The authors have no acknowledgements.

Etik deyimi: Tüm hayvan çalışmaları Texas MD Anderson Kanser Merkezinde Üniversitesi Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Komitesi (IACUC) tarafından onaylanmıştır. 1. Enjeksiyon için Kanser Hücreleri hazırlayın <ol><li> enjeksiyondan önce kanser hücreleri bir veya iki gün Tohum. özel bir ortam, özel bir hücre hattı için literatürde belirtilmedikçe,% 10 FBS ile desteklenmiş DMEM / F12 ortamı kullanın. </li><li> 37 ° C&#39;de 2 dakika - 1 tripsinizasyonla (% 0.25) daha önce bir kez serumsuz ortam ile birinci yıkama ile% 80 izdiham - cerrahi operasyonun günde hasat hücreleri 70 ulaşır. DMEM / F12 ortamı FBS ihtiva eden,% 10,% 0.25 tripsin söndürmek için hücrelere ilave edin. </li><li> 3 dakika 80 × g hücreleri santrifüj. Hücre hattına bağlı olarak, 5 x 10 6 hücre / ml -, bakiye serum kaldırma hemasitometre ile hücre sayımı, 1 Hank dengeli tuz çözeltisi (HBSS) içinde yeniden askıya almak için iki kez serumsuz ortam hücreleri yıkanır. buz üzerinde tutmakenjeksiyon zamanına kadar. Not: MDA-MB-231 göğüs kanseri hücreleri ve K1735 melanom hücreleri bu çalışmada kullanılmıştır ve her ikisi de hücre çizgileri / ml konsantrasyonda 2 x 10 6 hücre kullanıldı. metastaz tahlillerin sonuçlarını etkileyebilecek akibetini mümkün olduğunca kısa trypsinization süresini tutun. </li></ol> 2. tümör hücre enjeksiyonu için fareler hazırlamak <ol><li> intraperitonal (İP) fareler ketamin enjekte / ksilazin kokteyli (ketamin 100 mg / kg, ksilazin 10 mg / kg) anestezi. </li><li> hayvan ayak kısma tam anestezi onaylayın ve tepki eksikliği gözlemlemek. </li><li> (Protein jeller dökümü için kullanılan) bir cam levha üzerinde fare yerleştirin ve lastik bantlar ile sabitleyin. </li><li> Gerekirse, tıraş veya tüy dökücü ürünü küçük bir miktar uygulayarak ve kağıt havlu ile saçlarını kapalı silerek boyun tüylerden. NOT: çıplak fareler kullanılarak onlar vücut saç yok gibi, bu adımı atlayın. </li><li> uygulayarak boyun cildi temizleyinpovidon-iyot ve% 70 alkol. </li><li> Diseksiyon mikroskobu sahnede fare yerleştirin </li><li> Uzun bir cerrahi neşter ile cilt ~ 1 cm bir kesi yapmak. </li><li> Açık açık altında karotis arter ortaya çıkarmak için dişli forseps ile kas teşrih. </li><li> cerrahi forseps ile bitişik vagus sinirinden karotis arter ayırın. </li><li> Cerrahi forseps kullanarak, küçük bir pamuk içine bir pamuk bazı pamuk ayırmak nemlendirin ve moda. enjeksiyon amaçlanan sitenin karotis arter altında bu tampon-nemli pamuk yerleştirin. </li><li> pamuk bir dikiş uzak ve yakın yerleştirin ve gevşek knot yapmak. enjeksiyon yerinde kan akışını engellemek için proksimal düğüm sıkın. </li><li> pamuk karotid arter taze kırmızı kan ile tam basınçlı görünürse kanser hücre enjeksiyonu geçin. </li></ol> Karotis Arter içine 3. Kanser Hücre Enjeksiyon <ol><li> Vortex ve 100 ul o çizmekşırıngaya F kanser hücreleri. </li><li> Diseksiyon mikroskobu altında, yavaş yavaş pamuk üstünde oturan karotid arter lümenine (konik kadar) 31 G iğne takın. </li><li> Yavaşça karotis arter içine şırınga hücreleri enjekte edilir. tamponlu kanser hücreleri dolaşıma itilir zaman başarılı enjeksiyon yakın kan damarlarının ve kasların değişen renk ile mikroskop altında görülebilir. </li><li> Tüm birimin enjeksiyonu tamamlandıktan sonra, yetmezliği önlemek için hafifçe uzak karotid arter kaldırın. </li><li> Hızla enjeksiyon işlemini tamamlamak için uzak düğüm sıkın. </li><li> enjeksiyon tamamladıktan sonra, bitişik harfler sıkın ve mikroskop altında mikro-makas ile aşırı ipek sütür kırpın. yara kapatılmaması ayrılmış kas geri hareket ettirin. İki zımba ile cilt kapatın. </li></ol> 4. Cerrahi Kurtarma <ol><li> Bir ısıtma pedi üzerine çalışan hayvan taşımakkurtarma için. hayvanlar bilincini kazanmak için 60 dakika - 30 sürebilir. Bu süre içinde, ameliyat sonrası analjezi gibi deri altına enjeksiyon yoluyla buprenorfin (0.05 mg / kg) tatbik. Not: Analjezi yerel IACUC protokolü onayladı göre sağlanmalıdır. </li><li> hayvanlar uyandırmak ve onların normal davranış devam sonra, onların konut konumuna fareler dönün. birkaç gün sonrası ameliyat için jel gıda ile fareler sağlamak. Cerrahi kaydını tutmak ve odaya tutun. </li></ol> Vivo Görüntüleme 5. Non-invaziv <ol><li> Lusiferaz raportör yapıları ile etiketlenmiş hücreler için, in vivo görüntüleme sistemi 14 kullanılarak kanser hücre enjeksiyonu verimini ölçmek. NOT: Görüntüleme araştırma hayvanlara aşırı stresten kaçınmak enjeksiyon gününde yapılmaz. </li></ol>

