The work was funded by a CHIR operating grant (DJB).

Aşağıdaki deneysel protokol kurumun hayvan bakımı komitesi tarafından onaylandı. Dişi sıçanlarda 1. NEMO <ol><li> Hazırlık <ol><li> Yaklaşık 200 g 3 altında% izofluran anestezisi ağırlığında dişi Sprague-Dawley sıçan yerleştirin hayvan tartmak ve tıraş ve bir iyot cerrahi yıkama kullanılarak prepubik parkı 3 kez dezenfekte. </li><li> aşağı bir ısıtma yastığı, şerit arka bacak ve kuyruk üzerinde ve ayrıca yumuşak, kaymasını önlemek üzere aşağı bantlanmış 20-gauge anjiyokateterinden ile mesaneye kateter. </li></ol></li><li> teşrih <ol><li> üretra deliğine doğru aşikar pubis eklemi bir 8 mm uzunlamasına bir deri yarığı gerçekleştirmek için bir neşter kullanarak. Daha sonra yara kapanmasını kolaylaştırmak için her iki tarafta derisini kaldırın. </li><li> uzunlamasına ince makasla yayarak stentli üretra tanımlamak için açık açık teşrih. Açıklığı artırmak için ince kendini tutan deri kancaları yerleştirinüretra. </li><li> Gerçekleştirmek bazı yumuşak uzunlamasına üretra ve vajina arasında düzlemi geliştirmek için kavisli bir makas üretraya dorsal kullanarak yayılma. Sonra, açık açık üretra arkasında 4-0 ipek sütür geçmek ve bir cerrahın düğüm çift atış hazırlayın. </li></ol></li><li> Kısmi üretral tıkanıklığı <ol><li> , Angiocatheter kaldırma üretra 0.9 mm&#39;lik bir metal çubuk paralel yerleştirin ve ikinci hala kolayca sonra kayarak ve böylece daha sonra, üretra ve metal çubuk çevresinde bir düğüm sıkın. </li><li> 3 daha çubuk çıkarmadan önce nazik gerginliği kullanarak atış ile düğüm sabitleyin. sütür uzun yaklaşık 3 mm veya tıkanıklık sonradan serbest bırakma deney parçası ise 4 mm biter kesin. </li></ol></li><li> Yara kapatma <ol><li> emilebilen örgülü sütür 4-0 gömülü tek dikişle paraüretral bezleri yaklaşmaktadır. </li><li> Aynı emilebilen SUT kullanarak gömülü yatay yatak dikiş ile cilt kapatınobilyaları. Not: Bir cilt-delici dikiş için emilebilir dikiş kullanmak alışılmamış görünse de, bu tür yara enfeksiyonları gibi komplikasyonlar karşılaşmak yoktu ve bu dikiş alınması önlenebilir. </li></ol></li><li> bakım sonrası <ol><li> Enjekte buprenorfin 0.1 mg / kg deri altından, bir kurtarma kafeste sıçan yerleştirmeden önce. </li><li> Tek Housed fareye ilk 24 saat bazı yumuşak kurtarma diyet sunun. Bu süre geçtikten sonra, prosedür önce olduğu gibi aynı ikili tekrar ev hayvanların daha iyi olması ve aynı bakım grubuna aittir sağladı. </li><li> mesane büyüklüğü ve genel iyi sağlık için günlük sıçanlar kontrol; en azından haftada kendi ağırlığı kaydedin. </li></ol></li></ol> Kadın Farelerde 2. NEMO <ol><li> Hazırlık <ol><li> yaklaşık 18 g ağırlığında dişi C57BL / 6 fare ve aşama 1.1.1 detaylı devam edin. </li><li> 24 ayar ang kullanmak dışında adım 1.1.2 deki gibi detaylı Devamiocatheter. </li></ol></li><li> teşrih <ol><li> üretra deliğine doğru aşikar pubis eklemi 6 mm uzunlamasına cilt insizyonu gerçekleştirmek için bir neşter kullanarak. </li><li> uzunlamasına ince makasla yayarak stentli üretra tanımlamak için açık açık teşrih. benzer künt diseksiyon ile üretra üzerinde ventral çalışan nöro-vasküler demet kaldırın. </li><li> Gerçekleştirmek bazı yumuşak uzunlamasına üretra ve vajina arasında düzlemi geliştirmek için kavisli bir makas üretraya dorsal kullanarak yayılma. Sonra, açık açık üretra arkasında 5-0 emilemeyen örgülü sütür geçmek ve bir cerrahın düğüm çift atış hazırlayın. </li></ol></li><li> Kısmi üretral tıkanıklığı <ol><li> 1 ml şırınga ile angiocatheter bağlayın ve mesane içine, normal tuzlu su, 0.1 mL enjekte edilir. </li><li> üretraya 26 numara bir kanül paralel yerleştirin. angioca geri çekerken yavaşça üretra ve kanül etrafında düğüm sıkıninci. </li><li> 3 daha kanül çıkarmadan önce nazik gerginliği kullanarak atış ile düğüm sabitleyin. </li><li> hayvanın mesane hafif basınç uygulanması üzerine meatusta görünen idrar için test; idrar ifade edemeyen eğer kravat gevşetin. Aksi takdirde, ameliyat dikiş ipliği, yaklaşık 3 mm long uçları kesilmiş. </li></ol></li><li> Yara kapatma <ol><li> 5-0 örgülü emilebilir sütür kullanarak gömülü yatay yatak dikiş ile cilt kapatın. </li></ol></li><li> bakım sonrası <ol><li> Kurtarma kafes içinde fare yerleştirmeden önce 0.1 mg / kg deri altından buprenorfın enjekte edilir. </li><li> Tek Housed fareye ilk 48 saat bazı yumuşak kurtarma diyet sunun. Bu dönemden sonra, işlem öncesi aynı grupta yine ev hayvanları onlar iyi yapıyor ve aynı tedavi grubuna ait koşuluyla. NOT: Aşırı engellendiği ele zaman geçersiz yoktur ve n içinde ölecektir işlemden sonra ele gelen şişmiş mesane 24 saat ile Farelerengelleyici ligature çıkarılması için anestezi altında geri alınmıştır 2 gün sürece 1 - dahili. </li><li> mesane büyüklüğü ve genel iyi sağlık için günlük fareler kontrol; en azından haftada kendi ağırlığı kaydedin. