Yazarlar Dr Kathryn Pietrosimone Editör katkıları kabul etmiş oluyorsunuz. PLA iskele Kuzey Carolina Eyalet Üniversitesi'nde Dr. Elizabeth Loboa'nın laboratuvar tarafından üretildi. Bu eser UNC Lineberger kapsamlı kanser Merkezi'nin Üniversitesi kanser araştırma fonu ve UNC translasyonel ve Klinik Bilimler Enstitüsü (KL2TR001109, UL1TR001111) tarafından desteklenmiştir.

Tüm yöntem tanımlamak burada kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (IACUC), University of North Carolina Chapel Hill tarafından onaylanmıştır.
Not: Bu yordamı ile açık bir kranyotomi fareler üzerinde gerçekleştirilen iletişim kuralı neyin ameliyatla kemik dokusu atılır Mostany ve Portera-Cailliau19 tarafından değiştirilmiş bir sürümü beyin kuruluş için erişilebilir bırakarak ve nihai rezeksiyon GBM tümör. Kranyotomi, tümör stereotaksik implantasyon Ozawa ve James20içinde açıklandığı gibi kurulur. 1 x 105 U87 mCh-Fl hücreleri aşağıdaki stereotaksik koordinatları (bregma mm), implant: (2.5, 0, -0,5).
1. hücre kültürü ve İskele yapısı-hazırlık
Not: Farelerde implantasyon öncesinde 48 h iskele hazırlanmalıdır. Aşağıdaki birimler bir iskele başına olarak temin edilmektedir. Miktarları ek iskele için gerektiği gibi çarpın.
<ol><li>PLA iskele rezeksiyon (yaklaşık 2 x 2 mm) boşluğuna ölçekli parçalar halinde kesin. İskele makas veya tekrarlanabilirlik için bir delik yumruk kullanarak elle kesebiliriz.</li>
	<li>15 dakika içinde PBS çeker tarafından takip % 70 etanol içinde çeker tarafından sterilize. İskele Dulbecco'nın değiştirilmiş kartal Orta (DMEM) % 10 fetal Sığır serum (FBS) ve % 1 penisilin-streptomisin içeren hücreleri tohum için hazırlarken yerleştirin.</li>
	<li>Kültürlü MSCs % 0.05 tripsin (bir T75 şişesi için 3-5 mL) kullanarak kaldırın. 5 dk. hücreleri kaldırdı sağlamak için 37 ° C'de kuluçkaya sonra 7-10 mL DMEM tripsin devre dışı bırakabilirsiniz için balonun ekleyin.</li>
	<li>Şişesi içeriği 15 mL santrifüj tüpü aktarın. Bir hemasitometre kullanarak hücreleri saymak. 5 x 105 MSCs için her iskele üzerinden Santrifüjü 100 x g 5 min için de cips.</li>
	<li>Süpernatant Aspire edin ve MSCs 5 x 105 hücre başına 5 µL DMEM içinde resuspend.</li>
	<li>İskele kuru onları okşamaya tarafından tohumlama için hazırlayın.<ol>
<li>Bir iskele DMEM daldırma forseps ile çıkarın ve geçici olarak 6-şey plaka kapağını yerleştirin. İskele aşırı DMEM bir damlacık bırakarak kapağı kapalı kaldırın.</li>
		<li>İskele geri tekrar bir konumda yeni, Kuru kapağı yerleştirin. 3 - 5 kez yineleyin ve sonra kısmen kurutulmuş iskele tohum için yeni bir 6-şey tabak yerleştirin. Her iskele için yineleyin. Not: Optimum hücre sonuçları tohum kısmen kurutulmuş bir iskele sağlar. İskele çok ıslak ise, hücre iskele slayt ve iyi plakasına aşağıdaki uygun. İskele çok kuru ise, damlacık zavallı ilk hücre dağıtım kaynaklanan tüm iskele üzerinde yayılır değil.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Bir pipet kullanarak, kök hücre bazı hücreler altına kapatılmış olarak süspansiyon homojenize şişe karışımı yavaşça.</li>
	<li>Yavaş yavaş 2.5 µL taze MSC süspansiyon üzerinde doğrudan iskele iskele üst üzerinde küçük damlacık oluşturma, karışık pipet.</li>
	<li>300 µL DMEM için her şey kenarlar ekleyin. Bu hücre damlacık hızlı buharlaşma önlemek. 30 dk, hücreleri için iskele takmak izin için 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
	<li>Forseps ile hafifçe iskele iyi tabağına ters çevirin. Tohum 2.5 taze karışık µL MSC süspansiyon (5 x 105 hücre iskele seribaşı Toplam Sonuç). 30 dk, hücreleri için iskele takmak izin için 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
	<li>İskele DMEM içinde 2 mL 6-şey plaka her şey için ekleyerek kapsar. Medya altında akışı için izin vermek için iskele yavaşça kaldır. İmplantasyon ameliyat öncesi 48 saat için bu eyalette 37 ° C'de kuluçkaya.</li>
	<li>Aşırı buharlaşma veya pH dengesizlik nedeniyle renksiz medya gözlem yapılırsa iskele 24 h ve Ekle/Değiştir medya sonra kontrol edin.</li>
</ol>2. floresans güdümlü rezeksiyon ve iskele implantasyon
Not: cerrahi başlatma öncesinde tüm araçları Sterilize. Profilaktik analjezi, kurumsal IACUC protokolünde özetlenen yönetmek.
<ol><li>Stereotaksik çerçeve stereomicroscope anatomi bir floresan sahnesinde yerini.</li>
	<li>Fareyi bir indüksiyon odasında inhale isoflurane altında anestezi. Anestezi geldiğinde, fareyi bir isoflurane burun konisi adaptör ile sürekli inhale anestezi kaynağıyla stereotaksik çerçevesinde güvenli. Bir ısıtma yastığı ve/veya sonda ile vücut ısısını korumak. Not: 4-%5 isoflurane indüksiyon için uygundur ve 2-%3 bakım için uygundur, ancak bu adapte olmalı ve her fare için izlenir.</li>
	<li>Oftalmik merhem kornea kurutma önlemek için gözler için geçerlidir. Kafa derisi kesi site bir dizi üç alkol ve üç betadin mendil ile sterilize.</li>
	<li>Ayak çimdik refleks testi her bacak üzerinde gerçekleştirmek ve uygun anesthetization emin olmak için olumsuz yanıt onaylayın. Yaklaşık 55-65 nefes/dk solunum sabit hızda olun.</li>
