayın ve hayvanın boynunu tıraş. Bir gazlı kompres kullanarak bir cilt antiseptik solüsyon (Betadine fırçalayın) ile cilt temizleyin. Cerrahi siteyi ayırmak için, sağ omuz ve manubrium Sterni arasında doğru juguler etrafında steril örtüler yerleştirin. </li><li> Steril makas ile 4 cm&#39;lik boyuna kesi sağ omuz ve manubrium Sterni arasında yarım olun. </li><li> Dikkatle forseps ile deri ve kas tabakaları kaldırmak. Daha sonra yavaşça yaklaşık 5 sm bir uzunluğu boyunca damar çevreleyen bağ dokusu çıkarın. Kanamayı önlemek için uzak tarafı klibi. Pr etrafında bir bağlayıcı tel yerleştirinoximal yandan yarı kesit sonra damar açılmasını kontrol etmek için. </li><li> Belirli bir küçük çok keskin keski kullanarak, enine ikiye damarı kesti. Kesi kenarları düzgün olduğundan emin olun. İnce köpük kullanarak, kesi bir kenarı yükseltmek ve yavaşça venin proksimal tarafına kateter itin. Kontrol bağlayıcı tel ile kanama. </li><li> Şah damara kateter tanıtın ve art arda superior vena kava, sağ atrium, sağ ventrikül ve nihayet, pulmoner arter ile itmek. </li><li> Her kalp boşluğu ve pulmoner arter (T0) üzerine, 10 stabil kardiyak döngü üzerinde baskılarını kaydedin. Kalp kanı 1 dakika aralıklarla üç kere akış ölçün. </li><li> Radyoskopik kontrol altında pulmoner arter balon kateter yerleştirin. Şişirmek ve helyum 1 cm 3 balon (titreşim) Söndür. 10 dakika boyunca titreşim devam edin. Tutanak, her kalp boşluğunda 10 stabil kardiyak döngü üzerinde baskılar ve pulmoner artery ve 10 dakika sonra (T1) kalp kan akışını ölçmek. </li><li> Yine pulsatilite protokolü (T2) sonra 30 dk kalp kan akımını ölçün. </li></ol></li></ol> 3. NO Ölçümü <ol><li> Tamamen dolana kadar solunan solunum gaz çıkış borusuna bir Douglas torba bağlayın. NO nefes analizörü içinde boru üzerine yerleştirin. </li><li> Yavaş ve sürekli elastik Douglas çanta sıkıştırarak analizörü solunan havanın zorlar. Sabit akış sağlamak için analizörü debimetre ile torba çıkışı ölçün. </li></ol> 4. Histoloji Ölçümleri <ol><li> Anestezi altında, merkezinde yerleştirilen pulsatil kateterinin içine Dolethal 30 ml (ötenazi için enjekte edilebilir çözelti) enjekte edilir. </li><li> Hemen Ötenazi sonra, biraz uzunlamasına manubrium testere ile göğüs açık kalbi taşımak ve sağ akciğer tutun. Sonra makas diseksiyon kullanarak, 3 numune mi iki 2 veya 3 cm kesilmişAkciğerin ddle lob. </li><li> Ek bileşen bir sıvı azot içinde numune ve -80 ° C&#39;de saklandı dondurma. 24 saat süre ile% 3.7 paraformaldehid içinde ikinci bir numune saptamak ve daha sonra, sonraki histolojik analiz için parafin içine gömmek. </li><li> Daha önce açıklandığı gibi 16 histoloji ölçümleri yapın. 2 ölçüm / arter 10 arterler / domuz yavrusu ve 6 yavrusu / grup aşağıdaki gibidir: PA duvar kalınlığını ölçün. </li><li> Istatistiksel analiz gerçekleştirin. Değerler ortalama ± SEM kat değişiklik olarak ifade edildi. <ol><li> İki aracı karşılaştırmak için, bir Student t testi kullanın. Ikiden fazla karşılaştırmak için bir Dunn testi ile, bir tek-yönlü ANOVA kullanımı. P &lt;0.05 (*) istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Malenfant, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signal+transduction+in+the+development+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Signal transduction in the development of pulmonary arterial hypertension.</a> Pulm Circ. 3 (2), 278-293 (2013).</li><li>Paulin, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Signal+transducers+and+activators+of+transcription-3/pim1+axis+plays+a+critical+role+in+the+pathogenesis+of+human+pulmonary+arterial+hypertension.">Signal transducers and activators of transcription-3/pim1 axis plays a critical role in the pathogenesis of human pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 123 (11), 1205-1215 (2011).