The authors have nothing to disclose.

NOTE: Cette étude a été autorisée par numéro de comité d&#39;éthique CEEA34.PB.103.12. 1. Utilisation des porcelets comme un modèle animal <ol><li> Effectuez la en deux groupes (n = 6 dans chaque groupe), adapté en termes de sexe, d&#39;âge (15 ± 3 mois) et le poids (30 ± 10 kg) (groupe de contrôle et de l&#39;hypoxie chronique (CH) groupe). Maison le groupe CH pendant 3 semaines dans une chambre hypobare (0,4 atm), et de la maison du groupe de contrôle dans normobare régulière (1 atm) des conditions. </li><li> Utilisez un caisson hypobare composé d&#39;une boîte en plexiglas avec un carré empreinte de 2 mètres et une hauteur de 1,6 mètres, comme le montre la figure 1. </li><li> Surveiller en permanence et à maintenir une température de 18 ° C et sous une pression de 0,4 atm. Assurer une ventilation adéquate par une pompe à vide, permettant à un taux de 8 m 3 par heure de renouvellement d&#39;air. </li><li> Placez deux animaux dans la chambre de la litière appropriée. Chaque 48 heures, le retour de la pression dans la boîte aux conditions normobares pour la moitiéune heure pour nettoyer la boîte, en présence des deux animaux, avec la boîte gardé closedto empêcher leur échapper. Ce procédé d&#39;induction de l&#39;hypertension artérielle pulmonaire a été largement validé 13. </li><li> Anesthésier des animaux <ol><li> Anesthésier les porcelets avec une injection intraveineuse initiale de thiopental sodique (10 mg / kg) et de maintenir l&#39;anesthésie par inhalation d&#39;isoflurane continu (1,5 à 3,5%). Appliquer deux gouttes de gel de Carbopol dans les yeux des porcelets pour prévenir la sécheresse de la cornée. </li><li> Placez les animaux en position de décubitus latéral gauche avec leurs pattes antérieures attachées à une position fléchie pour exposer la poitrine. Nettoyer la peau avec de l&#39;eau et du savon, puis raser l&#39;aide d&#39;un rasoir électrique pour enlever tous les poils qui pourraient entraver la pénétration des ultrasons à travers la poitrine. </li></ol></li><li> Échocardiogramme </li><li> Surveiller l&#39;évolution de l&#39;HTAP longitudinalement et non-invasive par échocardiographie. Effectuer un écho chaque semaine en utilisant un transducteur de 3 MHz. Record un électrocardiogramme en plaçant 3 électrodes sur les pattes droite et gauche et sur le côté droit de la poitrine. </li><li> Enregistrez deux dimensions et en mode M données d&#39;imagerie en trois incidents différents (longitudinale, axe mineur et apical) en utilisant une sonde Doppler. Tenir la sonde dans la main droite et le lieu entre les quatrième et cinquième espaces intercostaux gauches. Déplacez lentement la sonde vers le haut et vers le bas, tourner à droite et à gauche jusqu&#39;à une bonne résolution d&#39;image est obtenue pour les différentes structures cardiaques (ie le septum). La fenêtre acoustique diffère légèrement d&#39;un animal à un autre en fonction de la position du coeur dans la poitrine. </li><li> Enregistrer l&#39;ECG en même temps pour chacun de ces incidents et pour au moins 10 cycles cardiaques pour permettre une analyse hors-ligne. diastole d&#39;extrémité est définie comme étant le point dans le cycle cardiaque qui coïncide avec le début de l&#39;onde Q sur l&#39;ECG. systole fin coïncide avec le début de l&#39;onde T. </li><li> Mesurer mitrale et tricuspide flux sanguin par une valvePical échographie Doppler vue. Placez la sonde Doppler à la pointe de l&#39;manubrium sternal; la zone de prélèvement est située juste au-dessus de la soupape d&#39;enregistrer le flux sanguin traversant la vanne. </li><li> Noter la vitesse du sang pendant le cycle cardiaque par Doppler pour obtenir la vitesse-temps d&#39;intégration de l&#39;écoulement de sang à travers les soupapes de mitrales et tricuspides et les valvules aortique et pulmonaire. Utilisez le Video Graphics Array de l&#39;échographe pour stocker les images à un taux de 25 par seconde de trame afin d&#39;obtenir des images fixes ou des images de séquences fournies par l&#39;échographe. </li><li> Mesurer les dimensions et la surface des cavités cardiaques au moyen d&#39;instruments de mesure et les contours des zones de surface proposés par le logiciel intégré dans l&#39;échographe conformément aux recommandations internationales 14. </li><li> Mesurer l&#39;épaisseur de la paroi libre du ventricule droit pendant la diastole et la systole par TM (temps mouvement) l&#39;enregistrement de l&#39;incidence de l&#39;axe secondaire 14. </li><li> Meavous que le diamètre de la racine de l&#39;artère pulmonaire à la pointe des valves pulmonaires sur la vue petit axe 14. </li><li> Mesurer le septum et la paroi postérieure du ventricule gauche pendant la diastole en mouvement de TM sur la vue longitudinale au début des