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Storage+and+voiding+symptoms:+pathophysiologic+aspects.">Storage and voiding symptoms: pathophysiologic aspects.</a> Urology. 62 (5), 3-10 (2003).</li><li>Boyle, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+prevalence+of+lower+urinary+tract+symptoms+in+men+and+women+in+four+centres.+The+UrEpik+study.">The prevalence of lower urinary tract symptoms in men and women in four centres. The UrEpik study.</a> BJU Int. 92 (4), 409-414 (2003).</li><li>Coyne, K. S., Wein, A., Nicholson, S., Kvasz, M., Chen, C. I., Milsom, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Economic+burden+of+urgency+urinary+incontinence+in+the+United+States:+a+systematic+review.">Economic burden of urgency urinary incontinence in the United States: a systematic review.</a> J Manag Care Pharm. 20 (2), 130-140 (2014).</li><li>Buttyan, R., Chen, M. W., Levin, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+bladder+outlet+obstruction+and+molecular+insights+into+the+basis+for+the+development+of+bladder+dysfunction.">Animal models of bladder outlet obstruction and molecular insights into the basis for the development of bladder dysfunction.</a> Eur. Urol. 32 (Suppl 1), 32-39 (1997).</li><li>Mattiasson, A., Uvelius, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+contractile+properties+in+hypertrophic+rat+urinary+bladder.">Changes in contractile properties in hypertrophic rat urinary bladder.</a> J Urol. 128 (6), 1340-1342 (1982).</li><li>Chang, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+the+PKC-mediated+signaling+pathway+for+smooth+muscle+contraction+in+obstruction-induced+hypertrophy+of+the+urinary+bladder.">Alteration of the PKC-mediated signaling pathway for smooth muscle contraction in obstruction-induced hypertrophy of the urinary bladder.</a> Lab Invest. 89 (7), 823-832 (2009).</li><li>Moore, J. A., Brading, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+porcine+model+of+bladder+outlet+obstruction+incorporating+radio-telemetered+cystometry.">A porcine model of bladder outlet obstruction incorporating radio-telemetered cystometry.</a> BJU Int. 100 (5), 1192-1193 (2007).</li><li>Beamon, C. R., Mazar, C., Salkini, M. W., Phull, H. S., Comiter, C. V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+sildenafil+citrate+on+bladder+outlet+obstruction:+a+mouse+model.">The effect of sildenafil citrate on bladder outlet obstruction: a mouse model.</a> BJU Inte. 104 (2), 252-256 (2009).</li><li>Pandita, R. K., Fujiwara, M., Alm, P., Andersson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cystometric+evaluation+of+bladder+function+in+non-anesthetized+mice+with+and+without+bladder+outlet+obstruction.">Cystometric evaluation of bladder function in non-anesthetized mice with and without bladder outlet obstruction.</a> J Urol. 164 (4), 1385-1389 (2000).</li><li>Kang, Y. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Early+Sequential+Changes+in+Bladder+Function+after+Partial+Bladder+Outlet+Obstruction+in+Awake+Sprague-Dawley+Rats:+Focus+on+the+Decompensated+Bladder.">Early Sequential Changes in Bladder Function after Partial Bladder Outlet Obstruction in Awake Sprague-Dawley Rats: Focus on the Decompensated Bladder.</a> Korean J Urol. 52 (12), 835-837 (2011).</li><li>Schroeder, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+effect+of+an+oral+endothelin+converting+enzyme+inhibitor+on+rat+detrusor+function+after+outlet+obstruction.">Protective effect of an oral endothelin converting enzyme inhibitor on rat detrusor function after outlet obstruction.</a> J Urol. 172 (3), 1171-1174 (2004).</li><li>Sidler, M., Aitken, K., Jiang, J., Bijos, D., B&#228;gli, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term="sometimes+a+sham+is+just+a+sham"+-+why+the+rodent+model+of+partial+bladder+outlet+obstruction+needs+adjustment.">"sometimes a sham is just a sham" - why the rodent model of partial bladder outlet obstruction needs adjustment.</a> J Urol. 195 (4), e379 (2016).</li><li>Jin, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+detrusor+overactivity+in+rats+after+relief+of+partial+urethral+obstruction.">Persistent detrusor overactivity in rats after relief of partial urethral obstruction.</a> Am. J. Physiol. Regul. Integr. Comp. Physiol. 301 (4), R896-R904 (2011).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Hayvan ölümleri Birçok raporda 10, 11, 13% 15 veya daha fazlasında proksimal üretra de pBOO geleneksel modelin önemli sorunlardan biridir. NEMO dişi sıçanlarda uygulandığında çok az ölüm oranı gibi görünmektedir. Farelerde proksimal üretral tıkanma teknik olarak daha zor sıçanlarda daha ve böylece daha meyilli komplikasyonlar etmektir. Bizim orta üretral yaklaşım için yer tutucu olara...

