Her şeyden önce, bu projeye katılan annelere içtenlikle teşekkür ederiz. Sonra, örnekleme prosedürüne yardımcı olan ve kolaylaştıran tüm personeli, Anestezi uzmanı, hemşire anestezisti ve cerrahi hemşirelerini kabul ediyoruz. Proje, Güneydoğu Norveç Bölgesel Sağlık Otoritesi ve Norveç Kadın Sağlığı Danışma Birimi, Oslo Üniversitesi ve Oslo Üniversitesi Hastanesi tarafından sağlanan yerel fonlardan sağlanan finansman olmaksızın mümkün olmazdı.

Çalışma, Oslo Üniversitesi Hastanesi&#39;ndeki veri koruma görevlileri ve Güney Norveç 2419/2011 Tıbbi ve Sağlık Araştırma Etikleri Bölgesel Komitesi tarafından onaylandı. Tüm katılımcılar, dahil edilme konusunda yazılı bir bilgilendirilmiş onam imzaladılar. 1. Preparatlar NOT: İşlemler için bir zaman çizelgesi Şekil 1&#39;de özetlenmiştir. <img alt="Şekil 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55847/55847fig1.jpg" /> Şekil 1 : 4 damarlı Numune Alma İşleminde Zamanlamayı ve Personel İfadesini Tanımlayan Akış Şeması. Tek renk bir kişiyi temsil eder. Yöntemin ayrıntılı açıklaması protokolde verilmiştir. <a href="http://ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55847/55847fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız.</a> <ol><li> Personel <ol><lI&gt; Gerekli tüm personelin mevcut olduğundan emin olun: Ultrason ölçümlerini yapan oldukça yetenekli bir Fetal Tıp uzmanı, cerrahiyi yürüten iki doğum uzmanı, doğum uzmanlarından ve numuneleri toplayan iki hemşireden biri, kan gazı analizlerini yapan bir asistanı ve Diğer numuneler toplama işlemini ard arda ve derhal gerçekleştirdikten sonra. NOT: Plasental dokunun daha gelişmiş toplanması durumunda ilave bir kişiye ihtiyaç vardır. </li></ol></li><li> ekipman <ol><li> Ekipman, buz soğukluğunda 1 M fosfat tamponlu salin (PBS), 25 mL soğuk RNA stabilize edici çözelti ve 5 x 0.5 mL optimal kesme sıcaklığı bileşiği (OCT) hazırlayın. Vacutainers ve tüpleri etiketleyin. Deneysel ekipman listesini görün. </li></ol></li></ol> 2. Anaokulleri <ol><li> Annelik klinik ve klinik dışı özelliklerini dahil ederek kaydedin ve ilgili soruları tekrarlayın veDoğumlar, doğum sırasında ağırlık dahil olmak üzere. Sezaryen öncesi oruç tutma süresini ve cerrahi sırasında meydana gelen herhangi bir hipotansif bölüme dikkat edin. Not: Global pregnancy coLaboratory (COLAB) &#39;dan yeni yayınlanan en az maternal klinik veri kümesini ekleyin. Bu makale aynı zamanda çalışma popülasyonlarının seçiminde çok önemli bazı yönleri içermektedir ve çalışmayı planlarken ele alınmalıdır 18 . </li><li> Etnik köken, yaş ve beden kitle indeksi (BKİ) de dahil olmak üzere baba özelliklerini kaydetmeyi düşünün. </li></ol> 3. Ultrason <ol><li> Doppler ultrason muayenesini doğum gününde, kadınlar açlıkta gerçekleştirin. Muayene, aort ve vena kava basısından kaçınmak için, yarı-sırtüstü konumdaki kadının fetal durgunluk döneminde, ilgi bölgesinin biraz lateralinde eğildiğinde gerçekleştirilir. Içindeki çıktıyı izleyinYoğunluğu ekrandaki mekanik ve termik indekslerle belirtir. </li><li> Umbilikal ven <ol><li> Göbek karını sagital veya oblik bir transeksiyonda göbekten damarı görselleştirin. Karın içi umbilikal venin düz bölümündeki iç büzgeci çapını, görülebilen dallardan önce ölçün. Normal B-modunu kullanın ve çap ölçümleri için tekneyi dik açılım açısı ile görselleştirin ve pulsatil çap değişikliklerinin etkisini en aza indirgemek için sonraki ölçümler için birkaç optimum kareyi tutun. <ol><li> Ölçümleri 5-10 kez tekrarlayın 19 . </li></ol></li><li> Aynı yerde, Doppler ultrasonu kullanın ve zaman ortalamalı maksimum hızı (TAMX) ölçmek için mümkün olduğunca düşük (30 ° &#39;lik) bir insonasyon açısı elde etmek için probu ayarlayın. Hızı 3 - 5 s&#39;lik bir periyot boyunca elde edin (titreşimsiz akış). </li></ol></li><li> Uterus arteri <ol><li> Doppler kullanUltrason, internal iliyak arterden dallandıktan hemen sonra, harici iliak arteri geçtiği için uterin arteri görselleştirir. Düşük insonasyon açısı (her zaman &lt;30 °) elde etmek için probu bu bölgede ayarlayın ve TAMX&#39;i ölçün. Hızı üç kalp çevriminin ortalama hızı olarak alın. </li><li> TAMX ölçülene kadar aynı yerde dikey bir açı elde etmesi pek mümkün olmadığından, çap ölçümleri alanlarına yakın ulaşılabilen çap ölçümleri için doğru bir açı elde etmek için, distal olarak damarı takip edin. Renkli Doppler ultrasonografi ile değerlendirildiğinde görünür damarlar bu bölgeden önce kesilirse çap ölçümlerini hariç tutun. <ol><li> Normal B-modunu kullanın ve çap ölçümleri için tekneyi dik açılım açısı ile görselleştirin ve pulsatil çap değişikliklerinin etkisini en aza indirgemek için sonraki ölçümler için birkaç optimum kareyi tutun. </li><li> Ölçümleri 5-10 kez tekrarlayın 19 . </li></ol></<html> li&gt; </ol></li><li> Plasentanın konumunu not edin. </li></ol> 4. 