</li><li>Courboulin, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+miR-204+in+human+pulmonary+arterial+hypertension.">Role for miR-204 in human pulmonary arterial hypertension.</a> J Exp Med. 208 (3), 535-548 (2011).</li><li>Bonnet, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+nuclear+factor+of+activated+T+cells+in+pulmonary+arterial+hypertension+can+be+therapeutically+targeted.">The nuclear factor of activated T cells in pulmonary arterial hypertension can be therapeutically targeted.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 104 (27), 11418-11423 (2007).</li><li>Meloche, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+for+DNA+damage+signaling+in+pulmonary+arterial+hypertension.">Role for DNA damage signaling in pulmonary arterial hypertension.</a> Circulation. 129 (7), 786-797 (2014).</li><li>Humbert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cellular+and+molecular+pathobiology+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Cellular and molecular pathobiology of pulmonary arterial hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 43 (12 Suppl S), 13S-24S (2014).</li><li>Archer, S. L., Michelakis, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+evidence-based+approach+to+the+management+of+pulmonary+arterial+hypertension.">An evidence-based approach to the management of pulmonary arterial hypertension.</a> Curr Opin Cardiol. 21 (4), 385-392 (2006).</li><li>Li, M., Scott, D. E., Shandas, R., Stenmark, K. R., Tan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+pulsatility+flow+induces+adhesion+molecule+and+cytokine+mRNA+expression+in+distal+pulmonary+artery+endothelial+cells.">High pulsatility flow induces adhesion molecule and cytokine mRNA expression in distal pulmonary artery endothelial cells.</a> Ann Biomed Eng. 37 (6), 1082-1092 (2009).</li><li>Li, M., Stenmark, K. R., Shandas, R., Tan, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+pathological+flow+on+pulmonary+artery+endothelial+production+of+vasoactive+mediators+and+growth+factors.">Effects of pathological flow on pulmonary artery endothelial production of vasoactive mediators and growth factors.</a> J Vasc Res. 46 (6), 561-571 (2009).</li><li>Nour, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrapulmonary+shear+stress+enhancement:+a+new+therapeutic+approach+in+pulmonary+arterial+hypertension.">Intrapulmonary shear stress enhancement: a new therapeutic approach in pulmonary arterial hypertension.</a> Pediatr Cardiol. 33 (8), 1332-1342 (2012).</li><li>Barst, R. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+differential+assessment+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Diagnosis and differential assessment of pulmonary arterial hypertension.</a> J Am Coll Cardiol. 43 (12 Suppl S), 40S-47S (2004).</li><li>Galie, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+on+diagnosis+and+treatment+of+pulmonary+arterial+hypertension.+The+Task+Force+on+Diagnosis+and+Treatment+of+Pulmonary+Arterial+Hypertension+of+the+European+Society+of+Cardiology.">Guidelines on diagnosis and treatment of pulmonary arterial hypertension. The Task Force on Diagnosis and Treatment of Pulmonary Arterial Hypertension of the European Society of Cardiology.</a> Eur Heart J. 25 (24), 2243-2278 (2004).</li><li>Naeije, R., Dewachter, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Animal models of pulmonary arterial hypertension.</a> Rev Mal Respir. 24 (4 pt 1), 481-496 (2007).