Kısmi mesane çıkışı tıkanması (pBOO) yüksek oranda bulunur ve şiddetli mesane fonksiyon bozukluğu 1 neden olabilir; tayfı, iyi huylu prostat hiperplazisi için alınan üretral striktür fazla posterior üretral valfleri veya hipospadyas gibi konjenital malformasyonlar, arasında değişmektedir. Erkekler altmış yıldan fazla% 30 ve 2 eski etkileyen ikincisi. Büyük hasta yükü ve pBOO taşıdığı büyük sağlık masrafları artan dış akış direnci 3 cevaben okuyan mesane yeniden koymak önemli araştırma çaba garanti. 2006 yılından itibaren 2015 yılına kadar 220 üzerinde PubMed makaleleri idrar kesesi üzerinde pBOO etkisiyle ilgili yayımlandı endekslendi. PBOO için hayvan modelleri, örneğin sıçan 5, tavşan 6, domuz 7 ve Mous gibi çeşitli türler 4 üzere tasarımlanmış olmakla berabere 8, 9, ancak proksimal üretra kısmi engelleme uygulanan dişi fareler burada en yaygın olarak kullanılan bir hayvan modelidir; Mesane boynuna hayvanların karın erişim, mesanenin exteriorizing ve diseksiyon bu geleneksel proksimal üretral tıkanıklığı tekniği ile kaçınılmazdır. Tıkanıklığı ve hayvan ölüm derecesinde değişkenlik sadece 11 Bu prosedür 10 ile ilişkili endişelerden bazılarını; Biz sahte ameliyat hayvanlarda, idrar yoluna diseksiyon mesane boynu 12, sinir liflerinin kaybı ile ilişkili fizyolojik değişikliklere neden olduğunu göstermiştir. Bu bulgu, bir kadın kemirgenlerde yakın üretra erişmek kapsar en yaygın olarak kullanılan pBOO hayvan modeli, etki, mesane bağlantılı bir yapısal ve işlevsel değişiklikler ile denervasyon hasara yol açtığını, göstermektedirsahte ve tıkalı hayvanlar. Bu nedenle, alternatif bir yaklaşım kaçınarak denervasyon yaralanması ihtiyaç vardı. Bizim laboratuvar geliştirilmiş ve sham ameliyat edilen hayvanlar ameliyat edilmemiş kontrol hayvanları ayırt iken, bu, organ kütlesini ve rezidüel idrar artış olarak mesanede beklenen tıkanıklığı ile uyumlu değişiklikler indüklenmesinde etkili olan bir sinir-koruyucu Orta üretral tıkanıklık (NEMO) yaklaşımı değerlendirildi . Bu diseksiyon seviyesine yakınlığında uzandığına olarak da, çizgili üretral sfinkter bakir kalmıştır. Bundan başka, mesane kütlesi içinde tıkanma ile uyarılmış değişkenlik geleneksel Üretra tıkanıklığında önemli ölçüde daha düşük olduğu ve hayvan ölüm olmamıştır. Bugüne kadar tarif edilmiş fareler için tüm pBOO modelleri 50 yaklaşık% mortalite ile ilişkili ise de başarılı bir tıkanmış hayvanlarda% 10&#39;dan az mortalite ile dişi farelerde NEMO uygulanır. Farelerde pBOO bağlamında mesane yenileme incelenmesi applicabil yararlanacaktırTransgenik modifikasyonların bütün spektrum üretebilir. Kadın kemirgenlerde orta idrar yoluna Kesme geleneksel yakın obstrüksiyon modelinde gözlenen idrar kesesi, istenmeyen ve karıştırıcı yapısal veya fonksiyonel değişiklikler indüklemez. Bununla birlikte, orta üretral düzeyinde bir kısmi engelleme indükleyici hala mesane hipertrofi indükler ve pBOO için bir hayvan modeli beklendiği gibi, artık idrar artmıştır. Önemli olarak, farelerde NEMO performans büyük kemirgenlerde neredeyse kullanılamaz transgenik yöntemlere pBOO mesane biçimlenme soruşturma açar.