4 damarlı Kan Örneklemesi NOT: İşlemler için zaman çizelgesi Şekil 1&#39;de özetlenmiştir ve örneklerin genel görünümü Şekil 2&#39;de gösterilmiştir. <img alt="şekil 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55847/55847fig2.jpg" /> Şekil 2 : Plasental Vasküler Yapının Şematik Gösterimi ve Numune Alma Siteleri. 4 damarlı örnekleme yönteminde, uterin ven, radial arter (uterin arter için bir vekil olarak) ve göbek arterleri ve damardan kan örnekleri alınır. Uterin arter ve göbek bağı kan akımı ultrason ile ölçülür. Plasentanın doku örnekleri toplanır. Resim: Øystein H. Horgmo, Oslo Üniversitesi.5847fig2large.jpg &quot;target =&quot; _ blank &quot;&gt; Bu figürde daha büyük bir versiyonunu görmek için lütfen tıklayınız. <ol><li> Güvenlik prosedürleri <ol><li> Operasyon tiyatrosundaki tüm personele eldiven, cerrahi eldiven takımı, maskeler ve şapkalar takın. </li><li> Operasyon alanıyla temas halindeki cerrahları ve araştırma personelini cerrahi kese elbiseleri, maskeler, şapkalar, önlüklar ve çift eldiven ile sağlayın. Gözlük isteğe bağlıdır. </li><li> Kan numunelerini eldivenlerle tutan personel sağlayın. </li><li> Plasenta numunelerine eldiven ve cerrahi maskeyle müdahale eden personel sağlayın. Homojenizasyon kaputların kullanılmasını gerektirir. </li></ol></li><li> Operasyon tiyatrosunda hazırlık <ol><li> Bir brifing verin ve ekipmanı ameliyat başlamadan önce numuneye yardımcı olacak tüm personele verin. </li><li> Gerekli periferik arteryel ve venöz girişe yardımcı olacak anestezi uzmanı ve anestezi hemşiresinin adresini öğrenin veNumune almadan önce intravenöz olarak hiçbir sıvı verilmez. </li><li> Antakübital ven örneğini ve iki şırıngayı (biri 20 mL ve bir tane de 10 mL) ve radial arteri destekleyen kişiye bir kan gazı şırıngasını (heparin ile) destekleyen kişiye iğneler olmadan üç şırınga (10 mL) verin. </li><li> Ameliyat sahası için iki steril şırınga (20 mL), beş steril şırınga (10 mL), üç &quot;kelebek iğne&quot; ve iki kan gazı şırıngası hazırlayın. </li></ol></li><li> Kan damarlarına erişim. <ol><li> Periferik intravenöz (iv) erişimi sağlamak için sezaryen öncesi standart prosedür izleyin. NOT: Antecubital ven tercih edilir, çünkü bu siteden örnek almak daha kolaydır. </li><li> Radial arteri ultrasonla veya palpasyonla bilekte lokalize edin. 0.5 mL subkutanöz lidokain analjeziyi takiben, radial artere bir arteriyel hat yerleştirin. Üç başarısız ekleme olması durumunda örneklemeyi bu siteden terk edin veyaEğer kadın yerleştirme sırasında acı çekerse. NOT: Standart prosedüre göre sezaryonun cerrahi prosedürünü uygulayın. Yalnızca örnekleme prosedürü için gereken ayarlamalar aşağıda belirtilmiştir. </li></ol></li><li> Anne kan örnekleri NOT: Uterus insizyonundan önce aynı anda üç anne kan örneğini (uterin ven, radial arter ve antekübital ven) elde edin. <ol><li> Uterin damar için, karın boşluğunu açtıktan sonra, karın duvarını kaldırmak ve uterusun anterolateral kenarlarındaki uterin venlerin ana dallarını ortaya çıkarmak için bir geri çekici kullanın. Mümkün olduğunca plasenta ile aynı yönde uterin damar dallarından kan alın veya plasenta rahim orta çizgisinde bulunduğu takdirde en belirgin damarı pleksus kullanın. <ol><li> Uterin damardaki bir kan gazı şırıngasına yaklaşık 30 derecelik bir açıda bir kelebek iğne takın ve önlemek için nazik bir aspirasyon ile kan toplamayınhemoliz. Kelebek iğnenin iv konumunu özenle sabitlerken dolu kan gazı şırıngasını 20 mL&#39;lik ve 10 mL&#39;lik şırıngayla ardışık olarak değiştirin. NOT: Seçilen rahim damarının kontralateral tarafında durduğunuzda en iyi verimi sağlamak en iyisidir. </li></ol></li><li> Radial arter için, intra-arteriyel hattan aspire edin. İlk 5 mL&#39;yi atın ve daha sonra kan gazı analizleri için heparin enjektöründe 3 mL aspirat ve bunu takiben iki şırınga (20 + 10 mL) içinde 3 mL aspire edin. </li><li> Antekübital ven için, intravenöz kateterden hafifçe aspire edin. İlk 5 mL&#39;yi atın ve üç şırıngada (10 mL) 30 mL aspire edin. </li><li> Karnı kapatmaya başlamadan önce uterin ven üzerindeki örnekleme alanının son muayenesini yapın. </li></ol></li><li> Fetal kan örnekleri <ol><li> Çocuğunuz doğduğunda, umbilikal kordonu kelepçelemeden veya plasentayı göndermeden umblikal arterden hemen kan alın. Zekayı başlatH kan gazı analizi şırınga ve mümkünse üç 10 ml şırınga ile