</li><li>Via, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=International+evidence-based+recommendations+for+focused+cardiac+ultrasound.">International evidence-based recommendations for focused cardiac ultrasound.</a> J Am Soc Echocardiogr. 27 (7), e681-e683 (2014).</li><li>Folland, E. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessment+of+left+ventricular+ejection+fraction+and+volumes+by+real-time,+two-dimensional+echocardiography.+A+comparison+of+cineangiographic+and+radionuclide+techniques.">Assessment of left ventricular ejection fraction and volumes by real-time, two-dimensional echocardiography. A comparison of cineangiographic and radionuclide techniques.</a> Circulation. 60 (4), 760-766 (1979).</li><li>Meloche, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Critical+role+for+the+advanced+glycation+end-products+receptor+in+pulmonary+arterial+hypertension+etiology.">Critical role for the advanced glycation end-products receptor in pulmonary arterial hypertension etiology.</a> J Am Heart Assoc. 2 (1), e005157 (2013).</li><li>Nour, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intrapulmonary+shear+stress+enhancement:+a+new+therapeutic+approach+in+acute+myocardial+ischemia.">Intrapulmonary shear stress enhancement: a new therapeutic approach in acute myocardial ischemia.</a> Int J Cardiol. 168, 4199-4208 (2013).</li><li>Barrier, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Today's+and+tomorrow's+imaging+and+circulating+biomarkers+for+pulmonary+arterial+hypertension.">Today's and tomorrow's imaging and circulating biomarkers for pulmonary arterial hypertension.</a> Cell Mol Life Sci. 69 (17), 2805-2831 (2012).</li><li>Budev, M. M., Arroliga, A. C., Jennings, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+evaluation+of+pulmonary+hypertension.">Diagnosis and evaluation of pulmonary hypertension.</a> Cleve Clin J Med. 70, S9-S17 (2003).</li><li>Barst, R. J., Channick, R., Ivy, D., Goldstein, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+perspectives+with+long-term+pulsed+inhaled+nitric+oxide+for+the+treatment+of+pulmonary+arterial+hypertension.">Clinical perspectives with long-term pulsed inhaled nitric oxide for the treatment of pulmonary arterial hypertension.</a> Pulm Circ. 2 (2), 139-147 (2012).</li><li>Pepke-Zaba, J., Higenbottam, T. W., Dinh-Xuan, A. T., Stone, D., Wallwork, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhaled+nitric+oxide+as+a+cause+of+selective+pulmonary+vasodilatation+in+pulmonary+hypertension.">Inhaled nitric oxide as a cause of selective pulmonary vasodilatation in pulmonary hypertension.</a> Lancet. 338 (8776), 1173-1174 (1991).</li><li>Zapol, W. M., Rimar, S., Gillis, N., Marletta, M., Bosken, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nitric+oxide+and+the+lung.">Nitric oxide and the lung.</a> Am J Respir Crit Care Med. 149 (5), 1375-1380 (1994).</li><li>Stenmark, K. R., Meyrick, B., Galie, N., Mooi, W. J., McMurtry, I. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+pulmonary+arterial+hypertension:+the+hope+for+etiological+discovery+and+pharmacological+cure.">Animal models of pulmonary arterial hypertension: the hope for etiological discovery and pharmacological cure.</a> Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 297 (6), L1013-L1032 (2009).</li><li>Torre-Amione, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reversal+of+secondary+pulmonary+hypertension+by+axial+and+pulsatile+mechanical+circulatory+support.">Reversal of secondary pulmonary hypertension by axial and pulsatile mechanical circulatory support.</a> J Heart Lung Transplant. 29 (2), 195-200 (2010).</li></ol>