<table><tbody><tr><td>Female rat&amp;nbsp;</td><td>Charles-River Canada</td><td>Sprague Dawley Rat (Crl:SD); Strain Code: 400</td><td>about 200 g</td></tr><tr><td>Isoflorane vaporizer</td><td>Benson medical industries inc.</td><td>TEC III Isoflurane; product code: 53-T3ISO&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Isoflorane</td><td>Fresenius Kabi Animal Health</td><td>Isoflorane; product code CP0406V2</td><td>&amp;nbsp;250 mL bottle</td></tr><tr><td>Disposable scalpel</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>#15 Sterile, Stainless Steel Scalpels; catalogue number 549-9-15S</td><td></td></tr><tr><td>Microscopy forceps</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap Microscopy Forceps, Finepoint, 115mm; product number 5443</td><td></td></tr><tr><td>Adson forceps</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Aesculap Adson Dissection Forceps, Curved, 120mm; product number 5002-9</td><td></td></tr><tr><td>Curved surgical scissors</td><td>Ted Pella, Inc.</td><td>Surgical Scissors, Curved, S/S, 105mm; catalogue number 1376</td><td></td></tr><tr><td>0.9 mm inox metal rod</td><td>goodfellow.com</td><td>Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>Skin hooks - self made from inox steel</td><td>goodfellow.com</td><td>Stainless Steel - AISI 316L Wire Diameter:0.9mm; order code 911-684-65</td><td></td></tr><tr><td>4-0 Silk suture</td><td>esutures.com</td><td>4-0 Sofsilk black 98&quot; strand; product number LS640</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Vicry suture</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Vicryl undyed 27&quot; RB-1 taper; product number J213H</td><td></td></tr><tr><td>Needle holder</td><td>Medsupplier.com</td><td>Integra Miltex Carb-N-Sert Baumgartner Needle Holder - 5 1/2&quot;; product code SKU NEE4484-8-40TC&lt;br/&gt; SKU NEE4484-8-40TC&lt;br/&gt; SKU NEE4484-8-40TC&amp;nbsp;</td><td></td></tr><tr><td>Temgesic (Buprenorphine)</td><td>first veterinary supply</td><td>Buprenex 0.3MG/ml inj amps; item #075701</td><td></td></tr><tr><td>1 mL syringe with 27 G needle</td><td>Fisher Scientific</td><td>BD&amp;nbsp;Tuberculin Syringe, BD 309623</td><td></td></tr><tr><td>20 G Angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Andwin Scientific&amp;nbsp;ANGIOCATH 20 GA; Catalog No. NC9561906</td><td></td></tr><tr><td>Recovery diet</td><td>clearh2o</td><td>DietGel 31M; 72-08-5022</td><td></td></tr><tr><td>C57Bl/6 female mice</td><td>Charles-River Canada</td><td>C57BL/6 Mouse (C57BL/6NCrI); Strain Code: 027</td><td>about 18 g</td></tr><tr><td>24 G angiocath</td><td>Fisher Scientific</td><td>Hanna Pharmaceutical Supply Co., Inc.&amp;nbsp;IV CATH ANGIOCATH 24GX3/4IN; Catalog No. NC9814340</td><td></td></tr><tr><td>5-0 Ethibond</td><td>esutures.com</td><td>5-0 Ethibond green 30&quot; RB-1 taper; product number X550H</td><td></td></tr><tr><td>26 G syringe needle</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BD Precisionglide syringe needle, Gauge 26; z192392</td><td></td></tr><tr><td>Normal Saline</td><td>Baxter</td><td>0.9% Sodium Chloride Injection, USP, 100 mL MINI-BAG; product code 2B0043</td><td></td></tr></tbody></table>