<ol>
	<li>Gavrilovic, I. T., Posner, J. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Brain+metastases:+epidemiology+and+pathophysiology.">Brain metastases: epidemiology and pathophysiology.</a> J Neurooncol. 75 (1), 5-14 (2005).</li><li>Patchell, R. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+management+of+brain+metastases.">The management of brain metastases.</a> Cancer Treat Rev. 29 (6), 533-540 (2003).</li><li>Barnholtz-Sloan, J. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+proportions+of+brain+metastases+in+patients+diagnosed+(1973+to+2001)+in+the+Metropolitan+Detroit+Cancer+Surveillance+System.">Incidence proportions of brain metastases in patients diagnosed (1973 to 2001) in the Metropolitan Detroit Cancer Surveillance System.</a> J Clin Oncol. 22 (14), 2865-2872 (2004).</li><li>Schouten, L. J., Rutten, J., Huveneers, H. A., Twijnstra, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+brain+metastases+in+a+cohort+of+patients+with+carcinoma+of+the+breast,+colon,+kidney,+and+lung+and+melanoma.">Incidence of brain metastases in a cohort of patients with carcinoma of the breast, colon, kidney, and lung and melanoma.</a> Cancer. 94 (10), 2698-2705 (2002).</li><li>Bendell, J. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Central+nervous+system+metastases+in+women+who+receive+trastuzumab-based+therapy+for+metastatic+breast+carcinoma.">Central nervous system metastases in women who receive trastuzumab-based therapy for metastatic breast carcinoma.</a> Cancer. 97 (12), 2972-2977 (2003).</li><li>Clayton, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Incidence+of+cerebral+metastases+in+patients+treated+with+trastuzumab+for+metastatic+breast+cancer.">Incidence of cerebral metastases in patients treated with trastuzumab for metastatic breast cancer.</a> Br J Cancer. 91 (4), 639-643 (2004).</li><li>Romond, E. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trastuzumab+plus+adjuvant+chemotherapy+for+operable+HER2-positive+breast+cancer.">Trastuzumab plus adjuvant chemotherapy for operable HER2-positive breast cancer.</a> N Engl J Med. 353 (16), 1673-1684 (2005).</li><li>Mayer, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+patient+perspective+on+brain+metastases+in+breast+cancer.">A patient perspective on brain metastases in breast cancer.</a> Clin Cancer Res. 13 (6), 1623-1624 (2007).</li><li>Lin, N. U., Bellon, J. R., Winer, E. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+metastases+in+breast+cancer.">CNS metastases in breast cancer.</a> J Clin Oncol. 22 (17), 3608-3617 (2004).</li><li>Zhang, C., Yu, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment+determinants+of+brain+metastasis+of+brain+metastasis.">Microenvironment determinants of brain metastasis of brain metastasis.</a> Cell Biosci. 1 (1), 8 (2011).</li><li>Fidler, I. J., Nicolson, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Organ+selectivity+for+implantation+survival+and+growth+of+B16+melanoma+variant+tumor+lines.">Organ selectivity for implantation survival and growth of B16 melanoma variant tumor lines.</a> J Natl Cancer Inst. 57 (5), 1199-1202 (1976).</li><li>Zhang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microenvironment-induced+PTEN+loss+by+exosomal+microRNA+primes+brain+metastasis+outgrowth.">Microenvironment-induced PTEN loss by exosomal microRNA primes brain metastasis outgrowth.</a> Nature. 527 (7576), 100-104 (2015).</li><li>Zhang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=SRC+family+kinases+as+novel+therapeutic+targets+to+treat+breast+cancer+brain+metastases.">SRC family kinases as novel therapeutic targets to treat breast cancer brain metastases.</a> Cancer Res. 73 (18), 5764-5774 (2013).</li><li>Lim, E., Modi, K. D., Kim, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+bioluminescent+imaging+of+mammary+tumors+using+IVIS+spectrum.">In vivo bioluminescent imaging of mammary tumors using IVIS spectrum.</a> J Vis Exp. (26), (2009).</li><li>Zhang, C., Zhang, F., Tsan, R., Fidler, I. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transforming+growth+factor-beta2+is+a+molecular+determinant+for+site-specific+melanoma+metastasis+in+the+brain.">Transforming growth factor-beta2 is a molecular determinant for site-specific melanoma metastasis in the brain.</a> Cancer Res. 69 (3), 828-835 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