The authors would like to thank the INRA institute, which housed the piglets, and Cardio Innovating systems for the funding.

İlk defa, o akciğer pulsatil akışında değişiklikler nedensel kronik hipoksi maruziyetinde sekonder PAH gelişimi ile ilişkili olduğu gösterilmiştir. Bu öteleme yaklaşım özel olarak tasarlanmış kateter kullanarak pulmoner pulsatil akışında bir yapay artış uyaran muhtemelen YOK nesil artırarak, pulmoner hipertansiyon iyileştirdiğini kanıt sağlar. Bu bulgular, endojen üretimi, sistemik fonksiyonlarını etkilemeden pulmoner dolaşım içinde mekanik olarak güvenli b...

Pulmoner arteriyel hipertansiyon, pulmoner damar etkileyen hayatı tehdit eden bir hastalıktır. Bronşdilatörler artışa (endotelin, serotonin) ve vazodilatörler bir azalma (NO, prostasiklin) arasında bir dengesizlik PAH gelişimine katkıda alanında anlaşma vardır. Zamanla, bu yanlısı konstriktif fenotip vasküler lezyonların 1 gelişimine katkıda karmaşık bir pro-proliferatif ve anti-apoptotik fenotip evrilir. Vazokonstriktörlere uzun süreli maruz kalma [Ca2 +] belirgin ve sürekli bir bir artışa yol açar, pulmoner arter yumuşak kas hücrelerinin i, bir etmek PASMC çoğalma ve dirençli olan, örneğin NFAT 2-4 gibi çeşitli kalsiyum düzenlenmiş transkripsiyon faktörleri, aktivasyonunu sağlayan apoptoz fenotipi 5. Bu fenotip, PA basıncı ve pulmoner res hem de bir artışa katkıda bulunan, pulmoner vasküler lezyonlara yol açarsonuçta ölümcül sağ kalp yetmezliği 6 yol açan istance. Şu anda, yaşamın 7 hastaların kalitesini artırmak olduğunu birkaç olsa PAH tersine hiçbir tedavisi yoktur. Bu tedaviler arasında, inhale NO tedavinin etkinliği gösterilmiştir ancak kısa yarılanma ömrü nedeniyle klinik uygulamada kullanmak zordur. Bu nedenle, daha kararlı ve dayanıklı tedaviler, prostasiklin analoglan veya endotelin reseptör blokerleri 7 olarak tercih edilmiştir. Daha iyi tedaviler geliştirmek için, geliştirmek ve PAH patofizyoloji bilgi genişletmek için esastır. Pulsatilite yüksek basınçlı akım yaralanmaları 8,9 arasında elastik olmayan uzak arter koruma, kayma strese bağlı damar genişlemesi aktive iyi bilinen bir uyarıcıdır. Aortopulmoner cerrahi şant sekonder PAH bir modelde, Nour ve ark. Gösterdi intrapulmoner kesme stress-aracılı endotel fonksiyon geliştirme 10. Pek çok çalışma, NO, prostasiklin ve ET-1 sentezleme yakın aralıklı akışında değişimler tarafından düzenlenir olduğunu göstermiştir. Gerçekten de, pulsatil akış ılımlı bir artış eNOS aktivitesi ve PAH azalmış her ikisi de prostasiklin seviyelerini artırır. Pulsatil akım modülasyonu muhtemelen PAH etiyolojisinde rol ve yapay pulmoner dolaşımda NO ve prostasiklin üretimini artırarak çekici ve yeni bir yoldur artmaktadır. Bu çalışma 10 dk pulsatil etkileri hipoksi kaynaklı olmuştur kime domuz yavrularında bir pulmoner hipertansiyon (PH) modelinde hemodinamik ölçümler üzerinde yeni geliştirilen pulsatil kateter kullanarak akış değerlendirmek amaçlanmıştır. Pulmoner arter pulsatilitesini artan ve böylece pulmoner arter basıncı azaltarak, pulmoner arterlerin damar gevşemesini uyardığı öne sürülmüştür. Sağ kalp kediheterization (SKK) tanı için önemli bir klinik müdahale ve takibi PAH hastalarının. Nitekim, bu vasküler reaktivite 11,12 yanı sıra hastalığın ilerlemesini değerlendirmek için PAH ve izin verir hekim teşhis en güvenilir yoludur. Aslında, her PAH hasta SKK birkaç kez geçirilir. Büyük hayvanlarda Bu çalışmada değerlendirilmesi ve düzenli bir SKK işlemi sırasında PAH tedavisinde pulsatil kateter etkinliğini ve güvenilirliğini ortaya koymayı amaçlamaktadır. Pulsatil kateterler zaten mevcut olan ve SKK rutin PAH hastalarında yapıldığından, bu çalışma hızla klinik araştırmalar yürütmek muktedir gerekli tüm bilgi sağlar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1421">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:311px;">Drugs for anesthesia</td>
			<td style="width:336px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">sodium thiopental, THIOPENTAL SODIUM</td>
			<td>Abbott, France</td>
			<td>0000071-73-8</td>
			<td>powder 
			3 place Gustave Eiffe 94518 RUNGIS CEDEX.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;isoflurane, FORANE</td>
			<td>Abbott, France</td>
			<td style="width:141px;">05260-05</td>
			<td>glass bottle 250 ml 
			3 place Gustave Eiffe 94518 RUNGIS CEDEX.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">midazolam, Hypnovel</td>
			<td>Accord Healthcare&#160;</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>injectable ampoules 1mg/ml 
			45 Rue du Faubourg de Roubaix 59000 Lille France</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">pramocaine,TRONOTHANE 1 %&#160;</td>
			<td>Laboratoires LISAPHARM</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>Gel appl locale T/30g 
			3, rue Scheffer. 75016 Paris.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">morphine chlohydrate Lavoisier</td>
			<td>CMD Lavoisier Laboratoires CHAIX et DU MARAIS</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>injectable ampoules&#160; 
			7, rue Labie -75017 Paris - France</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:311px;">Acrylates Copolymer-Carbopol&#174; Aqua SF-1 Polymer</td>
			<td>Lubrizol</td>
			<td></td>
			<td>gel appl local 
			Elys&#233;es La D&#233;fense 19 le Parvis 92073 Paris la d&#233;fense</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Material&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ventilateur Harvard 683</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>DRIM 75 rue des Anglais - 78700 Conflans Ste Honorine &#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Echographe Voluson E8 with a 3,5 MHz probe</td>
			<td>General Electric</td>
			<td>GEHealthcare</td>
			<td>DRIM 75 rue des Anglais - 78700 Conflans Ste Honorine &#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Pulsatil Catheter</td>
			<td>Cardio inovating system</td>
			<td></td>
			<td>Cardio innovative systems, 33 rue Vivienne, Paris, France 75002</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">NO breath Analyseur</td>
			<td>Respur</td>
			<td>Respur</td>
			<td>26 rue Felix Rouget 95490 Vaureal France</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