nerve-sparing mid-urethral obstruction (nemo) in female small rodents

Kısmi mesane çıkışı tıkanması (pBOO), oldukça yaygın olarak görülen önemli hasta yükünü ve muazzam sağlık maliyetlerini de beraberinde getirmektedir. pBOO içinde mesane yenileme araştırmak için en yaygın hayvan modeli proksimal üretra kısmi tıkanıklık geçiren kadın kemirgenler. tıkanıklığı ve hayvan ölüm derecesindeki Değişkenlik proksimal tıkanıklığı ile önemli sorunlardır. Ayrıca, proksimal üretra ve mesane boynunda kesme mesane inervasyonu tehlikeye atar. Biz geleneksel modelin dezavantajları kaçınarak pBOO için sinir koruyucu orta üretral tıkanma (Nemo) model geliştirdi. Biz laparotomi yanı sıra bu alanda nasıl tedavi edilmesi gerektiği obviated pubis eklemi, sadece alt üretra yaklaştı; Ayrıca, çizgili üretral sfinkter bakir kalmıştır. Bu dişi Sprague-Dawley farelerinde (12 engel, 6 sahte hayvanlar) ve aynı zamanda dişi C57 / BL6 fareleri NEMO gerçekleştirildi (20 tıkanıklığıs, 18 sahte hayvanlar). İki hafta sonra, mesane fonksiyonu, mesane kitlesi ve vücut kitle değerlendirdi. Biz obstructed- veya yapay olarak ameliyat dişi sıçanların arasında hiçbir ölümlerinin vardı; Geleneksel yakın pBOO-yöntemi için tarif edildiği gibi, biz idrar yoluna dikiş bağlı ve bir geçici 0.9 mm delikli metal çubuk yerleştirilir. NEMO iki hafta sonra, mesane kütlesinde% 85&#39;lik bir artışa neden ortalama rezidüel idrar hacmi, sadece 0.03 mL iken plasebo hayvanlarda kısmen tıkanmış sıçanlarda 0.4 ml idi. farelerde, dikiş bağlama biz üretra boyunca yerleştirilmiş kanüller 3 boyutları test edilmiştir. Bir 27-gauge kanül kullanılarak% 50 hayvan üzerinde mortalite sonuçlandığını tespit; artan mesane kütlesinde istenen yanıtı sağlamak değil, 25-gauge bir kanül yerleştirilmesi; 26 numara bir kanül kullanılarak en az bir hayvan ölüm (1/8) henüz mesane kitlesinde önemli bir 2-kat bir artış ile olumlu sonuçlar vermiştir.

Dişi sıçanlarda sinir-koruyucu Orta üretral tıkanması (NEMO) ölümlülük Şu ana kadar 40&#39;ın üzerinde dişi fareler üzerinde bir orta üretral tıkanma gerçekleştirilen ve hiçbir ölümlerinin vardı. mesane kütlesi <p class="jove_content" fo:keep-toge...

Watch this Scientific Journal Video about Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents at JoVE.com

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

kemirgenlerde kısmi mesane çıkışı tıkanıklığı geleneksel modelleme hayvan ölüm ile doludur. Proksimal üretra ve mesane boynuna diseksiyon A denervasyon yaralanması büyük sorun oluşturmaktadır. Biz geleneksel modelin eksiklikleri kaçınarak, gelişmiş ve güvenli ve güvenilir bir orta üretral tıkanma modelini değerlendirdi.

Kadın Küçük Kemirgenler Sinir koruyucu Orta üretral Tıkanıklığı (Nemo)

Partial bladder outlet obstruction (pBOO) has a high prevalence, causes significant patient burden, and immense health care costs. The most common animal ...

nerve-sparing-mid-urethral-obstruction-nemo-in-female-small-rodents

Research

JoVE Journal

Medicine

Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction (NeMO) in Female Small Rodents

9.6K Görüntüleme.  The Hospital for Sick Children.  kemirgenlerde kısmi mesane çıkışı tıkanıklığı geleneksel modelleme hayvan ölüm ile doludur. Proksimal üretra ve mesane boynuna diseksiyon A denervasyon yaralanması büyük sorun oluşturmaktadır. Biz geleneksel modelin eksiklikleri kaçınarak, gelişmiş ve güvenli ve güvenilir bir orta üretral tıkanma modelini değerlendirdi. 

Video: Nerve-sparing Mid-urethral Obstruction NeMO in Female Small Rodents

Transurethral Induction of Mouse Urinary Tract Infection

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on Luria-Bertani (LB) agar at 37&deg;C in ambient air. UPEC strains grow as yellowish-white translucent colonies on LB agar. Following confirmation of appropriate colony morphology, single colonies are then picked to be cultured in broth. LB broth can be used for most uropathogenic bacterial strains. Two serial, overnight LB broth cultures can be employed to enhance expression of type I pili, a well-defined virulence factor for uropathogenic bacteria. Broth cultures are diluted to the desired concentration in phosphate buffered saline (PBS). Eight to 12 week old female mice are placed under isoflurane anesthesia and transurethrally inoculated with bacteria using polyethylene tubing-covered 30 gauge syringes. Typical inocula, which must be empirically determined for each bacterial/mouse strain combination, are 106 to 108 cfu per mouse in 10 to 50 microliters of PBS. After the desired infection period (one day to several weeks), urine samples and the bladder and both kidneys are harvested. Each organ is minced, placed in PBS, and homogenized in a Blue Bullet homogenizer. Urine and tissue homogenates are serially diluted in PBS and cultured on appropriate agar. The following day, colony forming units are counted.