ondes Q sur l&#39;ECG et de la systole à la pointe de l&#39;onde T sur l&#39;ECG 14. </li><li> Mesurer les diamètres ventriculaire gauche de fin de diastole (LVEDD) et diamètres fin systolique ventriculaire gauche (LVESD). Calculer la fraction de raccourcissement (FS) en utilisant la FS de formule (%) = (LVEDD-LVESD) / LVEDD. Mesurer le diamètre de l&#39;aorte et la surface de l&#39;oreillette droite et à gauche. </li><li> De la vitesse-temps intégrante de la mitrale et tricuspide flux sanguins, mesurer la suivante: amplitude maximale de la vague E et A, la décélération mi-temps de l&#39;onde E, écouler indice durée, vitesse-temps 14. </li><li> De mesures Doppler de l&#39;artère pulmonaire, mesurer la suivante: vitesse maximale, l&#39;ascension la mi-temps,écouler durée et son intégrale 14. </li><li> Évaluer le volume ventriculaire gauche en utilisant la méthode de Simpson 15. </li><li> Stocker les données pour chaque porcelet dans une base de données pour l&#39;analyse statistique ultérieure sur l&#39;ensemble du groupe. </li></ol> 2. Droit de cathétérisme cardiaque <ol><li> la préparation des animaux <ol><li> Avant la pose du cathéter pulsatile, le cochon est placé dans un caisson hypobare pendant 3 semaines afin d&#39;induire une hypertension artérielle pulmonaire. </li><li> Jeûner les animaux pendant 24 heures avant la chirurgie (24 h pour les aliments solides, de 8 à 12 h pour l&#39;eau). </li><li> 24 h avant RHC, ont un vétérinaire bien formé effectuer un examen clinique pré-anesthésie pour évaluer la couleur de la membrane muqueuse, temps de remplissage capillaire, du poumon mondiale et les fonctions cardiaques à l&#39;aide d&#39;un stéthoscope et la température du corps en utilisant un thermomètre rectal. </li><li> Administrer des injections de Midazolam (intramusculaire, 0,5 mg / kg) et du chlorhydrate de morphine (intramusculaire, 0,1 mg / kg) de 15 à 30 min avant l&#39;induction of anesthésie. Répéter l&#39;injection de chlorhydrate de morphine (0,05 à 0,5 mg / kg, par voie intramusculaire) au cours de l&#39;induction toutes les 4 à 6 heures. </li><li> Administrer thiopental sodique (10 mg / kg, par voie intraveineuse) par l&#39;intermédiaire d&#39;une injection de bolus initial de 5 mg / kg puis par injection partielle jusqu&#39;à ce qu&#39;il soit efficace. Suivez ce par sac et masque de ventilation jusqu&#39;à ce que l&#39;intubation endotrachéale. </li><li> Porcinet intubation <ol><li> Graisser le tube de gel de pramocaine. Insérez un stylet métallique dans le tube à se raidir et faciliter le processus d&#39;intubation. </li><li> Touchez la paupière pour assurer une anesthésie profonde. Effectuer intubation par visualisation directe du larynx, en utilisant un laryngoscope pour élever la langue et éviter les blessures à la corde vocale. Gonflez le ballon du tube pour éviter les problèmes liés à la régurgitation. </li></ol></li><li> Contrôler la fréquence respiratoire à 10-12 respirations par minute; volume actuel de 7-10 ml / kg, la pression d&#39;insufflation de 25 à 30 cm H 2 O et d&#39;une phase inspiratoire de 2 sec avec une e positife-pression expiratoire de 5 cm H 2 O. </li><li> Anesthésier les animaux avec de l&#39;isoflurane dans de l&#39;oxygène à 100% (induction 5.3% avec un débit d&#39;oxygène de 2 à 3 l / min, maintien de l&#39;écoulement de l&#39;oxygène 01/05 à 02/05% à 1 L / min). Appliquer le gel de carbopol à la cornée comme à l&#39;étape 1.5.1. </li><li> Insérer un cathéter dans l&#39;artère héparine auriculaire caudale (5 ml de solution saline 0,9% dopés avec 5000 UI / ml d&#39;héparine) par perfusion sous-cutanée avec canule vert fixe en place avec un point de suture. </li><li> Faire infuser la solution de Ringer lactate (10-20 ml / kg / h). </li><li> Placez l&#39;animal sur une table d&#39;examen légèrement incliné. Gardez la tête légèrement inclinée vers le bas pour favoriser le flux salivaire. </li></ol></li><li> Suivi <ol><li> Toutes les 5 min, vérifier et enregistrer les valeurs suivantes sur l&#39;individu rapport de cas d&#39;anesthésie: la couleur de la membrane muqueuse et temps de remplissage capillaire, mandibulaire tonus musculaire et la position du globe oculaire, myosis / mydriase, réflexe palpébral. </li><li> Surveiller en permanence le cœur et respirataux tory, l&#39;oxymétrie de pouls, la température du corps et des électrocardiogrammes. Insérer un dispositif d&#39;introduction artérielle dans l&#39;artère fémorale. Insérer un gros calibre cathéter 10 cm de long, dans l&#39;artère fémorale et de surveiller la pression sanguine systémique. </li></ol></li><li> Mise en place du cathéter pulsatile NOTE: Ce dispositif médical est constitué de deux cathéters placés côte-à-côte et soudés ensemble. La partie distale de la première est reliée à un ballon standard