increasing pulmonary artery pulsatile flow improves hypoxic pulmonary hypertension in piglets

Pulmoner arteriyel hipertansiyon (PAH) distal pulmoner arter (PA) etkileyen bir hastalıktır. Bu arterler sağ ventrikül yetmezliğine yol, deforme bulunmaktadır. Güncel tedaviler sınırlıdır. Fizyolojik olarak, pulsatil kan akımı damar için zararlıdır. Sürekli pulsatil strese yanıt olarak, damarlar kendini koruma vazodilatasyon ikna etmek için nitrik oksit (NO) bırakın. Bu gözleme dayanarak, bu çalışma bir yapay akciğer pulsatil kan akımı pulmoner arter basıncında NO bağımlı azalma neden olabilir olup olmadığını değerlendirmek için bir protokol geliştirmiştir. Domuz yavrusu bir grup 3 hafta boyunca kronik hipoksi maruz kalmış ve domuz yavrusu bir kontrol grubu ile karşılaştırılmıştır. Haftada bir kez, domuz yavrusu PAH şiddetini değerlendirmek için ekokardiyografi yapıldı. Hipoksi maruz sonunda, domuz yavrusu pulsatil kateter kullanılarak pulsatil protokolüne tabi tutulmuştur. Anestezi ve ameliyat için hazırlandıktan sonra, piglet juguler ven izole ve ca oldutheter radyoskopik kontrol altında sağ atrium, sağ ventrikül ve pulmoner arter yoluyla tanıtıldı. Pulmoner arter basıncı (PAP) derhal (T1) ve (T2) pulsatil protokolünden sonra 30 dakika sonra, (T0) önce ölçüldü. Bu pulsatil protokolü bir NO-bağımlı mekanizma yoluyla ortalama PAP önemli bir azalmaya neden olan bir güvenli ve etkin bir yöntem olduğu kanıtlanmıştır. Bu veriler PAH klinik yönetimi için yeni yollar açmak.

Artan Pulmoner Arter Pulsatif Akış Piglets Kronik Hipoksik Pulmoner Hipertansiyon Bağlı geliştirir Pulsatil akışında artışa hayvanları maruz önce, ultrason domuz pulmoner hipertansiyon gelişti olduğunu kontrol etmek için non-invazif kullanıldı. Şekil 2&#39;de gösterildiği gibi, kronik hipoksi üç hafta pulmoner arter hızlanma süresinde önemli bir azalma (Doppler) RV hipertrofisi (M-modu) bir artış ile karakterize edilen domuz yavrularında pulmoner ...