izleyin. </li><li> Arteryel numuneler güvenceye alındığında, umblikal ven (kan gazı ve 20 + 10 mL şırınga) örneklemeden önce kordonu sıkıştırın ve çocuğu ebeye verin. NOT: Teslimat saniye içinde ve kendiliğinden müstakil sürece yerinde plasenta ile tüm göbek örnekleri alın. </li><li> Geç kordon kelepçesi ile ilgili Norveç önerilerini izleyin. Bozulmuş bir çocuğun olması durumunda, kelepçeyi kelepçeleyin ve kesin derhal ve elini çocuğu ebe ve neonatologla görüşün. </li></ol></li><li> Kan örneklerinin taşınması <ol><li> Geri kalan kan numunelerini hazırlarken kan gaz şırıngalarını buz üzerine koyun ve 5 dakika içinde bir kan gazı analizöründe analiz edin. </li><li> Kan numunelerini derhal vacutainers&#39;a aktarın ve buz üzerine koymadan önce plazma tüplerini 1 - 2 dakika boyunca bir rocker üzerine koyun. Serum tüplerini emek üzerine bırakın.Atory tezgah 30 dakika yerleşmek için. NOT: Prosedürdeki ekstra dikkat gerektiren kritik bir adımdır, çünkü beş bölgeden alınan numunelerin aynı kalitede olması için aynı anda hazırlanması gerekir. </li><li> Plazma örneklerini mümkün olan en kısa sürede santrifüj edin ve 30 dakika içinde, 6 ° C&#39;de, 20 dakika süreyle 2,500 xg santrifüjleyin. </li><li> 30 dakika sonra, serum örneklerini 10 dakika 2.500 x g&#39;de oda sıcaklığında santrifüjleyin. </li><li> Trombosit içermeyen plazma sağlamak için süpernatantları peletin üstünde 0,5 mL bırakarak, 2 mL cryo tüplerine dikkatle ayırın. </li><li> Örnekleri -80 ° C&#39;de saklayın. </li></ol></li></ol> 5. Plasental Dokunun Toplanması <ol><li> Plasenta, buzağı soğutulmuş diseksiyon tepsisine mümkün olduğunca kısa sürede düz bir şekilde koyun. En uzun çapı ve çapı 90 derece fotoğraflayın ve ölçün. </li><li> Plasentayı tartın. </li><li> Ağırlığı, iki çapını, herhangi bir gRoss patolojisi, kordtaki damar sayısı ve doğumdan plasenta buza yerleştirilme zaman aralığı. NOT: Plasenta, klinik olarak belirtilmişse, patolojik muayene için gönderilir. </li><li> Plasenta, maternal yüzeyi yukarı bakacak şekilde yerleştirin ve açık pozitif patolojilerin bulunduğu bölgeden kaçınarak, plasentanın her bir çeyreğinde tesadüfen bulunan 4-5 örnekleme bölgesini belirleyin. Anne yüzeyinden 3-5 mm kesmek için desiduyu makas kullanarak çıkartın. Her bir alandan 1 - 2 cm&#39;lik 3 adet villous doku toplayın. </li><li> Toplanan dokuyu yavaşça 50 mL soğuk 1M PBS içerisinde yıkayın. Her numune alanından birkaç parça halinde bölün. Not: Plasenta parçalarının boyutu, planlanan analizlere bağlı olacaktır. </li><li> 5 kriyo boruları 0,5 cm3 doku örnekleri ve sıvı azot içinde dondurulması ek - 0.1 alikotları ekleyin. </li><li> RNA, sabitleme çözeltisi 25 mL tüpe 0.2 cm 3-0,1 küçük parçalar ekleyin. 4&#39;te saklama6 ° C&#39;de 24 saat bekletin, RNA stabilizasyon solüsyonunu atın ve değiştirin. Donmak. </li><li> Karıştırmak ve dondurularak, OKT ile OCT, yukarı 0.5 mL, 5 kriyo boruları 0,5 cm3 parçaları ekleyin. </li><li> Analiz edilene kadar numuneleri -80 ° C&#39;de saklayın. NOT: Burton ve ark. Planlanan analizlere bağlı olarak plasental numunenin pratik yönlerine mükemmel bir genel bakış sağlar. 20 Kalan dokuyu, mikrovillus ve bazal zarları izole etmek için hazırlamayı ve vakum emme tekniği ile desidual dokuyu toplamayı düşünün. 21 , 22 </li></ol> 6. Yenidoğan Özellikleri <ol><li> Apgar skoru (1, 5 ve 10 dakika), cinsiyet, kilo, uzunluk, gebelik haftası ve Yenidoğan Yoğun Bakım Ünitesine kabulün (kalışın uzunluğu ve sonucuna) dahil yenidoğanın özelliklerini kaydedin. </li><li> Yenidoğan vücut kompozisyonunu antropometrik ölçümlerle, havayı yerinden değiştirerek ölçmeyi düşünün.Ment pletismograf veya çift X-ışını absorptiometrisi. 23 , 24 </li></ol> 7. Hesaplamalar <ol><li> Radial ve uterin arterde benzer kan kompozisyonu varsayın ve uteroplasental arteriovenöz konsantrasyon farkını hesaplayın. Uteroplasental arteriovenöz konsantrasyon farkı = C A - C V Umbilikal venöz arteriyel konsantrasyon farkı = C v - C a C, alt simgelerle konsantrasyon: A, radyal arter; V, rahim damarı; V göbek bağı ve a, göbek bağı. </li><li> Hacimdeki kan akışını, mL / dak (Q) hesaplayın: <img alt="Denklem 1" src="/files/ftp_upload/55847/55847eq1.jpg" /> D, damar çapı (cm) olduğunda, TAMX, zaman ortalamalı maksimum hız ve h, uzaysal kan hızı profili için katsayıdır. Umblikal ven katsayısı olarak 0.5 kullanın veUterin arter 25, 26 için 0.6. </li><li> Plasental alımını hesaplayın ve Fick&#39;in prensibine göre serbest bırakın: Uteroplasental alım = ( C A - C V ) x Qm Fetal alımı = (Cı-V - C) X Q f Alt simgeler: m, maternal ve f, fetus. </li></ol>

