Name: long-term catheterization of the intestinal lymph trunk and collection of lymph in neonatal pigs
Uploaded: 2016-03-05T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 25 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs at JoVE.com

The work was supported in part by funding from Alberta Livestock and Meat Agency and Natural Science and Research Council Discovery grant to S. D. Proctor.

video ve yazıda hem anlatılan deney hayvanlarında Tüm işlemler Hayvan Bakım Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallar Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanmış ve takip edildi. 1. Cerrahi Anestezi ve Neonatal Domuzlar Cerrahi Hazırlık <ol><li> azaperone (0.3 mg / kg) ketamin hidroklorür (10 mg / kg), deksmedetomidin (15 ug / kg), bir ayrı Hol olarak, 25 kg ihtiva eden bir kas içi sedatif anestetik madde kokteyli ile boyun tabanına yakın domuz premedikasyon. Not: Geliştirilmiş intra-operatif ağrı kontrolü için önceden anestezik ilaç kokteyli buprenorfin (0,005-,02 mg / kg) ekleyin. </li><li> Bir yüz maskesi kullanılarak (500 ml-1000 ml / dk O 2 4-5 izofluran%) solunan izofluran inhalasyon gaz ile domuz uyutmak. Bir veteriner laringeal kapsamı (17-25 cm uzunluğunda düz bıçak) kullanarak ses telleri görselleştirmek ve vokal topikal% 10 lidokain spray uygulamakkordonlar. lidokain sprey vokal kord spazm ve havayolu tıkanıklığına olasılığını azaltmak için entübasyon 30-60 sn önce ses telleri temas etmesine izin. </li><li> Izofluran gaz ile anestezi ses tellerinin arasından bir kelepçeli endotrakeal tüpün (5,0-7,0 mm İç Çap (ID)) geçerek domuz entübe ve bakımını (/ 1,000-2,000 ml 0.5-2.0 izofluran% min O 2) ile bir kapalı ameliyat boyunca anestezi sistemi yeniden soluk devresi. çene sesi ile anestezi düzeyi ve hem pedal ve palpebral refleks tepkilerini nasıl değerlendiriyorsunuz. Süresi Doldu anestezik gaz uzaklaştırılmış ve cerrahi paketi dışında havalandırılır. </li><li> % 70 izopropil alkol durulama ardından% 2.0 klorheksidin cerrahi fırçalama çözeltisi ile kulağın dış yüzeyini temizleyin. Ameliyat sırasında, bir 20 G kateter intravenöz ile intravenöz sıvı (5-10 ml / kg / saat laktatlı Ringer çözeltisi) temin etmek üzere bir kulak daman kateter. Med dil mukozal yüzeyine bir pals oksimetresi elde edinical bant kalp hızı ve periferik kan oksijenlenme doygunluk (SpO2) izlemek için. </li><li> dorsal sırt üstü yatar pozisyonda anestezi domuz yerleştirin ve pubis ventral orta toraks kaudal ventral karın tıraş. İki% 2.0 Klorheksidin cerrahi önlük ve steril su yıkar alternatif bu bölgeyi temizleyin. </li><li> Cerrahi paketine anestezi domuz aktarın ve% 70 izopropil alkol durulama nihai cerrahi fırçalayın uygulamak, bu kurumasını bekleyin ve sonra hayvan asmak. </li><li> vücut ısısını izlemek için rektum içine bir rektal sıcaklık probu yaklaşık 2-4 cm yerleştirin. cerrahi işlem sırasında normal vücut sıcaklığına (38-40 ° C) muhafaza edilmesi için bir su sirkülasyon ısıtma pedi üzerinde domuz yerleştirin. </li><li> karın çevresinde örten kadran desen yerleştirilir dört havlu perdeler ile domuz örtün. karın yaklaşık 5 c lateral boyunca, xiphisternum karşısında ikinci asmak ilk örtüyü yerleştirinKarın orta hat m yanal. (Karşı tarafta olmasına rağmen), yaklaşık 5 cm karın orta hatta yanal karın lateral boyunca yerleştirilir ikinci perde gibi, pelvis ileal kret ve dördüncü drape genelinde üçüncü asmak yerleştirin. </li><li> altta yatan havlu perdeler üzerinde cerrahi sitesine erişim sağlayan bir yarık açılması ile, büyük bir tablo asmak yerleştirin ve domuz ve tüm cerrahi tabloyu kapsamaktadır. Nihai asmak büyük masa asmak üzerine yerleştirilen tek kullanımlık bir steri-drape olduğunu. </li></ol> Bağırsak Lenfatik Trunk 2. Abdominal Cerrahi ve Kateterizasyon <ol><li> Altta yatan karın kasları ortaya çıkarmak için bir neşter bıçağı ile 20 cm&#39;lik cilt kesi olun. parietal periton maruz mono-polar elektrokoter (20 Watt ayarı) ile karın kas katmanları İnsizyon. Karın iç organları ve lenfatik damar erişmek için Metzenbaum makas ile parietal periton bir 20 cm doğrusal segmenti açın. </li><li&gt; Ameliyat süresince açık karın boşluğuna tutmak için cerrahi kesi kafatası yönü de retractor yerleştirin. </li><li> tüm cerrahi işlem için sıcak (37 ° C) steril serum fizyolojik ile tüm dokuların nemlendirin. Yavaşça karın boşluğuna gelen kolon, çekum, ileum ve jejunum da dahil olmak üzere bağırsak büyük bir kesimi kaldırın ve üst karın, karaciğer ve lenf damarı erişmek için domuz soldan onu exteriorize. yavaşça bağırsak desteklemek için bir askı oluşturmak için ek havlu perdeler ile pozisyonunda batın bağırsak sabitleyin. </li><li> Lenfatik damar bulun, yaklaşık 4 cm sağ renal ven, 6 cm kuyruk-medial kaval ustabaşı ventral ve pankreas 22,36,37 yakın karaciğer sağ lobunda visseral yönü altında kranial-medial bırakır. Portal ven 36,37 sağ ventral kesimine bitişik bir saydam bir yapı olarak lenfatik damar belirlemek. </li><li> lenfatik vess