kanser hücrelerinin başarılı karotis arter enjeksiyonu için en kritik adımlar şunlardır: cerrahi operasyon için hazırlık fare 1) derin anestezi; 2) Pamuk desteğinin üstünde karotis arter sürekli yerleştirme; Başarılı enjeksiyondan sonra karotid arter 3) sıkı ligasyon. 30 dakika ~ Derin anestezi mikroskop altında istikrarlı cerrahi performans için genellikle gereklidir. Biz fare anestezi için ticari hazır kullanımlı ketamin / ksilizin kokteyl kullanın. Anestezi i?...

merkezi sinir sistemi (MSS) için kanser metastazı yıkıcı bir hastalıktır ve beyin dokusundan ya da ( &quot;beyin metastazı&quot; Bu makalede hem anlamına gelir) leptomeningial ya içerebilir. 1 1, 2: Bu&gt; 10 birincil gliomas outnumbering, baskın intrakranial kanseridir. Akciğer kanseri, meme kanseri ve melanom beyin metastazı 3, 4 yüksek incidences üreten ilk üç büyük neoplastik hastalıklar vardır. Son yıllarda, yeni kanser tedavilerinde etkileyici gelişmeler dramatik birçok kanser hastaları için hayatta kalma ve yaşam kalitesinin düzeltilmesi uzamış var. Ancak, nüks üzerine, beyin metastazı insidansı hızla artıyor. Örneğin, anti-HER2 antikoru trastuzumab (Herceptin) HER2 + meme kanserli hastalarda önemli klinik etkinlik göstermiştir; henüz rahatsız edici bir eğilim ortaya çıkmıştırBu hastalarda: kimin Ekstrakranial sistemik bir hastalık başlangıçta daha sonra beyin metastazı 5, 6, 7 geliştirmek trastuzumab tedavisinden fayda olanların 1/3 kadar. Ne yazık ki, beyin metastazı olan hastalar genellikle yaşam kalitesi travmatik bozulma yaşandığı, hemen hemen tüm güncel tedavilere dirençli olan ve tanı sonrası onların bir yıllık sağkalım sadece ~% 20 8&#39;dir. Akım (steroidler, kranial radyoterapi ve seçilmiş hastalarda cerrahi rezeksiyon dahil) beyin metastazı için tedaviler sadece 9 küratif değil, palyatif. Bu nedenle, beyin metastazı yeni kanser tedavilerinin bu dönemde bir sonraki heybetli bir meydan okuma olarak ortaya çıkmaktadır. Hastalar klinikte her gün yüz karşılanmamış zorluğu gidermek için, biz acilen daha iyi beyin metastazı altında yatan mekanizmayı anlamak ve yeni tedaviler geliştirmek için bu bilgiyi kullanmak gerekir. <pSınıf = &quot;jove_content&quot;&gt; metastatik kanser hücreleri tarafından beyin başarılı kolonizasyon, kan beyin bariyeri (BBB) ​​bypass gibi birden fazla biyolojik oyuncuların karmaşık etkileşimi aracılık işlevler bir dizi performans gerektirir ve beyin intrinsik kaçmak bir ex vivo veya in vitro sistemde değinmeyecek hiçbiri bağışıklık savunma mekanizmaları 10,. Bu nedenle, in vivo modellerde doğru ve sadık beyin metastazı çalışmaları için kritik öneme sahiptir. In vivo metastazı tahlilinde geleneksel bir akciğer tıkayabilirler