avec un diamètre de 20 mm et une capacité de volume maximal de 5 ml. Le deuxième cathéter permet l&#39;insertion d&#39;un fil pour faciliter le positionnement dans l&#39;artère pulmonaire. Le dispositif est de 750 mm de long avec une jauge interne de 0,035 et un diamètre externe de 12 Fr. <ol><li> Pour les expériences, effectuer une pulsation par un petit ventilateur Harvard 683 animaux, qui applique un vide actif pour le ballonnet pendant le dégonflage et une pression positive pendant le gonflage, d&#39;un volume de 2,5 ml pour chaque impulsion. Utiliser l&#39;hélium comme gaz propulseur pour la balleoon pompe afin d&#39;éviter une embolie gazeuse. </li><li> Enregistrez les tracés électrocardiographiques de surface continue de documenter tous les troubles du rythme cardiaque pendant le protocole. Dans l&#39;artère fémorale gauche, connecter un dispositif de capteur à un cathéter de calibre 20, relié à un système de surveillance hémodynamique. </li></ol></li><li> Cathétérisme cardiaque droit <ol><li> Lavez et raser le cou de l&#39;animal. Nettoyer la peau avec une solution antiseptique cutané (Betadine scrub) à l&#39;aide d&#39;une compresse de gaze. Pour délimiter le site chirurgical, placer des champs stériles autour de la jugulaire droite entre l&#39;épaule droite et du manubrium sternal. </li><li> Faire une incision longitudinale de 4 cm avec des ciseaux stériles mi-chemin entre l&#39;épaule droite et du manubrium sternal. </li><li> Retirez délicatement les couches de la peau et des muscles avec une pince. Puis retirez délicatement le tissu conjonctif entourant la veine sur une longueur d&#39;environ 5 cm. Fixez le côté distal pour prévenir les saignements. Placez un fil de liant autour de la proximal côté pour être en mesure de commander l&#39;ouverture de la veine après hémi-section. </li><li> En utilisant un petit ciseau très forte spécifique, couper la veine dans la moitié transversalement. Veiller à ce que les bords de l&#39;incision sont propres. Utiliser de la mousse fine, soulever un bord de l&#39;incision et pousser doucement le cathéter dans le côté proximal de la veine. Contrôler le saignement avec du fil de liant. </li><li> Introduire le cathéter dans la veine jugulaire et pousser successivement à travers la veine cave supérieure, l&#39;oreillette droite, le ventricule droit et, enfin, l&#39;artère pulmonaire. </li><li> Noter les pressions au-dessus de 10 cycles cardiaques stables, à chaque cavité cardiaque et l&#39;artère pulmonaire (T0). Mesurer flux sanguin cardiaque trois fois à des intervalles de 1 min. </li><li> Positionner le cathéter à ballonnet dans l&#39;artère pulmonaire sous contrôle radioscopique. Gonfler et dégonfler le ballon (pulsations) avec 1 cm 3 d&#39;hélium. Continuer pulsation pendant 10 min. pressions record de plus de 10 cycles cardiaques stables, dans chaque cavité cardiaque et l&#39;arte pulmonairery et mesurer le débit sanguin cardiaque après 10 min (T1). </li><li> Mesurer de nouveau le flux sanguin cardiaque 30 minutes après le protocole de pulsatilité (T2). </li></ol></li></ol> 3. Aucune mesure <ol><li> Branchez un sac Douglas à la conduite de sortie de gaz respiratoire expiré jusqu&#39;à ce qu&#39;il soit complètement rempli. Placez-le sur l&#39;in-pipe d&#39;un analyseur de NO souffle. </li><li> Lentement et constamment forcer l&#39;air expiré dans l&#39;analyseur en comprimant le sac élastique Douglas. Mesurer le sac par le débitmètre sortie de l&#39;analyseur de maintenir un débit constant. </li></ol> 4. Les mesures d&#39;histologie <ol><li> Sous anesthésie, injecter 30 ml d&#39;Dolethal (solution injectable pour l&#39;euthanasie) dans le cathéter pulsatile placé dans le coeur. </li><li> Immédiatement après l&#39;euthanasie, ouvrir le coffre par sciage manubrium longitudinalement, déplacer légèrement le cœur et maintenez le poumon droit. Ensuite, en utilisant la dissection de ciseaux, couper deux 2 ou 3 cm 3 échantillons de la middle lobe du poumon. </li><li> Aligner geler un échantillon dans de l&#39;azote liquide et stockés à -80 ° C. Fixer le deuxième échantillon dans 3,7% de paraformaldehyde pendant 24 h et ensuite intégrer dans de la paraffine pour l&#39;analyse histologique ultérieure. </li><li> Effectuer des mesures d&#39;histologie comme décrit précédemment 16. Mesurer l&#39;épaisseur de la paroi PA comme suit: 2 mesures / artère dans 10 artères / porcelet et 6 porcelets / groupe. </li><li> Effectuer une analyse statistique. Les valeurs ont été exprimées en facteur de variation ± SEM. <ol><li> Pour comparer deux moyens, utiliser le test t de Student non apparié un. Pour comparer plus de deux moyens, utiliser une ANOVA à un facteur suivie par un test de Dunn. Un p &lt;0,05 était considéré comme statistiquement significatif (*). </li></ol></li></ol>