ayırınEl nazikçe Q-tip uygulayıcılar ile bağlı doku uzak alay ile çevredeki fasya gelen. kabın yan taraflarından çevreleyen dokudan ayrılır sonra, ince bir küt uçlu forseps teknenin altında bir &quot;tüneli&quot; açıklığı oluşturur. </li><li> ince forseps ile lenfatik altında üç 2-0 ipek sütür geçirin. , Tıkamak dilate ve lenf ile gemi doldurmak için ilk olarak en kaudal dikiş Arter. Kasıtlı lenfatik kateteri sabitlemek için nispeten uzun bu sütür (4 cm) uçlarını bırakın. diğer iki dikiş birbirinden 1,0 cm ayrılmış ve güvenli kaudal sütür kranial 1.0-1.5 cm yaklaşık olarak yerleştirin. damar içine kateter hızlı emniyete için izin vermek için bir &#39;tek gevşek bağ kravat&#39; bu iki sütür bırakın. Not: En kaudal lige sütür ve (iki kafatası sütür) orta sütür arasında bulunan lenfatik segment kateterizasyon için sitedir. SU ile ilgiliGerekirse Ture malzemesi, 2-0 polyglactin sütür 2-0 ipek dikişlerle yerine geçebilir. </li><li> iris makas ile damar içine küçük bir delik kesin ve ince künt forseps ile gemi dilate. kabına bir eğimli ucu ile özel kateter tüp (4.06 Dış Çap (OD) x 2.31 mm ID) yaklaşık 1.0-1.5 cm yerleştirin ve yerine kateteri sabitlemek için iki kranial sütürler kravat. Geminin kateteri sabitlemek için kaudal dikiş uzun dikiş uçlarını kullanın. </li><li> ılık serum fizyolojik ile bol miktarda batın bağırsak yıkayın ve yavaşça bağırsak doğru anatomik konumlandırılmasını sağlayan karın boşluğuna geri getirin. </li><li> (Paralumbar fossa 5-10 cm ventral) Sol orta kanadında kateter exteriorize. bir neşter ile bir cilt kesi yapmak ve kateterin eksteriorizasyon için bir açıklık oluşturmak için deri yüzeyine karın boşluğuna bir Noktalayıcıyı geçmektedir. Karın cav kateteri exteriorize büyük Kelly forseps kullanabilirtrokar deliğinden Sığ. </li><li> yuvarlak (konik) iğne ile 2-0 polyglactin dikiş basit sürekli dikiş deseni ile parietal periton kapatın. yuvarlak iğne 2-0 polyglactin sütür ile basit bir kesintiye dikiş deseni ile karın kas katmanları kapatın. </li><li> Bir kesim iğne 2-0 polyglactin sütür ile bir subkütiküler desen cilt kapatın. Bir çanta-string dikiş deseni ile deri ve kesme iğne 2-0 naylon sütür ile batın kateter sabitleyin. </li><li> hala yerleştirme kolaylığı ve kurtarma sırasında domuz stresi azaltmak için anestezi sırasında domuz üzerinde uzmanlaşmış bir ceket yerleştirin. </li></ol> 3. Post-cerrahi Kurtarma ve Lenf Koleksiyonu <ol><li> önce inhalasyon anestezi kesilmesi yaklaşık 10 dakika, hemen cerrahi sonrası analjezi sağlamak için kas içi bupenorphine (0.1 mg / kg) yönetmek. bupenorphine devam (0.1 mg / kg) 24-48 saat koruması için her 12 saatameliyat sonrası analjezi. </li><li> ameliyat sonrası komplikasyonlar için 7 gün boyunca her 8-12 saat domuz izleyin. </li><li> etilendiamin tetraasetik asit (EDTA) ile kaplanmış ve antibiyotikler ile takviye edilmiş 500 ml polipropilen yıkama şişeleri lenf, toplamak; penisilin (6000 IU), streptomisin (6 mg) ve amfoterisin B (3 mg), 7 günlük bir süre boyunca her 12 saat süredir. </li></ol> Lipoprotein ApoB48, Trigliserid, Kolesterol ve toplam Protein 4. Niceleme Lenf Toplanan <ol><li> 4 ° C&#39;de 5 dakika boyunca 1800 x g&#39;de lenf santrifüjleyin. Süpernatant toplayın ve trigliserid, kolesterol ve toplam proteinin miktar tayini için kullanın. </li><li> seyreltilmemiş bir numunesidir, örnek bir 1:20 seyreltilmiş damıtılmış su ve 1 seyreltilmiş bir son örneği: damıtılmış su ile 100, üç numune halinde süpernatant bölün. </li><li> Bir ticari olarak temin edilebilir kit ile, kolesterol seviyelerini ölçmek için seyreltilmemiş süpernatant kullanın. </li><li> 1:20 ve 1:10 kullanarak0 seyreltilmiş numuneler ticari olarak temin edilebilir kit sırasıyla bisinkoninik asit toplam protein tahlili ile, trigliserid ve toplam protein düzeylerini ölçmek için. </li></ol> Lenf 38 Toplanan Lipoprotein ApoB48 5. miktarının belirlenmesi, <ol><li> Uyarlanmış bağışıklık Western Blot yöntemiyle 38 ile lipoprotein ApoB48 konsantrasyonunu belirleyin. % 3-8 tris-asetat- sodyum dodesil sülfat poliakrilamid jel elektroforezi (SDS-PAGE) ile ayırın toplam lenf. </li><li> bir anti-keçi sekonder antikor ile birleştirmiş, sonra: Bir polivinil florür membran (0,45 mikron) ayrılmış proteinler aktarın ve ApoB (4.000 1) bir keçi poliklonal antikor ile kuluçkaya yatmaktadır. </li><li> saflaştırılmış kemirgen ApoB48 protein standardı ile doğrusal dansitometrik karşılaştırma kullanılarak kemilüminesans ile lipoprotein ApoB48 niceliğini. </li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Bağırsak lenf Toplama çeşitli deneysel hayvan modellerinde lipid 8-12 ve ilaç 13-15 metabolizması, kanser metastazı 16,17, hücre kaçakçılığı ve bağışıklık fonksiyonu 18-26 katılan mekanizmaları araştırmak için mükemmel bir yöntemdir. Nitekim, uzun bir süre boyunca ya periferik (afferent) ve merkezi (efferent ve büyük gövde damarlar) lenf büyük miktarlarda hasat yeteneği immün modülasyon ajanları 18-22 ile zorluklar aşağıdaki h?...