hücrelerin çoğunluğu gelen, kuyruk damarından enjeksiyon yoluyla kanser hücrelerinin getirmektedir. Hayvan ölüm akciğerlerde 11 tümör yükü nedeniyle önce beyin metastatik lezyonlar nadiren bu modellerde üretilmektedir. Kanser hücrelerinin doğrudan intraserebral enjeksiyonla CNS&#39;de tutarlı bir tümör büyümesini üretir ve yaygın olarak primer gliomların çalışmalarında kullanılmaktadır. Ancak, Such enjeksiyonu bu modelin fizyolojik alaka olarak, ilgilendiren önemli noktaları hem BBB ödün ve enjeksiyon yerinde travmatik yaralanma neden olur. Başka sık kullanılan kanser hücre giriş yolu, intrakardiyak enjeksiyon, yönetmek ve merkezi sinir sistemine deneysel metastaz üretir kolaydır. Ancak, CNS dışında diğer organ sitelerine eşzamanlı metastazları her zaman üretilir ve hayvan ölümleri 11 neden olabilir; Bu nedenle, bu modele göre yüksek değişkenlik derecesi nedeniyle, biyolojik mekanizmalar ya da hayvanların sınırlı sayıda terapötik maddelerin kantitatif bir değerlendirme için, uygun hale getirir. Burada genel karotis arterinin içine kanser hücrelerinin enjeksiyonu ile deneysel beyin metastazı üretilmesi için işlemleri tarif eder. Biz beyin metastazı metastatik kaskad bireysel genlerin katkılarını incelemek ve terapötik müdahale etkinliğini değerlendirmek için bu yaklaşımı kullanmışs 12, 13. Bu yaklaşımın önemli avantajları tekrarlanabilirlik ve değişkenlik düşük derecesi yüksek derecede olduğu; büyük dezavantajı mikrocerrahi gerçekleştirmek için gerekli sofistike ve beceri olduğunu.

<table><tbody><tr><td>Ketamine hydrochloride/xylazine hydrochloride solution</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>K113</td><td></td></tr><tr><td>Routine Stereomicroscope Leica M50</td><td>Leica</td><td>M50</td><td>The microscope is modular and highly configurable to fit particular space requirements.</td></tr><tr><td>Surgical disposable scapel</td><td>Integra Miltex</td><td>4-410</td><td>to make skin incisions</td></tr><tr><td>Tissue Forceps - 1 x 2 Teeth</td><td>Fine Science Tools</td><td>11021-12</td><td>to bluntly dissect mucles</td></tr><tr><td>Dumont #5 - Mirror Finish Forceps</td><td>Fine Science Tools</td><td>11252-23</td><td>to separate and prepare the carotid artery for injection</td></tr><tr><td>Spring Scissors</td><td>Fine Science Tools</td><td>15025-10</td><td>to cut sutures</td></tr><tr><td>EZ Clip Kit</td><td>Stoelting</td><td>59020</td><td>for wound cloure</td></tr><tr><td>BD Insulin Syringe</td><td>Becton Dickinson</td><td>328438</td><td>for cell injection</td></tr><tr><td>IVIS Spectrum &lt;em&gt;In Vivo&lt;/em&gt; Imaging System</td><td>PerkinElmer</td><td>124262</td><td></td></tr></tbody></table>

