이 프로토콜은 유기체 생리학에 대한 데이터를 접근 가능하고 표준화된 방식으로 수집하는 매우 저렴한 방법입니다. 이 도구는 여러 수준에서 생리학을 탐구하는 데 사용할 수 있습니다. 그것은 용감한 필드 생물학자뿐만 아니라 어린 학교 아이들에 의해 고용 될 수있다.
이 기술의 주요 장점은 쉽게 사용할 수있는 재료에 의존하고 매우 저렴한 비용이라는 것입니다. 그것은 거의 모든 곳에서 그리고 전문 지식과 목표의 범위를 가진 연구원에 의해 수행 될 수 있습니다. 이 방법은 생리학, 행동 및 생태 학적 과정에 대한 통찰력을 제공 할 수 있습니다.
생리적 반응을 유도하기 위한 주요 지표가 표준화됨에 따라 이 방법은 개인, 종 및 생태 공동체 그룹 전반에 걸친 주요 특성을 이해하고 비교할 수 있는 능력을 증가시킬 수 있습니다. 곤충을 손상시키지 않고 처리하는 것은 연습이 필요하지만 연습은 완벽합니다. 실험의 매개 변수를 정의, 얼음 물에 곤충을 유지하는 데 걸리는 시간과 마찬가지로, 시간이 걸릴 수 있으며, 그것은 당신의 초점 택시의 실험과 이해가 필요합니다.
저와 함께 절차를 시연하는 것은 다니엘의 실험실에서 온 두 명의 기술자인 헤더 로어와 맷 스탠드리지입니다. 관심있는 종을 식별하는 것으로 시작, 각 그룹은 차가운 혼수 상태를 유도하는 데 걸리는 시간에 다를 것이라는 점을 명심. 유기체 및 데이터의 사용에 기초하여, 초점 개인이 비행하지 않는 경우 실험에 대한 다른 차단 점을 선택합니다.
작은 샘플에서 예심을 수행하여 얼음에 필요한 시간과 같은 주요 매개 변수를 결정하여 차가운 혼수 상태를 유도합니다. 종의 생태에 따라 컷오프 시간을 선택합니다. 비행이 불가능한 지 몇 분 후에 일부 곤충은 포식자에 의해 촬영된다는 것을 명심하십시오.
미끼 트랩과 곤충 그물과 같은 적절한 방법을 사용하여 곤충을 수집합니다. 각 개인을 고유한 ID가 있는 별도의 유리 봉투에 넣고 직접 태양, 바람 및 육식 동물로부터 보호되는 그늘진 시원한 장소에 동물을 보관하십시오. 항상 실험 전반에 걸쳐 가능한 한이 시간을 표준화하기 위해 캡처 된 24 시간 이내에 실험 치료에 동물을 노출.
물과 충분한 얼음으로 쿨러를 채우고 0°C의 물 속에서 환경을 유지합니다. 각 개인이 식별 할 수 있는지 확인하기 위해 실험의 라운드를 위해 1 ~ 4 개의 초점 개인 사이에서 선택합니다. 여러 종을 사용하는 경우 혼동을 피하기 위해 각각 하나만 사용하십시오.
실험이 날개 색채와 관련이 없는 경우, 개인을 구별하기 위해 미세펠트 팁 마커로 날개를 독특한 색상으로 표시합니다. 실험이 위의 기준을 충족하지 않으면 한 번에 한 개인에 대한 실험을 수행합니다. 노트에 고유한 ID와 유용한 식별자를 포함하여 분석된 각 곤충에 대한 정보와 데이터 시트행을 채웁니다.
모든 초점 대상인을 밀폐된 비닐 봉지에 넣고 가방을 얼음물에 60분 간 넣어 차가운 혼수 상태를 유도합니다. 간단한 온도계를 사용하여 짧은 간격으로 주변 온도를 간단히 기록합니다. 사용 가능한 경우 데이터 로거를 사용하여 주변 조건을 기록할 수 있습니다.
먼저 데이터 로거를 연결하고 장치로 이동하여 Okay를 클릭하여 연결된 장치를 실행및 선택합니다. 평가판 이름을 입력하고 온도 및 광 강도를 선택하고 단위를 입력합니다. 로깅 간격을 10초로 설정합니다.
