Yazarlar kabul mali desteği Çin hibe doğal Bilim Vakfı (No 21372023, 21778009 ve 81701818); Bakanlığı Bilim ve teknoloji-in Halk Cumhuriyeti Çin (No. 2015DFA31590); Shenzhen bilim ve teknoloji yenilik Komitesi (No. JCYJ20170412150719814, JCYJ20170412150609690, JCYJ20150403101146313, JCYJ20160301111338144, JCYJ20160331115853521, JSGG20160301095829250 ve GJHS20170310093122365); ve Çin doktora sonrası Bilim Vakfı (No. 2017 M 610704).

1. ekipman hazırlık
<ol><li>El ile peptid sentez cihazları için vakum manifold (Tablo reçetesi) bir verimli duman mahallede yerleştirin. Daha sonra Üçlü Kesme muslukları vakum manifold üzerine yerleştirin ve onları bir azot veya argon gaz hattı bağlayın. Kauçuk septa kullanarak tüm kullanılmayan girişleri kap.</li>
	<li>Reçine kaplı sütunları (0.8 x 4 cm, 10 mL rezervuar, bkz: Malzemeler tablo) üç yönlü Kesme muslukları (Şekil 1) kullanarak manifold bağlayın. Yükseltme tarafından vakum filtrasyon veya kauçuk pipet ampul bir vakum sistemine bağlı bir pompa çözücü sütunları kaldırmak için kullanın.</li>
	<li>Kullanım photoreactor (resim 2), UV ışınlama için on 350 nm lambalar (Malzemeler tablo) ile donatılmıştır. Bu bir argon gaz tankı argon gazı öncesinde ve sırasında photoreactions photoreactor dolu emin olmak için photoreactor hava giriş üzerinden bağlanır.</li>
	<li>Photoreactor UV lamba değiştirmeden önce ışınlama UV ışık diye photoreactor kapağının kapalı olduğundan emin olun.</li>
</ol>2. reçine hazırlık
Not: genel olarak, peptid yüzeylerde inşaat Fmoc tabanlı katı fazlı peptid sentez protokolleri kullanılarak yapılır. Bunlar bir C-terminal Amid kalan aşağıdaki peptid bölünme bırakıyor pisti Amid reçine kullanılarak yapılmaktadır. Bu iletişim kuralı kağıt kullanılır.
Dikkat: N, N- dimethylformamide (DMF), diklorometan (DCM), 4-methylmorpholine (NMM) ve N, N- diisoproylethylamine (DIPEA) zehirli ve zararlı inhalasyon, yenmesi veya Ciltle temas vardır. Dietil eter çok kolay alevlenebilir. Trifluoroacetic asit (TFA) aşındırıcı. 1,2-ethanedithiol (EDT) son derece kötü kokulu. Bu nedenle, tüm organik çözücüler ve kimyasallar olmalı uygun kişisel koruyucu ekipman ile (nitril eldiven, önlük ve koruyucu gözlük) ele ve kimyasal duman çuval içinde ele.
<ol><li>Aşağıdaki formülü kullanarak gerekli reçine miktarı Hesapla: ölçek (mmol) / (yükleme kapasitesi (mmol/g) 1.000 (mg/g) reçine) reçine (mg) kütlesi = Örn, pisti Amid MBHA reçine (0.5 mmol/g) 25 µmol miktarı = 0.025 mmol / (0.5 mmol/g 1000 mg/g) = 50 mg. Ardından, reçine 50 mg bir sütunda tartmak ve üçlü Kesme muslukları kullanarak vakum manifold üzerinde ayarlayın.</li>
	<li>1-2 mL DCM reçine (0.8 x 4 cm, 10 mL rezervuar) bir sütun ekleyin. Reçine şişmeye, yavaşça 10 dakikadır azot ve argon akışı kullanarak kışkırtmak. Ardından, vakum filtrasyon kullanarak solvent kaldırın.</li>
</ol>3. N-terminal Fmoc Deprotection ve yıkama
<ol><li>Çözüm deprotecting N-terminal Fmoc hazırlamak: % 50 (v/v) morpholine DMF bir cam şişe içinde yeterli bir hacmi (200 mL) hazırlamak.</li>
	<li>1-2 mL deprotection çözüm için reçine ekleyin, yavaşça 10 dakikadır kışkırtmak ve bir vakum kullanma çözüm drenaj. DMF (1-2 mL) ve DCM (1-2 mL) o sırada kullanarak, reçine ve 3 x Toplam reaksiyon damar iyice yıkayın. Daha sonra tekrar deprotection ve yıkama işlemleri 1 x.</li>
</ol>4. Fmoc korumalı Amino asit kaplin
<ol><li>Alanin kalıntı kaplin 25 µmol ölçekli el ile sentezi, durumunda bir örnek olarak kullanarak tartmak Fmoc-Ala-OH (5 eşdeğeri, 41.4 mg), 2-(6-chloro-1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethylaminium hexafluorophosphate (HCTU; 4.9 eşdeğeri, 50,5 mg) içinde bir Polipropilen konteyner ve DMF (0.5 mL) çözülür.</li>
	<li>DIPEA ekleyin (10 eşdeğeri, 43,5 µl) 0,25 M oluşturmak için çözüm amino asit (Tablo 1) aktif. Bir yaklaşık 1 dk pre-harekete geçirmek, çözüm için reçine ekleyin ve sonra kabarcık bu N2 yaklaşık 1-2 h için.</li>
	<li>Bu adımdaki peptid zincirindeki her amino asit adımları dizisi dahil: ilk deprotection N-terminal Fmoc-grup ve çamaşır HCTU kullanarak harekete geçirmek yolu ile amino asit kaplin tarafından takip. Not: Bir bağlantı daha uzun (e.g., 2 h) tavsiye edilir eğer sterically engel amino asit tortu kaplin [Örneğin., Fmoc-Thr (tBu) - OH, Fmoc-Cys (Trt) - OH, Fmoc O'nun (Trt) - OH, Fmoc-Arg (Pbf) - OH]. Un doğal amino asitler taşıyan alkene/alkin yerine 5 3 eşdeğerleri kullanılır ve 3 h tepki için yaptı.</li>