<ol>
	<li>Jansson, T., Powell, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+the+placenta+in+fetal+programming:+underlying+mechanisms+and+potential+interventional+approaches.">Role of the placenta in fetal programming: underlying mechanisms and potential interventional approaches.</a> Clin Sci (Lond). 113 (1), 1-13 (2007).</li><li>Hanson, M. A., Gluckman, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+developmental+conditioning+of+later+health+and+disease:+physiology+or+pathophysiology.">Early developmental conditioning of later health and disease: physiology or pathophysiology.</a> Physiol Rev. 94 (4), 1027-1076 (2014).</li><li>Guttmacher, A. E., Spong, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+human+placenta+project:+it's+time+for+real+time.">The human placenta project: it's time for real time.</a> Am J Obstet Gynecol. 213, 3-5 (2015).</li><li>Battaglia, F. C., Regnault, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+transport+and+metabolism+of+amino+acids.">Placental transport and metabolism of amino acids.</a> Placenta. 22 (2-3), 145-161 (2001).</li><li>Hay, W. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental-fetal+glucose+exchange+and+fetal+glucose+metabolism.">Placental-fetal glucose exchange and fetal glucose metabolism.</a> Trans Am Clin Climatol Assoc. 117, 321-339 (2006).</li><li>Woollett, L. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Review:+Transport+of+maternal+cholesterol+to+the+fetal+circulation.">Review: Transport of maternal cholesterol to the fetal circulation.</a> Placenta. 32, 218-221 (2011).</li><li>Prenton, M. A., Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Umbilical+vein-artery+and+uterine+arterio-venous+plasma+amino+acid+differences+(in+the+human+subject).">Umbilical vein-artery and uterine arterio-venous plasma amino acid differences (in the human subject).</a> J Obstet Gynaecol Br Commonw. 76 (5), 404-411 (1969).</li><li>Cetin, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Plasma+and+erythrocyte+amino+acids+in+mother+and+fetus.">Plasma and erythrocyte amino acids in mother and fetus.</a> Biol Neonate. 60 (2), 83-91 (1991).</li><li>Filshie, G. M., Anstey, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+distribution+of+arachidonic+acid+in+plasma+and+tissues+of+patients+near+term+undergoing+elective+or+emergency+Caesarean+section.">The distribution of arachidonic acid in plasma and tissues of patients near term undergoing elective or emergency Caesarean section.</a> Br J Obstet Gynaecol. 85 (2), 119-123 (1978).</li><li>Haberey, P. P., Schaefer, A., Nisand, I., Dellenbach, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+fate+and+importance+of+fetal+lactate+in+the+human+placenta+-a+new+hypothesis.">The fate and importance of fetal lactate in the human placenta -a new hypothesis.</a> J Perinat Med. 10 (2), 127-129 (1982).</li><li>Prendergast, C. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glucose+production+by+the+human+placenta+in+vivo.">Glucose production by the human placenta in vivo.</a> Placenta. 20 (7), 591-598 (1999).</li><li>Metzger, B. E., Rodeck, C., Freinkel, N., Price, J., Young, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplacental+arteriovenous+gradients+for+glucose,+insulin,+glucagon+and+placental+lactogen+during+normoglycaemia+in+human+pregnancy+at+term.">Transplacental arteriovenous gradients for glucose, insulin, glucagon and placental lactogen during normoglycaemia in human pregnancy at term.</a> Placenta. 6 (4), 347-354 (1985).</li><li>Zamudio, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoglycemia+and+the+origin+of+hypoxia-induced+reduction+in+human+fetal+growth.">Hypoglycemia and the origin of hypoxia-induced reduction in human fetal growth.</a> PLoS One. 5 (1), 8551 (2010).</li><li>Holme, A. M., Roland, M. C., Lorentzen, B., Michelsen, T. M., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+glucose+transfer:+a+human+in+vivo+study.">Placental glucose transfer: a human in vivo study.</a> PLoS One. 10 (2), 0117084 (2015).</li><li>Holme, A. M., Roland, M. C., Henriksen, T., Michelsen, T. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+uteroplacental+release+of+placental+growth+factor+and+soluble+Fms-like+tyrosine+kinase-1+in+normal+and+preeclamptic+pregnancies.">In vivo uteroplacental release of placental growth factor and soluble Fms-like tyrosine kinase-1 in normal and preeclamptic pregnancies.</a> Am J Obstet Gynecol. 215 (6), 781-782 (2016).</li><li>Paasche Roland, M. C., Lorentzen, B., Godang, K., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uteroplacental+arterio-venous+difference+in+soluble+VEGFR-1+(sFlt-1),+but+not+in+soluble+endoglin+concentrations+in+preeclampsia.">Uteroplacental arterio-venous difference in soluble VEGFR-1 (sFlt-1), but not in soluble endoglin concentrations in preeclampsia.</a> Placenta. 33 (3), 224-226 (2012).</li><li>Brar, H. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Uteroplacental+unit+as+a+source+of+elevated+circulating+prorenin+levels+in+normal+pregnancy.">Uteroplacental unit as a source of elevated circulating prorenin levels in normal pregnancy.</a> Am J Obstet Gynecol. 155 (6), 1223-1226 (1986).</li><li>Myatt, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Strategy+for+standardization+of+preeclampsia+research+study+design.">Strategy for standardization of preeclampsia research study design.</a> Hypertension. 63 (6), 1293-1301 (2014).</li><li>Kiserud, T., Rasmussen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=How+repeat+measurements+affect+the+mean+diameter+of+the+umbilical+vein+and+the+ductus+venosus.">How repeat measurements affect the mean diameter of the umbilical vein and the ductus venosus.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 11 (6), 419-425 (1998).</li><li>Burton, G. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimising+sample+collection+for+placental+research.">Optimising sample collection for placental research.</a> Placenta. 35 (1), 9-22 (2014).</li><li>Illsley, N. P., Wang, Z. Q., Gray, A., Sellers, M. C., Jacobs, M. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simultaneous+preparation+of+paired,+syncytial,+microvillous+and+basal+membranes+from+human+placenta.">Simultaneous preparation of paired, syncytial, microvillous and basal membranes from human placenta.</a> Biochim Biophys Acta. 1029 (2), 218-226 (1990).</li><li>Staff, A. C., Ranheim, T., Khoury, J., Henriksen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Increased+contents+of+phospholipids,+cholesterol,+and+lipid+peroxides+in+decidua+basalis+in+women+with+preeclampsia.">Increased contents of phospholipids, cholesterol, and lipid peroxides in decidua basalis in women with preeclampsia.</a> Am J Obstet Gynecol. 180 (3), 587-592 (1999).</li><li>Catalano, P. M., Thomas, A. J., Avallone, D. A., Amini, S. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anthropometric+estimation+of+neonatal+body+composition.">Anthropometric estimation of neonatal body composition.</a> Am J Obstet Gynecol. 173 (4), 1176-1181 (1995).</li><li>Ellis, K. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Body-composition+assessment+in+infancy:+air-displacement+plethysmography+compared+with+a+reference+4-compartment+model.">Body-composition assessment in infancy: air-displacement plethysmography compared with a reference 4-compartment model.</a> Am J Clin Nutr. 85 (1), 90-95 (2007).</li><li>Haugen, G., Kiserud, T., Godfrey, K., Crozier, S., Hanson, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Portal+and+umbilical+venous+blood+supply+to+the+liver+in+the+human+fetus+near+term.">Portal and umbilical venous blood supply to the liver in the human fetus near term.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 24 (6), 599-605 (2004).</li><li>Acharya, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+validation+of+uterine+artery+volume+blood+flow+measurement+by+Doppler+ultrasonography+in+pregnant+sheep.">Experimental validation of uterine artery volume blood flow measurement by Doppler ultrasonography in pregnant sheep.</a> Ultrasound Obstet Gynecol. 29 (4), 401-406 (2007).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glutamate-glutamine+cycle+and+exchange+in+the+placenta-fetus+unit+during+late+pregnancy.">Glutamate-glutamine cycle and exchange in the placenta-fetus unit during late pregnancy.</a> Amino Acids. 47 (1), 45-53 (2015).</li><li>Tuckey, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progesterone+synthesis+by+the+human+placenta.">Progesterone synthesis by the human placenta.</a> Placenta. 26 (4), 273-281 (2005).</li><li>Simmons, M. A., Meschia, G., Makowski, E. L., Battaglia, F. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fetal+metabolic+response+to+maternal+starvation.">Fetal metabolic response to maternal starvation.</a> Pediatr Res. 8 (10), 830-836 (1974).</li><li>Simmons, M. A., Jones, M. D., Battaglia, F. C., Meschia, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Insulin+effect+on+fetal+glucose+utilization.">Insulin effect on fetal glucose utilization.</a> Pediatr Res. 12 (2), 90-92 (1978).</li><li>Bujold, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+supporting+that+the+excess+of+the+sVEGFR-1+concentration+in+maternal+plasma+in+preeclampsia+has+a+uterine+origin.">Evidence supporting that the excess of the sVEGFR-1 concentration in maternal plasma in preeclampsia has a uterine origin.</a> J Matern Fetal Neonatal Med. 18 (1), 9-16 (2005).</li><li>Jansson, T., Aye, I. L., Goberdhan, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+emerging+role+of+mTORC1+signaling+in+placental+nutrient-sensing.">The emerging role of mTORC1 signaling in placental nutrient-sensing.</a> Placenta. 33, 23-29 (2012).</li><li>Cetin, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Placental+transport+of+amino+acids+in+normal+and+growth-restricted+pregnancies.">Placental transport of amino acids in normal and growth-restricted pregnancies.</a> Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 110, 50-54 (2003).</li></ol>