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The authors would like to thank the INRA institute, which housed the piglets, and Cardio Innovating systems for the funding.

Pour la première fois, il a été montré que les changements de flux pulsatile pulmonaire sont causalement liés au développement de l&#39;HTAP secondaire à une exposition hypoxique chronique. Cette approche translationnelle fournit la preuve que l&#39;induction d&#39;une augmentation artificielle de flux pulsatile pulmonaire en utilisant un cathéter spécialement conçu améliore l&#39;hypertension artérielle pulmonaire, probablement en augmentant la production de NO. Ces résultats n...

L&#39;hypertension artérielle pulmonaire est une maladie mortelle qui affecte le système vasculaire pulmonaire. Il ya un accord dans le domaine que le déséquilibre entre l&#39;augmentation de vasoconstricteurs (endothéline, la sérotonine) et une diminution des vasodilatateurs (NO, la prostacycline) contribue au développement de l&#39;HTAP. Au fil du temps, ce phénotype pro-constrictive évolue vers un phénotype pro-proliférative et anti-apoptotique complexe, contribuant au développement des lésions vasculaires 1. Une exposition prolongée à des vasoconstricteurs conduit à une augmentation significative et soutenue de [Ca 2+] i dans les cellules musculaires lisses de l&#39;artère pulmonaire, permettant l&#39;activation de plusieurs facteurs de transcription calcium réglementés, tels que NFAT 2-4, favorisant la prolifération de PASMC et résistance à un 5 phénotype apoptose. Ce phénotype conduit à des lésions vasculaires pulmonaires, ce qui contribue à une augmentation de la pression PA et res pulmonairesistance, qui conduit finalement à fatale insuffisance cardiaque droite 6. Actuellement, il n&#39;y a pas de traitement disponible qui renverse l&#39;HTAP Bien qu&#39;il existe plusieurs qui améliorent la qualité de vie des patients 7. Parmi ces traitements, l&#39;efficacité de NO inhalé traitement a été démontrée mais en raison de sa courte demi-vie, il est difficile à utiliser dans la pratique clinique. Pour cette raison, des traitements plus stables et durables ont été préférés, tels que les analogues de la prostacycline, ou des inhibiteurs des récepteurs de l&#39;endothéline 7. Pour développer de meilleurs traitements, il est essentiel d&#39;améliorer et d&#39;approfondir les connaissances sur la physiopathologie de l&#39;HTAP. Pulsatilité est un stimulant bien connu activant cisaillement vasodilatation induite par le stress, la protection de l&#39;artère distale non élastique de blessures de flux à haute pression 8,9. Dans un modèle de l&#39;HTAP secondaire à aortopulmonaire manœuvre chirurgicale, Nour et al. Démontré cisaillement str intrapulmonaireess-médiation amélioration de la fonction endothéliale 10. Plusieurs études ont démontré que le NO, la prostacycline et ET-1 expression sont étroitement réglementées par des changements de flux pulsatile. En effet, une augmentation modérée des flux pulsatile augmente l&#39;activité eNOS et les niveaux de la prostacycline, les deux qui sont réduits dans l&#39;HTAP. modulation de flux pulsatile est probablement impliqué dans l&#39;étiologie de l&#39;HTAP et augmente artificiellement, il est d&#39;une manière attrayante et novatrice d&#39;augmenter la production de NO et de prostacycline au sein de la circulation pulmonaire. La présente étude vise à évaluer les effets d&#39;un flux pulsatile 10 min en utilisant un cathéter pulsatile nouvellement développé sur des mesures hémodynamiques dans un modèle chez les porcelets en qui hypoxie a été induite par l&#39;hypertension artérielle pulmonaire (PH). Il a été émis l&#39;hypothèse que l&#39;augmentation de pulsatilité de l&#39;artère pulmonaire induit une vasorelaxation des artères pulmonaires, ce qui diminue la pression artérielle pulmonaire. Cardiaque droite chatheterization (RHC) est une intervention clinique essentiel pour le diagnostic et le suivi des patients atteints d&#39;HTAP. En effet, il est le moyen le plus fiable de diagnostic HAP et permet aux médecins d&#39;évaluer la réactivité vasculaire 11,12 ainsi que la progression de la maladie. En fait tous les patients HTAP subit RHC à plusieurs reprises. La présente étude dans les grands animaux vise à démontrer l&#39;efficacité et la sécurité des cathéters pulsatiles dans l&#39;évaluation et le traitement de l&#39;HTAP au cours d&#39;une procédure régulière RHC. Parce que les cathéters pulsatiles sont déjà disponibles et RHC est systématiquement réalisée chez les patients de HAP, cette étude fournit toutes les informations nécessaires pour être en mesure de procéder rapidement à des essais cliniques.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1421">
	<tbody>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;width:311px;">Drugs for anesthesia</td>
			<td style="width:336px;"></td>
			<td style="width:141px;"></td>
			<td style="width:224px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">sodium thiopental, THIOPENTAL SODIUM</td>
			<td>Abbott, France</td>
			<td>0000071-73-8</td>
			<td>powder 
			3 place Gustave Eiffe 94518 RUNGIS CEDEX.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">&#160;isoflurane, FORANE</td>
			<td>Abbott, France</td>
			<td style="width:141px;">05260-05</td>
			<td>glass bottle 250 ml 
			3 place Gustave Eiffe 94518 RUNGIS CEDEX.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">midazolam, Hypnovel</td>
			<td>Accord Healthcare&#160;</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>injectable ampoules 1mg/ml 
			45 Rue du Faubourg de Roubaix 59000 Lille France</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">pramocaine,TRONOTHANE 1 %&#160;</td>
			<td>Laboratoires LISAPHARM</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>Gel appl locale T/30g 
			3, rue Scheffer. 75016 Paris.</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">morphine chlohydrate Lavoisier</td>
			<td>CMD Lavoisier Laboratoires CHAIX et DU MARAIS</td>
			<td>Vidal</td>
			<td>injectable ampoules&#160; 
			7, rue Labie -75017 Paris - France</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:311px;">Acrylates Copolymer-Carbopol&#174; Aqua SF-1 Polymer</td>
			<td>Lubrizol</td>
			<td></td>
			<td>gel appl local 
			Elys&#233;es La D&#233;fense 19 le Parvis 92073 Paris la d&#233;fense</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Material&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Ventilateur Harvard 683</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>Harvard apparatus</td>
			<td>DRIM 75 rue des Anglais - 78700 Conflans Ste Honorine &#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Echographe Voluson E8 with a 3,5 MHz probe</td>
			<td>General Electric</td>
			<td>GEHealthcare</td>
			<td>DRIM 75 rue des Anglais - 78700 Conflans Ste Honorine &#160;&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">Pulsatil Catheter</td>
			<td>Cardio inovating system</td>
			<td></td>
			<td>Cardio innovative systems, 33 rue Vivienne, Paris, France 75002</td>
		</tr>
		<tr height="17">
			<td height="17" style="height:17px;">NO breath Analyseur</td>
			<td>Respur</td>
			<td>Respur</td>
			<td>26 rue Felix Rouget 95490 Vaureal France</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