intracarotid cancer cell injection to produce mouse models of brain metastasis

Metastaz, hastanın vücudu içinde ikincil sitelerde, yayılması ve habis hücrelerin büyüme, kansere bağlı ölümlerin&gt;% 90 oluşturmaktadır. Son zamanlarda, yeni tedavilere etkileyici gelişmeler dramatik birçok kanser hastaları için hayatta kalma ve yaşam kalitesinin düzeltilmesi uzamış var. Ne yazık ki, beyin metastatik nüks sıklığı hızla artmakta ve mevcut tüm tedaviler sadece palyatif vardır. Bu nedenle, iyi bir deneysel hayvan modelleri acil hastalığı biyoloji derinlemesine çalışmalar kolaylaştırmak ve klinik öncesi değerlendirilmesi için yeni tedavi rejimleri değerlendirmek için ihtiyaç vardır. Bununla birlikte, kanser hücrelerinin kuyruk damarından enjeksiyon yoluyla in vivo metastazı tahlilinde standart ağırlıklı akciğerdeki metastatik lezyonlar; hayvanlar genellikle beyin metastazı herhangi bir anlamlı akıbet önce akciğer tümör yükü yenik. Tümör hücrelerinin intrakardiyak enjeksiyon beyin dahil çoklu organ sitelerine metastatik lezyonlar oluşturur; Bununla birlikte, variabiBu model ile üretilen tümör büyümesinin vasıflı tedavi etkinliğini değerlendiren kendi programını nemlendirme, büyüktür. Beyin metastazı çalışma için güvenilir ve tutarlı hayvan modelleri oluşturmak için, burada tümör hücrelerinin intracarotid enjeksiyon yoluyla ev faresi (Mus musculus) deneysel beyin metastazı üretmek için bir prosedür açıklanmaktadır. Bu yaklaşım, böylece temel biyolojik mekanizmaları incelemek için ve yeni terapötik ajanlar değerlendirmek için araştırma çabalarını kolaylaştırıcı bir benzeri büyüme ve ölüm özellikleri ile beyin metastazı taşıyan farelerin çok sayıda üretmesini sağlar.

Enjeksiyon kalitesi değerlendirilebilir hangi iki nokta vardır. ilk şans enjeksiyon sırasında kan damarı renklerini değiştirme operatörün gözlem gereğidir. fakir enjeksiyonları Kaçak kolayca mikroskop altında görülebilir. Istikrarlı ve güvenli bir fare gövdesinin yerleştirilmesi (Şekil 1A) ve destekleyici pamuk üzerindeki karotid arter (Şekil 1B) karotid arter içine düzgün ve başarılı bir enjeksiyon için kritik faktörlerdi...

Watch this Scientific Journal Video about Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis at JoVE.com

Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

tedavi seçenekleri palyatif kalmıştır ise görülme sıklığı artmıştır olarak beyin metastazı acil karşılanmamış tıbbi ihtiyaç haline gelmiştir. Kanser hücrelerinin intracarotid arteriyel enjeksiyon yoluyla beyin metastazı deneysel hayvan modelleri oluşturma yeni müdahale rejimlerinin hastalığın biyolojisi ve değerlendirilmesi mekanik çalışmaları kolaylaştırır.

Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için

Metastasis, the spread and growth of malignant cells at secondary sites within a patient&#39;s body, accounts for &#62; 90% of cancer-related mortality. ...

intracarotid-cancer-cell-injection-to-produce-mouse-models-brain

Research

JoVE Journal

Cancer Research

26.3K Görüntüleme.  The University of Texas MD Anderson Cancer Center.  tedavi seçenekleri palyatif kalmıştır ise görülme sıklığı artmıştır olarak beyin metastazı acil karşılanmamış tıbbi ihtiyaç haline gelmiştir. Kanser hücrelerinin intracarotid arteriyel enjeksiyon yoluyla beyin metastazı deneysel hayvan modelleri oluşturma yeni müdahale rejimlerinin hastalığın biyolojisi ve değerlendirilmesi mekanik çalışmaları kolaylaştırır. 

Video: Intracarotid Cancer Cell Injection to Produce Mouse Models of Brain Metastasis

Intra-iliac Artery Injection for Efficient and Selective Modeling of Microscopic Bone Metastasis

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely used intra-cardiac and intra-tibial injections, IIA injection brings several advantages. First, it can deliver a large quantity of cancer cells specifically to hind limb bones, thereby providing spatiotemporally synchronized early-stage colonization events and allowing robust quantification and swift detection of disseminated tumor cells. Second, it injects cancer cells into the circulation without damaging the local tissues, thereby avoiding inflammatory and wound-healing processes that confound the bone colonization process. Third, IIA injection causes very little metastatic growth in non-bone organs, thereby preventing animals from succumbing to other vital metastases, and allowing continuous monitoring of indolent bone lesions. These advantages are especially useful for the inspection of progression from single cancer cells to multi-cell micrometastases, which has largely been elusive in the past. When combined with cutting-edge approaches of biological imaging and bone histology, IIA injection can be applied to various research purposes related to bone metastases.