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

<html> Plasenta 4-gemi örnekleme yöntemi, üç ana amaç için uygundur. İlk olarak, spesifik maddelerin maternal tarafta plasenta tarafından nasıl alındığını ve glikoz ve amino asit çalışmalarımızla gösterildiği gibi muhtemelen umblikal dolaşıma ve fetusa transfer edildiğini incelemek için kullanılabilir. İkincisi, yöntem progesteron sonuçlarına göre plasenta tarafından üretilen ve maternal veya fetal dolaşıma bırakılan maddelerin incelenmesi ile oldukça yakından ilgilidir. Üçüncü ...

Ulusal Sağlık Enstitüsüne (ABD) göre, plasenta insan vücudunda en az anlaşılmış organ 1 , 2 , 3&#39;tür . Devam eden gebelikte etik olmayan riskler getirmeksizin insan plasentasını in vivo erişmek ve incelemek zordur. İnsandaki plasental fonksiyon çalışmaları büyük oranda in vitro ve ex vivo modellere dayanır. Plasental nakil ve metabolizma ile ilgili önceki in vivo çalışmaların çoğunluğu hayvanlar 4 , 5 , 6&#39;da gerçekleştirilmiştir . Bununla birlikte, plasental yapı ve fonksiyonlar türler arasında önemli farklılık gösterdiğinden, hayvanlardan insanlara yapılan sonuçların dikkatle kullanılması gerekir. İn vivo çalışmaların sadece birkaç küçük insan plasental ve fetal alımını ve normal fizyolojikVe hiçbiri 7 , 8 , 9 , 10 , 11 , 12 , 13 numaralı bileşiklerin bir bütün olarak transferini araştırmamıştır. Bu temel çalışmalar insan plasentasının in vivo çalışmalarının uygulanabilir olduğunu ve çeşitli amaçlara hizmet edebileceğini göstermektedir. Birincisi, plasental fonksiyonların temelde in vitro , ex vivo ve hayvan çalışmalarından türetilen güncel kavramları insan ortamında test edilerek insan plasentasına yeni ve daha spesifik bir bakış açısı getirilebilir. İkincisi, anormal fetal büyüme, preeklampsi, maternal diyabet, metabolik sendrom ve diğer maternal metabolik bozukluklarla ilişkili disfonksiyonel plasentanın özellikleri daha iyi karakterize edilebilir. Üçüncü olarak, insan in vivo çalışmalar teşhis geliştirme fırsatı sağlarPlasental fonksiyonun tik ve prediktif araçları. Bu arka planda insan plasental fonksiyonunu in vivo araştırmak için kapsamlı bir fizyolojik veri topluluğu oluşturmayı amaçladık . Planlı bir sezaryen sırasında, plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki (4 damarlı örnekleme yöntemi) gelen ve giden damarlardan kan örnekleri toplamak için intraabdominal uterin ven girişini kullanırız. Bu numuneler besin maddeleri ve diğer maddelerin eşleştirilmiş arteriovenöz konsantrasyon farklılıklarını hesaplamak için kullanılır 14 . Buna ek olarak, ultrason ile plasentanın her iki tarafındaki hacimsel kan akışını ölçüyoruz. Sonuç olarak, herhangi bir bileşiğin plasental ve fetal alım miktarı belirlenebilir. Ayrıca plasenta tarafından maternal ve fetal dolaşımlara 15 , 16 , 17 serbest bırakılan maddelerin belirlenmesi mümkündür. BirleştirildiğindeD anne ve çocuğun klinik parametreleri ile birlikte, ve plasental ve diğer ilgili dokuların analizleri ile, bu yöntem, plasenta fonksiyonlarının birçok yönünü in vivo aynı anne-fetus çiftlerine entegre etmek için heyecan verici bir potansiyele sahiptir.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1323">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:557px;">Maternal body composition</td>
			<td style="width:173px;"></td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:487px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Impedance scale</td>
			<td>Tanita</td>
			<td></td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ultrasound measurements&#160;</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">Sequoia 512 ultrasound machine</td>
			<td>Acuson</td>
			<td></td>
			<td>equipped with a curved transducer with colour and pulsewave Doppler (frequency bandwidth 2-6 MHz)</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Blood samples</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Arerial cannula</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>682245</td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">20cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle</td>
			<td>Termo</td>
			<td>SS-20ES</td>
			<td>or similar. 3 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">10cc Eccentric Luer Tip Syringe without Needle</td>
			<td>Termo</td>
			<td>SS-10ES</td>
			<td>or similar. 9 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">5cc 6% Luer Syringe without Needle</td>
			<td>Termo</td>
			<td>SS-05S1</td>
			<td>or similar. 2 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Arterial blood gas syringe&#160;</td>
			<td>Radiometer Medical</td>
			<td></td>
			<td>or similar. 4 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Sterile winged needle connected to flexible tubing, 21 gauge</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>450081</td>
			<td>(intended for single use).3 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Vacutainer tube 6 mL EDTA&#160;</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>456043</td>
			<td>or similar. Label with sample site. 10 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Vacutainer tube 5 ml LH Lithium Heparin Separator</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>456305</td>
			<td>or similar. Label with sample site. 5 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Vacutainer tube 6 mL Serum Clot Activator&#160;</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>456089</td>
			<td>or similar. Label with sample site. 5 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:557px;">Vacutainer tube 3 ml&#160; 9NC Coagulation sodium citrate 3,2%</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>454334</td>
			<td>or similar. Label with sample site. 5 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cryogenic vials, 2.0 mL</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430488</td>
			<td>or similar. Label with sample site, serum/type of plasma and ID. 90 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Marked trays to transport the syringes</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>to transport the blood samples in the operation theatre</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Rocker</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>for gentle mixing of the samples</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ice</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>in styrofoam box</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Liquid nitrogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>in appropriate container</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Placenta samples</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Metal tray</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Ice</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>in styrofoam box</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Calibrated scale</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Metal ruler</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">1 M Phosphate buffered saline</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1408</td>
			<td>or similar. Dilute 10 M to&#160; 1M before use</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">RNA stabilization solution</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>R0901-500ML&#160;</td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Optimal Cutting Temperature (O.C.T.) compound</td>
			<td>vwr</td>
			<td>361603E</td>
			<td>or similar</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Cryogenic vials, 2.0 mL</td>
			<td>Corning</td>
			<td>430488</td>
			<td>or similar. Label with sample site. content and ID. 10 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Centrifuge tubes, conical bottom 50 mL</td>
			<td>Greiner Bio-One</td>
			<td>227,285</td>
			<td>or similar. Label with &#34;RNA later&#34;, sample site and ID. 2 needed.</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Liquid nitrogen</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td>in appropriate container</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Fetal body composition</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Calibrated scale</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;">Measuring tape</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the 4-vessel sampling approach to integrative studies of human placental physiology in vivo

Insan plasenta rahimde iken hala araştırma için son derece erişilemez. Bu nedenle, plasental anatomi, hemodinamik ve gebeliğin süresindeki türler arasında yüksek çeşitliliğe rağmen, insan plasental fizyolojisinin in vivo olarak mevcut anlayışı büyük oranda hayvan çalışmalarına dayanmaktadır. İnsan plasenta çalışmalarının büyük çoğunluğu ex vivo perfüzyon çalışmaları veya in vitro trofoblast çalışmalardır. In vitro çalışmalar ve hayvan modelleri çok önemlidir, ancak bu tür çalışmaların sonuçlarının insan plasentasına in vivo ekstrapolasyonu kesin değildir. İnsana plasenta fizyolojisini venöz dönemde çalışmayı ve yöntemin ayrıntılı bir protokolünü sunmayı amaçladık. Planlanan sezaryen sırasında uterin vene uterin vene girişin uterus kesi öncesi istismar edilmesi, gelen ve giden damarlardan plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki kan örneklerini toplarız. Konuyu birleştirirkenHacimsel kan akımı ölçümleri ile kan numunelerinden elde edilen santrasyon ölçümleri sayesinde, herhangi bir bileşiğin plasental ve fetal alımını ve salımını nicel olarak değerlendirebiliriz. Dahası, aynı anne-fetus çiftlerinden elde edilen plasental doku örnekleri, taşıyıcı yoğunluğunu, aktivitesini ve plasental fonksiyonların diğer yönlerini in vivo olarak ölçebilir . 4 damarlı örnekleme yönteminin bu entegre kullanımı sayesinde hem normal hem de patolojik gebeliklerde plasental besin transferinin ve metabolizmasının bazılarını in vivo olarak test edebiliyoruz. Ayrıca, bu yöntem, plasenta tarafından salgılanan maddelerin maternal dolaşımda tanımlanmasını sağlar ve bu da plasenta disfonksiyonunun biyolojik belirteçlerinin araştırılmasına önemli katkı sağlayabilir.