Watch this Scientific Journal Video about Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets at JoVE.com

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets | Medicine | Video

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Pulmonary hypertension is associated with a significant reduction in pulmonary artery pulsatility, contractility and elasticity, contributing to an increase in pulmonary artery pressure and pulmonary resistance. Using a hypoxic piglet model, this study demonstrated that improving pulmonary artery plasticity using a newly developed pulsatile catheter improves hypoxic pulmonary hypertension.

Artan Pulmoner Arter Pulsatif Akış Piglets içinde Hipoksik Pulmoner Hipertansiyon Artırır

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

increasing-pulmonary-artery-pulsatile-flow-improves-hypoxic-pulmonary

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Medicine

Human Biology

Circulatory and Pulmonary Systems

SCIENTISTS IN ACTION

14.0K Görüntüleme.  Laval University. Pulmonary hypertension is associated with a significant reduction in pulmonary artery pulsatility, contractility and elasticity, contributing to an increase in pulmonary artery pressure and pulmonary resistance. Using a hypoxic piglet model, this study demonstrated that improving pulmonary artery plasticity using a newly developed pulsatile catheter improves hypoxic pulmonary hypertension.

Video: Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

İnsan internal meme arter (İMA) Transplantasyon ve Stent: In-Stent Restenozis Geliştirme Eğitim Bir İnsan Modeli

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Tıp

Videomorphometric Analysis of Hypoxic Pulmonary Vasoconstriction of Intra-pulmonary Arteries Using Murine Precision Cut Lung Slices

Acute alveolar hypoxia causes pulmonary vasoconstriction (HPV) - also known as von Euler-Liljestrand mechanism - which serves to match lung perfusion to ventilation. Up to now, the underlying mechanisms are not fully understood. The major vascular segment contributing to HPV is the intra-acinar artery. This vessel section is responsible for the blood supply of an individual acinus, which is defined as the portion of lung distal to a terminal bronchiole. Intra-acinar arteries are mostly located in that part of the lung that cannot be selectively reached by a number of commonly used techniques such as measurement of the pulmonary artery pressure in isolated perfused lungs or force recordings from dissected proximal pulmonary artery segments1,2. The analysis of subpleural vessels by real-time confocal laser scanning luminescence microscopy is limited to vessels with up to 50 &#181;m in diameter3.
We provide a technique to study HPV of murine intra-pulmonary arteries in the range of 20-100 &#181;m inner diameters. It is based on the videomorphometric analysis of cross-sectioned arteries in precision cut lung slices (PCLS). This method allows the quantitative measurement of vasoreactivity of small intra-acinar arteries with inner diameter between 20-40 &#181;m which are located at gussets of alveolar septa next to alveolar ducts and of larger pre-acinar arteries with inner diameters between 40-100 &#181;m which run adjacent to bronchi and bronchioles. In contrast to real-time imaging of subpleural vessels in anesthetized and ventilated mice, videomorphometric analysis of PCLS occurs under conditions free of shear stress. In our experimental model both arterial segments exhibit a monophasic HPV when exposed to medium gassed with 1% O2 and the response fades after 30-40 min at hypoxia.

Hypoxic pulmonary vasoconstriction (HPV) is an important physiological phenomenon by which at alveolar hypoxia lung perfusion is matched to ventilation. The major vascular segment contributing to HPV is the intra-acinar artery. Here, we describe our protocol for the analysis of HPV of murine pulmonary vessels with diameters of 20-100 &mu;m.

Murine Hassas Kesim Akciğer Dilimleri Kullanılarak Pulmoner Arterlerin Hipoksik Pulmoner Vazokonstriksiyonunun Videomorfometrik Analizi

Acute alveolar hypoxia causes pulmonary vasoconstriction (HPV) - also known as von Euler-Liljestrand mechanism - which serves to match lung perfusion to ...