	<li>Forseps kullanarak, çimdik ve kafa derisi yavaşça kaldırın. Bir doğrusal kaudal rostral ensizyon cerrahi makas ile olun. PBS kesi sitesiyle sulamak ve dairesel bir fırçalama hareketle bir pamuk uç aplikatör ile deri altı yağ çıkarmak. Öyle ki daha önce kurulmuş kafatası tamamen görünür penceresidir cilt düzenlemek.</li>
	<li>Yavaşça sadece bir 18-G iğne kullanarak kafatası pencere kenarlıklarının iç dura delik. Belgili tanımlık kesme tam pencere iç izleri kadar yineleyin.</li>
	<li>Beyin zarı uzak temel parankimi ve tümör ortaya iyi forseps kullanarak peeling tarafından kaldırın.</li>
	<li>Oda ışıkları kapatarak ve stereomicroscope floresan modu kapatarak U87 mCh-Fl tümörü bulun. Rezeksiyon için bir vakum pompası hortumu ucunu 1-200 µL pipet ucu yükleyerek hazırlayın.</li>
	<li>Vakum Pompası açmak. Tümör kadar hiçbir sinyal kalır yavaşça floresan doku alıyorum tarafından çıkarabileceğim. Vakum Pompası devre dışı bırakmak ve Pipet Ucu atın. Floresans kapalı ve odanın ışıkları geri dön. Not: kanamayı kontrol için soğuk PBS ile sulamak ve pamuk uç aplikatör ile sabit basınç uygulayın. Kanamayı ardından başka bir PBS sulama durduktan sonra kaldırılır sürece daha ciddi vakalarda, rezeksiyon boşluğu da geçici olarak bir kan durdurucu sargı aracıyla paketlenebilir.</li>
	<li>Hemen implantasyon öncesinde, yavaş yavaş istenmeyen ortam ve ilişkili bileşenleri kaldırmak için PBS bir MSC numaralı seribaşı PLA iskele daldırma. İskele rezeksiyon boşluğuna implant. Gerekirse, 1 µL fibrinojen (67-106 mg/mL) 1 µL Trombin (400-625 U / iskele güvenliğini sağlamak için mL) tarafından takip yere ekleyin.</li>
	<li>Kaldırıldı dura ve kalp kapakcıgını zaten atılan kafatası penceresinden, yara deri kapanış ve cerrahi yapıştırıcı uygulayarak kapatın. Hayvan inhale anestezik kaldırmak ve ısıtmalı bir yüzeye kurtarmak için izin.</li>
	<li>Bir kez Ambulatuvar, dönüş fare kafesi. Analjezik IACUC onaylı zamanlamaya göre yönetmek. Her fare için yordamı yineleyin.</li>
</ol>3. görüntüleme sonrası ameliyat
<ol><li>28-G insülin Ģırınga kullanarak, fare ile D-biyoluminesans (150 mg/kg mayi) enjekte et.</li>
	<li>10 dakika bekleyin. Bu vücutta dolaşan ve beyinde en yüksek ifadesi elde etmek için luciferase ifade kanser hücreleri ile reaksiyona biyoluminesans izin verir.</li>
	<li>(Olarak daha önce bahsedilen) İsoflurane anestezi altında fareler bir bioluminescence görüntüleme (BLI) sistemi tümörleri görselleştirmek için görüntü. Pozlama süreleri gerekli (saniye dakika) tümör boyutuna bağlı olarak değişir.</li>
	<li>Görüntüleme yordamı tümör büyüme kinetik belirlemek için gerektiği kadar yineleyin. Hayvan sağlığı izlemeye devam edin. Not: Terapötik MSCs yapısal kanser hücrelerini öldürme ve genel tümör büyüme baskılayarak izi, ifade edecek. 2-5 günde Imaging yeterli frekans bu amaç için sağlar.</li>
	<li>IACUC protokolünde özetlenen önceden belirlenmiş bitiş noktaları araya geldi, fareler transcardial perfüzyon tarafından kurban ve doku analizi için toplamak.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Adamson, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glioblastoma+multiforme:+a+review+of+where+we+have+been+and+where+we+are+going.">Glioblastoma multiforme: a review of where we have been and where we are going.</a> Expert opinion on investigational drugs. 18 (8), 1061-1083 (2009).</li><li>Asthagiri, A. R., Pouratian, N., Sherman, J., Ahmed, G., Shaffrey, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+Brain+Tumor+Surgery.">Advances in Brain Tumor Surgery.</a> Neurologic Clinics. 25 (4), 975-1003 (2007).</li><li>Affronti, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overall+survival+of+newly+diagnosed+glioblastoma+patients+receiving+carmustine+wafers+followed+by+radiation+and+concurrent+temozolomide+plus+rotational+multiagent+chemotherapy.">Overall survival of newly diagnosed glioblastoma patients receiving carmustine wafers followed by radiation and concurrent temozolomide plus rotational multiagent chemotherapy.</a> Cancer. 115 (15), 3501-3511 (2009).</li><li>Erpolat, O., Akmansu, M., Goksel, F., Bora, H., Yaman, E., B&#252;y&#252;kberber, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Outcome+of+newly+diagnosed+glioblastoma+patients+treated+by+radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide:+a+long-term+analysis.">Outcome of newly diagnosed glioblastoma patients treated by radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide: a long-term analysis.</a> Tumori. 95 (2), 191-197 (2009).</li><li>Minniti, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma+in+elderly+patients.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma in elderly patients.</a> Journal of Neuro-Oncology. 88 (1), 97-103 (2008).</li><li>Stupp, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma.">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> The New England Journal of Medicine. 