	<li>Kaiser veya chloranil testler Arora vd tarafından açıklandığı gibi kullanarak peptid sentez ilerlemesini izlemek 36 nitel değerlendirmeler varlığı veya yokluğunu ücretsiz birincil ve ikincil aminlerin bu testler sağlar. Alternatif olarak, yaklaşık 2-3 mg peptid reçine--dan i ciddi ve LC-MS tarafından analiz.</li>
</ol>5. thiol-Batı Hydrothiolation ve Thiol yne Cyclization
<ol><li>Thioether bağlayıcı reçine olarak cyclization (Şekil 3) aracılığıyla oluşturmak.<ol>
<li>Yaklaşık 50 mL Trt deprotection çözeltisi (TFA/TIS/DCM 0.03/0.06/1.0) hazırlayın. Cys - ve mS5tedavi-reçine taşıyan [NH2-R-mS5-A-A-A-Cys (Trt)-R'-reçine, 50 mg] 1-2 mL Trt deprotection çözeltisi 10 mL sütun ile. Yavaşça 10 dk N2kullanarak için çözüm tahrik. Son olarak, DCM ile yıkayın (1-2 mL) 3 x Toplam. Not: alkylene taşıyan yapı taşı (bkz: Şekil 6' tasvir yapısı) peptid kaplin ve thio-Doğu cyclization38için kullanılan MS5 temsil eder.</li>
		<li>Yukarıda yaklaşık 6 x Toplam için çözüm renk sarı olana sistein, trityl koruma grubunu kaldırmak için açıklanan yordamı yineleyin.</li>
		<li>N2ile bubbled, R-mS5- A-A-A-Cys(-SH)-R yıka '-reçine [ücretsiz thio ile sistein (-SH)] DMF (1-2 mL) ve DCM (1-2 mL) o sırada. Metanol (1-2 mL) 2 min için kullanarak reçine küçültmek ve filtrasyon kullanarak solvent kaldırın. Daha sonra sırayla bir buhar N2 gaz için yaklaşık 5 dakika içinde sütun altında reçine kuru.</li>
		<li>Degassed DMF önceden, bir ağız şişesi içinde köpüren azot gazı çözücü uzanan uzun bir iğne aracılığıyla yaklaşık 1 h için hazırlayın.</li>
		<li>Reçine tartmak kağıt üzerinden bir 10 mL yuvarlak popolu şişesi içine aktarın. Buna ek olarak 2-hydroxy-1-[4-(2-hydroxyethoxy)-phenyl]-2-methyl-1-propanone photoinitiator tarafından takip degassed DMF 2 ml reçine askıya (MMP; 1 eşdeğeri, 5.6 mg), 4-methoxyacetophenone (harita; 1 eşdeğeri, 3.8 mg).</li>
		<li>Bir heyecan eklemek balonun çubuk (0,3 cm) ve şişeye bir uygun lastik fiş ile kap sonra balonun havada bir yağ pompası kullanarak azot gazı ile yerinden. Not: İnert atmosfer üzerinde katı bir aşama etkili thio-Batı photoreaction için kesinlikle gerekli değildir. Ancak, bu çözüm aşamasında Şekil 5' te thio-yne photoreaction için çok gereklidir. Aksi takdirde, kükürt UV ışınlama sırasında okside.</li>
		<li>Reaksiyon balonun photoreactor ayarla ve reçine için 1 h UV ışınlama altında oda sıcaklığında (Şekil 2) ilave edin. Dikkat: photoreactor UV lambası geçiş öncesinde, UV ışık zararlı radyasyon vermeliyiz diye photoreactor kapağının kapalı olduğundan emin olun. Not: ürünün aynı moleküler ağırlıklı doğrusal peptid habercisi olduğu gibi sık sık tepki karışımı sırasında photoreactions örnekleme yeni diziler için tavsiye edilir. Genel olarak, doğrusal ve döngüsel peptidler önemli ölçüde farklı hydrophilicity görüntüler. Bu kolayca HPLC kullanarak seçkin. Alternatif olarak, 5, 5' - dithiobis-(2-nitrobenzoic asit) (DTNB) reaktif ücretsiz thiol37varlığı eğitim için de kullanılabilir.</li>
		<li>Reçine balonun sütuna aktarmak ve vakum filtrasyon kullanarak solvent kaldırın. Yıkama ve reçine 5.1.3. adımda açıklandığı gibi kuru.</li>
		<li>Yaklaşık 10 mL dekolte kokteyl (TFA/ipuçları/EDT/H2O 94/1/2.5/2.5) duman başlıklı hazırlayın.</li>
		<li>Reçine 2 mL polipropilen konteyner içine aktarmak, dekolte kokteyl (TFA/ipuçları/EDT/H2O 94/1/2.5/2.5) 1 mL kapsayıcıya Ekle ve sıkı bir şekilde kullanarak bir vidalı kapak konteyner mühür. Sonra yavaşça kapsayıcıda izinleri duman başlıklı 60 rpm hızında bir orbital çalkalayıcı 1.5-2 h için tahrik. Dikkat: TFA son derece korozif. Koruyucu giysi giyin ve verimli duman mahallede çalışma. EDT son derece kötü kokulu bir maddedir ve verimli duman mahallede ele alınması gerekir.</li>
		<li>TFA kokteyl buharlaşma bir N2 gaz akışı duman Hood altında çıkarın. Daha sonra soğuk dietil eter (1 mL) kullanarak kalıntı çökelti 30 s ve izole etmek için bu yolu ile Santrifüjü 12.000 x g 2 min için de. Santrifüjü yavaşça eter bileşen dökmek. Çökelti ve Santrifüjü adımları 2 x için yineleyin. Kalıntı kuruluk için buharlaşır.</li>