This video will demonstrate methods to transurethrally induce mouse urinary tract infections and quantify the extent of resulting infections.

Transüretral İndüksiyon Fare İdrar Yolu Enfeksiyonu

Uropathogenic bacterial strains of interest are grown on agar. Generally, uropathogenic E. coli (UPEC) and other strains can be grown overnight on ...

İmmünoloji ve Enfeksiyon

The Use of Cystometry in Small Rodents: A Study of Bladder Chemosensation

The lower urinary tract (LUT) functions as a dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a convenient time. While storing urine, however, the bladder is exposed for prolonged periods to waste products. By acting as a tight barrier, the epithelial lining of the LUT, the urothelium, avoids re-absorption of harmful substances. Moreover, noxious chemicals stimulate the bladder's nociceptive innervation and initiate voiding contractions that expel the bladder's contents. Interestingly, the bladder's sensitivity to noxious chemicals has been used successfully in clinical practice, by intravesically infusing the TRPV1 agonist capsaicin to treat neurogenic bladder overactivity1. This underscores the advantage of viewing the bladder as a chemosensory organ and prompts for further clinical research. However, ethical issues severely limit the possibilities to perform, in human subjects, the invasive measurements that are necessary to unravel the molecular bases of LUT clinical pharmacology. A way to overcome this limitation is the use of several animal models2. Here we describe the implementation of cystometry in mice and rats, a technique that allows measuring the intravesical pressure in conditions of controlled bladder perfusion.
	After laparotomy, a catheter is implanted in the bladder dome and tunneled subcutaneously to the interscapular region. Then the bladder can be filled at a controlled rate, while the urethra is left free for micturition. During the repetitive cycles of filling and voiding, intravesical pressure can be measured via the implanted catheter. As such, the pressure changes can be quantified and analyzed. Moreover, simultaneous measurement of the voided volume allows distinguishing voiding contractions from non-voiding contractions3.
	Importantly, due to the differences in micturition control between rodents and humans, cystometric measurements in these animals have only limited translational value4. Nevertheless, they are quite instrumental in the study of bladder pathophysiology and pharmacology in experimental pre-clinical settings. Recent research using this technique has revealed the key role of novel molecular players in the mechano- and chemo-sensory properties of the bladder.

Cystometry is an efficient technique to measure bladder function of small animals in vivo. The bladder is continuously infused at rates controlled through an intravesical catheter, whereas the urethra is left free for micturition. This allows for repetitive filling and emptying of the bladder, while intravesical pressure and voided volume are recorded.

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

	The lower urinary tract (LUT) functions as a  dynamic reservoir that is able to store urine and to efficiently expel it at a  convenient time. While ...

Tıp

Urinary Tract Infection in a Small Animal Model: Transurethral Catheterization of Male and Female Mice

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, which accurately reflect disease establishment and progression, permit dissection of host-pathogen interactions and generation of immunity to infection. In mice, intravesical instillation of uropathogenic E. coli, the causative agent in more than 85% of community acquired UTI, recapitulates many of the stages of infection observed in humans. Until recently, however, UTI could only be modeled in female animals. This limitation has hindered the study of sex-related differences in UTI, as well as other bladder pathologies, such as cancer. Here, we describe a method to instill male mice that allows direct comparison between female and male animals and provide a detailed protocol to assess bladder tissue by flow cytometry as a means to better understand host responses to infection. Together, these approaches will aid in the identification of host factors that contribute to sex biases observed in UTI and other bladder-associated diseases.

The established model of transurethral catheterization of mice allows the study of bladder pathologies, including urinary tract infection, but can only be performed in females. A new model of male transurethral instillation, presented here, will enable research in an area marked by strong clinical and epidemiological differences between the sexes.

İdrar yolu enfeksiyonu küçük bir hayvan modeli: erkek ve dişi farelerin transüretral Kateterizasyon

Urinary tract infections (UTI) are extremely common worldwide, incurring significant morbidity and healthcare-associated expenses. Small animal models, ...