Lenf sistemi fizyolojisi ilgili yeterli bir alandır. Lenfatik kateterizasyon Klinik öncesi modeller farklı hayvan türleri 1-8 oluşur ve lipid 8-12 ve ilaç metabolizması 13-15, deneysel tedavi 17 kanser metastazı 16 katılan mekanizmaların araştırılması ilaç sanayi ve araştırma kurumları tarafından kullanılan ve bağışıklık fonksiyonu 18 -26. Bu çalışma, lipoprotein metabolizma bileşenlerini ölçmek için bir iç domuz modelinde bağırsak lenf gövde kateterizasyon kullanımını araştırıyor. Lipoprotein metabolizması üretimi ve salgılanması şilomikronlar bölgesinin ve ilişkili lipid ve toplam proteinin değişiklikler yer almaktadır. Yaygın olarak kullanılan kemirgen modellerinde ve insanlar arasında ve gibi lipid metabolizmasında önemli farklılıklar vardır Bunlar beni lipid incelemek için daha karşılaştırılabilir bilgiler verebilir bağırsak lenf toplamak için domuz modelleri kullanılarak, önemli hususlar vardırinsanlar 27-31 yılında tabolism. Çeşitli cerrahi teknikler büyük hayvan türlerinde bağırsak lenf toplamak için kullanılır: kranial omuz yaklaşımı (yani, göğüs kanal kateterizasyon) 5, lateral üst kanadını yaklaşımı 32-34 ve ventral orta hat veya paramediyan yaklaşım 22,35. Bu video ayrıntılı olarak bağırsak lenf gövde kateterizasyon için ventral orta hat cerrahi yaklaşım kullanılarak domuzlarda cerrahi prosedürü tanımlamaktadır. Dikkatli cerrahi teknik izin lenfatik kateterizasyon bu yöntem, uzun zaman süreleri boyunca büyük lenf miktarlarda ve kendisine hedef toplamak için. Bu teknik, çeşitli fizyolojik fonksiyonları inceleyerek birçok disiplinlerle uygulamalar sayısız açar. Uygulamalar içerir, ancak tüm vücut lipoprotein ve lipid metabolizması, immüno-tümör oluşumu ve metastaz, bağırsak fonksiyonu ve developm, bunlarla sınırlı değildirent ve bağırsak inflamatuvar hastalığın ilerlemesi.