352 (10), 987-996 (2005).</li><li>Delgado-L&#243;pez, P., Corrales-Garc&#237;a, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Survival+in+glioblastoma:+a+review+on+the+impact+of+treatment+modalities.">Survival in glioblastoma: a review on the impact of treatment modalities.</a> Clinical and Translational Oncology. 18 (11), 1062-1071 (2016).</li><li>Wu, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vivo+tracking+of+superparamagnetic+iron+oxide+nanoparticle-labeled+mesenchymal+stem+cell+tropism+to+malignant+gliomas+using+magnetic+resonance+imaging.+Laboratory+investigation.">In vivo tracking of superparamagnetic iron oxide nanoparticle-labeled mesenchymal stem cell tropism to malignant gliomas using magnetic resonance imaging. Laboratory investigation.</a> Journal of Neurosurgery. 108 (2), 320-329 (2008).</li><li>Nakamizo, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Human+bone+marrow-derived+mesenchymal+stem+cells+in+the+treatment+of+gliomas.">Human bone marrow-derived mesenchymal stem cells in the treatment of gliomas.</a> Cancer Research. 65 (8), 3307-3318 (2005).</li><li>Xu, F., Shi, J., Yu, B., Ni, W., Wu, X., Gu, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemokines+mediate+mesenchymal+stem+cell+migration+toward+gliomas+in+vitro.">Chemokines mediate mesenchymal stem cell migration toward gliomas in vitro.</a> Oncology Reports. 23 (6), 1561-1567 (2010).</li><li>Park, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CXCR4-transfected+human+umbilical+cord+blood-derived+mesenchymal+stem+cells+exhibit+enhanced+migratory+capacity+toward+gliomas.">CXCR4-transfected human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells exhibit enhanced migratory capacity toward gliomas.</a> International Journal of Oncology. 38 (1), 97-103 (2011).</li><li>Ho, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Matrix+Metalloproteinase+1+Is+Necessary+for+the+Migration+of+Human+Bone+Marrow-Derived+Mesenchymal+Stem+Cells+Toward+Human+Glioma.">Matrix Metalloproteinase 1 Is Necessary for the Migration of Human Bone Marrow-Derived Mesenchymal Stem Cells Toward Human Glioma.</a> STEM CELLS. 27 (6), 1366-1375 (2009).</li><li>Bexell, D., Svensson, A., Bengzon, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stem+cell-based+therapy+for+malignant+glioma.">Stem cell-based therapy for malignant glioma.</a> Cancer Treatment Reviews. 39 (4), (2012).</li><li>Nouri, F., Wang, X., Hatefi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetically+engineered+theranostic+mesenchymal+stem+cells+for+the+evaluation+of+the+anticancer+efficacy+of+enzyme/prodrug+systems.">Genetically engineered theranostic mesenchymal stem cells for the evaluation of the anticancer efficacy of enzyme/prodrug systems.</a> Journal of Controlled Release. 200, 179-187 (2015).</li><li>Kauer, T., Figueiredo, J. -. L., Hingtgen, S., Shah, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Encapsulated+therapeutic+stem+cells+implanted+in+the+tumor+resection+cavity+induce+cell+death+in+gliomas.">Encapsulated therapeutic stem cells implanted in the tumor resection cavity induce cell death in gliomas.</a> Nature Neuroscience. 15 (2), 197-204 (2011).</li><li>Bag&#243;, J., Pegna, G., Okolie, O., Hingtgen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Fibrin+matrices+enhance+the+transplant+and+efficacy+of+cytotoxic+stem+cell+therapy+for+post-surgical+cancer.">Fibrin matrices enhance the transplant and efficacy of cytotoxic stem cell therapy for post-surgical cancer.</a> Biomaterials. 84, 42-53 (2016).</li><li>Bag&#243;, J., Pegna, G., Okolie, O., Mohiti-Asli, M., Loboa, E., Hingtgen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrospun+nanofibrous+scaffolds+increase+the+efficacy+of+stem+cell-mediated+therapy+of+surgically+resected+glioblastoma.">Electrospun nanofibrous scaffolds increase the efficacy of stem cell-mediated therapy of surgically resected glioblastoma.</a> Biomaterials. 90, 116-125 (2016).</li><li>Loebinger, M., Eddaoudi, A., Davies, D., Janes, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mesenchymal+Stem+Cell+Delivery+of+TRAIL+Can+Eliminate+Metastatic+Cancer.">Mesenchymal Stem Cell Delivery of TRAIL Can Eliminate Metastatic Cancer.</a> Cancer Research. 69 (10), 4134-4142 (2009).</li><li>Mostany, R., Portera-Cailliau, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Craniotomy+Surgery+Procedure+for+Chronic+Brain+Imaging.">A Craniotomy Surgery Procedure for Chronic Brain Imaging.</a> J. Vis. Exp. (12), e680 (2008).</li><li>Ozawa, T., James, C. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+Intracranial+Brain+Tumor+Xenografts+With+Subsequent+Analysis+of+Tumor+Growth+and+Response+to+Therapy+using+Bioluminescence+Imaging.">Establishing Intracranial Brain Tumor Xenografts With Subsequent Analysis of Tumor Growth and Response to Therapy using Bioluminescence Imaging.</a> J. Vis. Exp. (41), e1986 (2010).</li></ol>

