Bu yöntem bal arısı beslenme alanında anahtar sorulara cevap yardımcı olabilir, kötü beslenme ve hipofaringeal bezi büyüme ve gelişme arasındaki bağlantı hakkında. Bu tekniğin en büyük avantajı, arı hipofaringeal bezlerini kolayca lekelemek, görselleştirmek ve ölçmek için kullanabilirsiniz. Genellikle, hipofaringeal bezleri bulmak ve görsel rehberlik olmadan incelemek zor olabilir, çünkü bu yönteme yeni bireyler mücadele edecek.
İşleme başlamadan önce, bir cam Petri çanak erimiş serin ayarı balmumu dökün. Bir kuyuya 20 mikrolitre taze hazırlanmış Giemsa lekesi ve 50 ila 100 mikrolitre tuzlu su bir mikroskop kaydırağının bitişik kuyusuna, her hemşire işçi arının işlenmesini sağlar. Balmumu ayarlandığında, ilk arı baş kaldırmak ve forceps kullanmak için 10 milimetre mikro yay makas kullanın, bir kesme mikroskop, ve balmumu ön-yan-up balmumu diseksiyonu plaka katıştırmak için bir balmumu oyma kalem.
Kafayı tabağa sabitlemek için gözlere ve ağıza iğne yerleştirin ve yüz plakasının her iki tarafındaki gözler ve çene kemikleri arasında 2-3 milimetrelik bir kesi yapmak için bir iğne mengenesine sabitlenmiş keskin, kırılabilir bir jilet kullanın. Mikro makası yüz plakasının altında niçin çalıştırın ve anten ile beyin arasında çalışan anten sinirini kesin. İnce forceps kullanarak, ağız tarafından yüz plakakapmak ve ince nokta forceps ve bir iğne ile balmumu yüz-aşağı doku pin.
Sonra, pipet 20 mikrolitre PBS başın açık bölümüüzerine. Hipofaringeal bezleri inci bir dize gibi bakmak ve bozulmamış ise beynin üstünde yer almaktadır. Süper ince nokta forsepskullanarak, yavaşça mikroskopi slayt üzerinde Giemsa leke hemen daldırma için bezlerinden birini hasat.
Beş dakikalık bir kuluçkadan sonra bezi aynı kaydıraktaki tuzlu su havuzuna aktarın ve bezi mikromak ile gerektiğinde mikroskop altında daha küçük parçalara ayırın. Bezleri ölçmek için, ışık mikroskobu için ölçüm programını açın ve 10 kat büyütme seçin. Slaytı mikroskop aşamasına yerleştirin ve bezleri göz parçası nın içinden elle yerleştirin.
Büyütmeyi 60 ila 80 kata yükseltin ve yeni büyütmede bezlerin odak noktasını manuel olarak ayarlayın. Monitördeki canlı görüntüdeki bezlerin odak noktasını daha fazla ayarlayın ve görüntü adını ve örnek açıklamasını görüntü adı kutusuna girin. Bezlerin görüntüsünü elde etmek için Görüntü Kazan'ı tıklatın ve Analiz sekmesinin altında, Alan aracını seçin ve Ekran sekmesi altında Değer'i seçin.
Birim de seçilmemiş olacak. Diğer ayarların tümünün varsayılan olarak ayarlanır. Acini ölçmek için, sürekli tıklayın veya mümkün olduğunca dikkatli bir anda bir acinus çevre izleme sırasında sol fare düğmesini basılı tutun.
Tek bir resimdeki acini'nin tümü ölçüldükten sonra, uygun seçeneklerin seçildiğini onaylayan Raporu Oluştur'u seçin ve Dışa Aktar'ı tıklatın. Daha sonra raporu uygun bir biçimde kaydedin ve çalışma alanını ve malzemeleri uygun şekilde temizleyin. Lekesiz dokularda acini uygun bir kontrast ve tanımlanmış kenarları bulmak zordur.
Lekeli hipofaringeal bezlerinde, acini kenarları lekeli doku ve beyaz arka plan arasındaki gelişmiş kontrast nedeniyle keskin. Hipofaringeal bezler polen ile karışık bal beslenen arılarda zaman içinde büyür, tek başına bal beslenen arılar ile karşılaştırıldığında. Hipofaringeal bez boyutu da sağlanan polen türüne duyarlıdır.
Örneğin, çöl veya badem polen beslenen arılar eşdeğer büyüklükte bezleri göstermek, arılar güneydoğu polen diyetler bal tek başına beslenen arılar daha büyük bezleri sergilerken, ama arılardan besbezleri daha küçük ya badem veya çöl poleni beslenen. Bu işlemi denerken, bezleri dikkatlice incelemeyi ve aşırı veya az lekelememeyi unutmamak önemlidir. Giemsa lekesi ile çalışmanın tehlikeli olabileceğini ve lekeyi alevden uzak tutmak, uygun bertaraf etmek, eldiven takmak ve bu işlemi yaparken her zaman göz koruması almak gibi önlemlerin alınması gerektiğini unutmayın.