increasing pulmonary artery pulsatile flow improves hypoxic pulmonary hypertension in piglets

L&#39;hypertension artérielle pulmonaire (HTAP) est une maladie qui affecte les artères pulmonaires distales (PA). Ces artères sont déformés, conduisant à une insuffisance ventriculaire droite. Les traitements actuels sont limités. Physiologiquement, le flux sanguin pulsatile est préjudiciable au système vasculaire. En réponse au stress pulsatile soutenue, les navires libèrent l&#39;oxyde nitrique (NO) pour induire une vasodilatation pour l&#39;auto-protection. Partant de ce constat, cette étude a élaboré un protocole pour évaluer si un flux pulsatile de sang artificiel pulmonaire pourrait induire une diminution de NO-dépendante de la pression artérielle pulmonaire. Un groupe de porcelets a été exposé à une hypoxie chronique pendant 3 semaines et comparée à un groupe de porcelets de contrôle. Une fois par semaine, les porcelets ont subi une échocardiographie pour évaluer la gravité HAP. A la fin de l&#39;exposition à l&#39;hypoxie, les porcelets ont été soumis à un protocole de pulsatile en utilisant un cathéter pulsatile. Après avoir été anesthésiés et préparés pour la chirurgie, la veine jugulaire du porcelet a été isolé et la catheter a été introduite par l&#39;oreillette droite, le ventricule droit et l&#39;artère pulmonaire, sous contrôle radioscopique. La pression artérielle pulmonaire (PAP) a été mesurée avant (T0), immédiatement après (T1) et 30 min après (T2) le protocole pulsatile. Il a été démontré que ce protocole pulsatile est une méthode sûre et efficace d&#39;induire une réduction significative de la PAP moyenne via un mécanisme dépendant de NO. Ces données ouvrent de nouvelles avenues pour la gestion clinique de l&#39;HTAP.

L&#39;augmentation de l&#39;artère pulmonaire pulsatile flux Améliore induite chronique hypertension pulmonaire hypoxique chez les porcelets Avant d&#39;exposer les animaux à une augmentation des flux pulsatile, l&#39;échographie a été utilisé de manière non invasive pour vérifier que les porcelets avaient développé une hypertension artérielle pulmonaire. Comme le montre la Figure 2, les trois semaines de l&#39;hypoxie chronique induit le développement de l&#39;...

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Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets | Medicine | Video

Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Pulmonary hypertension is associated with a significant reduction in pulmonary artery pulsatility, contractility and elasticity, contributing to an increase in pulmonary artery pressure and pulmonary resistance. Using a hypoxic piglet model, this study demonstrated that improving pulmonary artery plasticity using a newly developed pulsatile catheter improves hypoxic pulmonary hypertension.

L&#39;augmentation de l&#39;artère pulmonaire pulsatile débit améliore l&#39;hypertension pulmonaire hypoxique chez les porcelets

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease affecting distal pulmonary arteries (PA). These arteries are deformed, leading to right ventricular ...

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14.0K vues.  Laval University. Pulmonary hypertension is associated with a significant reduction in pulmonary artery pulsatility, contractility and elasticity, contributing to an increase in pulmonary artery pressure and pulmonary resistance. Using a hypoxic piglet model, this study demonstrated that improving pulmonary artery plasticity using a newly developed pulsatile catheter improves hypoxic pulmonary hypertension.

Vidéo: Increasing Pulmonary Artery Pulsatile Flow Improves Hypoxic Pulmonary Hypertension in Piglets

Human Internal Mammary Artery (IMA) Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel stenting are crucial for translational approaches1,2.
The commonly used animal models include mice, rats, rabbits, and pigs3-5. However, the translation of these models into clinical settings remains difficult, since those biological processes are already studied in animal vessels but never performed before in human research models6,7. In this video we demonstrate a new humanized model to overcome this translational gap. The shown procedure is reproducible, easy, and fast to perform and is suitable to study the development of intimal hyperplasia and the applicability of diverse stents.
This video shows how to perform the stent technique in human vessels followed by transplantation into immunodeficient rats, and identifies the origin of proliferating cells as human.

Human Internal Mammary Artery IMA Transplantation and Stenting: A Human Model to Study the Development of In-Stent Restenosis

This video shows a model to study the development of intimal hyperplasia after stent deployment using a human vessel (IMA) in an immunodeficient rat model.

Human artère mammaire interne (IMA) à la transplantation et stenting: un modèle humain pour étudier le développement de la resténose intra-stent

Preclinical in vivo research models to investigate pathobiological and pathophysiological processes in the development of intimal hyperplasia after vessel ...