		<li>Son olarak, kalıntı 1 mL H2O/Asetonitril (2:1) dağıtılması ve HPLC C18 analitik sütun kullanarak tarafından arındırmak (4.6 x 250 mm, akış oranı 1.0 mL/dk). Kullanım H2O (% 0,1 içeren TFA) ve % 20 den 2%/min doğrusal gradyan için UV 280 nm ve 220 nm dalga boyu (Tablo 2) kullanarak 25 dk. monitör HPLC spectra üzerinden % 70 Asetonitril çözücüler olarak saf Asetonitril.</li>
	</ol></li>
	<li>Thioether bağlayıcı cins thio-Doğu tepki ve cyclize peptid macrolactamization (Şekil 4) tarafından inşa.<ol>
<li>Doğrusal peptid H2N-A-A-A-mS5taşıyan alkylene kalıntı sentez (2-R'')-R'-standart Fmoc tabanlı katı fazlı peptid sentez (SPP'ler) kullanarak reçine (50 mg) açıklandığı gibi adım 2-4. Daha sonra yıkama ve reçine 5.1.3. adımda açıklandığı gibi kuru.</li>
		<li>5.1.4. adımda açıklandığı gibi degassed DMF 2 mL içeren bir 10 mL yuvarlak popolu şişesi reçine askıya alma.</li>
		<li>Photoinitiator ekleyin MMP ve harita (MMP: 1 eşdeğeri, 5.6 mg; HARİTA: 1 eşdeğeri, 3.8 mg), Fmoc-Cys-OH (3 eşdeğeri, 25.7 mg) ve heyecan balonun çubuk (0,3 cm). Uygun kauçuk fişi kullanarak şişesi kap ve yağ pompası balonun havada azot ile değiştirmek için kullanın.</li>
		<li>Reaksiyon balonun photoreactor ayarlayın. 1-2 h UV ışınlama, oda sıcaklığında (Şekil 2) altında için karıştırın.</li>
		<li>LC-MS Analizi altında tepki izlemek: 2-3 mg bölünme kokteyl kullanarak reçine ayırmak. Kalıntı soğuk dietil eter (300 µL) ile çökelti, kalıntı Santrifüjü tarafından ayırma ve kuruluk için kalıntı 5.1.11. adımda açıklandığı gibi buharlaşır. Bundan sonra H2O/Asetonitril (2:1) 100 µL kalıntı geçiyoruz. 0,22-µm gözenekli film kullanarak peptid çözüm filtrate ve electrospray iyonlaşma (ESI) iyonize ve olumlu modunda işletilen bileşik ile LC-MS kullanarak çözümleyebilirsiniz.</li>
		<li>5.2.2 - gerekli, tekrar adım atarsa 5.2.4'ten tepki emin olmak için tamamlanması için yapılır.</li>
		<li>Bitimini takiben fotoğraf-reaksiyon reçine balonun sütuna aktarmak ve vakum filtrasyon kullanarak solvent kaldırın. Yıkama ve reçine 5.1.3. adımda açıklandığı gibi kuru.</li>
		<li>Benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate DMF çözüm ekleyin (PyBob; 2.4 eşdeğeri, 31.2 mg), 1-hydroxybenzotriazole (HoBt; 2.4 eşdeğeri, 8.1 mg) ve NMM (4 eşdeğeri, 11 µL) reçine sütun için macrolactamization için. Bu çözüm için 2 h N2 ile kabarcık.<ol>
<li>Buna ek olarak, LC-MS 5.2.3. adımda açıklandığı gibi kullanarak bu bağlantı reaksiyon izleyin. Gerekirse, tepki emin olmak için bu adımı için tamamlanma yürütülen yineleyin.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Standart Fmoc tabanlı SPP'ler 3 ve 4 numaralı adımlarda açıklandığı gibi kullanarak peptid uzamış.</li>
		<li>Derleme amino asit kalıntıları üzerine peptid reçine 5.1.10 ve 5.1.11 adımlarda açıklandığı gibi ayırmak ve 5.1.12 adımda anlatıldığı gibi arındırmak.</li>
	</ol></li>
	<li>Vinil sülfat bağlayıcı çözüm aşamasında (Şekil 5) oluşturun.<ol>
<li>Standart Fmoc tabanlı SPP'ler 2-4 adımda açıklandığı gibi kullanarak doğrusal peptid taşıyan alkin kalıntı sentez. Bir önceki çalışma20içinde açıklandığı gibi köklü bir protokolüne göre amino asit taşıyan alkin sentez.</li>
		<li>Peptid reçine ayırmak ve soğuk dietil eter adımlarda 5.1.9 - 5.1.11 açıklandığı gibi kullanarak çökelti. Bölünme ve yağış reçine 2 min için de 12.000 x g Santrifüjü kullanarak peptid toplamak.</li>
		<li>Bir vakum elde edilen kalıntı kuru. 0,5 mM son bir konsantrasyon ulaşmak için kalıntı yuvarlak popolu bir 100 mL şişe içinde degassed DMF (50 mL) içinde erimesi (reçine, 0.025 mmol yüklenmesini dayalı (1000 mL/L / 0.5 mmol/L) 50 mL =).<ol>
<li>Photoinitiator DMPA (0.5 eşdeğeri, 3.2 mg) ekleyin ve 10 dakika çözüm içine uzanan uzun bir iğne aracılığıyla N2 kullanarak tepki çözüm degas. Ardından, UV ışığı 0.5 - 1 h ajitasyon olmadan için oda sıcaklığında altında örnek ışınlatayım.</li>
		</ol>
</li>
		<li>Yüksek vakum altında DMF kaldırmak ve onun organik yan dağıtılması amacıyla dietil eter ekleyerek ham kalıntı çökelti. Sonra 2 min için de 12.000 x g Santrifüjü kullanarak kalıntı izole et. Santrifüjü yavaşça eter bileşen dökmek. Kalıntı kuruluk için buharlaşır. Son olarak, kalıntı H2O/Asetonitril (2:1) 1 ml dağıtılması ve 5.1.7 adımda anlatıldığı gibi HPLC kullanarak arındırmak.</li>
	</ol></li>
</ol>