This manuscript provides the detailed procedure of intra-iliac artery (IIA) injection, a technique to deliver cancer cells specifically to hind limb tissues including bones to establish experimental bone metastases. Although initially established with breast tumor models, this protocol can be easily extended to other cancer types.

Mikroskopik Kemik Metastazı Verimli ve Seçici Modelleme için intra-iliak arter Enjeksiyon

Intra-iliac artery (IIA) injection is an efficient approach to introduce metastatic lesions of various cancer cells in animals. Compared to the widely ...

Kanser Araştırmaları

Modeling Brain Metastases Through Intracranial Injection and Magnetic Resonance Imaging

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are particularly devastating, difficult to treat, and confer a poor prognosis. While the precise incidence of brain metastases in the United States remains hard to estimate, it is likely to increase as extracranial therapies continue to become more efficacious in treating cancer. Thus, it is necessary to identify and develop novel therapeutic approaches to treat metastasis at this site. To this end, intracranial injection of cancer cells has become a well-established method in which to model brain metastasis. Previously, the inability to directly measure tumor growth has been a technical hindrance to this model; however, increasing availability and quality of small animal imaging modalities, such as magnetic resonance imaging (MRI), are vastly improving the ability to monitor tumor growth over time and infer changes within the brain during the experimental period. Herein, intracranial injection of murine mammary tumor cells into immunocompetent mice followed by MRI is demonstrated. The presented injection approach utilizes isoflurane anesthesia and a stereotactic setup with a digitally controlled, automated drill and needle injection to enhance precision, and reduce technical error. MRI is measured over time using a 9.4 Tesla instrument in The Ohio State University James Comprehensive Cancer Center Small Animal Imaging Shared Resource. Tumor volume measurements are demonstrated at each time point through use of ImageJ. Overall, this intracranial injection approach allows for precise injection, day-to-day monitoring, and accurate tumor volume measurements, which combined greatly enhance the utility of this model system to test novel hypotheses on the drivers of brain metastases.

Intracranial brain metastasis modeling is complicated by an inability to monitor tumor size and response to treatment with precise and timely methods. The presented methodology couples intracranial tumor injection with magnetic resonance imaging analysis, which when combined, cultivates precise and consistent injections, enhanced animal monitoring, and accurate tumor volume measurements.

İntrakraniyal Enjeksiyon ve Manyetik Rezonans Görüntüleme Ile Beyin Metastazlarının Modellenmesi

Metastatic spread of cancer is an unfortunate consequence of disease progression, aggressive cancer subtypes, and/or late diagnosis. Brain metastases are ...

Modeling Brain Metastasis Via Tail-Vein Injection of Inflammatory Breast Cancer Cells

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are diagnosed with brain metastases each year. Significant progress has been made in improving survival outcomes for patients with primary breast cancer and systemic malignancies; however, the dismal prognosis for patients with clinical brain metastases highlights the urgent need to develop novel therapeutic agents and strategies against this deadly disease. The lack of suitable experimental models has been one of the major hurdles impeding advancement of our understanding of brain metastasis biology and treatment. Herein, we describe a xenograft mouse model of brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified cell line derived from inflammatory breast cancer (IBC), a rare and aggressive form of breast cancer. Cells were labeled with firefly luciferase and green fluorescence protein to monitor brain metastasis, and quantified metastatic burden by bioluminescence imaging, fluorescent stereomicroscopy, and histologic evaluation. Mice robustly and consistently develop brain metastases, allowing investigation of key mediators in the metastatic process and the development of preclinical testing of new treatment strategies.

We describe a xenograft mouse model of breast cancer brain metastasis generated via tail-vein injection of an endogenously HER2-amplified inflammatory breast cancer cell line.

İnflamatuar Meme Kanseri Hücrelerinin Kuyruk-Ven Enjeksiyonu ile Beyin Metastazının Modellenmesi

Metastatic spread to the brain is a common and devastating manifestation of many types of cancer. In the United States alone, about 200,000 patients are ...