DRS. çarşaf, Bagó ve Hingtgen şahin Therapeutics kök hücre ve iskele teknoloji UNC Chapel Hill gelen yönlerini lisanslı sermayen yok.

Aşağıdaki noktaları hassas maksimize etmek ve zaman alan tuzaklardan kaçınmak dikkate alınır verilen bu ameliyatı genellikle fare, başına 30 dakika içinde tamamlanabilir. Öncelikle, fare yordamına başlamadan önce stereotaksik alet şekilde alacak biçimde yerleştirildiğinden emin olun. İstenmeyen baş hareketleri kranyotomi cerrahi doğruluğunu, tümör rezeksiyonu derecesini ve tümör implantasyon yerlerini sınırlar. Rezeksiyon önce tam olarak tümör kapsayan dura bölümünü kaldırın. Aspira...

Glioblastoma (GBM) kasvetli bir medyan sağkalım sadece 12-15 ay1,2,3,4,5ile erişkinlerde en sık görülen birincil beyin kanseri var. Ardından verebildiği ve adjuvan temozolomide kemoterapi ve radyasyon maksimal cerrahi rezeksiyon geçerli klinik standartları ne zamandı 20056,7kabul beri hayatta kalma önemli ölçüde geliştirilmiş değil. Geçici bir rahatlama belirtileri olan hastalarda bu tedavi sağlar gibi invaziv kanser foci rezeksiyon kaçmasına ve sistemik tedaviler kan - beyin bariyerini (BBB) tarafından korunmaktadır standart bakım tedavi kaçınılmaz yineleme içinde sonuçları. BBB engellemeyi invaziv tümör foci hedefleyen Stratejileri çekiş bu agresif ve zayıflatıcı hastalığa karşı kazanmak için acilen ihtiyaç vardır.
İnsan mezenkimal kök hücre (MSCs) teslimat araçlar GBM için kendi yerel tümör tropism8,9nedeniyle ilaç olarak umut verici. MSCs reseptörleri için sahip ve tümör salgılar, stromal hücre kaynaklı faktör 1α çözünür faktörler doğru göç (SDF-1α), matriks metalloproteinaz-1 (MMP-1) ve monosit chemoattractant protein-1 (MCP-1) diğerleri arasında10, 11 , 12 , 13. ifade etmek ve sitotoksik ilaçlar salgılar mühendislik MSCs tümör-posta ilaç teslim aracı olarak harnessed olabilir etmelerini sağlar. Mühendislik MSCs invaziv tümör foci doğru hareket ve tedavi amaçlı proteinleri teslim. Bu yaklaşım preklinik GBM modelleri9,14çeşitli fizibilite göstermiştir. Ancak, bu modellerin büyük çoğunluğu bu bileşenin klinik önemi rağmen cerrahi rezeksiyon eklemeyin. Rezeksiyon yeni modeller kullanılarak çalışmalar ortaya çıkan cerrahi tümör kaldırma kök hücrelerin cerrahi kavite15doğrudan enjekte sebat azalttığı saptandı. Canlılığı, azaltılmış etkinlik neden, dozu ve süresi uyuşturucu düşüşler nedeniyle olası invaziv tümör foci için teslim.
Kök hücre canlılığı ve ilaç dağıtım artırmak için MSCs implantasyon öncesinde iskele üzerine seribaşı. Bu protokol için biyouyumlu ve yeniden emilebilir electrospun nanofibrous poly(lactic acid) (PLA) için MSCs. PLA şişiriyor ve rezeksiyon boşluğuna implant, hangi tedavi kapsama alanı en üst düzeye çıkarır ve en aza indirir üzerine şeklinde uygundur ve iskele olarak kullanılır mesafe MSCs tümör hücreleri ulaşmak için seyahat gerekir. MSCs implantasyonu-iskele üzerinde kalır ve sonra tümör hücrelerinin doğru iskele kapalı implantasyon16,17sonra geçirin. MSCs ve sonra taşıdıkları sitotoksik ilaçlar tümör foci birikir. Sitotoksik ilaç teslim tümöre MSC canlılığı ve sebat, ikisi de iskele Uygulanılmasından tarafından destekli gerektirir.
Bu yordam, lentiviral vektörler Floresan (izlemevitro ) ve (kollarındakivivo içinde izleme) istikrarlı ifade ikna etmek için kullanılan işaretleri kanser ve kök hücre hatlarında. İnsan GBM satır U87 mCherry ve ateş böceği luciferase (U87 mCh-Fl) ve tedavi edici olmayan MSCs GFP ve renilla luciferase (MSC GFP-Rluc) ile bulaşmış. MSCs tedavi türevi TNFα ilgili apoptosis ligand (MSC-TRAIL) inducing hızlı. İZ, bir yapısal salgılanan protein bağlar için yakın ölüm reseptörleri kanser hücreleri ve başlatır apoptosis caspase-aracılı18.
Burada, biz preklinik görüntü güdümlü GBM cerrahi rezeksiyon ve MSC numaralı seribaşı iskele implantasyonu için bir protokol sağlar. Kısacası, Çıplak fareler üç gün sonra U87 mCh-Fl birincil tümör kurmak için stereotaktik orthotopic enjeksiyonu ile takip bir kranyotomi verilir. Engrafted tümör yaklaşık bir hafta süreyle büyür. PLA iskele MSCs 48 h rezeksiyonu ameliyat öncesi numaralı seribaşı. Tümör sonra floresan rehberliği altında rezeke ve MSC yüklü iskele rezeksiyon boşluğuna yerleştirilir. Tümör yükü ve fare hayatta kalma sonra izlenir post-operatively bioluminescence (BLI) görüntüleme. Bu yordamlardan birini bir zaman çizelgesi (Şekil 1) sağlanır.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/57452/57452fig1.jpg"> Şekil 1: yordamlar kronolojisi. Fareler başlangıçta kafatası pencere (0 gün) alırsınız. Üç gün sonra bir iyileşme döneminde, tümör vardır (3. gün) implante ve yaklaşık bir hafta için büyür. İskele MSCs (günü 8) ile tümör rezeksiyonu ve implantasyon yordamı (gün 10) öncesinde iki gün numaralı seribaşı. Bundan sonra görüntüleme sonrası ameliyat (gün 10 +) tümör ilerleme ve tedavi edici etkinliği değerlendirilir. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/57452/57452fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.</a>