4 damarlı örnekleme yöntemi klinik uygulamada uygulanabilir ve 209 ana / bebek çifti kan numunesini başarıyla elde ettik. Bunların 128&#39;inde hacimsel kan akışını ölçmekteyiz. Hem ana hem de fetal damarların tam 4 damar örneklemesi ve kaliteli akış ölçümleri, 70 ana-fetus çiftinde elde edildi ( Şekil 3 ). Buna ek olarak, şimdiye kadar 30 preeklamptik hastadan alınan kan ve plasenta örneklerini aldık. Yöntemin 14...

Watch this Scientific Journal Video about The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo at JoVE.com

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

Bu dönemde in vivo insan plasental fizyoloji çalışmak için ayrıntılı bir yöntem sunulmaktadır. Yöntem, plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki gelen ve giden damarlardan alınan kan örneklerini, hacimsel kan akışı ve plasental doku örneklemesi ile ilgili ultrason ölçümleri ile birleştirir.

İnsan vücudunun fizyolojisini bütünleştiren 4 damarlı Örnekleme Yaklaşımı<emIn vivo</em

The human placenta is highly inaccessible for research while still in utero. The current understanding of human placental physiology in vivo is therefore ...

the-4-vessel-sampling-approach-to-integrative-studies-human-placental

Research

JoVE Journal

Medicine

The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

10.5K Görüntüleme.  Oslo University Hospital.  Bu dönemde in vivo insan plasental fizyoloji çalışmak için ayrıntılı bir yöntem sunulmaktadır. Yöntem, plasentanın maternal ve fetal taraflarındaki gelen ve giden damarlardan alınan kan örneklerini, hacimsel kan akışı ve plasental doku örneklemesi ile ilgili ultrason ölçümleri ile birleştirir. 

Video: The 4-vessel Sampling Approach to Integrative Studies of Human Placental Physiology In Vivo

Roux-en-Y Gastric Bypass Operation in Rats

Currently, the most effective therapy for the treatment of morbid obesity to induce significant and maintained body weight loss with a proven mortality benefit is bariatric surgery1,2. Consequently, there has been a steady rise in the number of bariatric operations done worldwide in recent years with the Roux-en-Y gastric bypass (gastric bypass) being the most commonly performed operation3. Against this background, it is important to understand the physiological mechanisms by which gastric bypass induces and maintains body weight loss. These mechanisms are yet not fully understood, but may include reduced hunger and increased satiation4,5, increased energy expenditure6,7, altered preference for food high in fat and sugar8,9, altered salt and water handling of the kidney10 as well as alterations in gut microbiota11. Such changes seen after gastric bypass may at least partly stem from how the surgery alters the hormonal milieu because gastric bypass increases the postprandial release of peptide-YY (PYY) and glucagon-like-peptide-1 (GLP-1), hormones that are released by the gut in the presence of nutrients and that reduce eating12.
During the last two decades numerous studies using rats have been carried out to further investigate physiological changes after gastric bypass. The gastric bypass rat model has proven to be a valuable experimental tool not least as it closely mimics the time profile and magnitude of human weight loss, but also allows researchers to control and manipulate critical anatomic and physiologic factors including the use of appropriate controls. Consequently, there is a wide array of rat gastric bypass models available in the literature reviewed elsewhere in more detail 13-15. The description of the exact surgical technique of these models varies widely and differs e.g. in terms of pouch size, limb lengths, and the preservation of the vagal nerve. If reported, mortality rates seem to range from 0 to 35%15. Furthermore, surgery has been carried out almost exclusively in male rats of different strains and ages. Pre- and postoperative diets also varied significantly.
Technical and experimental variations in published gastric bypass rat models complicate the comparison and identification of potential physiological mechanisms involved in gastric bypass. There is no clear evidence that any of these models is superior, but there is an emerging need for standardization of the procedure to achieve consistent and comparable data. This article therefore aims to summarize and discuss technical and experimental details of our previously validated and published gastric bypass rat model.

Numerous studies using gastric bypass rat models have been recently conducted to uncover the underlying physiological mechanisms of Roux-en-Y gastric bypass operations. This article aims to demonstrate and discuss the technical and experimental details of our published gastric bypass rat model to understand advantages and limitations of this experimental tool.

Sıçanlarda Roux-en-Y Gastrik Bypass Operasyonu

Currently, the most effective therapy for the treatment of morbid obesity to induce significant and maintained body weight loss with a proven mortality ...

Tıp

Depletion of Mouse Cells from Human Tumor Xenografts Significantly Improves Downstream Analysis of Target Cells

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic patient tumors in different assays1. Human tumor xenografts represent the gold standard with respect to tumor biology, drug discovery, and metastasis research 2-4. Tumor xenografts can be derived from different types of material like tumor cell lines, tumor tissue from primary patient tumors4 or serially transplanted tumors. When propagated in vivo, xenografted tissue is infiltrated and vascularized by cells of mouse origin. Multiple factors such as the tumor entity, the origin of xenografted material, growth rate and region of transplantation influence the composition and the amount of mouse cells present in tumor xenografts. However, even when these factors are kept constant, the degree of mouse cell contamination is highly variable.
Contaminating mouse cells significantly impair downstream analyses of human tumor xenografts. As mouse fibroblasts show high plating efficacies and proliferation rates, they tend to overgrow cultures of human tumor cells, especially slowly proliferating subpopulations. Mouse cell derived DNA, mRNA, and protein components can bias downstream gene expression analysis, next-generation sequencing, as well as proteome analysis 5. To overcome these limitations, we have developed a fast and easy method to isolate untouched human tumor cells from xenografted tumor tissue. This procedure is based on the comprehensive depletion of cells of mouse origin by combining automated tissue dissociation with the benchtop tissue dissociator and magnetic cell sorting. Here, we demonstrate that human target cells can be can be obtained with purities higher than 96% within less than 20 min independent of the tumor type.

Human tumor xenografts are vascularized and infiltrated by cells of mouse origin during the growth phase in vivo. To circumvent the bias caused by these contaminating cells during downstream analysis, we developed a method allowing for comprehensive depletion of all mouse cells by magnetic cell sorting.

İnsan Tümör ksenogratflarının gelen Fare Hücrelerinin tükenmesi Anlamlı Hedef Hücre Alt Analizi geliştirir

The use of in vitro cell line models for cancer research has been a useful tool. However, it has been shown that these models fail to reliably mimic ...

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo and noninvasively in humans via phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS). However, the approach has not been widely adopted in translational and clinical research, with variations in methodology and limited guidance from the literature. Increased optimization, standardization, and dissemination of methods for in vivo 31PMRS would facilitate the development of targeted therapies to improve OXPHOS capacity and could ultimately favorably impact cardiovascular health. 31PMRS produces a noninvasive, in vivo measure of OXPHOS capacity in human skeletal muscle, as opposed to alternative measures obtained from explanted and potentially altered mitochondria via muscle biopsy. It relies upon only modest additional instrumentation beyond what is already in place on magnetic resonance scanners available for clinical and translational research at most institutions. In this work, we outline a method to measure in vivo skeletal muscle OXPHOS. The technique is demonstrated using a 1.5 Tesla whole-body MR scanner equipped with the suitable hardware and software for 31PMRS, and we explain a simple and robust protocol for in-magnet resistive exercise to rapidly fatigue the quadriceps muscle. Reproducibility and feasibility are demonstrated in volunteers as well as subjects over a wide range of functional capacities.