Yazarlar ifşa gerek yok.

Şekil 3' te açıklanan-reçine intramolecular thio-Doğu cyclization içinde sistein kalıntı trityl grup kaldırılması sonraki photoreaction için önemli bir adım olduğu anlaşıldı. Buna ek olarak, peptid molekül ağırlığı öncesinde ve sonrasında tepki olarak aynı olması için bulundu Şekil 6Btasvir. Bu nedenle, HPLC kimlik veya DTNB tahlil tepki izlemek için gereklidir. Şekil 4' te açıklanan cins thio-Doğu...

Protein-protein etkileşimleri (PPIs) modüle ligandlar geliştirmesi modern ilaç keşfi için çekici bir yaklaşım sağlar. Böylece, büyük bir çaba bu verimli PPIs1,2,3modüle Eğitim Roman kimyasal yöntemleri yatırdı. PPIs genellikle sığ, büyük ve/veya üretilmiyor etkileşen yüzeylerin oluşur ve küçük moleküller genelde PPIs4,5modülasyon için uygun olmayan ligandlar olarak kabul edilir. Bir uygun maruz etkileşen yüzey alanı ile bu sorun6,7gidermek için ideal aday protein arabirimleri yapısal özelliklerini taklit kısa peptidler temsil eder. Ancak, kısa peptidler genellikle sulu bir çözüm yapılandırılmamış. Gerçeğini peptid omurga ve iyi tanımlanmış biçimler oluşan intramolecular hidrojen bağı ağ ile rekabet su molekülleri su8' entropically olumsuz nedeni bu. Buna ek olarak, peptidler doğal olarak istikrar düşük ve hücre geçirgenlik özelliklerini büyük ölçüde onların biyolojik uygulamalar9,10sınırla. Protein veri Bankası (PDB) Analize göre > PPIs % 50'si kısa α-helix etkileşimleri11içerir. Böylece, farklı kimyasal yöntemler helix istikrar açısından geliştirdik. Bunlar arasında disülfit/thioether bağ oluşumu12,13,14, yüzük-kapanış sentezde15, laktam halkası oluşumu16, "Kimya17, eklenmesi tıklayın" perfluoroarenes18,19ve vinil-sülfür oluşumu20.
Stabilize helisel peptidler yaygın p53, dahil olmak üzere çeşitli hücre içi hedefleri için kullanılan östrojen reseptörleri, Ras, BCL-2 ailesi proteinler ve diğerleri21,22,23,24. ALRN-6924, bir all-hidrokarbon peptid çift inhibitörü olan MDM2 ve MDMX zımbalanmış, klinik araştırma25için kullanılıyor. Son birkaç yıl içinde bizim grup roman peptid sabitleme yöntemleri thiol-Doğu ve thiol yne reaksiyonlar26,27,28kullanarak geliştirme üzerinde odaklanmıştır. Genel olarak, doğal olarak bol miktarda sistein kullanıldığında bu fotoğraf tarafından başlatılan tepkiler hafif koşullar altında verimli göstermiştir. Buna ek olarak, biz bu tepkiler bir mükemmel fonksiyonel grup hoşgörü, biyo-dik ve peptid ve protein değişiklikler29için geçerli olduğu kanıtlanmış göstermiştir. Elde edilen thioether/vinil kaşif balonlu keşif sülfür peptidler büyük ölçüde kısıtlaması peptidler kimyasal alanı artırmak bir değişken urgan üzerinde değişiklik merkezi sağlamak ve çok sayıda biyolojik uygulamalar30 kullandığı için geçerli olduğu kanıtlanmıştır ,31,32. Bugüne kadar yalnızca sınırlı raporlar thiol-KD/thiol-yne peptid cyclization ile ilgili tarif edilmistir. Anseth ve ark. tarafından 2009 yılında yayınlanan bir çalışmada, bir reçine üzerinde intramolecular thiol-Doğu Sistein ile harekete geçirmek alkenes arasında peptid cyclization için gösterdiği33tepkiydi. 2015 yılında, Chou ve ark. bir iki radikal başlatılan thiol-Doğu tepki peptid34 ve bir sonraki, sıralı thiol-yne/Doğu kaplin tepki35Zımbalama için nitelendirdi. Son zamanlarda, bir dizi thioether/vinil kaşif balonlu keşif sülfür peptidler20,26,27tarihinde alan iş tanımladı. Bu iletişim kuralı yukarıda belirtilen thioether/vinil kaşif balonlu keşif sülfür peptidler daha geniş araştırma toplum için yararlı olacak umuduyla detaylı bir sentezi açıklar.

<table><tbody><tr><td>Rink Amide MBHA resin(0.53 mmol/g)</td><td>HECHENG</td><td>GRM50407</td><td></td></tr><tr><td>Standard Fmoc-protected amino acids</td><td>GL Biochem (Shanghai) Ltd.</td><td></td><td></td></tr><tr><td>N-Methyl-2-pyrrolidinone</td><td>Shenzhen endi Biotechnology Co.Ltd.</td><td>3230</td><td>skin harmful</td></tr><tr><td>N,N-Dimethyl formamide</td><td>Energy</td><td>B020051</td><td>skin harmful</td></tr><tr><td>Dichloromethane</td><td>Energy</td><td>W330229</td><td>skin harmful</td></tr><tr><td>N,N-Diisoproylethylamine</td><td>Aldrich</td><td>9578</td><td>irritant</td></tr><tr><td>Trifluoroacetic acid</td><td>J&amp;amp;K</td><td>101398</td><td>corrosive</td></tr><tr><td>Triisopropylsilane</td><td>J&amp;amp;K</td><td>973821</td><td></td></tr><tr><td>1,2-Ethanedithiol</td><td>J&amp;amp;K</td><td>248897</td><td>Stench</td></tr><tr><td>2-(6-Chloro-1H-benzotriazole-1-yl)-1,1,3,3-tetramethylaminium hexafluorophosphate&amp;nbsp;</td><td>GL Biochem (Shanghai) Ltd.</td><td>851012</td><td></td></tr><tr><td>Morpholine</td><td>Aldrich</td><td>M109062</td><td>irritant</td></tr><tr><td>Diethyl ether</td><td>Aldrich</td><td>673811</td><td>flammable</td></tr><tr><td>Acetonitrile</td><td>Aldrich</td><td>9758</td><td>toxicity</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Aldrich</td><td>9758</td><td>toxicity</td></tr><tr><td>2-hydroxy-1-[4-(2-hydroxyethoxy)-phenyl]-2-methyl-1-propanone</td><td>Energy</td><td>A050035</td><td></td></tr><tr><td>4-methoxyacetophenone</td><td>Energy</td><td>A050098</td><td></td></tr><tr><td>2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone</td><td>Energy</td><td>D070132</td><td></td></tr><tr><td>5,5&#039;-Dithiobis-(2-nitrobenzoic acid)</td><td>J&amp;amp;K</td><td>281281</td><td></td></tr><tr><td>Benzotriazole-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate</td><td>Energy</td><td>E020172</td><td></td></tr><tr><td>1-Hydroxybenzotriazole</td><td>Energy</td><td>D050256</td><td></td></tr><tr><td>4-Methylmorpholine</td><td>Energy</td><td>W320038</td><td></td></tr><tr><td>High Performance Liquid Chromatography</td><td>SHIMADZU</td><td>LC-30AD</td><td></td></tr><tr><td>Electrospray Ionization Mass</td><td>SHIMADZU</td><td>LCMS-8030</td><td></td></tr><tr><td>Lyophilizer</td><td>Labconco</td><td>FreeZone</td><td></td></tr><tr><td>SpeedVac concentration system</td><td>Thermo</td><td>Savant</td><td></td></tr><tr><td>vacuum manifold</td><td>promega</td><td>A7231</td><td></td></tr><tr><td>three-way stopcocks</td><td>Bio-Rad</td><td>7328107</td><td></td></tr><tr><td>poly-prep chromatography columns&amp;nbsp;</td><td>Bio-Rad</td><td>7311550</td><td></td></tr></tbody></table>