<table><tbody><tr><td>Miller laryngoscope blade</td><td>Welch Allyn</td><td>68044</td><td>182 mm length</td></tr><tr><td>Surgivet advisor: Vital signs monitor</td><td>Surgivet</td><td>V9203</td><td></td></tr><tr><td>Rectal temperature probe</td><td>Surgivet</td><td>V3417</td><td></td></tr><tr><td>Mono-polar electrosurgery generator</td><td>Valley Lab</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Metzenbaum scissors</td><td>Fine Science</td><td>14518-18</td><td></td></tr><tr><td>Tuffier retractor</td><td>Stevens</td><td>162-11-676</td><td></td></tr><tr><td>Mosquito forceps</td><td>Stevens</td><td>162-7-10</td><td></td></tr><tr><td>Kelly forceps-curved (14cm)</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Allis tissue forceps</td><td>Stevens</td><td>162-7-38</td><td></td></tr><tr><td>Forceps dressing-eye (10.2cm)</td><td>Stevens</td><td>162-18-780</td><td></td></tr><tr><td>Forceps dressing-Adison (12.1cm)</td><td>Stevens</td><td>162-17-2510</td><td></td></tr><tr><td>Needle Drivers</td><td>Stevens</td><td>162-V98-42</td><td></td></tr><tr><td>Iris scissors</td><td>Fine science</td><td>14058-11</td><td></td></tr><tr><td>Circulating water pump</td><td>Jorvet</td><td>J-783X</td><td></td></tr><tr><td>Maxitherm-Vinyl blanket</td><td>Jorvet</td><td>J-784C</td><td></td></tr><tr><td>Q tip applicators</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-037-960</td><td></td></tr><tr><td>Catheterization&amp;nbsp; tubing (4.06 OD X 2.31 ID)</td><td>Braintree Scientific Inc.</td><td>MRE-160</td><td>Micro-Renethane implantation tubing</td></tr><tr><td>2-0 silk suture</td><td>Ethicon</td><td>LA556</td><td></td></tr><tr><td>2-0 polyglactin suture</td><td>Ethicon</td><td>J443H</td><td>2-0 vicryl</td></tr><tr><td>Large animal jacket</td><td>Lomir Biomedical Inc.</td><td>SSJ2YC</td><td></td></tr><tr><td>Polypropylene wash bottles</td><td>Fisher Scientific</td><td>03-409-22C</td><td>500 ml</td></tr><tr><td>Penicillin-Streptomycin</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D4333</td><td></td></tr><tr><td>EDTA</td><td>Sigma Aldrich</td><td>60-00-4</td><td></td></tr><tr><td>Amphotericin B</td><td>Sigma Aldrich</td><td>A2411</td><td></td></tr><tr><td>Azaperone</td><td>Elanco Animal Health</td><td></td><td>Stresnil</td></tr><tr><td>Dexmedetomidine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>6295</td><td>Dexdomitor</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott Animal&amp;nbsp; Health</td><td>05260-5</td><td>IsoFlo</td></tr><tr><td>Ketamine hydrochloride</td><td>Zoetis</td><td>2626</td><td>Ketaset</td></tr><tr><td>Bupenorphine hydrochloride</td><td>Champion Alstoe Animal Health</td><td></td><td>DIN:02347510</td></tr><tr><td>6 mm Endotracheal tube</td><td>Jorvet</td><td>J-165d</td><td></td></tr><tr><td>10% Lidocaine spray</td><td>AstraZeneca</td><td></td><td>DIN:02003767</td></tr><tr><td>4 % Chlorhexidine surgical scrub</td><td>Partnar Animal Health</td><td>PCH-011</td><td>Diluted: 2.0% solution</td></tr><tr><td>3M Surgical steri- drape</td><td>3M Health Care</td><td>1040</td><td></td></tr><tr><td>SDS page gel</td><td>Invitrogen</td><td>EA0375BOX</td><td>3-8 % tris acetate</td></tr><tr><td>Polyvinylidene fluoride membrane</td><td>Millipore</td><td>IPVH00010</td><td>0.45 &amp;mu;m pore size</td></tr><tr><td>ApoB antibody&amp;nbsp;</td><td>EMD Millipore</td><td>AB742</td><td>1:4000 dilution</td></tr><tr><td>Donkey anti-goat IgG-HRP</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>Sc-2304</td><td></td></tr><tr><td>ECL Prime Western Blotting Reagent</td><td>GE Healthcare LifeSciences</td><td>RPN2232&amp;nbsp;&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Triglyceride Kit</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>998-40391/994-40491</td><td></td></tr><tr><td>Total Cholesterol Kit</td><td>Wako Pure Chemicals</td><td>439-17501</td><td></td></tr><tr><td>Total Protein</td><td>&amp;nbsp;Pierce&amp;nbsp;</td><td>23225</td><td>Bicinchoninic Acid Assay</td></tr></tbody></table>