A Murine Model of Irreversible and Reversible Unilateral Ureteric Obstruction

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive nephropathy induced by unilateral ureteric obstruction (UUO), which can either be irreversible (UUO) or reversible (R-UUO). In the irreversible UUO model, the ureter may be obstructed for variable periods of time in order to induce increasingly severe renal inflammation and interstitial fibrotic scarring. In the reversible R-UUO model the ureter is obstructed to induce hydronephrosis, tubular dilation and inflammation. After a suitable period of time the ureteric obstruction is then surgically reversed by anastomosis of the severed previously obstructed ureter to the bladder in order to allow complete decompression of the kidney and restoration of urinary flow to the bladder. The irreversible UUO model has been used to investigate various aspects of renal inflammation and scarring including the pathogenesis of disease and the testing of potential anti-inflammatory or anti-fibrotic therapies. The more challenging model of R-UUO has been used by some investigators and does offer significant research potential as it allows the study of inflammatory and immune processes and tissue remodeling in an injured and scarred kidney following the removal of the injurious stimulus. As a result, the R-UUO model offers investigators the opportunity to explore the resolution of kidney inflammation together with key aspects of tissue repair. These experimental models are of relevance to human disease as patients often present with obstruction of the renal tract that requires decompression and are commonly left with significant residual kidney impairment that has no current treatment options and may lead to eventual end stage kidney failure.

The murine model of irreversible unilateral ureteric obstruction (UUO) is presented together with the model of reversible UUO in which the ureteric obstruction is relieved by anastomosis of the severed ureter into the bladder. These models enable the study of renal inflammation and scarring as well as tissue remodeling.

Geri dönüşümsüz ve Tersinir Tek taraflı Üreterik Obstrüksiyon bir fare modeli

Obstruction of the kidney may affect native or transplanted kidneys and results in kidney injury and scarring. Presented here is a model of obstructive ...

In Vivo Luminal Measurement of Distension-Evoked Urothelial ATP Release in Rodents

ATP, released from the urothelium in response to bladder distension, is thought to play a significant sensory role in the control of micturition. Therefore, accurate measurement of urothelial ATP release in a physiological setting is an important first step in studying the mechanisms that control purinergic signaling in the urinary bladder. Existing techniques to study mechanically evoked urothelial ATP release utilize cultured cells plated on flexible supports or bladder tissue pinned into Ussing chambers; however, each of these techniques does not fully emulate conditions in the intact bladder. Therefore, an experimental setup was developed to directly measure ATP concentrations in the lumen of the rodent urinary bladder.
In this setup, the bladders of anesthetized rodents are perfused through catheters in both the dome of the bladder and via the external urethral orifice. Pressure in the bladder is increased by capping the urethral catheter while perfusing sterile fluid into the bladder through the dome. Measurement of intravesical pressure is achieved using a pressure transducer attached to the bladder dome catheter, akin to the setup used for cystometry. Once the desired pressure is reached, the urethral catheter's cap is removed, and fluid collected for ATP quantification by luciferin-luciferase assay. Through this experimental setup, the mechanisms controlling both mechanical and chemical stimulation of urothelial ATP release can be interrogated by including various agonists or antagonists into the perfusate or by comparing results between wildtype and genetically modified animals.

In Vivo Luminal Measurement of Distension-Evoked Urothelial ATP Release in Rodents

This protocol describes the procedure for measuring ATP concentrations in the lumen of the bladder in an anesthetized rodent.

İn Vivo Kemirgenlerde Distansiyon Uyarılmış Ürotelyal ATP Salınımının Luminal Ölçümü

ATP, released from the urothelium in response to bladder distension, is thought to play a significant sensory role in the control of micturition. ...

Development of a Uterosacral Ligament Suspension Rat Model

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately 10%-20% of women undergo pelvic floor repair surgery to treat prolapse in the United States. PFD cases result in an overall $26.3 billion annual cost in the United States alone. This multifactorial condition has a negative impact on the quality of life and yet the treatment options have only dwindled in the recent past. One common surgical option is uterosacral ligament suspension (USLS), which is typically performed by affixing the vaginal vault to the uterosacral ligament in the pelvis. This repair has a lower incidence of complications compared to those with mesh augmentation, but is notable for a relatively high failure rate of up to 40%. Considering the lack of standard animal models to study pelvic floor dysfunction, there is an urgent clinical need for innovation in this field with a focus on developing cost-effective and accessible animal models. In this manuscript, we describe a rat model of USLS involving a complete hysterectomy followed by fixation of the remaining vaginal vault to the uterosacral ligament. The goal of this model is to mimic the procedure performed on women to be able to use the model to then investigate reparative strategies that improve the mechanical integrity of the ligament attachment. Importantly, we also describe the development of an in situ tensile testing procedure to characterize interface integrity at chosen time points following surgical intervention. Overall, this model will be a useful tool for future studies that investigate treatment options for POP repair via USLS.

Pelvic organ prolapse affects millions of women worldwide and yet some common surgical interventions have failure rates as high as 40%. The lack of standard animal models to investigate this condition impedes progress. We propose the following protocol as a model for uterosacral ligament suspension and in vivo tensile testing.

Uterosakral Ligament Süspansiyon Sıçan Modelinin Geliştirilmesi

Pelvic organ prolapse (POP) is a common pelvic floor disorder (PFD) with the potential to significantly impact a woman's quality of life. Approximately ...