Recherche

Médecine

Videomorphometric Analysis of Hypoxic Pulmonary Vasoconstriction of Intra-pulmonary Arteries Using Murine Precision Cut Lung Slices

Acute alveolar hypoxia causes pulmonary vasoconstriction (HPV) - also known as von Euler-Liljestrand mechanism - which serves to match lung perfusion to ventilation. Up to now, the underlying mechanisms are not fully understood. The major vascular segment contributing to HPV is the intra-acinar artery. This vessel section is responsible for the blood supply of an individual acinus, which is defined as the portion of lung distal to a terminal bronchiole. Intra-acinar arteries are mostly located in that part of the lung that cannot be selectively reached by a number of commonly used techniques such as measurement of the pulmonary artery pressure in isolated perfused lungs or force recordings from dissected proximal pulmonary artery segments1,2. The analysis of subpleural vessels by real-time confocal laser scanning luminescence microscopy is limited to vessels with up to 50 &#181;m in diameter3.
We provide a technique to study HPV of murine intra-pulmonary arteries in the range of 20-100 &#181;m inner diameters. It is based on the videomorphometric analysis of cross-sectioned arteries in precision cut lung slices (PCLS). This method allows the quantitative measurement of vasoreactivity of small intra-acinar arteries with inner diameter between 20-40 &#181;m which are located at gussets of alveolar septa next to alveolar ducts and of larger pre-acinar arteries with inner diameters between 40-100 &#181;m which run adjacent to bronchi and bronchioles. In contrast to real-time imaging of subpleural vessels in anesthetized and ventilated mice, videomorphometric analysis of PCLS occurs under conditions free of shear stress. In our experimental model both arterial segments exhibit a monophasic HPV when exposed to medium gassed with 1% O2 and the response fades after 30-40 min at hypoxia.

Hypoxic pulmonary vasoconstriction (HPV) is an important physiological phenomenon by which at alveolar hypoxia lung perfusion is matched to ventilation. The major vascular segment contributing to HPV is the intra-acinar artery. Here, we describe our protocol for the analysis of HPV of murine pulmonary vessels with diameters of 20-100 &mu;m.

Analyse vidéomorphométrique de la vasoconstriction pulmonaire hypoxique des artères intra-pulmonaires à l’aide de tranches pulmonaires coupées de précision murine

Acute alveolar hypoxia causes pulmonary vasoconstriction (HPV) - also known as von Euler-Liljestrand mechanism - which serves to match lung perfusion to ...

Automated Measurement of Microcirculatory Blood Flow Velocity in Pulmonary Metastases of Rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. However, very few methods exist to date to investigate lung metastases in a dynamic fashion at the microcirculatory level, due to the difficulty to access the lung with a microscope. Here, an intravital microscopy method is presented to functionally image and quantify the microcirculation of superficial pulmonary metastases in rats, using a closed-chest pulmonary window and automated analysis of blood flow velocity and direction. The utility of this method is demonstrated to measure increases in blood flow velocity in response to pharmacological intervention, and to image the well-known tortuous vasculature of solid tumors. This is the first demonstration of intravital microscopy on pulmonary metastases in a closed-chest model. Because of its minimized invasiveness, as well as due to its relative ease and practicality, this technology has the potential to experience widespread use in laboratories that specialize on pulmonary tumor research.

A method is presented to measure microcirculatory blood flow velocity in pulmonary cancer metastases of the pleural surface in rats in an automated fashion, using closed-chest pulmonary intravital microscopy. This model has potential to be used as a widespread tool to perform physiologic research on pulmonary metastases in rodents.

Mesure automatisée du flux sanguin Microcirculatory vitesse dans métastases pulmonaire des rats

Because the lung is a major target organ of metastatic disease, animal models to study the physiology of pulmonary metastases are of great importance. ...

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension and Assessment of Right Ventricular Function in the Piglet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. Pulmonary Hypertension (PH) was induced in 3-week-old piglets by a progressive obstruction of the pulmonary vascular bed. A ligation of the left Pulmonary Artery (PA) was performed first through a mini-thoracotomy. Second, weekly embolizations of the right lower pulmonary lobe were done under fluoroscopic guidance with n-butyl-2-cyanoacrylate during 5 weeks. Mean Pulmonary Arterial Pressure (mPAP) measured by ritght heart catheterism, increased progressively, as well as Right Atrial pressure and Pulmonary Vascular Resistances (PVR) after 5 weeks compared to sham animals. Right Ventricular (RV) structural and functional remodeling were assessed by transthoracic echocardiography (RV diameters, RV wall thickness, RV systolic function). RV elastance and RV-pulmonary coupling were assessed by Pressure-Volume Loops (PVL) analysis with conductance method. Histologic study of the lung and the right ventricle were also performed. Molecular analyses on RV fresh tissues could be performed through repeated transcutaneous endomyocardial biopsies. Pulmonary microvascular disease in obstructed and unobstructed territories was studied from lung biopsies using molecular analyses and pathology. Furthermore, the reliability and the reproducibility was associated with a range of PH severity in animals. Most aspects of the human CTEPH disease were reproduced in this model, which allows new perspectives for the understanding of the underlying mechanisms (mitochondria, inflammation) and new therapeutic approaches (targeted, cellular or gene therapies) of the overloaded right ventricle but also pulmonary microvascular disease.

Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) and Right Ventricular (RV) dysfunction were induced in piglets by progressive obstruction of the pulmonary arteries. Consequences were remarkably similar to those observed in CTEPH patients. This animal model would be a very useful tool for pathophysiology and therapeutic experiments on CTEPH and RV failure.