long-term catheterization of the intestinal lymph trunk and collection of lymph in neonatal pigs

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal (central) efferent lymph. Importantly, the collection of central lymph from the intestine enables researchers to study both the mechanisms and lipid constitutes associated with lipid metabolism, intestinal inflammation and cancer metastasis, as well as cells involved in immune function and immunosurveillance. A ventral mid-line surgical approach permits excellent surgical exposure to the cranial abdomen and relatively easy access to the intestinal lymph trunk vessel that lies near the pancreas and the right ventral segment of the portal vein underneath the visceral aspect of the right liver lobe. The vessel is meticulously dissected and released from the surrounding fascia and then dilated with sutures allowing for insertion and subsequent securing of the catheter into the vessel. The catheter is exteriorized and approximately 1 L/24 hr of lymph is collected over a 7 day period. While this technique enables the collection of large quantities of central lymph over an extended period of time, the success depends on careful surgical dissection, tissue handling and close attention to proper surgical technique. This is particularly important with surgeries in young animals as the lymph vessels can easily tear, potentially leading to surgical and experimental failure. The video demonstrates an excellent surgical technique for the collection of intestinal lymph.

<html> Yenidoğan domuz bağırsak lenfatik gövde lenfatik kateterizasyon 7 günlük süre içinde yaklaşık 1 L merkezi lenf / 24 saat toplanmasını sağlar. Bu deneylerde elde lenf lipid metabolizması, yani toplam lenf protein, ApoB48 kolesterol, trigliserid, toplam protein ve kolesterol bileşenlerini ihtiva etmiştir. Tablo 1 vurgulamaktadır üç domuz toplanmış lenf örneklerinden bu lipit bileşenleri temsil miktarları. Özellikle, lenf akışı ve lipid bileşenleri in-line...

Watch this Scientific Journal Video about Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs at JoVE.com

Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.

Yenidoğan Domuzların Lenf Bağırsak Lenf Trunk ve Koleksiyonu Uzun Vadeli Kateterizasyon

Catheterization of the intestinal lymph trunk in neonatal pigs is a technique allowing for the long-term collection of large quantities of intestinal ...

long-term-catheterization-intestinal-lymph-trunk-collection-lymph

Research

JoVE Journal

Medicine

8.7K Görüntüleme.  University of Alberta. We present a surgical procedure to catheterize the intestinal lymph trunk in neonatal pigs to collect large quantities of lipid metabolism components from efferent lymph.

Video: Long-Term Catheterization of the Intestinal Lymph Trunk and Collection of Lymph in Neonatal Pigs

Multispectral Real-time Fluorescence Imaging for Intraoperative Detection of the Sentinel Lymph Node in Gynecologic Oncology

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical excision of the tumor with a full lymphadenectomy in the drainage area of the tumor. However, removal of lymph nodes is associated with increased morbidity due to infection, wound breakdown and lymphedema.4,5 As an alternative, the sentinel lymph node procedure (SLN) was developed several decades ago to detect the first draining lymph node from the tumor.6 In case of lymphogenic dissemination, the SLN is the first lymph node that is affected (Figure 1). Hence, if the SLN does not contain metastases, downstream lymph nodes will also be free from tumor metastases and need not to be removed. The SLN procedure is part of the treatment for many tumor types, like breast cancer and melanoma, but also for cancer of the vulva and cervix.7 The current standard methodology for SLN-detection is by peritumoral injection of radiocolloid one day prior to surgery, and a colored dye intraoperatively. Disadvantages of the procedure in cervical and vulvar cancer are multiple injections in the genital area, leading to increased psychological distress for the patient, and the use of radioactive colloid.
Multispectral fluorescence imaging is an emerging imaging modality that can be applied intraoperatively without the need for injection of radiocolloid. For intraoperative fluorescence imaging, two components are needed: a fluorescent agent and a quantitative optical system for intraoperative imaging. As a fluorophore we have used indocyanine green (ICG). ICG has been used for many decades to assess cardiac function, cerebral perfusion and liver perfusion.8 It is an inert drug with a safe pharmaco-biological profile. When excited at around 750 nm, it emits light in the near-infrared spectrum around 800 nm. A custom-made multispectral fluorescence imaging camera system was used.9.
The aim of this video article is to demonstrate the detection of the SLN using intraoperative fluorescence imaging in patients with cervical and vulvar cancer. Fluorescence imaging is used in conjunction with the standard procedure, consisting of radiocolloid and a blue dye. In the future, intraoperative fluorescence imaging might replace the current method and is also easily transferable to other indications like breast cancer and melanoma.