<table><tbody><tr><td>Just for mouse stereotaxic instrument</td><td>Stoelting</td><td>51730</td><td>Maintains steady head positioning during surgery</td></tr><tr><td>Fluorescence dissecting stereomicroscope</td><td>Leica</td><td>M165 FC&amp;nbsp;</td><td>Allows real-time imaging of tumor during resection</td></tr><tr><td>Motorized integrated stereotaxic injector (ISI) system</td><td>Stoelting</td><td>53315</td><td>Allows precise tumor cell injection volume and rate</td></tr><tr><td>Vetbond tissue adhesive</td><td>3M</td><td>1469</td><td>Sugical glue to close skin wound</td></tr><tr><td>Artificial tears</td><td>Akorn</td><td>664268</td><td>Prevents eyes from drying during surgery</td></tr><tr><td>Webcol alcohol preps</td><td>Covidien</td><td>6818</td><td>Sterilize incision site</td></tr><tr><td>Betadine surgical scrub</td><td>Purdue Fredick Company</td><td>6761815117</td><td>Sterilize incision site</td></tr><tr><td>Cotton-tipped applicators</td><td>Fisherbrand</td><td>23-400-115</td><td>Surgery tool</td></tr><tr><td>E-vac aspirating system</td><td>Argos</td><td>EV310</td><td>Vacuum pump used to resect tumor</td></tr><tr><td>Fibrinogen and thrombin extracted from as-received TISSEEL</td><td>Baxter</td><td></td><td>To temporarily secure the scaffold in the resection cavity</td></tr><tr><td>IVIS Kinetic in vivo optical imaging system</td><td>Caliper Life Science</td><td></td><td>Bioluminescent Imager</td></tr><tr><td>D-Luciferin potassium salt</td><td>PerkinElmer</td><td>122799</td><td>In vivo imaging agent</td></tr></tbody></table>

image-guided resection of glioblastoma and intracranial implantation of therapeutic stem cell-seeded scaffolds

Glioblastoma (GBM), en sık görülen ve agresif birincil beyin kanseri, 12-15 ay yaşam beklentisi taşıyor. Kısa yaşam beklentisi invaziv tümör foci ortadan kaldırmak için kısmen yetersizlik cerrahi rezeksiyon radyasyon ve kemoterapi, ardından oluşan güncel tedavi için kaynaklanmaktadır. Bu resimde tedavisinde tumoricidal insan mezenkimal kök hücre ile (MSCs) geliştirilmiş. MSCs güçlü tümör tropism sergi ve tümör hücrelerini öldürmek ifade terapötik proteinler için tasarlanmış. Preklinik modelleri gelişmeler bu cerrahi rezeksiyon erken MSC kaybına neden olmaktadır ve terapötik etkinlik azaltır gösterir. MSC tedavi etkinliğinin bir biyolojik poly(lactic acid) (PLA) iskele tarafından sağlanan MSCs geliştirilebilir. MSC teslim bir PLA iskele cerrahi rezeksiyon den içine hücre saklama, sebat ve tümör öldürme geri yükler. GBM Uygulanılmasından MSC numaralı seribaşı PLA etkilerini incelemek için doğru bir preklinik modeli gereklidir. Burada bir preklinik cerrahi protokol GBM görüntü güdümlü Tümör rezeksiyonu bağışıklık eksikliği farelerde MSC numaralı seribaşı iskele implantasyon tarafından takip için sağlar. MSCs lentiviral yapıların yapısal hızlı ve floresan izleme izin vermek için yeşil flüoresan protein (GFP) yanı sıra tedavi TNFα ilgili apoptosis indükleyici ligand (iz) salgılar tasarlanmıştır. Benzer şekilde, U87 tümör hücreleri hızlı mCherry ve ateş böceği luciferase, Çift floresan/izleme Işıksaçan sağlamak için tasarlanmıştır. Therapeutics teslimini kök hücre aracılı soruşturma için kullanılmakta iken, bu iletişim kuralı diğer GBM müdahaleler üzerinde cerrahi rezeksiyon etkisini araştırmak için değiştirilmiş olabilir.

U87 tümör hücreleri hızlı mCherry ve ateş böceği luciferase (U87 mCh-Fl) enjeksiyon öncesinde ve görüntü güdümlü rezeksiyon ve bioluminescence (Şekil 2A-C) izleme için izin vermek için tasarlanmış. Kök hücre benzer şekilde tanı GFP-Rluc (MSC-GFP) veya tedavi GFP-deneme (MSC-TRAIL) ile tasarlanmış ve eki ve nükleer silahların yayılmasına karşı (Şekil 2B-F) onaylama...

Watch this Scientific Journal Video about Image-Guided Resection of Glioblastoma and Intracranial Implantation of Therapeutic Stem Cell-seeded Scaffolds at JoVE.com

Image-Guided Resection of Glioblastoma and Intracranial Implantation of Therapeutic Stem Cell-seeded Scaffolds

Görüntü güdümlü rezeksiyon Glioblastoma ve kafa içi tedavi kök hücre numaralı seribaşı iskele implantasyonu

Tümör arayan tedavi mezenkimal kök hücre (MSCs) invaziv glioblastoma için bir tedavi olarak umut verici. En uygun nakli MSCs teslimini iskele Tümör rezeksiyonu den içine içerir. Burada, glioblastoma tedavisinde MSC çalışmaya preklinik teknikleri de dahil olmak üzere sağlanan: görüntü güdümlü Tümör rezeksiyonu; MSC numaralı seribaşı iskele implantasyonu; ve ameliyat sonrası terapi izleme.

Glioblastoma (GBM), the most common and aggressive primary brain cancer, carries a life expectancy of 12-15 months. The short life expectancy is due in ...

image-guided-resection-glioblastoma-intracranial-implantation

Research

JoVE Journal

Medicine

8.2K Görüntüleme.  University of North Carolina at Chapel Hill. Tümör arayan tedavi mezenkimal kök hücre (MSCs) invaziv glioblastoma için bir tedavi olarak umut verici. En uygun nakli MSCs teslimini iskele Tümör rezeksiyonu den içine içerir. Burada, glioblastoma tedavisinde MSC çalışmaya preklinik teknikleri de dahil olmak üzere sağlanan: görüntü güdümlü Tümör rezeksiyonu; MSC numaralı seribaşı iskele implantasyonu; ve ameliyat sonrası terapi izleme.