Ultrasound Imaging-guided Intracardiac Injection to Develop a Mouse Model of Breast Cancer Brain Metastases Followed by Longitudinal MRI

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 months. It is critical to have suitable animal models to mimic the hemodynamic spread of the metastatic cells in the clinical scenario. Here, we are introducing the use of small animal ultrasound imaging to guide an accurate injection of brain tropical breast cancer cells into the left ventricle of athymic nude mice. Longitudinal MRI is used to assessing intracranial initiation and growth of brain metastases. Ultrasound-guided intracardiac injection ensures not only an accurate injection and hereby a higher successful rate but also significantly decreased mortality rate, as compared to our previous manual procedure. In vivo high resolution MRI allows the visualization of hyperintense multifocal lesions, as small as 310 &#181;m in diameter on T2-weighted images at 3 weeks post injection. Follow-up MRI reveals intracranial tumor growth and increased number of metastases that distribute throughout the whole brain.

A breast cancer brain metastasis mouse model is established with ultrasound imaging-guided intracardiac injection of MDA-MB231/Br-GFP cells. Development of multifocal intracranial metastases has been monitored longitudinally using high-resolution 9.4 T MRI.

Boyuna MRG Ardından Meme Kanseri Beyin Metastaz bir Fare Modeli geliştirmek için ultrason görüntüleme eşliğinde intrakardiyak enjeksiyon

Breast cancer brain metastasis, occurring in 30% of breast cancer patients at stage IV, is associated with high mortality. The median survival is only 6 ...

Tıp

Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural microenvironment and stromal cell interaction, cannot be entirely replicated with in vitro assays; thus, animal models are critical for investigating and understanding the effects of therapeutic intervention. However, most brain tumor xenografting methods do not produce brain metastases consistently in terms of the time frame and tumor burden. Brain metastasis models generated by intracardiac injection of cancer cells can result in unintended extracranial tumor burden and lead to non-brain metastatic morbidity and mortality. Although intracranial injection of cancer cells can limit extracranial tumor formation, it has several caveats, such as the injected cells frequently form a singular tumor mass at the injection site, high leptomeningeal involvement, and damage to brain vasculature during needle penetration. This protocol describes a mouse model of brain metastasis generated by internal carotid artery injection. This method produces intracranial tumors consistently without the involvement of other organs, enabling the evaluation of therapeutic agents for brain metastasis.

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Most brain metastasis mouse models are complicated by systemic metastases confounding analysis of mortality and therapeutic intervention outcomes. Presented here is a protocol for internal carotid injection of cancer cells that produces consistent intracranial tumors with minimal systemic tumors.

Kanser Hücrelerinin İç Karotis Arter Enjeksiyonu ile Beyin Metastazının Modellenmesi

Brain metastasis is a cause of severe morbidity and mortality in cancer patients. Critical aspects of metastatic diseases, such as the complex neural ...

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor (CAR) T Cell Infusions in Mice

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy and radiotherapy. As many tumors lack efficacious treatments, there is a crucial need to develop more promising therapeutic options, such as immunotherapies; the use of chimeric antigen receptor (CAR) T cell therapy&#160;directed against CNS tumors is of particular interest. Cell surface targets such as B7-H3, IL13RA2, and the disialoganglioside GD2 are highly expressed on the surface of several pediatric and adult CNS tumors,&#160;raising the opportunity to use CAR T cell therapy against these and other surface targets. To evaluate the repeated locoregional delivery of CAR T cells in preclinical murine models, an indwelling catheter system that recapitulates indwelling catheters currently being used in human clinical trials was established. Unlike stereotactic delivery, the indwelling catheter system allows for repeated dosing without the use of multiple surgeries. This protocol describes the intratumoral placement of a fixed guide cannula that has been used to successfully test serial CAR T cell infusions in orthotopic murine models of pediatric brain tumors. Following orthotopic injection and engraftment of the tumor cells in mice, intratumoral placement of a fixed guide cannula is completed on a stereotactic apparatus and secured with screws and acrylic resin. Treatment cannulas are then inserted through the fixed guide cannula for repeated CAR T cell delivery. Stereotactic placement of the guide cannula can be adjusted to deliver CAR T cells directly into the lateral ventricle or other locations in the brain. This platform offers a reliable mechanism for the preclinical testing of repeated intracranial infusions of CAR T cells and other novel therapeutics for these devastating pediatric tumors.

Intracranial Cannula Implantation for Serial Locoregional Chimeric Antigen Receptor CAR T Cell Infusions in Mice

Central nervous system (CNS) tumors are the leading cause of cancer-related death in children, and locoregional immune-based therapies are increasingly being tested for patients in clinical trials. This protocol describes methods for locoregional cannula implantation in mice for the preclinical evaluation of immunotherapeutic infusions targeting CNS tumors.