Fluorescence imaging is a promising innovative modality for image-guided surgery in surgical oncology. In this video we describe the technical procedure for detection of the sentinel lymph node using fluorescence imaging as showcased in gynecologic oncologicy. A multispectral fluorescence camera system, together with the fluorescent agent indocyanine green, is applied.

Jinekolojik Onkoloji Sentinel lenf nodu intraoperatif Algılama için Multispektral Gerçek zamanlı Floresans Görüntüleme

The prognosis in virtually all solid tumors depends on the presence or absence of lymph node metastases.1-3 Surgical treatment most often combines radical ...

Tıp

A Swine Model of Neonatal Asphyxia

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, perfusion deficit, hypoxic-ischemic encephalopathy, pulmonary hypertension, vasculopathic enterocolitis, renal failure and thrombo-embolic complications. Animal models are developed to help us understand the patho-physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. In comparison to rodents and newborn lambs, the newborn piglet has been proven to be a valuable model. The newborn piglet has several advantages including similar development as that of 36-38 weeks human fetus with comparable body systems, large body size (&tilde;1.5-2 kg at birth) that allows the instrumentation and monitoring of the animal and controls the confounding variables of hypoxia and hemodynamic derangements.
We here describe an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia and allow us to examine the systemic and regional hemodynamic changes during the asphyxiating and reoxygenation process as well as the respective effects of interventions. Further, the model has the advantage of studying multi-organ failure or dysfunction simultaneously and the interaction with various body systems. The experimental model is a non-survival procedure that involves the surgical instrumentation of newborn piglets (1-3 day-old and 1.5-2.5 kg weight, mixed breed) to allow the establishment of mechanical ventilation, vascular (arterial and central venous) access and the placement of catheters and flow probes (Transonic Inc.) for the continuously monitoring of intra-vascular pressure and blood flow across different arteries including main pulmonary, common carotid, superior mesenteric and left renal arteries. Using these surgically instrumented piglets, after stabilization for 30-60 minutes as defined by Z&lt;10% variation in hemodynamic parameters and normal blood gases, we commence an experimental protocol of severe hypoxemia which is induced via normocapnic alveolar hypoxia. The piglet is ventilated with 10-15% oxygen by increasing the inhaled concentration of nitrogen gas for 2h, aiming for arterial oxygen saturations of 30-40%. This degree of hypoxemia will produce clinical asphyxia with severe metabolic acidosis, systemic hypotension and cardiogenic shock with hypoperfusion to vital organs. The hypoxia is followed by reoxygenation with 100% oxygen for 0.5h and then 21% oxygen for 3.5h. Pharmacologic interventions can be introduced in due course and their effects investigated in a blinded, block-randomized fashion.

Large animal models have good translational values in the examination of physiology and pharmacology of neonatal asphyxia. Using newborn piglets, we develop an experimental protocol to simulate neonatal asphyxia which has advantages of studying the systemic and regional hemodynamics, oxygen transport with biochemical and pathologic pathways and correlations.

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Annually more than 1 million neonates die worldwide as related to asphyxia. Asphyxiated neonates commonly have multi-organ failure including hypotension, ...

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Various animal models of lung injury exist to study the complex pathomechanisms of human acute respiratory distress syndrome (ARDS) and evaluate future therapies. Severe lung injury with a reproducible deterioration of pulmonary gas exchange and hemodynamics can be induced in anesthetized pigs using repeated lung lavages with warmed 0.9% saline (50 ml/kg body weight). Including standard respiratory and hemodynamic monitoring with clinically applied devices in this model allows the evaluation of novel therapeutic strategies (drugs, modern ventilators, extracorporeal membrane oxygenators, ECMO), and bridges the gap between bench and bedside. Furthermore, induction of lung injury with lung lavages does not require the injection of pathogens/endotoxins that impact on measurements of pro- and anti-inflammatory cytokines. A disadvantage of the model is the high recruitability of atelectatic lung tissue. Standardization of the model helps to avoid pitfalls, to ensure comparability between experiments, and to reduce the number of animals needed.