constructing thioether/vinyl sulfide-tethered helical peptides via photo-induced thiol-ene/yne hydrothiolation

Burada, intramolecular/cins thiol KD-Tarih-reçine hydrothiolation kullanarak thioether hayvan zinciri peptidler hazırlanması için detaylı bir protokol açıklayın. Ayrıca, bu iletişim kuralını intramolecular thiol yne-çözüm hydrothiolation alkene/alkin yan zincirleri sahip amino acids ve sistein kalıntıları arasında kullanarak ben, ben + 4 pozisyonlar vinil sülfür gergin peptidler hazırlanması açıklar. Doğrusal peptidler bir standart Fmoc tabanlı katı fazlı peptid sentez (SPP'ler) kullanarak sentez. Thiol-Güney hydrothiolation intramolecular thio-Doğu reaksiyon veya peptid uzunluğu bağlı olarak bir cins thio-Doğu reaksiyon kullanılarak yapılır. Bu araştırmada, intramolecular thio-Doğu reaksiyon reçine üzerinde deprotection sistein kalıntıları doğrusal peptid tam sentezi takip trityl grupları kullanarak daha kısa peptidler söz konusu olduğunda gerçekleşir. Reçine sonra photoinitiator 4-methoxyacetophenone (Harita) ve 2-hydroxy-1-[4-(2-hydroxyethoxy)-phenyl]-2-methyl-1-propanone (MMP) kullanarak UV ışınlama için ayarlanır. Cins thiol-Doğu tepki bir N, N- dimethylformamide (DMF) çözücü Fmoc-Cys-OH çözülerek yapılır. Bu o zaman alkene taşıyan kalıntı bağlı kullanarak peptid ile tepki. Bundan sonra macrolactamization harekete geçirmek reaktif reçine tarih olarak benzotriazol-1-yl-oxytripyrrolidinophosphonium hexafluorophosphate (PyBop), 1-hydroxybenzotriazole (HoBt) ve 4-Methylmorpholine (NMM) kullanarak yapılır. Peptid sentez macrolactamization devam standart SPP'ler kullanarak. Thio-yne hydrothiolation söz konusu olduğunda doğrusal peptid reçine--dan i ciddi, kurutulmuş ve daha sonra degassed DMF içinde çözünmüş. Bu o zaman UV ışığı photoinitiator 2,2-dimethoxy-2-phenylacetophenone ile (DMPA) kullanarak ışınlanmış. Reaksiyon, DMF buharlaşmış ve ham kalıntı çöktürülmüş ve yüksek performanslı sıvı kromatografi (HPLC) kullanarak saf. Bu yöntemler thioether hayvan zinciri döngüsel peptidler üstün fonksiyonel grup hoşgörü ve iyi verim sahiptir thio-KD/yne tıklayın Kimya kullanımı nedeniyle nesil basitleştirmek için işlev olabilir. Thioether tahvil giriş peptidler içine sistein kalıntıları nükleofilik doğa yararlanır ve redoks-hareketsiz disülfür bağları göre.

HPLC ve MS spectra peptid Ac-YmS5AAAC-NH2 ve cyclized ürün Ac - Y-(siklo-1,5)-[mS5AAAC] - Tarih-reçine intramolecular thiol-Doğu photoreaction kullanarak oluşturulan NH2 figürü tasvir 6B. döngüsel peptid doğrusal onun öncü göre özdeş bir moleküler ağırlığa sahip bulundu. Ancak, onun HPLC tutma zamanı yaklaşık 2 dakika daha önce onun öncüleri aynı ayrımı koşullar altında daha olmak gö...

Watch this Scientific Journal Video about Constructing Thioether/Vinyl Sulfide-tethered Helical Peptides Via Photo-induced Thiol-ene/yne Hydrothiolation at JoVE.com

Constructing Thioether/Vinyl Sulfide-tethered Helical Peptides Via Photo-induced Thiol-ene/yne Hydrothiolation

Thioether/vinil sülfür-gergin helisel peptidler fotoğraf yolu ile indüklenen Thiol-KD/yne Hydrothiolation oluşturmak

Helisel peptidler sülfür hayvan zinciri fotoğraf kaynaklı thiol-KD/thiol-yne hydrothiolation kullanarak thioether/vinil inşası için bir iletişim kuralı mevcut.

Here, we describe a detailed protocol for the preparation of thioether-tethered peptides using on-resin intramolecular/intermolecular thiol-ene ...

constructing-thioethervinyl-sulfide-tethered-helical-peptides-via

Research

JoVE Journal

Chemistry

10.6K Görüntüleme.  Peking University Shenzhen Graduate School. Helisel peptidler sülfür hayvan zinciri fotoğraf kaynaklı thiol-KD/thiol-yne hydrothiolation kullanarak thioether/vinil inşası için bir iletişim kuralı mevcut.