Video: Image-Guided Resection of Glioblastoma and Intracranial Implantation of Therapeutic Stem Cell-seeded Scaffolds

A Simple Guide Screw Method for Intracranial Xenograft Studies in Mice

The grafting of human tumor cells into the brain of immunosuppressed mice is an established method for the study of brain cancers including glioblastoma (glioma) and medulloblastoma. The widely used stereotactic approach only allows for the injection of a single animal at a time, is labor intensive and requires highly specialized equipment. The guide screw method, initially developed by Lal et al.,1 was developed to eliminate cumbersome stereotactic procedures. We now describe a modified guide screw approach that is rapid and exceptionally safe; both of which are critical ethical considerations. Notably, our procedure now incorporates an infusion pump that allows up to 10 animals to be simultaneously injected with tumor cells.
To demonstrate the utility of this procedure, we established human U87MG glioma cells as intracranial xenografts in mice, which were then treated with AMG102; a fully human antibody directed to HGF/scatter factor currently undergoing clinical evaluation2-5. Systemic injection of AMG102 significantly prolonged the survival of all mice with intracranial U87MG xenografts and resulted in a number of complete cures. 
This study demonstrates that the guide screw method is an inexpensive, highly reproducible approach for establishing intracranial xenografts. Furthermore, it provides a relevant physiological model for validating novel therapeutic strategies for the treatment of brain cancers.

In order to evaluate novel therapeutic paradigms for the treatment of glioma, physiological relevant models are essential. We utilize an implantable guide screw procedure for establishment of intracranial xenograft models that is more rapid and safer than stereotactic approaches.

Basit Fare İntrakranial Xenograftlarında Çalışmaları Kılavuzu Vida Yöntemi

The grafting of human tumor cells into the brain of immunosuppressed mice is an established method for the study of brain cancers including glioblastoma ...

Tıp

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

The mouse glioma 261 (GL261) is recognized as an in vivo model system that recapitulates many of the features of human glioblastoma multiforme (GBM). The cell line was originally induced by intracranial injection of 3-methyl-cholantrene into a C57BL/6 syngeneic mouse strain 1; therefore, immunologically competent C57BL/6 mice can be used. While we use GL261, the following protocol can be used for the implantation and monitoring of any intracranial mouse tumor model. GL261 cells were engineered to stably express firefly luciferase (GL261-luc). We also created the brighter GL261-luc2 cell line by stable transfection of the luc2 gene expressed from the CMV promoter. C57BL/6-cBrd/cBrd/Cr mice (albino variant of C57BL/6) from the National Cancer Institute, Frederick, MD were used to eliminate the light attenuation caused by black skin and fur. With the use of albino C57BL/6 mice; in vivo imaging using the IVIS Spectrum in vivo imaging system is possible from the day of implantation (Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA). The GL261-luc and GL261-luc2 cell lines showed the same in vivo behavior as the parental GL261 cells. Some of the shared histological features present in human GBMs and this mouse model include: tumor necrosis, pseudopalisades, neovascularization, invasion, hypercellularity, and inflammation 1.
Prior to implantation animals were anesthetized by an intraperitoneal injection of ketamine (50 mg/kg), xylazine (5 mg/kg) and buprenorphine (0.05 mg/kg), placed in a stereotactic apparatus and an incision was made with a scalpel over the cranial midline. A burrhole was made 0.1mm posterior to the bregma and 2.3mm to the right of the midline. A needle was inserted to a depth of 3mm and withdrawn 0.4mm to a depth of 2.6mm. Two &mu;l of GL261-luc or GL261-luc2 cells (107 cells/ml) were infused over the course of 3 minutes. The burrhole was closed with bonewax and the incision was sutured.
Following stereotactic implantation the bioluminescent cells are detectable from the day of implantation and the tumor can be analyzed using the 3D image reconstruction feature of the IVIS Spectrum instrument. Animals receive a subcutaneous injection of 150&mu;g luciferin /kg body weight 20 min prior to imaging. Tumor burden is quantified using mean tumor bioluminescence over time. Tumor-bearing mice were observed daily to assess morbidity and were euthanized when one or more of the following symptoms are present: lethargy, failure to ambulate, hunched posture, failure to groom, anorexia resulting in &gt;10% loss of weight. Tumors were evident in all of the animals on necropsy.

Intracranial Implantation with Subsequent 3D In Vivo Bioluminescent Imaging of Murine Gliomas

Intracranial implantation of GL261 cells into C57BL/6 mice produces malignant gliomas that recapitulate many of the hallmarks of human glioblastoma multiforme. We used GL261 cells stably expressing luciferase to allow us to use in vivo imaging to follow tumor progression. The surgery and 3D in vivo imaging are demonstrated.

Müteakip 3D ile İntrakranial İmplantasyonu In Vivo Murin Gliomlar Bioluminescent Görüntüleme

The mouse glioma 261 (GL261) is recognized as an in vivo model system that recapitulates many of the features of human glioblastoma multiforme (GBM). The ...

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality treatment consisting of surgical resection, post-operative radiation therapy and temozolomide chemotherapy 1. New therapeutic approaches are clearly needed to improve patient survival and quality of life. The development of more effective treatment strategies would be aided by animal models of GBM that recapitulate human disease yet allow serial imaging to monitor tumor growth and treatment response. In this paper, we describe our technique for the precise stereotactic implantation of bio-imageable GBM cancer cells into the brains of nude mice resulting in tumor xenografts that recapitulate key clinical features of GBM 2. This method yields tumors that are reproducible and are located in precise anatomic locations while allowing in vivo bioluminescent imaging to serially monitor intracranial xenograft growth and response to treatments 3-5. This method is also well-tolerated by the animals with low perioperative morbidity and mortality.