Chronique thromboembolique l&#39;hypertension artérielle pulmonaire et de l&#39;évaluation de la fonction ventriculaire droite dans la Porcinet

An original piglet model of Chronic Thromboembolic Pulmonary Hypertension (CTEPH) associated with chronic Right Ventricular (RV) dysfunction is described. ...

Hemodynamic Characterization of Rodent Models of Pulmonary Arterial Hypertension

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare disease of the pulmonary vasculature characterized by endothelial cell apoptosis, smooth muscle proliferation and obliteration of pulmonary arterioles. This in turn results in right ventricular (RV) failure, with significant morbidity and mortality. Rodent models of PAH, in the mouse and the rat, are important for understanding the pathophysiology underlying this rare disease. Notably, different models of PAH may be associated with different degrees of pulmonary hypertension, RV hypertrophy and RV failure. Therefore, a complete hemodynamic characterization of mice and rats with PAH is critical in determining the effects of drugs or genetic modifications on the disease. 
Here we demonstrate standard procedures for assessment of right ventricular function and hemodynamics in both rat and mouse PAH models. Echocardiography is useful in determining RV function in rats, although obtaining standard views of the right ventricle is challenging in the awake mouse. Access for right heart catheterization is obtained by the internal jugular vein in closed-chest mice and rats. Pressures can be measured using polyethylene tubing with a fluid pressure transducer or a miniature micromanometer pressure catheter. Pressure-volume loop analysis can be performed in the open chest. After obtaining hemodynamics, the rodent is euthanized. The heart can be dissected to separate the RV free wall from the left ventricle (LV) and septum, allowing an assessment of RV hypertrophy using the Fulton index (RV/(LV+S)). Then samples can be harvested from the heart, lungs and other tissues as needed.

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a disease of pulmonary arterioles that leads to their obliteration and the development of right ventricular failure. Rodent models of PAH are critical in understanding the pathophysiology of PAH. Here we demonstrate hemodynamic characterization, with right heart catheterization and echocardiography, in the mouse and rat.

Hémodynamique Caractérisation des modèles rongeurs de l&#39;hypertension artérielle pulmonaire

Pulmonary arterial hypertension (PAH) is a rare disease of the pulmonary vasculature characterized by endothelial cell apoptosis, smooth muscle ...

Shunt Surgery, Right Heart Catheterization, and Vascular Morphometry in a Rat Model for Flow-induced Pulmonary Arterial Hypertension

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt (MCT+Flow). The shunt is created by inserting an 18-G needle from the abdominal aorta into the adjacent caval vein. Increased pulmonary flow has been demonstrated as an essential trigger for a severe form of PAH with distinct phases of disease progression, characterized by early medial hypertrophy followed by neointimal lesions and the progressive occlusion of the small pulmonary vessels. To measure the right heart and pulmonary hemodynamics in this model, right heart catheterization is performed by inserting a rigid cannula containing a flexible ball-tip catheter via the right jugular vein into the right ventricle. The catheter is then advanced into the main and the more distal pulmonary arteries. The histopathology of the pulmonary vasculature is assessed qualitatively, by scoring the pre- and intra-acinar vessels on the degree of muscularization and the presence of a neointima, and quantitatively, by measuring the wall thickness, the wall-lumen ratios, and the occlusion score.

This protocol describes a surgical procedure to create a model for flow-induced pulmonary arterial hypertension (PAH) in rats and the procedures to analyze the principle hemodynamic and histological end-points in this model.

Chirurgie Shunt, droite Cathétérisme cardiaque et vasculaire Morphometry dans un modèle de rat pour Flow-induite Hypertension artérielle pulmonaire

In this protocol, PAH is induced by combining a 60 mg/kg monocrotalin (MCT) injection with increased pulmonary blood flow through an aorto-caval shunt ...

Murine Echocardiography of Left Atrium, Aorta, and Pulmonary Artery

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic pressure through echocardiography, as well as to obtain measurements of the Aorta and PA diameter in mice.
Mice older than 10 d of age can be analyzed using the present technique. The technique is composed of 3 main steps: set-up, image acquisition, and image analysis. The set-up step consists of getting the mouse anesthetized with 1% isoflurane, shaving it, and taping it in a supine position to a heated EKG board where the image acquisition will take place. The image acquisition step consists of learning to identify the cardiac structures and obtaining all the required images with its correspondent probe and axis in order to be able to calculate volumes and diameters. The image analysis step consists of measuring the previously acquired images with the aid of computer software.
Advantages of the proposed technique include a fast (15 min) procedure that would allow the researcher to evaluate interventions in a non-invasive, non-terminal approach and therefore follow the same mouse over time; each mouse can be used as its own control. This fact plus having the same operator perform all the acquisition and analysis for the entire experiment minimizes the limitation of operator-dependency. The present methodology is useful for mouse researchers in cardiovascular and pulmonary medicine.

The following protocol describes the methodology for the acquisition and analysis of echocardiographic images used to obtain the Left Atrial Volume (LAV), Aorta (Ao) diameter, and Pulmonary Artery (PA) diameter in mice. This technique is a non-invasive, non-terminal procedure that allows assessment of the cardiopulmonary function.

Murine échocardiographie de gauche Atrium, Aorte, et l&#39;artère pulmonaire

The present methodology teaches the investigator how to measure and use the LAV as a surrogate of chronic elevations in Left Ventricular diastolic ...