Lavage-induced Surfactant Depletion in Pigs As a Model of the Acute Respiratory Distress Syndrome ARDS

Repeated pulmonary lavages in anesthetized pigs induce lung injury resembling major aspects of human acute respiratory distress syndrome (ARDS). For this purpose the lungs are repeatedly lavaged with 0.9% saline at 37 &#176;C. The goal of the protocol is a reproducible mitigation of gas exchange and hemodynamics for research in ARDS.

Akut Solunum Sıkıntısı Sendromu Modeli itibariyle Domuzların lavaj kaynaklı Surfaktan tükenmesi (ARDS)

Various animal models of lung injury exist to study the complex pathomechanisms of human acute respiratory distress syndrome (ARDS) and evaluate future ...

Surgical Placement of Catheters for Long-term Cardiovascular Exercise Testing in Swine

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early cardiopulmonary dysfunction is difficult to diagnose, particularly in animal models, as cardiopulmonary function is often measured invasively, requiring anesthesia. As many anesthetic agents are cardiodepressive, subtle changes in cardiovascular function may be masked. In contrast, chronic instrumentation allows for measurement of cardiopulmonary function in the awake state, so that measurements can be obtained under quiet resting conditions, without the effects of anesthesia and acute surgical trauma. Furthermore, when animals are properly trained, measurements can also be obtained during graded treadmill exercise.
Flow probes are placed around the aorta or pulmonary artery for measurement of cardiac output and around the left anterior descending coronary artery for measurement of coronary blood flow. Fluid-filled catheters are implanted in the aorta, pulmonary artery, left atrium, left ventricle and right ventricle for pressure measurement and blood sampling. In addition, a 20 G&#160;catheter is positioned in the anterior interventricular vein to allow coronary venous blood sampling.
After a week of recovery, swine are placed on a motor-driven treadmill, the catheters are connected to pressure and flow meters, and swine are subjected to a five-stage progressive exercise protocol, with each stage lasting 3 min. Hemodynamic signals are continuously recorded and blood samples are taken during the last 30 sec of each exercise stage.
The major advantage of studying chronically instrumented animals is that it allows serial assessment of cardiopulmonary function, not only at rest but also during physical stress such as exercise. Moreover, cardiopulmonary function can be assessed repeatedly during disease development and during chronic treatment, thereby increasing statistical power and hence limiting the number of animals required for a study.

Here we present a protocol to assess cardiopulmonary function in awake swine, at rest and during graded treadmill exercise. Chronic instrumentation allows for repeated hemodynamic measurements uninfluenced by cardiodepressive anesthetic agents.

Domuz uzun süreli Kardiyovasküler Egzersiz Testi için Kateter Cerrahi Yerleştirme

This protocol describes the surgical procedure to chronically instrument swine and the procedure to exercise swine on a motor-driven treadmill. Early ...

Direct Cannula Implantation in the Cisterna Magna of Pigs

The glymphatic system is a waste clearance system in the brain that relies on the flow of cerebrospinal fluid (CSF) in astrocyte-bound perivascular spaces and has been implicated in the clearance of neurotoxic peptides such as amyloid-beta. Impaired glymphatic function exacerbates disease pathology in animal models of neurodegenerative diseases, such as Alzheimer's, which highlights the importance of understanding this clearance system. The glymphatic system is often studied by cisterna magna cannulations (CMc), where tracers are delivered directly into the cerebrospinal fluid (CSF). Most studies, however, have been carried out in rodents. Here, we demonstrate an adaptation of the CMc technique in pigs. Using CMc in pigs, the glymphatic system can be studied at a high optical resolution in gyrencephalic brains and in doing so bridges the knowledge gap between rodent and human glymphatics.

This article presents a step-by-step protocol for the direct cannula implantation in the cisterna magna of pigs.

Domuzların Sarnıç Magnasında Doğrudan Kanın İmplantasyonu

The glymphatic system is a waste clearance system in the brain that relies on the flow of cerebrospinal fluid (CSF) in astrocyte-bound perivascular spaces ...

Nörobilim

Microscopic Observation of Lymphocyte Dynamics in Rat Peyer's Patches

Na&#239;ve lymphocytes recirculate from the blood to the lymphoid tissues under physiological condition and it is commonly recognized as an important phenomenon in the gut immunity. The stroma of secondary lymphoid organs, such as Peyer&#8217;s patches (PPs) or mesenteric lymph nodes, are where na&#239;ve lymphocytes sense antigens. Na&#239;ve lymphocytes circulate through the bloodstream to reach high endothelial venules, the portal of entry into PPs. Some immunomodulators are estimated to influence lymphocyte migration, but the precise evaluation of microcirculation dynamics is very difficult, and establishing a method to observe lymphocyte migration in vivo can contribute to the clarification of the precise mechanisms. We refined the method of collecting lymphocytes from the lymph duct and observing the detailed dynamics of gut-tropic lymphocytes in rat PPs. We chose confocal laser scanning microscopy to observe rat PPs in vivo and recorded it using time-lapse photography. We can now obtain clear images that can contribute to the analysis of lymphocyte dynamics.