실험 날짜와 시간을 입력하고 지연 된 시작을 선택하여 선택한 시간에 데이터 로거를 시작합니다. 하루 중 시간을 포함한 데이터 로거 정보가 실험과 동기화되어 주변 조건에 대한 데이터가 나중에 각 개별 초점 곤충과 일치할 수 있도록 합니다. 복구가 그늘이나 태양에서 이루어질지 여부와 같은 실험 매개 변수를 결정하고 데이터 시트에 이러한 처리를 기록하십시오.
온도와 조명 환경이 케이지 내에서 균일할 수 있도록 적절한 위치에 곤충을 위한 메쉬 케이지를 배치합니다. 케이지의 베이스를 높이 유지하여 관찰자가 탭하고 데이터 로거를 케이지 바깥이나 케이지 내부에 배치하여 방해받지 않고 보관할 수 있습니다. 60분 후에 얼음 수조에서 동물을 제거하고 즉시 비닐 봉지에서 곤충을 제거한 다음, 최소한의 취급으로 봉투에서 각 개인을 신속하게 제거하고 동물이 메쉬 케이지에 있는 즉시 스톱워치를 시작합니다.
연필로 케이지의 베이스를 자주 누르고 충분히 강하게 반응하지 않고 복구 곤충을 교반할 수 있습니다. 개인이 비행한 후 재판을 완료한 것으로 표시합니다. 시험을 끝내고 30 분 후에 움직이지 않으면 곤충이 회복되지 않은 것으로 간주하십시오.
메쉬 케이지에서 곤충을 제거하고 개인을 라벨이 붙은 유리 봉투에 다시 넣습니다. 동물을 해방하거나 추가 데이터 수집을 위해 동물을 유지하고 텍스트 원고에 설명된 대로 데이터를 처리합니다. 기록된 환경 데이터에 액세스하려면 HOBO 데이터 로거를 다시 컴퓨터에 연결합니다.
장치 판독값으로 이동하여 로깅 중지를 선택하고 원하는 폴더에 HOBO 파일로 파일을 저장합니다. 팝업이 표시된 후 매개 변수의 단위를 확인하고 플롯을 선택하여 실험 조건에 대한 그래프를 얻습니다. 데이터 테이블을 내보내려면 파일 내보내기 테이블 데이터를 선택하고 CSV 파일로 내보내 적절한 폴더에 저장합니다.
이 프로토콜에서, 유기체 생리학및 감기 충격 복구에 중요한 주변 조건 사이 상호 작용은 나비의 가변 종을 위해 탐구되었습니다. 시험의 평균 온도가 증가함에 따라, 감기 충격 회복 시간이 감소하면 택시 전반에 걸쳐 변동성이 나타나는 것으로 관찰되었습니다. 마찬가지로, 시험의 평균 광강도와 냉충격 회복시간 사이의 역관계가 관찰되었으며, 이는 온도와 빛 조건이 모두 나비의 회복에 기여한다는 것을 나타낸다.
5개월 동안 3명의 관찰자가 수집한 181종의 야생종은 차가운 충격에 의해 유도된 차가운 혼수상태에 의해 뚜렷한 회복을 보였으며, 이 실험이 성공적으로 적용될 수 있는 분류학폭을 강조했습니다. 주변 현장 조건과 실험 조건은 주변 조건에서 생리학 조사를 수행하는 생태학적 관련성을 입증하여 플롯되었습니다. 이 프로토콜을 수행할 때는 동작의 변화가 미묘하고 신속하게 발생할 수 있기 때문에 메시 케이지의 모든 개인에게 주의를 기울여야 합니다.
이 프로토콜에 의해 생성된 데이터는 시험된 유기체의 생태 생리적 특성에 빛을 비추습니다. 다른 많은 특성은 크기, 색상 및 물리 학과 같은 유기 생리학에 기여합니다. 추가 특성에 대한 데이터는 이 정보의 생태학적 및 생명 역사 맥락을 더해 차가운 충격 회복의 측정을 더 설명하고 맥락화할 것입니다.
나는 콜롬비아 안데스에서 나비의 전체 지역 사회의 생태 생리학을 특성화하기 위해이 방법을 사용했습니다. 프로토콜은 시골 환경에서 구현할 수 있을 만큼 접근 가능하고 저렴하며 간단하기 때문에 단기간에 수백 명의 개인에 대한 데이터가 수집되었습니다.