Video: Constructing Thioether/Vinyl Sulfide-tethered Helical Peptides Via Photo-induced Thiol-ene/yne Hydrothiolation

A Facile and Efficient Approach for the Production of Reversible Disulfide Cross-linked Micelles

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. Improving drug delivery to maximize therapeutic outcomes and to reduce drug-associated side effects are some of the cornerstones of present-day nanomedicine. Nanoparticles in particular have found a wide application in cancer treatment. Nanoparticles that offer a high degree of flexibility in design, application, and production based on the tumor microenvironment are projected to be more effective with rapid translation into clinical practice. The polymeric micellar nano-carrier is a popular choice for drug delivery applications.
In this article, we describe a simple and effective protocol for synthesizing drug-loaded, disulfide cross-linked micelles based on the self-assembly of a well-defined amphiphilic linear-dendritic copolymer (telodendrimer, TD). TD is composed of polyethylene glycol (PEG) as the hydrophilic segment and a thiolated cholic acid cluster as the core-forming hydrophobic moiety attached stepwise to an amine-terminated PEG using solution-based peptide chemistry. Chemotherapy drugs, such as paclitaxel (PTX), can be loaded using a standard solvent evaporation method. The O2-mediated oxidation was previously utilized to form intra-micellar disulfide cross-links from free thiol groups on the TDs. However, the reaction was slow and not feasible for large-scale production. Recently, an H2O2-mediated oxidation method was explored as a more feasible and efficient approach, and it was 96 times faster than the previously reported method. Using this approach, 50 g of PTX-loaded, disulfide cross-linked nanoparticles have been successfully produced with narrow particle size distribution and high drug loading efficiency. The stability of the resulting micelle solution is analyzed using disrupting conditions such as co-incubation with a detergent, sodium dodecyl sulfate, with or without a reducing agent. The drug-loaded, disulfide cross-linked micelles demonstrated less hemolytic activity when compared to their non-cross-linked counterparts.

To deliver cancer drugs to tumor sites with high specificity and reduced side effects, new methods based on nanoparticles are required. Here, we describe disulfide cross-linked micelles that can be easily prepared by hydrogen peroxide-mediated oxidation and are able to dissociate efficiently under a reducing tumor environment to release payloads.

Döner disülfür Çapraz bağlı misellerin Üretimi için basit ve etkin Yaklaşım

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. ...

Biyokimya

Synthesis of Programmable Main-chain Liquid-crystalline Elastomers Using a Two-stage Thiol-acrylate Reaction

This study presents a novel two-stage thiol-acrylate Michael addition-photopolymerization (TAMAP) reaction to prepare main-chain liquid-crystalline elastomers (LCEs) with facile control over network structure and programming of an aligned monodomain. Tailored LCE networks were synthesized using routine mixing of commercially available starting materials and pouring monomer solutions into molds to cure. An initial polydomain LCE network is formed via a self-limiting thiol-acrylate Michael-addition reaction. Strain-to-failure and glass transition behavior were investigated as a function of crosslinking monomer, pentaerythritol tetrakis(3-mercaptopropionate) (PETMP). An example non-stoichiometric system of 15 mol% PETMP thiol groups and an excess of 15 mol% acrylate groups was used to demonstrate the robust nature of the material. The LCE formed an aligned and transparent monodomain when stretched, with a maximum failure strain over 600%. Stretched LCE samples were able to demonstrate both stress-driven thermal actuation when held under a constant bias stress or the shape-memory effect when stretched and unloaded. A permanently programmed monodomain was achieved via a second-stage photopolymerization reaction of the excess acrylate groups when the sample was in the stretched state. LCE samples were photo-cured and programmed at 100%, 200%, 300%, and 400% strain, with all samples demonstrating over 90% shape fixity when unloaded. The magnitude of total stress-free actuation increased from 35% to 115% with increased programming strain. Overall, the two-stage TAMAP methodology is presented as a powerful tool to prepare main-chain LCE systems and explore structure-property-performance relationships in these fascinating stimuli-sensitive materials.

A novel methodology is presented to synthesize and program main-chain liquid-crystalline elastomers using commercially available starting monomers. A wide range of thermomechanical properties was tailored by adjusting the amount of crosslinker, while the actuation performance was dependent on the amount of applied strain during programming.

Bir iki-aşamalı Tiol akrilat reaksiyonu kullanılarak programlanabilir ana zincirli Sıvı kristal Elastomerler sentezi

This study presents a novel two-stage thiol-acrylate Michael addition-photopolymerization (TAMAP) reaction to prepare main-chain liquid-crystalline ...

Kimya

Generation and Recovery of &beta;-cell Spheroids From Step-growth PEG-peptide Hydrogels

Hydrogels are hydrophilic crosslinked polymers that provide a three-dimensional microenvironment with tissue-like elasticity and high permeability for culturing therapeutically relevant cells or tissues. Hydrogels prepared from poly(ethylene glycol) (PEG) derivatives are increasingly used for a variety of tissue engineering applications, in part due to their tunable and cytocompatible properties. In this protocol, we utilized thiol-ene step-growth photopolymerizations to fabricate PEG-peptide hydrogels for encapsulating pancreatic MIN6 b-cells. The gels were formed by 4-arm PEG-norbornene (PEG4NB) macromer and a chymotrypsin-sensitive peptide crosslinker (CGGYC). The hydrophilic and non-fouling nature of PEG offers a cytocompatible microenvironment for cell survival and proliferation in 3D, while the use of chymotrypsin-sensitive peptide sequence (CGGY&darr;C, arrow indicates enzyme cleavage site, while terminal cysteine residues were added for thiol-ene crosslinking) permits rapid recovery of cell constructs forming within the hydrogel. The following protocol elaborates techniques for: (1) Encapsulation of MIN6 &beta;-cells in thiol-ene hydrogels; (2) Qualitative and quantitative cell viability assays to determine cell survival and proliferation; (3) Recovery of cell spheroids using chymotrypsin-mediated gel erosion; and (4) Structural and functional analysis of the recovered spheroids.

Generation and Recovery of &#946;-cell Spheroids From Step-growth PEG-peptide Hydrogels

The following protocol provides techniques for encapsulating pancreatic &#x03B2;-cells in step-growth PEG-peptide hydrogels formed by thiol-ene photo-click reactions. This material platform not only offers a cytocompatible microenvironment for cell encapsulation, but also permits user-controlled rapid recovery of cell structures formed within the hydrogels.

Adım büyüme PEG-peptid Hidrojeller kaynaktan β-hücre sferoidlerin Üretimi ve Kurtarma

Hydrogels are hydrophilic crosslinked polymers that provide a three-dimensional  microenvironment with tissue-like elasticity and high permeability for  ...