Here, we describe a precise method for collecting thoracic duct lymphocytes and observing the migration of gut-tropic lymphocytes in rat Peyer&#8217;s patches for 3 hours using time-lapse photography. This technique can clarify how the dynamics of lymphocytes are affected under inflammatory conditions.

Sıçan Peyer Yamalarında Lenfosit Dinamiği Mikroskobik Gözlemi

Na&#239;ve lymphocytes recirculate from the blood to the lymphoid tissues under physiological condition and it is commonly recognized as an important ...

Intubation, Central Venous Catheter, and Arterial Line Placement in Swine for Translational Research in Abdominal Transplantation Surgery

Translational surgical research models in swine are crucial for developing safe preclinical protocols. However, the success of the experimental surgeries does not solely rely on the research team's surgical skills; perioperative care and management procedures, like intubation, central venous line, and arterial line placement, are necessary and of the utmost importance for favorable experiment results. As it is uncommon for research teams to have anesthesiologists or any other staff other than the surgical team, the surgical team involved in translational research must acquire and/or develop the skills to perform the perioperative care. The purpose of this paper is to show the techniques of intubation, central venous catheter, and arterial line placement used and perfected at the Toronto Organ Preservation Laboratory over the last 10 years, to be used as a reference for future researchers joining either this team or any other lab performing translational research protocols in swine and/or abdominal transplantation.

To obtain the best possible results, surgeons performing translational research experiments should be proficient at intubation and vascular line placement. This paper describes the techniques used by the Toronto Organ Preservation Laboratory to perform these procedures.

Translational surgical research models in swine are crucial for developing safe preclinical protocols. However, the success of the experimental surgeries ...

Domuzlarda Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateteri

Hickman Catheter Use for Long-Term Vascular Access in a Preclinical Swine Model

Central venous catheters (CVCs) are invaluable devices in large animal research as they facilitate a wide range of medical applications, including blood monitoring and reliable intravenous fluid and drug administration. Specifically, the tunneled multi-lumen Hickman catheter (HC) is commonly used in swine models due to its lower extrication and complication rates. Despite fewer complications relative to other CVCs, HC-related morbidity presents a significant challenge, as it can significantly delay or otherwise negatively impact ongoing studies. The proper insertion and maintenance of HCs is paramount in preventing these complications, but there is no consensus on best practices. The purpose of this protocol is to comprehensively describe an approach for the insertion and maintenance of a tunneled HC in swine that mitigates HC-related complications and morbidity. The use of these techniques in &gt;100 swine has resulted in complication-free patent lines up to 8 months and no catheter-related mortality or infection of the ventral surgical site. This protocol offers a method to optimize the lifespan of the HC and guidance for approaching issues during use.

Yazar Spotlight: Klinik Öncesi Domuz Modelinde Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateter Kullanımı  

A reliable and reproducible approach for the insertion and maintenance of a tunneled Hickman catheter for long-term vascular access in swine is described. Placement of a central venous catheter allows for convenient daily sampling of whole blood from awake animals and intravenous administration of medication and fluids.

Klinik Öncesi Domuz Modelinde Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateter Kullanımı

Central venous catheters (CVCs) are invaluable devices in large animal research as they facilitate a wide range of medical applications, including blood ...

Yenidoğan Domuzların Lenf Bağırsak Lenf Trunk ve Koleksiyonu Uzun Vadeli Kateterizasyon

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Jinekolojik Onkoloji Sentinel lenf nodu intraoperatif Algılama için Multispektral Gerçek zamanlı Floresans Görüntüleme

Yenidoğan Asfiksi Bir Domuz Modeli

Akut Solunum Sıkıntısı Sendromu Modeli itibariyle Domuzların lavaj kaynaklı Surfaktan tükenmesi (ARDS)

Domuz uzun süreli Kardiyovasküler Egzersiz Testi için Kateter Cerrahi Yerleştirme

Domuzların Sarnıç Magnasında Doğrudan Kanın İmplantasyonu

Sıçan Peyer Yamalarında Lenfosit Dinamiği Mikroskobik Gözlemi

Intubation, Central Venous Catheter, and Arterial Line Placement in Swine for Translational Research in Abdominal Transplantation Surgery

Klinik Öncesi Domuz Modelinde Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateter Kullanımı

Klinik Öncesi Domuz Modelinde Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateter Kullanımı

Klinik Öncesi Domuz Modelinde Uzun Süreli Vasküler Erişim için Hickman Kateter Kullanımı