Stereotactic Intracranial Implantation and In vivo Bioluminescent Imaging of Tumor Xenografts in a Mouse Model System of Glioblastoma Multiforme

We describe an integrated method for the precise, stereotactic implantation of human glioblastoma multiforme cells into the brains of nude mice and subsequent serial in vivo imaging to monitor growth and response to treatment of the resultant xenografts.

Stereotaktik intrakranial implantasyon ve<em&gt; In vivo</emGlioblastoma Multiforme bir Mouse Model Sistemde Tümör Xenografts arasında&gt; Bioluminescent Görüntüleme

Glioblastoma multiforme (GBM) is a high-grade primary brain cancer with a median survival of only 14.6 months in humans despite standard tri-modality ...

Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

Glioma is the one of the most lethal forms of human cancer. The most effective glioma therapy to date-surgery followed by radiation treatment-offers patients only modest benefits, as most patients do not survive more than five years following diagnosis due to glioma relapse 1,2. The discovery of cancer stem cells in human brain tumors holds promise for having an enormous impact on the development of novel therapeutic strategies for glioma 3. Cancer stem cells are defined by their ability both to self-renew and to differentiate, and are thought to be the only cells in a tumor that have the capacity to initiate new tumors 4. Glioma relapse following radiation therapy is thought to arise from resistance of glioma stem cells (GSCs) to therapy 5-10. In vivo, GSCs are shown to reside in a perivascular niche that is important for maintaining their stem cell-like characteristics 11-14. Central to the organization of the GSC niche are vascular endothelial cells 12. Existing evidence suggests that GSCs and their interaction with the vascular endothelial cells are important for tumor development, and identify GSCs and their interaction with endothelial cells as important therapeutic targets for glioma. The presence of GSCs is determined experimentally by their capability to initiate new tumors upon orthotopic transplantation 15. This is typically achieved by injecting a specific number of GBM cells isolated from human tumors into the brains of severely immuno-deficient mice, or of mouse GBM cells into the brains of congenic host mice. Assays for tumor growth are then performed following sufficient time to allow GSCs among the injected GBM cells to give rise to new tumors-typically several weeks or months. Hence, existing assays do not allow examination of the important pathological process of tumor initiation from single GSCs in vivo. Consequently, essential insights into the specific roles of GSCs and their interaction with the vascular endothelial cells in the early stages of tumor initiation are lacking. Such insights are critical for developing novel therapeutic strategies for glioma, and will have great implications for preventing glioma relapse in patients. Here we have adapted the PoRTS cranial window procedure 16and in vivo two-photon microscopy to allow visualization of tumor initiation from injected GBM cells in the brain of a live mouse. Our technique will pave the way for future efforts to elucidate the key signaling mechanisms between GSCs and vascular endothelial cells during glioma initiation.

Imaging Glioma Initiation In Vivo Through a Polished and Reinforced Thin-skull Cranial Window

By combining a polished and reinforced thin-skull (PoRTS) cranial window and glioblastoma (GBM) cell injection, we can observe glioma initiation and growth from injected GBM cells in the brain of a live mouse longitudinally.

Görüntüleme Glioma Başlatma<em&gt; In Vivo</em&gt; Bir Parlak ve Takviyeli İnce kafatası Kranial Pencere arkası

Glioma is the one of the most lethal forms of human cancer. The most effective glioma therapy to date-surgery followed by radiation treatment-offers ...

Flexible Organic Electronic Devices for Pulsed Electric Field Therapy of Glioblastoma

Glioblastoma is difficult to eradicate with standard oncology therapies due to its high degree of invasiveness. Bioelectric treatments based on pulsed electric fields (PEFs) are promising for the improvement of treatment efficiency. However, they rely on rigid electrodes that cause acute and chronic damage, especially in soft tissues such as the brain. In this work, flexible electronics were used to deliver PEFs to tumors and the biological response was evaluated with fluorescent microscopy. Interdigitated gold electrodes on a thin, transparent parylene-C substrate were coated with the conducting polymer PEDOT:PSS, resulting in a conformable and biocompatible device. The effects of PEFs on tumors and their microenvironment were examined using various biological models. First, monolayers of glioblastoma cells were cultured on top of the electrodes to investigate phenomena in vitro. As an intermediate step, an in ovo model was developed where engineered tumor spheroids were grafted in the embryonic membrane of a quail. Due to the absence of an immune system, this led to highly vascularized tumors. At this early stage of development, embryos have no immune system, and tumors are not recognized as foreign bodies. Thus, they can develop fast while developing their own vessels from the existing embryo vascular system, which represents a valuable 3D cancer model. Finally, flexible electrode delivery of PEFs was evaluated in a complete organism with a functional immune system, using a syngenic, orthograft (intracranial) mouse model. Tumor spheroids were grafted into the brain of transgenic multi-fluorescent mice prior to the implantation of flexible organic electrode devices. A sealed cranial window enabled multiphoton imaging of the tumor and its microenvironment during treatment with PEFs over a period of several weeks.

This work describes the development of flexible interdigitated electrodes for implementation in 3D brain tumor models, namely, in vitro culture, in ovo model, and in vivo murine model. The proposed method can be used to evaluate the effects of pulsed electric fields on tumors at different levels of complexity.

Glioblastoma'nın Darbeli Elektrik Alan Terapisi için Esnek Organik Elektronik Cihazlar

Glioblastoma is difficult to eradicate with standard oncology therapies due to its high degree of invasiveness. Bioelectric treatments based on pulsed ...