Biyomühendislik

Self-assembling Morphologies Obtained from Helical Polycarbodiimide Copolymers and Their Triazole Derivatives

A facile method for the preparation of polycarbodiimide-based secondary structures (e.g., nano-rings, &#34;craters,&#34; fibers, looped fibers, fibrous networks, ribbons, worm-like aggregates, toroidal structures, and spherical particles) is described. These aggregates are morphologically influenced by extensive hydrophobic side chain-side chain interactions of the singular polycarbodiimide strands, as inferred by atomic force microscopy (AFM) and scanning electron microscopy (SEM) techniques. Polycarbodiimide-g-polystyrene copolymers (PS-PCDs) were prepared by a combination of synthetic methods, including coordination-insertion polymerization, copper(I)-catalyzed azide alkyne cycloaddition (CuAAC) &#34;click&#34; chemistry, and atom transfer radical polymerization (ATRP). PS-PCDs were found to form specific toroidal architectures at low concentrations in CHCl3. To determine the influence of a more polar solvent medium (i.e., THF and THF/EtOH) on polymer aggregation behavior, a number of representative PS-PCD composites have been tested to show discrete concentration-dependent spherical particles. These fundamental studies are of practical interest to the development of experimental procedures for desirable architectures by directed self-assembly in thin film. These architectures may be exploited as drug carriers, whereas other morphological findings represent certain interest in the area of novel functional materials.

Here, we present a protocol to prepare and visualize secondary structures (e.g., fibers, toroidal architectures, and nano-spheres) derived from helical polycarbodiimides. The morphology characterized by both atomic force microscopy (AFM) and scanning electron microscopy (SEM) was shown to depend on molecular structure, concentration, and the solvent of choice.

Sarmal polikarbodiimidden Kopolimer ve Bunların Triazole Türevleri elde edilen kendinden montaj morfolojileri

A facile method for the preparation of polycarbodiimide-based secondary structures (e.g., nano-rings, &#34;craters,&#34; fibers, looped fibers, fibrous ...

Synthesis of a Thiol Building Block for the Crystallization of a Semiconducting Gyroidal Metal-sulfur Framework

We present a method for preparing thioester molecules as the masked form of the thiol linkers and their utilization for accessing a semiconducting and porous metal-dithiolene network in the highly ordered single crystalline state. Unlike the highly reactive free-standing thiols, which tend to decompose and complicate the crystallization of metal-thiolate open frameworks, the thioester reacts in situ to provide the thiol species, serving to mitigate the reaction between the mercaptan units and the metal centers, and to improve crystallization consequently. Specifically, the thioester was synthesized in a one-pot procedure: an aromatic bromide (hexabromotriphenylene) reacted with excess sodium thiomethoxide under vigorous conditions to first form the thioether intermediate product. The thioether was then demethylated by the excess thiomethoxide to provide the thiolate anion that was acylated to form the thioester product. The thioester was conveniently purified by standard column chromatography, and then used directly in the framework synthesis, wherein NaOH and ethylenediamine serve to revert in situ the thioester to the thiol linker for assembling the single-crystalline Pb(II)-dithiolene network. Compared with other methods for thiol synthesis (e.g., by cleaving alkyl thioether using sodium metal and liquid ammonia), the thioester synthesis here uses simple conditions and economical reagents. Moreover, the thioester product is stable and can be conveniently handled and stored. More importantly, in contrast to the generic difficulty in accessing crystalline metal-thiolate open frameworks, we demonstrate that using the thioester for in situ formation of the thiol linker greatly improves the crystallinity of the solid-state product. We intend to encourage broader research efforts on the technologically important metal-sulfur frameworks by disclosing the synthetic protocol for the thioester as well as the crystalline framework solid.

Here, we present a one-pot, transition-metal-free synthesis of thiols and thioesters from aromatic halides and sodium thiomethoxide, followed by the preparation of single crystals of a metal-dithiolene network using thiol species generated in situ from the more stable and tractable thioester.

Bir yarıiletken Gyroidal Metal-kükürt çerçeve kristalleşme için Thiol yapı taşı sentezi

We present a method for preparing thioester molecules as the masked form of the thiol linkers and their utilization for accessing a semiconducting and ...

Synthesis and Characterization of 1,2-Dithiolane Modified Self-Assembling Peptides

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting self-assembled supramolecular structures. The synthetic route takes advantage of solid-phase peptide synthesis with the on-resin coupling of the dithiolane precursor molecule, 3-(acetylthio)-2-(acetylthiomethyl)propanoic acid, and the microwave-assisted thioacetate deprotection of the peptide N-terminus before final cleavage from the resin to yield the 1,2-dithiolane modified peptide. After the high-performance liquid chromatography (HPLC) purification of the 1,2-dithiolane peptide, derived from the nucleating core of the A&#946; peptide associated with Alzheimer&#39;s disease, the peptide is shown to self-assemble into cross-&#946; amyloid fibers. Protocols to characterize the amyloid fibers by Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR), circular dichroism spectroscopy (CD) and transmission electron microscopy (TEM) are presented. The methods of N-terminal modification with a 1,2-dithiolane moiety to well-characterized self-assembling peptides can now be explored as model systems to develop post-assembly modification strategies and explore dynamic covalent chemistry on supramolecular peptide nanofiber surfaces.

A protocol for the synthesis of a 1,2-dithiolane modified peptide and the characterization of the supramolecular structures resulting from the peptide self-assembly.

1,2-Dithiolane malzemelerin ve kendi kendine montaj peptidler değiştirilme tarihi

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting ...

Synthesis and Bioconjugation of Thiol-Reactive Reagents for the Creation of Site-Selectively Modified Immunoconjugates

Maleimide-bearing bifunctional probes have been employed for decades for the site-selective modification of thiols in biomolecules, especially antibodies. Yet maleimide-based conjugates display limited stability in vivo because the succinimidyl thioether linkage can undergo a retro-Michael reaction. This, of course, can lead to the release of the radioactive payload or its exchange with thiol-bearing biomolecules in circulation. Both of these processes can produce elevated activity concentrations in healthy organs as well as decreased activity concentrations in target tissues, resulting in reduced imaging contrast and lower therapeutic ratios. In 2018, we reported the creation of a modular, stable, and easily accessible phenyloxadiazolyl methyl sulfone reagent &#8212; dubbed &#8216;PODS&#8217; &#8212; as a platform for thiol-based bioconjugations. We have clearly demonstrated that PODS-based site-selective bioconjugations reproducibly and robustly create homogenous, well-defined, highly immunoreactive, and highly stable radioimmunoconjugates. Furthermore, preclinical experiments in murine models of colorectal cancer have shown that these site-selectively labeled radioimmunoconjugates exhibit far superior in vivo performance compared to radiolabeled antibodies synthesized via maleimide-based conjugations. In this protocol, we will describe the four-step synthesis of PODS, the creation of a bifunctional PODS-bearing variant of the ubiquitous chelator DOTA (PODS-DOTA), and the conjugation of PODS-DOTA to the HER2-targeting antibody trastuzumab.