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. However, very few methods exist to date to investigate lung metastases in a dynamic fashion at the microcirculatory level, due to the difficulty to access the lung with a microscope. Here, an intravital microscopy method is presented to functionally image and quantify the microcirculation of superficial pulmonary metastases in rats, using a closed-chest pulmonary window and automated analysis of blood flow velocity and direction. The utility of this method is demonstrated to measure increases in blood flow velocity in response to pharmacological intervention, and to image the well-known tortuous vasculature of solid tumors. This is the first demonstration of intravital microscopy on pulmonary metastases in a closed-chest model. Because of its minimized invasiveness, as well as due to its relative ease and practicality, this technology has the potential to experience widespread use in laboratories that specialize on pulmonary tumor research.

A method is presented to measure microcirculatory blood flow velocity in pulmonary cancer metastases of the pleural surface in rats in an automated fashion, using closed-chest pulmonary intravital microscopy. This model has potential to be used as a widespread tool to perform physiologic research on pulmonary metastases in rodents.

Sıçan Pulmoner METASTAZLARINDA Mikrosirkülasyonda Kan Akışı Hızının Otomatik Ölçüm

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Kronik tromboembolik pulmoner hipertansiyon ve Piglet Sağ Ventrikül Fonksiyonu Değerlendirilmesi

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Hemodynamic Characterization of Rodent Models of Pulmonary Arterial Hypertension

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare disease of the pulmonary vasculature characterized by endothelial cell apoptosis, smooth muscle proliferation and obliteration of pulmonary arterioles. This in turn results in right ventricular (RV) failure, with significant morbidity and mortality. Rodent models of PAH, in the mouse and the rat, are important for understanding the pathophysiology underlying this rare disease. Notably, different models of PAH may be associated with different degrees of pulmonary hypertension, RV hypertrophy and RV failure. Therefore, a complete hemodynamic characterization of mice and rats with PAH is critical in determining the effects of drugs or genetic modifications on the disease. 
Here we demonstrate standard procedures for assessment of right ventricular function and hemodynamics in both rat and mouse PAH models. Echocardiography is useful in determining RV function in rats, although obtaining standard views of the right ventricle is challenging in the awake mouse. Access for right heart catheterization is obtained by the internal jugular vein in closed-chest mice and rats. Pressures can be measured using polyethylene tubing with a fluid pressure transducer or a miniature micromanometer pressure catheter. Pressure-volume loop analysis can be performed in the open chest. After obtaining hemodynamics, the rodent is euthanized. The heart can be dissected to separate the RV free wall from the left ventricle (LV) and septum, allowing an assessment of RV hypertrophy using the Fulton index (RV/(LV+S)). Then samples can be harvested from the heart, lungs and other tissues as needed.

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease of pulmonary arterioles that leads to their obliteration and the development of right ventricular failure. Rodent models of PAH are critical in understanding the pathophysiology of PAH. Here we demonstrate hemodynamic characterization, with right heart catheterization and echocardiography, in the mouse and rat.

Pulmoner Hipertansiyon Kemirgen Modeller Hemodinamik Karakterizasyonu

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare disease of the pulmonary vasculature characterized by endothelial cell apoptosis, smooth muscle ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Akış kaynaklı pulmoner hipertansiyon için bir Sıçan Modelinde Şant Cerrahisi, Sağ Kalp kateterizasyonu ve Damar Morfometri

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic pressure through echocardiography, as well as to obtain measurements of the Aorta and PA diameter in mice.
Mice older than 10 d of age can be analyzed using the present technique. The technique is composed of 3 main steps: set-up, image acquisition, and image analysis. The set-up step consists of getting the mouse anesthetized with 1% isoflurane, shaving it, and taping it in a supine position to a heated EKG board where the image acquisition will take place. The image acquisition step consists of learning to identify the cardiac structures and obtaining all the required images with its correspondent probe and axis in order to be able to calculate volumes and diameters. The image analysis step consists of measuring the previously acquired images with the aid of computer software.
Advantages of the proposed technique include a fast (15 min) procedure that would allow the researcher to evaluate interventions in a non-invasive, non-terminal approach and therefore follow the same mouse over time; each mouse can be used as its own control. This fact plus having the same operator perform all the acquisition and analysis for the entire experiment minimizes the limitation of operator-dependency. The present methodology is useful for mouse researchers in cardiovascular and pulmonary medicine.

