Bu protokol, organizma fizyolojisi hakkında erişilebilir ve standartlaştırılmış bir şekilde veri toplamanın son derece düşük maliyetli bir yöntemidir. Bu araç fizyolojiyi çeşitli seviyelerde keşfetmek için kullanılabilir. Cesur alan biyologlarının yanı sıra küçük okul çocukları tarafından da kullanılabilir.
Bu tekniğin ana avantajı, hazır malzemelere dayanmış olması ve çok düşük maliyetli olmasıdır. Neredeyse her yerde ve bir dizi uzmanlık ve hedefle araştırmacılar tarafından gerçekleştirilebilir. Bu yöntem fizyolojik, davranışsal ve ekolojik süreçler hakkında fikir verebilir.
Fizyolojik bir yanıt vermek için temel ölçümler standartlaştırıldıkça, yöntem bireyler, türler ve ekolojik topluluklar arasında temel özellikleri anlama ve karşılaştırma yeteneğimizi artırabilir. Böcekleri zarar vermeden işlemek pratik gerektirir, ancak uygulama mükemmel hale getirir. Deneyinizin parametrelerini tanımlamak, Böcekleri buzlu suda ne kadar süre tutacağınız gibi, zaman alabilir ve odak taksonunuzun deneyini ve anlaşılmasını gerektirir.
Prosedürü benimle birlikte gösterecek olan Heather Rohrer ve Matt Standridge, Daniel'ın laboratuvarından iki teknisyen. Her grubun soğuk komaya neden olmak için gereken sürede farklılık göstereceğini akılda tutarak, ilgi türlerini tanımlamakla başlayın. Organizmaya ve verilerin kullanımına bağlı olarak, odak birey uçmazsa deney için farklı kesme noktaları seçin.
Soğuk komaya neden olmak için buzda gereken süre gibi temel parametreleri belirlemek için küçük bir numune üzerinde bir ön yargılama gerçekleştirin. Türlerin ekolojisini temel alan bir kesme süresi seçin. Uçuştan aciz birkaç dakika sonra, bazı böceklerin avcılar tarafından alındığını unutmayın.
Yemlenmiş tuzaklar ve entomolojik ağlar gibi uygun yöntemleri kullanarak böcekleri toplayın. Her bireyi benzersiz bir kimlik içeren ayrı bir cam zarfa yerleştirin ve hayvanları doğrudan güneş, rüzgar ve avcılardan korunan gölgeli serin bir yerde saklayın. Bu zamanı denemeler boyunca mümkün olduğunca standartlaştırmak için hayvanı yakalandıktan sonraki 24 saat içinde her zaman deneysel tedaviye maruz bırakın.
Bir soğutucuyu su ve sudaki ortamı sıfır santigrat derecede korumak için yeterli buzla doldurun. Her bireyin tanımlanabilir olduğundan emin olarak bir tur deneme için bir ila dört odak kişi arasında seçim yapın. Birden fazla tür kullanırken, karışıklığı önlemek için her birinden yalnızca birini kullanın.
Deney kanat renklendirmesi ile ilgili değilse, kanatları bireyleri ayırt etmek için ince bir keçe uçlu işaretleyici ile benzersiz kimliklerle işaretleyin. Deneyler yukarıdaki kriterlerin hiçbirini karşılamazsa, deneyi aynı anda bir kişi üzerinde gerçekleştirin. Veri sayfası satırlarını, notlarda benzersiz kimlikleri ve yararlı bir tanımlayıcı da dahil olmak üzere test edilen her böcek hakkındaki bilgilerle doldurun.
Tüm odak bireylerini bir ağırlıkla kapalı bir plastik torbaya yerleştirin ve soğuk komaya neden olmak için torbayı 60 dakika buzlu suya yerleştirin. Ortam sıcaklığını kısa aralıklarla elle kaydetmek için basit bir termometre kullanın. Varsa, ortam koşullarını bir veri kaydedici kullanarak kaydedebilirsiniz.
İlk olarak, veri kaydediciyi bağlayın, cihaza gidin, Tamam'ı tıklatarak ekli cihazı başlatın ve seçin. Deneme adını girin, Sıcaklık ve Işık Yoğunluğu'na basın ve birimleri girin. Günlük aralığını 10 saniye olarak ayarlayın.