In this protocol, we will describe the synthesis of PODS, a phenyoxadiazolyl methyl sulfone-based reagent for the site-selective attachment of cargos to the thiols of biomolecules, particularly antibodies. In addition, we will describe the synthesis and characterization of a PODS-bearing bifunctional chelator and its conjugation to a model antibody.

Sentez ve Site seçici olarak oluşturulması için Thiol reaktif reaktif Bioconjugation Immunoconjugates modifiye

Maleimide-bearing bifunctional probes have been employed for decades for the site-selective modification of thiols in biomolecules, especially antibodies. ...

Synthesis of Information-bearing Peptoids and their Sequence-directed Dynamic Covalent Self-assembly

This protocol presents the use of Lewis acidic multi-role reagents to circumvent kinetic trapping observed during the self-assembly of information-encoded oligomeric strands mediated by paired dynamic covalent interactions in a manner mimicking the thermal cycling commonly employed for the self-assembly of complementary nucleic acid sequences. Primary amine monomers bearing aldehyde and amine pendant moieties are functionalized with orthogonal protecting groups for use as dynamic covalent reactant pairs. Using a modified automated peptide synthesizer, the primary amine monomers are encoded into oligo(peptoid) strands through solid-phase submonomer synthesis. Upon purification by high-performance liquid chromatography (HPLC) and characterization by electrospray ionization mass spectrometry (ESI-MS), sequence-specific oligomers are subjected to high-loading of a Lewis acidic rare-earth metal triflate which both deprotects the aldehyde moieties and affects the reactant pair equilibrium such that strands completely dissociate. Subsequently, a fraction of the Lewis acid is extracted, enabling annealing of complementary sequence-specific strands to form information-encoded molecular ladders characterized by matrix assisted laser desorption/ionization mass spectrometry (MALDI-MS). The simple procedure outlined in this report circumvents kinetic traps commonly experienced in the field of dynamic covalent assembly and serves as a platform for the future design of robust, complex architectures.

A protocol is presented for the synthesis of information-encoded peptoid oligomers and for the sequence-directed self-assembly of these peptoids into molecular ladders using amines and aldehydes as dynamic covalent reactant pairs and Lewis acidic rare-earth metal triflates as multi-role reagents.

Bilgi taşıyan Peptoidlerin sentezi ve Dizi yönelimli Dinamik Kovalent Öz-montaj

This protocol presents the use of Lewis acidic multi-role reagents to circumvent kinetic trapping observed during the self-assembly of information-encoded ...

Constructing Cyclic Peptides Using an On-Tether Sulfonium Center

In recent years, cyclic peptides have attracted increasing attention in the field of drug discovery due to their excellent biological activities, and, as a consequence, they are now used clinically. It is, therefore, critical to seek effective strategies for synthesizing cyclic peptides to promote their application in the field of drug discovery. This paper reports a detailed protocol for the efficient synthesis of cyclic peptides using on-resin or intramolecular (intermolecular) bisalkylation. Using this protocol, linear peptides were synthesized by taking advantage of solid-phase peptide synthesis with cysteine (Cys) and methionine (Met) coupled simultaneously on the resin. Further, cyclic peptides were synthesized via bisalkylation between Met and Cys using a tunable tether and an on-tether sulfonium center. The whole synthetic route can be divided into three major processes: the deprotection of Cys on the resin, the coupling of the linker, and the cyclization between Cys and Met in a trifluoroacetic acid (TFA) cleavage solution. Furthermore, inspired by the reactivity of the sulfonium center, a propargyl group was attached to the Met to trigger thiol-yne addition and form a cyclic peptide. After that, the crude peptides were dried and dissolved in acetonitrile, separated, and then purified by high-performance liquid chromatography (HPLC). The molecular weight of the cyclic peptide was confirmed by liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS), and the stability of the cyclic peptide combination with the reductant was further confirmed using HPLC. In addition, the chemical shift in the cyclic peptide was analyzed by 1H nuclear magnetic resonance (1H NMR) spectra. Overall, this protocol aimed to establish an effective strategy for synthesizing cyclic peptides.

This protocol presents the synthesis of cyclic peptides via bisalkylation between cysteine and methionine and the facile thiol-yne reaction triggered by the propargyl sulfonium center.

On-Tether Sülfonyum Merkezi Kullanarak Döngüsel Peptitlerin Oluşturulması

In recent years, cyclic peptides have attracted increasing attention in the field of drug discovery due to their excellent biological activities, and, as ...

In Vesiculo Synthesis of Peptide Membrane Precursors for Autonomous Vesicle Growth

Compartmentalization of biochemical reactions is a central aspect of synthetic cells. For this purpose, peptide-based reaction compartments serve as an attractive alternative to liposomes or fatty acid-based vesicles. Externally or within the vesicles, peptides can be easily expressed and simplify the synthesis of membrane precursors. Provided here is a protocol for the creation of vesicles with diameters of ~200 nm based on the amphiphilic elastin-like polypeptides (ELP) utilizing dehydration-rehydration from glass beads. Also presented are protocols for bacterial ELP expression and purification via inverse temperature cycling, as well as their covalent functionalization with fluorescent dyes. Furthermore, this report describes a protocol to enable the transcription of RNA aptamer dBroccoli inside ELP vesicles as a less complex example for a biochemical reaction. Finally, a protocol is provided, which allows in vesiculo expression of fluorescent proteins and the membrane peptide, whereas synthesis of the latter results in vesicle growth.

Presented here are protocols for the creation of peptide-based small unilamellar vesicles capable of growth. To facilitate in vesiculo production of the membrane peptide, these vesicles are equipped with a transcription-translation system and the peptide-encoding plasmid.

Vesiculo 'da otonom vezikül büyümesi için peptid membran öncülerinin sentezini

Compartmentalization of biochemical reactions is a central aspect of synthetic cells. For this purpose, peptide-based reaction compartments serve as an ...