Phosphorus-31 Magnetic Resonance Spectroscopy: A Tool for Measuring In Vivo Mitochondrial Oxidative Phosphorylation Capacity in Human Skeletal Muscle

This work demonstrates the feasibility of an in vivo phosphorus-31 magnetic resonance spectroscopy (31PMRS) technique to quantify mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity in human skeletal muscle.

Fosfor-31 Manyetik Rezonans Spektroskopisi: Ölçme için Aracı<em&gt; İn Vivo</emİnsan İskelet Kası içinde&gt; Mitokondriyal Oksidatif Fosforilasyon Kapasitesi

Skeletal muscle mitochondrial oxidative phosphorylation (OXPHOS) capacity, which is critically important in health and disease, can be measured in vivo ...

Analyzing Beneficial Effects of Nutritional Supplements on Intestinal Epithelial Barrier Functions During Experimental Colitis

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause severe problems, such as abdominal cramping, bloody diarrhea, and weight loss, in affected individuals. Unfortunately, there is no cure yet, and treatments only aim to alleviate symptoms. Current treatments include anti-inflammatory and immunosuppressive drugs that may cause severe side effects. This warrants the search for alternative treatment options, such as nutritional supplements, that do not cause side effects. Before their application in clinical studies, such compounds must be rigorously tested for effectiveness and security in animal models. A reliable experimental model is the dextran sulfate sodium (DSS) colitis model in mice, which reproduces many of the clinical signs of ulcerative colitis in humans. We recently applied this model to test the beneficial effects of a nutritional supplement containing vitamins C and E, L-arginine, and &#969;3-polyunsaturated fatty acids (PUFA). We analyzed various disease parameters and found that this supplement was able to ameliorate edema formation, tissue damage, leukocyte infiltration, oxidative stress, and the production of pro-inflammatory cytokines, leading to an overall improvement in the disease activity index. In this article, we explain in detail the correct application of nutritional supplements using the DSS colitis model in C57Bl/6 mice, as well as how disease parameters such as histology, oxidative stress, and inflammation are assessed. Analyzing the beneficial effects of different diet supplements may then eventually open new avenues for the development of alternative treatment strategies that alleviate IBD symptoms and/or that prolong the phases of remission without causing severe side effects.

Current treatments of inflammatory bowel diseases (IBD) aim at alleviating disease symptoms but may cause severe side effects. Thus, alternative strategies are being investigated in animal colitis models. Here, we explain how the beneficial effects of diet supplements on clinical IBD signs are analyzed in such a colitis model.

Deneysel Kolit sırasında Bağırsak epitel Bariyer Fonksiyonları Üzerine Ek Beslenme Faydalı Etkileri Analizi

Inflammatory bowel diseases (IBD), including Crohn&#39;s disease and ulcerative colitis, are chronic relapsing disorders of the intestines. They cause ...

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ischemia and infarction in children. If left untreated, it results in a 90% mortality rate in the first year of life. In patients who survive to the adulthood, the coronary steal phenomenon and retrograde left-sided coronary flow provide a substrate for chronic subendocardial ischemia, which may lead to left ventricular dysfunction, ischemic mitral regurgitation, malignant ventricular arrhythmias, and sudden cardiac death. The average age of life-threatening presentation is 33 years and of sudden cardiac death 31 years. Therefore, surgical correction is highly recommended as soon as the diagnosis is made, regardless of age. In adult-type ALCAPA originating from the right-facing sinus of the pulmonary artery, direct re-implantation of the ALCAPA into the aorta is the more physiologically sound repair technique to re-establish the dual-coronary perfusion system and is recommended. This protocol describes the technique of direct re-implantation of adult-type ALCAPA into the aorta.

Direct Re-implantation of Left Coronary Artery into the Aorta in Adults with Anomalous Origin of Left Coronary Artery from the Pulmonary Artery ALCAPA

Surgical correction of ALCAPA is highly recommended, regardless of age or the degree of intercoronary collateralization. This protocol presents a technique for the direct re-implantation of adult-type ALCAPA into the aorta to re-establish the dual-coronary perfusion. Whenever feasible, direct re-implantation is preferred to other surgical correction techniques.

Pulmoner Arter Left Koroner arter çıkış anomalileri Erişkin Aort içine Sol Koroner Arter Doğrudan Yeniden implantasyon (ALCAPA)

Anomalous origin of the left coronary artery from the pulmonary artery (ALCAPA) is a rare congenital anomaly which is one of leading causes of myocardial ...

Full-root Aortic Valve Replacement by Stentless Aortic Xenografts in Patients with Small Aortic Roots

In patients with small aortic roots who need an aortic valve replacement with biological valve substitutes, the implantation of the stented pericardial valve might not meet the functional needs. The implantation of a too-small stented pericardial valve, leading to an effective orifice area indexed to a body surface area less than 0.85 cm2/m2, is regarded as prosthesis-patient mismatch (PPM). A PPM negatively affects the regression of left ventricular hypertrophy and thus the normalization of left ventricular function and the alleviation of symptoms. Persistent left ventricular hypertrophy is associated with an increased risk of arrhythmias and sudden cardiac death. In the case of predictable PPM, there are three options: 1) accept the PPM resulting from the implantation of a stented pericardial valve when comorbidities of the patient forbid the more technically demanding operative technique of implanting a larger prosthesis, 2) enlarge the aortic root to accommodate a larger stented valve substitute, or 3) implant a stentless biological valve or a homograft. Compared to classical aortic valve replacement with stented pericardial valves, the full-root implantation of stentless aortic xenografts offers the possibility of implanting a 3-4 mm larger valve in a given patient, thus allowing significant reduction in transvalvular gradients. However, a number of cardiac surgeons are reluctant to transform a classical aortic valve replacement with stented pericardial valves into the more technically challenging full-root implantation of stentless aortic xenografts. Given the potential hemodynamic advantages of stentless aortic xenografts, we have adopted full-root implantation to avoid PPM in patients with small aortic roots necessitating an aortic valve replacement. Here, we describe in detail a technique for the full-root implantation of stentless aortic xenografts, with emphasis on the management of the proximal suture line and coronary anastomoses. Limitations of this technique and alternative options are discussed.

Full-root aortic valve replacement by stentless aortic xenograft is a viable option in patients with small aortic roots. We describe, a technique for the full-root implantation of stentless aortic xenografts, with emphasis on the management of the proximal suture line and coronary anastomoses, and discuss its limitations and alternative options.

Küçük Aort Köklü Hastalarda Stentless Aortik Xenograftlarla Tam Kök Aort Kapak Replasmanı

In patients with small aortic roots who need an aortic valve replacement with biological valve substitutes, the implantation of the stented pericardial ...