The following protocol describes the methodology for the acquisition and analysis of echocardiographic images used to obtain the Left Atrial Volume (LAV), Aorta (Ao) diameter, and Pulmonary Artery (PA) diameter in mice. This technique is a non-invasive, non-terminal procedure that allows assessment of the cardiopulmonary function.

Sol Atrium, Aort ve Pulmoner Arter Murin Ekokardiyografi

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

Sol atriyal stenoz indüklenen pulmoner venöz Arterialization ve Grup 2 sıçan pulmoner hipertansiyon

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats with the additional administration of monocrotaline (MCT) or SU5416 (Sugen). We also compare these two models to other PAH models commonly used in research. In the last few years, the focus of animal PAH models has moved towards studying the mechanism of angioproliferation of plexiform lesions, in which the role of increased pulmonary blood flow is considered as an important trigger in the development of severe pulmonary vascular remodeling. One of the most promising rodent models of increased pulmonary flow is the unilateral left pneumonectomy combined with a "second hit" of MCT or Sugen. The removal of the left lung leads to increased and turbulent pulmonary blood flow and vascular remodeling. Currently, there is no detailed procedure of the pneumonectomy surgery in rats. This article details a step-by-step protocol of the pneumonectomy surgical procedure and post-operative care in male Sprague-Dawley rats. Briefly, the animal is anesthetized and the chest is opened. Once the left pulmonary artery, pulmonary vein, and bronchus are visualized, they are ligated and the left lung is removed. The chest then closed and the animal recovered. Blood is forced to circulate only on the right lung. This increased vascular pressure leads to a progressive remodeling and occlusion of small pulmonary arteries. The second hit of MCT or Sugen is used one week post-surgery to induce endothelial dysfunction. The combination of increased blood flow in the lung and endothelial dysfunction produces severe PAH. The primary limitation of this procedure is that it requires general surgical skills.

The rodent left pneumonectomy is a valuable technique in pulmonary hypertension research. Here, we present a protocol to describe the rat pneumonectomy procedure and postoperative care to ensure minimal morbidity and mortality.

Sıçanlarda pulmoner hipertansiyon bir Model olarak Monocrotaline ya da Sügen ile birlikte sol Pneumonectomy

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by right heart&#160;catheterization. A broad spectrum of diseases can lead to PH, differing in their etiology, histopathology, clinical presentation, prognosis, and response to&#160;treatment. Despite significant progress in the last years, PH remains an uncured disease. Understanding the underlying mechanisms can pave the way for the development of new therapies. Animal models are important research tools to achieve this goal. Currently, there are several models available for recapitulating PH. This protocol describes a two-hit mouse PH model. The stimuli for PH development are hypoxia and the injection of SU5416, a vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor antagonist. Three weeks after initiation of Hypoxia/SU5416, animals develop pulmonary vascular remodeling imitating the histopathological changes observed in human PH (predominantly Group 1). Vascular remodeling in the pulmonary circulation results in the remodeling of the right&#160;ventricle (RV). The procedures for measuring RV pressures (using the open chest method), the morphometrical analyses of the RV (by dissecting and weighing both cardiac ventricles) and the histological assessments of the remodeling (both pulmonary by assessing vascular remodeling and cardiac by assessing RV cardiomyocyte hypertrophy and fibrosis) are described in detail. The advantages of this protocol are the possibility of the application both in wild type and in genetically modified mice, the relatively easy and low-cost implementation, and the quick development of the disease of interest (3 weeks). Limitations of this method are that mice do not develop a severe phenotype and PH is reversible upon return to normoxia. Prevention, as well as therapy studies, can easily be implemented in this model, without the necessity of advanced skills (as opposed to surgical rodent models).

This protocol describes the induction of pulmonary hypertension (PH) in mice based on the exposure to hypoxia and the injection of a VEGF receptor antagonist. The animals develop PH and right ventricular (RV) hypertrophy 3 weeks after the initiation of the protocol. The functional and morphometrical characterization of the model is also presented.

Hipoksi/SU5416 Modeli kullanılarak Farelerde Pulmoner Hipertansiyonun İndüksiyonu ve Karakterizasyonu

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...