Farelerde Seri Lokorejyonel Kimerik Antijen Reseptörü (CAR) T Hücre İnfüzyonları için İntrakraniyal Kanül İmplantasyonu

Pediatric CNS tumors are responsible for the majority of cancer-related deaths in children and have poor prognoses, despite advancements in chemotherapy ...

<meta charset="utf8"></head><body>Bir fare modelinde enjeksiyon sonrası ortak karotis arter onarımı

Facilitating Repeat Intracarotid Injections in Mouse Models by a Novel Injection Site Repair Technique

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there is an urgent need to develop methods for intracarotid injections in mouse models, including methods to repair the carotid artery in mice after injection to allow for subsequent injections. We developed a method of intracarotid injection in a mouse model to deliver therapeutics into the internal carotid artery (ICA) with two alternative procedures. 
During injection, the needle is inserted into the common carotid artery (CCA) after tying a suture around the external carotid artery (ECA) and injected therapeutics are delivered into the ICA. Following injection, the common carotid artery (CCA) can be ligated, which limits the number of intracarotid injections to one. The alternative procedure described in this article includes a modification where intracarotid artery injection is followed by injection site repair of the CCA, which restores blood flow within the CCA and avoids the complication of cerebral ischemia seen in some mouse models. 
We also compared the delivery of bone marrow-derived human mesenchymal stem cells (BM-hMSCs) to intracranial tumors when delivered through intracarotid injection with and without injection site repair following the injection. Delivery of BM-hMSCs does not differ significantly between the methods. Our results demonstrate that injection site repair of the CCA allows for repeat injections through the same artery and does not impair the delivery and distribution of injected material, thus providing a model with greater flexibility that more closely emulates intracarotid injection in humans.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Onkolitik Virüsler ve MikroRNA'lar için İntraarteriyel Dağıtım Stratejileri Yoluyla Glioblastoma Tedavisini İlerletmek

Repair of the intracarotid artery in a mouse model after injection returns blood flow to the artery without negatively impacting the distribution of the injected material. Injection site repair facilitates subsequent injections through the same artery and prevents cerebral ischemia in mouse strains that lack a complete Circle of Willis.

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Given recent advances in the delivery of novel antitumor therapeutics using endovascular selective intraarterial delivery methods in neuro-oncology, there ...

Modeling Brain Tumor Metastasis via Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells

<a href='https://app.jove.com/v/23284/modeling-brain-tumor-metastasis-via-internal-carotid-artery-injection'>Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)</a>In this video, an anesthetized mouse undergoes a surgical procedure in which cancer cells are injected into the common carotid artery (CCA) to facilitate targeted delivery to the brain. The procedure involves precise suturing and manipulation of the carotid arteries to direct the injected cells toward the internal carotid artery (ICA), promoting tumor formation in the brain over time.

Source: Lim, M., et al. Modeling Brain Metastasis by Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells. J. Vis. Exp. (2022)In this video, an anesthetized ...

Intracarotid Kanser Hücre Enjeksiyon Beyin metastaz Fare modelleri üretmek için

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Mikroskopik Kemik Metastazı Verimli ve Seçici Modelleme için intra-iliak arter Enjeksiyon

İntrakraniyal Enjeksiyon ve Manyetik Rezonans Görüntüleme Ile Beyin Metastazlarının Modellenmesi

İnflamatuar Meme Kanseri Hücrelerinin Kuyruk-Ven Enjeksiyonu ile Beyin Metastazının Modellenmesi

Boyuna MRG Ardından Meme Kanseri Beyin Metastaz bir Fare Modeli geliştirmek için ultrason görüntüleme eşliğinde intrakardiyak enjeksiyon

Kanser Hücrelerinin İç Karotis Arter Enjeksiyonu ile Beyin Metastazının Modellenmesi

Farelerde Seri Lokorejyonel Kimerik Antijen Reseptörü (CAR) T Hücre İnfüzyonları için İntrakraniyal Kanül İmplantasyonu

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Fare Modellerinde Tekrarlanan İntrakarotis Enjeksiyonlarının Yeni Bir Enjeksiyon Alanı Onarım Tekniği ile Kolaylaştırılması

Modeling Brain Tumor Metastasis via Internal Carotid Artery Injection of Cancer Cells