Kanser Araştırmaları

An Orthotopic Glioblastoma Mouse Model Maintaining Brain Parenchymal Physical Constraints and Suitable for Intravital Two-photon Microscopy

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive form of brain tumors with no curative treatments available to date.
Murine models of this pathology rely on the injection of a suspension of glioma cells into the brain parenchyma following incision of the dura-mater. Whereas the cells have to be injected superficially to be accessible to intravital two-photon microscopy, superficial injections fail to recapitulate the physiopathological conditions. Indeed, escaping through the injection tract most tumor cells reach the extra-dural space where they expand abnormally fast in absence of mechanical constraints from the parenchyma.
Our improvements consist not only in focally implanting a glioma spheroid rather than injecting a suspension of glioma cells in the superficial layers of the cerebral cortex but also in clogging the injection site by a cross-linked dextran gel hemi-bead that is glued to the surrounding parenchyma and sealed to dura-mater with cyanoacrylate. Altogether these measures enforce the physiological expansion and infiltration of the tumor cells inside the brain parenchyma. Craniotomy was finally closed with a glass window cemented to the skull to allow chronic imaging over weeks in absence of scar tissue development.
Taking advantage of fluorescent transgenic animals grafted with fluorescent tumor cells we have shown that the dynamics of interactions occurring between glioma cells, neurons (e.g. Thy1-CFP mice) and vasculature (highlighted by an intravenous injection of a fluorescent dye) can be visualized by intravital two-photon microscopy during the progression of the disease.
The possibility to image a tumor at microscopic resolution in a minimally compromised cerebral environment represents an improvement of current GBM animal models which should benefit the field of neuro-oncology and drug testing.

We have established a cortical orthotopic glioblastoma model in mice for intravital two-photon microscopy that recapitulates the biophysical constraints normally at play during the growth of the tumor. A chronic glass window replacing the skull above the tumor enables the follow-up of the tumor progression over time by two-photon microscopy.

Ortotopik Glioblastoma Fare Modeli Beyin parankim fiziksel kısıtlamaları bakımı ve Intravital İki foton Mikroskopi için uygundur

Glioblastoma multiforme (GBM) is the most aggressive form of brain tumors with no curative treatments available to date.
Murine models of this pathology ...

Farelerde 2P-IVM Kullanarak Beyin Tümörlerinde Nanopartiküllerin Gerçek Zamanlı Takibi

Two-Photon Intravital Microscopy of Glioblastoma in a Murine Model

The delivery of intravenously administered cancer therapeutics to brain tumors is limited by the blood-brain barrier. A method to directly image the accumulation and distribution of macromolecules in brain tumors in vivo would greatly enhance our ability to understand and optimize drug delivery in preclinical models. This protocol describes a method for real-time in vivo tracking of intravenously administered fluorescent-labeled nanoparticles with two-photon intravital microscopy (2P-IVM) in a mouse model of glioblastoma (GBM).
The protocol contains a multi-step description of the procedure, including anesthesia and analgesia of experimental animals, creating a cranial window, GBM cell implantation, placing a head bar, conducting 2P-IVM studies, and post-surgical care for long-term follow-up studies. We show representative 2P-IVM imaging sessions and image analysis, examine the advantages and disadvantages of this technology, and discuss potential applications.
This method can be easily modified and adapted for different research questions in the field of in vivo preclinical brain imaging.

Yazar Gündemi: Glioblastoma Tedavisinde İlaç Dağıtımını ve Erken Teşhisi Optimize Etmek için Multimodal Görüntüleme Stratejileri

We present a novel approach for two-photon microscopy of the tumor delivery of fluorescent-labeled iron oxide nanoparticles to glioblastoma in a mouse model.

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

The delivery of intravenously administered cancer therapeutics to brain tumors is limited by the blood-brain barrier. A method to directly image the ...

Stereotactic Adoptive Transfer of Cytotoxic Immune Cells in Murine Models of Orthotopic Human Glioblastoma Multiforme Xenografts

Glioblastoma multiforme (GBM), the most frequent and aggressive primary brain cancer in adults, is generally associated with a poor prognosis, and scarce efficient therapies have been proposed over the last decade. Among the promising candidates for designing novel therapeutic strategies, cellular immunotherapies have been targeted to eliminate highly invasive and chemo-radioresistant tumor cells, likely involved in a rapid and fatal relapse of this cancer. Thus, administration(s) of allogeneic GBM-reactive immune cell effectors, such as human V&#978;9V&#948;2 T lymphocytes, in the vicinity of the tumor would represents a unique opportunity to deliver efficient and highly concentrated therapeutic agents directly into the site of brain malignancies. Here, we present a protocol for the preparation and the stereotaxic administration of allogeneic human lymphocytes in immunodeficient mice carrying orthotopic human primary brain tumors. This study provides a preclinical proof-of-concept for both the feasibility and the antitumor efficacy of these cellular immunotherapies that rely on stereotactic injections of allogeneic human lymphocytes within intrabrain tumor beds.

Here, we present a protocol for the preparation and the stereotaxic administration of allogeneic human lymphocytes in immunodeficient mice carrying orthotopic human primary brain tumors. This study provides a proof-of-concept for both the feasibility and the antitumor efficacy of intrabrain-delivered cellular immunotherapies.

Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer

Glioblastoma multiforme (GBM), the most frequent and aggressive primary brain cancer in adults, is generally associated with a poor prognosis, and scarce ...

Görüntü güdümlü rezeksiyon Glioblastoma ve kafa içi tedavi kök hücre numaralı seribaşı iskele implantasyonu

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Basit Fare İntrakranial Xenograftlarında Çalışmaları Kılavuzu Vida Yöntemi

Müteakip 3D ile İntrakranial İmplantasyonu In Vivo Murin Gliomlar Bioluminescent Görüntüleme

Stereotaktik intrakranial implantasyon ve

Görüntüleme Glioma Başlatma

Glioblastoma'nın Darbeli Elektrik Alan Terapisi için Esnek Organik Elektronik Cihazlar

Ortotopik Glioblastoma Fare Modeli Beyin parankim fiziksel kısıtlamaları bakımı ve Intravital İki foton Mikroskopi için uygundur

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

Bir Murin Modelinde Glioblastomun İki Fotonlu İntravital Mikroskobu

Orthotopic insan Glioblastoma Multiforme Xenografts fare modelleri sitotoksik bağışıklık hücrelerinin stereotaksik evlat edinen Transfer