Left Atrial Stenosis Induced Pulmonary Venous Arterialization and Group 2 Pulmonary Hypertension in Rat

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of group 2 PH, due to mitral stenosis (MS), to facilitate the investigation of disease mechanisms and potential therapeutic strategies. We present a novel rat model of pulmonary venous congestion-induced pulmonary venous arterialization and group 2 PH caused by left atrial stenosis (LAS). LAS is achieved by constricting the left atrium using a half-closed titanium clip. After the LAS surgery, a rat model with a transmitral inflow velocity greater than or equal to 2.0 m/s on echocardiography gradually develops pulmonary venous arterialization and group 2 PH over an 8- to 10-week period. In this protocol, we provide the step-by-step procedure of how to perform the LAS surgery. The presented LAS rat model mimics MS in humans and is useful for studying the underlying molecular mechanism of pulmonary venous arterialization and for the preclinical evaluation of therapies for group 2 PH.

Left atrial stenosis (LAS) is a novel surgical technique used for studying group 2 pulmonary hypertension (PH) and mechanisms underlying pulmonary venous arterialization. Here, we present a protocol to constrict the left atrium using a titanium clip to cause pulmonary venous arterialization and moderate PH in a rat.

La sténose auriculaire gauche induit Arterialization veineuse pulmonaire et l’Hypertension pulmonaire chez le Rat groupe 2

The mechanism of mitral stenosis-induced pulmonary venous arterialization and group 2 pulmonary hypertension (PH) is unclear. There is no rodent model of ...

The Left Pneumonectomy Combined with Monocrotaline or Sugen as a Model of Pulmonary Hypertension in Rats

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats with the additional administration of monocrotaline (MCT) or SU5416 (Sugen). We also compare these two models to other PAH models commonly used in research. In the last few years, the focus of animal PAH models has moved towards studying the mechanism of angioproliferation of plexiform lesions, in which the role of increased pulmonary blood flow is considered as an important trigger in the development of severe pulmonary vascular remodeling. One of the most promising rodent models of increased pulmonary flow is the unilateral left pneumonectomy combined with a "second hit" of MCT or Sugen. The removal of the left lung leads to increased and turbulent pulmonary blood flow and vascular remodeling. Currently, there is no detailed procedure of the pneumonectomy surgery in rats. This article details a step-by-step protocol of the pneumonectomy surgical procedure and post-operative care in male Sprague-Dawley rats. Briefly, the animal is anesthetized and the chest is opened. Once the left pulmonary artery, pulmonary vein, and bronchus are visualized, they are ligated and the left lung is removed. The chest then closed and the animal recovered. Blood is forced to circulate only on the right lung. This increased vascular pressure leads to a progressive remodeling and occlusion of small pulmonary arteries. The second hit of MCT or Sugen is used one week post-surgery to induce endothelial dysfunction. The combination of increased blood flow in the lung and endothelial dysfunction produces severe PAH. The primary limitation of this procedure is that it requires general surgical skills.

The rodent left pneumonectomy is a valuable technique in pulmonary hypertension research. Here, we present a protocol to describe the rat pneumonectomy procedure and postoperative care to ensure minimal morbidity and mortality.

La pneumonectomie gauche combiné avec Monocrotaline ou Sugen comme un modèle d’Hypertension pulmonaire chez le rat

In this protocol, we detail the correct procedural steps and necessary precautions to successfully perform a left pneumonectomy and induce PAH in rats ...

Induction and Characterization of Pulmonary Hypertension in Mice using the Hypoxia/SU5416 Model

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by right heart&#160;catheterization. A broad spectrum of diseases can lead to PH, differing in their etiology, histopathology, clinical presentation, prognosis, and response to&#160;treatment. Despite significant progress in the last years, PH remains an uncured disease. Understanding the underlying mechanisms can pave the way for the development of new therapies. Animal models are important research tools to achieve this goal. Currently, there are several models available for recapitulating PH. This protocol describes a two-hit mouse PH model. The stimuli for PH development are hypoxia and the injection of SU5416, a vascular endothelial growth factor (VEGF) receptor antagonist. Three weeks after initiation of Hypoxia/SU5416, animals develop pulmonary vascular remodeling imitating the histopathological changes observed in human PH (predominantly Group 1). Vascular remodeling in the pulmonary circulation results in the remodeling of the right&#160;ventricle (RV). The procedures for measuring RV pressures (using the open chest method), the morphometrical analyses of the RV (by dissecting and weighing both cardiac ventricles) and the histological assessments of the remodeling (both pulmonary by assessing vascular remodeling and cardiac by assessing RV cardiomyocyte hypertrophy and fibrosis) are described in detail. The advantages of this protocol are the possibility of the application both in wild type and in genetically modified mice, the relatively easy and low-cost implementation, and the quick development of the disease of interest (3 weeks). Limitations of this method are that mice do not develop a severe phenotype and PH is reversible upon return to normoxia. Prevention, as well as therapy studies, can easily be implemented in this model, without the necessity of advanced skills (as opposed to surgical rodent models).

This protocol describes the induction of pulmonary hypertension (PH) in mice based on the exposure to hypoxia and the injection of a VEGF receptor antagonist. The animals develop PH and right ventricular (RV) hypertrophy 3 weeks after the initiation of the protocol. The functional and morphometrical characterization of the model is also presented.

Induction et caractérisation de l’hypertension pulmonaire chez les souris à l’aide du modèle Hypoxie/SU5416

Pulmonary Hypertension (PH) is a pathophysiological condition, defined by a mean pulmonary arterial pressure exceeding 25 mm Hg at rest, as assessed by ...