Denemenin tarih ve saatini girin ve veri günlükçüserini seçilen saatte başlatmak için Gecikmeli Başlangıç'ı seçin. Ortam koşullarındaki verilerin daha sonra her bir odak böceğiyle eşleştirilebilmesi için günün saati de dahil olmak üzere veri kaydedici bilgilerinin denemelerle eşitlendiğinden emin olun. Kurtarmanın gölgede mi yoksa güneşte mi gerçekleşeceği gibi deneysel parametrelere karar verin ve bu tedavileri veri sayfasında not edin.
Böcekler için uygun bir yere bir kafes yerleştirin, böylece sıcaklık ve ışık ortamları kafes içinde homojendir. Kafesin tabanını yüksek tutun, böylece gözlemci tarafından dokunabilir ve veri kaydediciyi kafesin hemen dışına veya içine rahatsız edilmeden tutulabileceği şekilde yerleştirin. Hayvanları 60 dakika sonra buzlu su banyosundan çıkarın ve böcekleri plastik torbadan hemen çıkarın, ardından her bireyi minimum kullanımla hızlı bir şekilde zarfından çıkarın ve hayvanlar kafes kafesine girer girmez kronometreyi başlatın.
Kafesin tabanına, iyileşen böcekleri bir yanıta neden olmadan tedirgin etmek için sık sık ve güçlü bir şekilde bir kalemle dokunun. Bir birey uçtuktan sonra denemeyi tamamlandı olarak işaretleyin. Denemeyi sonlandırın ve 30 dakika sonra hareket etmediyse böceğin iyileşmediğini düşünün.
Böcekleri kafes kafesinden çıkarın ve bireyleri etiketli cam zarflarına geri yerleştirin. Hayvanları özgürleştirmek veya daha fazla veri toplama için saklamak ve metin el yazmasında açıklandığı gibi verileri işlemek. Kaydedilen çevresel verilere erişmek için HOBO veri kaydedicisini bilgisayara geri takın.
Aygıt okumasına gidin, Günlüğü Durdur'u seçin ve dosyaları istediğiniz klasöre HOBO dosyaları olarak kaydedin. Bir açılır pencere görüntülendikten sonra, parametrelerin birimlerini onaylayın ve deneysel koşullar için bir grafik elde etmek için Çiz'i seçin. Veri tablosunu vermek için Dosya Tablo Verilerini Ver'i seçin ve uygun klasöre kaydetmek üzere CSV dosyası olarak verin.
Bu protokolde, değişken kelebek türleri için organizma fizyolojisi için önemli olan ortam koşulları ile soğuk şok iyileşmesi arasındaki etkileşim araştırıldı. Ortalama deneme sıcaklığı arttıkça, soğuk şok iyileşme süresinin taxa genelinde değişkenlik göstererek azaldığı gözlendi. Benzer şekilde, denemenin ortalama ışık yoğunluğu ile soğuk şok iyileşme süresi arasındaki ters ilişki gözlendi, bu da hem sıcaklık hem de ışık koşullarının kelebeklerin iyileşmesine katkıda bulunduğunu gösterdi.
Beş ay boyunca üç gözlemci tarafından toplanan 181 vahşi kelebek türü, soğuk şokun neden olduğu soğuk komadan belirgin bir iyileşme gösterdi ve bu deneyin başarıyla uygulanabileceği taksonomik genişliği vurguladı. Ortam saha koşulları ve deneysel koşullar çizilerek, ortam koşulları altında fizyoloji testlerinin yapılmasının ekolojik yeterliliğini göstermiştir. Bu protokolü gerçekleştirirken, davranış değişiklikleri ince olabileceğinden ve hızlı bir şekilde gerçekleşebileceğinden, kafes kafesteki tüm bireylere çok dikkat ettiğinizden emin olun.
Bu protokol tarafından oluşturulan veriler, test edilen organizmaların eko fizyolojik özelliklerine ışık tutmaktadır. Boyut, renk ve filogeni gibi diğer birçok özellik organizma fizyolojisine katkıda bulunur. Ek özelliklere ilişkin veriler, bu bilgilerin ekolojik ve yaşam tarihi bağlamını ekleyerek soğuk şok kurtarma önlemlerini daha fazla açıklayacak ve bağlamsallaştıracaktır.
Kolombiya AndEs'teki tüm kelebek topluluklarının eko fizyolojisini karakterize etmek için bu yöntemi kullandım. Protokol erişilebilir, ucuz ve kırsal ortamlarda uygulanacak kadar basit olduğu için kısa sürede yüzlerce kişi hakkında veri toplandı.