Urethral Stricture Induction Followed by Buccal Mucosa Graft Urethroplasty in a Rat Model

Urethral reconstruction is an important area of expertise for urologists. The buccal mucosa is considered the best option when urethral grafting is necessary, although in some cases, it is inappropriate or needs to be optimized to repair a given stricture. Therefore, developing innovative procedures and evaluating their putative success in experimental models is crucial to fit the clinical need. With this goal, this study describes a protocol in which urethral stricture was induced by electrocautery in Wistar rats. Urethral reconstruction was performed 1 week later with a buccal mucosa graft, harvested from the lower lip, and placed in a ventral onlay fashion. A retrograde urethrogram showed a significant improvement in urethral diameter after urethroplasty compared to the respective value after stricture induction. Additionally, the graft placement was assessed by blood perfusion analysis using laser Doppler. As expected, a dark blue area corresponded to the non-vascularized buccal mucosa graft. This procedure can successfully simulate the normal pathophysiological process of urethral injury and tissue modulation, as well as urethral reconstruction using a buccal mucosa graft in a reproducible manner, and serve as the basis for future research based on tissue engineering or urethral grafts.

In the present protocol, a urethral stricture induction was developed in Wistar rats, followed by urethral reconstruction with a buccal mucosa graft. A retrograde urethrogram and laser Doppler assessment were performed, validating urethral reconstruction (after stricture formation) and graft placement.

Üretra darlığı indüksiyonunu takiben sıçan modelinde bukkal mukoza greft üretroplastisi

Urethral reconstruction is an important area of expertise for urologists. The buccal mucosa is considered the best option when urethral grafting is ...

<meta charset="utf8"></head><body>Üretra Darlığı için Verimli Sıçan Modeli: Elektrikli Bıçak Yöntemi

Iatrogenic Injury Recapitulated: Electroexcision Technique for Urethral Stricture Modeling in Rats

Urethral stricture (US) is a common clinical condition in urology, characterized by high prevalence and morbidity across all ages. Current treatments for US, such as urethral dilatation and internal urethrotomy, fail to fully resolve the condition and are associated with high rates of recurrence and complications. 
Additionally, the pathogenesis of US is not well understood. To explore the pathogenesis of US and develop new therapeutic strategies, it is crucial to establish a standardized rat model that accurately reflects the clinical manifestations. This study outlines a straightforward and repeatable method for inducing US in rats using a high-frequency electric knife. The method involves making a longitudinal incision with the electric knife set to a unipolar mixed cutting mode at 4 W, which inflicts significant urethral damage. Histopathological analysis shows thickening of the urothelium, inflammatory infiltration, and disorganized collagen fibers. This model effectively replicates iatrogenic injury through electroexcision in the rat urethra. In summary, this study successfully establishes a new, efficient, and stable rat model of US that closely mimics the clinical scenario, providing a valuable tool for further research into the mechanisms and novel treatments for US.

<meta charset="utf8"></head><body>İyatrojenik Yaralanma Özetlendi: Sıçanlarda Üretra Darlığı Modellemesi için Elektroeksizyon Tekniği

In this study, we present a novel, efficient, and stable rat model of urethral stricture created through electroexcision of the rat urethra, which effectively simulates iatrogenic injury observed in clinical settings.

İyatrojenik Yaralanma Özetlendi: Sıçanlarda Üretra Darlığı Modellemesi için Elektroeksizyon Tekniği

Urethral stricture (US) is a common clinical condition in urology, characterized by high prevalence and morbidity across all ages. Current treatments for ...

Kadın Küçük Kemirgenler Sinir koruyucu Orta üretral Tıkanıklığı (Nemo)

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Transüretral İndüksiyon Fare İdrar Yolu Enfeksiyonu

Küçük Kemirgenler sistometri ve Kullanımı: Mesane Chemosensation Çalışması

İdrar yolu enfeksiyonu küçük bir hayvan modeli: erkek ve dişi farelerin transüretral Kateterizasyon

Geri dönüşümsüz ve Tersinir Tek taraflı Üreterik Obstrüksiyon bir fare modeli

İn Vivo Kemirgenlerde Distansiyon Uyarılmış Ürotelyal ATP Salınımının Luminal Ölçümü

Uterosakral Ligament Süspansiyon Sıçan Modelinin Geliştirilmesi

Üretra darlığı indüksiyonunu takiben sıçan modelinde bukkal mukoza greft üretroplastisi

İyatrojenik Yaralanma Özetlendi: Sıçanlarda Üretra Darlığı Modellemesi için Elektroeksizyon Tekniği

İyatrojenik Yaralanma Özetlendi: Sıçanlarda Üretra Darlığı Modellemesi için Elektroeksizyon Tekniği

İyatrojenik Yaralanma Özetlendi: Sıçanlarda Üretra Darlığı Modellemesi için Elektroeksizyon Tekniği