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the body, an additional extraction procedure is commonly required to release the active constituents from raw herbs. Water decoction is a classical extraction procedure that is still broadly used in the clinical settings. Here, we propose a detailed protocol for er-xian decoction (EXD) in order to apply herbal decoctions to experimental studies. The calculation of an animal-appropriate dose is described, as well as the four main steps of EXD: soaking, water decoction, filtration, and concentration. In addition, serum-containing EXD is introduced to rats as a means of in vitro validation. Here, rats were orally administered EXD for three days. Blood samples were then collected, inactivated, centrifuged, and filtered. The serum, diluted with the culture medium, can be utilized to treat cells or tissues in vitro. For example, EXD was applied to both in vivo and in vitro studies and demonstrated that EXD enhances osteogenesis. This protocol can be used as a reference for the preparation and application of herbal medicines.

Preparation of Herbal Medicine: Er-Xian Decoction and Er-Xian-containing Serum for In Vivo and In Vitro Experiments

Here, we present the preparation of an er-xian decoction (EXD) in four steps&#8212;soaking, decoction, filtration, and concentration&#8212;and demonstrate the administration of a prepared EXD-containing serum to rats. These methods are applicable to the in vivo and in vitro study of herbal decoctions such as traditional Chinese medicines.

Bitkisel Tıbbın Hazırlanması: Er-Xian Kaynatma ve Er-Xian içeren Serum<emIn vivo</emVe<em&gt; In vitro</em&gt; Deneyler

Traditional herbal medicine, an alternative medicine in the clinical setting, has received increased attention in recent years. Before delivery to the ...

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy (ALPPS) Procedure

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver metastases, the amount of liver tissue left behind after liver resection has become the main limiting factor of resectability of large or multiple liver tumors. A minimal amount of functional tissue is required to avoid the severe complication of post-hepatectomy liver failure, which has high morbidity and mortality. Inducing liver growth of the prospective remnant prior to resection has become more established in liver surgery, either in the form of portal vein embolization by interventional radiologists or in the form of portal vein ligation several weeks prior to resection. Recently, it was shown that liver regeneration is more extensive and rapid, when the parenchymal transection is added to portal vein ligation in a first stage and then, after only one week of waiting, resection performed in a second stage (Associating Liver Partition and Portal vein ligation for Staged hepatectomy = ALPPS). ALPPS has rapidly become popular across the world, but has been criticized for its high perioperative mortality. The mechanism of accelerated and extensive growth induced by this procedure has not been well understood. Animal models have been developed to explore both the physiological and molecular mechanisms of accelerated liver regeneration in ALPPS. This protocol presents a rat model that allows mechanistic exploration of accelerated regeneration.

Rat Model of the Associating Liver Partition and Portal Vein Ligation for Staged Hepatectomy ALPPS Procedure

Inducing rapid liver hypertrophy using Associating Liver Partition and Portal vein ligation for a Staged hepatectomy (ALPPS) has been proposed for resection of borderline resectable liver tumors. This model may elucidate mechanisms involved in rapid hypertrophy and allows testing of drugs that promote or block the acceleration of regeneration.

Karaciğer bölümü ilişkilendirme ve Portal ven ligasyonu hazırlanmış Hepatectomy (ALPPS) yordamı için fare modeli

Recent clinical data support an aggressive surgical approach to both primary and metastatic liver tumors. For some indications, like colorectal liver ...

Technique of Minimally Invasive Transverse Aortic Constriction in Mice for Induction of Left Ventricular Hypertrophy

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure overload-induced left ventricular hypertrophy (LVH) and its progression to heart failure. In the majority of the reported investigations, this procedure is performed with intubation and ventilation of the animal which renders it demanding and time-consuming and adds to the surgical burden to the animal. The aim of this protocol is to describe a simplified technique of minimally invasive TAC without intubation and ventilation of mice. Critical steps of the technique are emphasized in order to achieve low mortality and high efficiency in inducing LVH.
Male C57BL/6 mice (10-week-old, 25-30 g, n=60) were anesthetized with a single intraperitoneal injection of a mixture of ketamine and xylazine. In a spontaneously breathing animal following a 3-4 mm upper partial sternotomy, a segment of 6/0 silk suture threaded through the eye of a ligation aid was passed under the aortic arch and tied over a blunted 27-gauge needle. Sham-operated animals underwent the same surgical preparation but without aortic constriction. The efficacy of the procedure in inducing LVH is attested by a significant increase in the heart/body weight ratio. This ratio is obtained at days 3, 7, 14 and 28 after surgery (n = 6 - 10 in each group and each time point). Using our technique, LVH is observed in TAC compared to sham animals from day 7 through day 28. Operative and late (over 28 days) mortalities are both very low at 1.7%.
In conclusion, our cost-effective technique of minimally invasive TAC in mice carries very low operative and post-operative mortalities and is highly efficient in inducing LVH. It simplifies the operative procedure and reduces the strain put on the animal. It can be easily performed by following the critical steps described in this protocol.

The aim of this protocol is to describe step-by-step the technique of minimally invasive transverse aortic constriction (TAC) in mice. By elimination of intubation and ventilation which are mandatory for the commonly used standard procedure, minimally invasive TAC simplifies the operative procedure and reduces the strain put on the animal.

Minimal invaziv transvers aort daralma farelerde sol ventrikül hipertrofisi indüksiyon için tekniği

Transverse aortic constriction (TAC) in mice is one of the most commonly used surgical techniques for experimental investigation of pressure ...

Standardized Technique of Aortic Valve Re-implantation for Valve-sparing Aortic Root Replacement

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures prevents a number of cardiac surgeons from incorporating them into their practice. The aim of this protocol is to describe a simplified and user-friendly technique of an aortic valve-sparing root replacement (VSRR) procedure by re-implantation of the aortic valve. Proper selection of patients and limitations of the technique are discussed.
In 54 consecutive patients, normal appearing aortic valves were re-implanted in a commercially available polyester prosthesis with pre-shaped sinuses by a simplified and standardized technique. Placement of the first row of the proximal suture line, choice of the prosthesis size, and adjustment of the height of the commissures of the patient to the fixed height of the sinus portion of the prosthesis were slightly modified from the reference techniques with the aim of increasing its feasibility for use by other cardiac surgeons. Early mortality and morbidity as well as 5-year survival, freedom from aortic valve reoperation, and freedom from recurrent moderate regurgitation were collected in all patients.
Thirty-day mortality, re-sternotomy for bleeding, re-sternotomy for mediastinitis, and the incidence of stroke were very low, 1.8% for each (1 of 54). No patient required permanent pace-maker implantation. At 5 years, survival, freedom from aortic valve reoperation, and freedom from recurrent moderate regurgitation were 97.5%, 95.2%, and 91.6%, respectively.
Mid-term results of our standardized technique of re-implantation of the aortic valve for valve-sparing aortic root replacement are very good and compare with more complex techniques reported by experienced surgeons. By following the present protocol of the standardized re-implantation technique, a greater number of cardiac surgeons can perform this procedure with comparable good results.

Valve-sparing aortic root replacement has the advantage of preserving the patient&#39;s own aortic valve. The complexity of the reported techniques to date restricts their use to a limited number of cardiac surgeons. This protocol describes step-by-step a standardized technique reproducible by a greater number of cardiac surgeons.

Aort kapak yeniden implantasyon Vana-tutumlu aort için standart tekniği kök değiştirme

Despite the obvious advantages of the preservation of a normal aortic valve during aortic root replacement, the complexity of valve sparing procedures ...