Bu protokol, dolaşım ölümünden sonra büyük bir hayvan bağış modelini ve ardından klinik kalp transplantasyonunu tam olarak taklit eden torakoabdominal normotermik bölgesel perfüzyonu tanımlamaktadır. Bu, translasyonel araştırmalarda potansiyel stratejileri değerlendirmek için kullanılabilir. Bu protokolün en büyük avantajı, yaban domuzu ve insan kalbi arasındaki anatomik ve cerrahi tekniklerin benzerlikleri göz önüne alındığında, kalp nakli için uygun bir preklinik model sağlamasıdır.
Orta servikal bölgeden ksifoid'e kadar anestezi uygulanan bir hayvanda orta hat insizyonu yapmak için bir koter kalemi kullanarak başlayın. Daha sonra, peristernuma ulaşmak için elektrokoter kullanarak deri altı yağını, katman katman orta hat boyunca bölün. Sternal çentiğin etrafını kestikten sonra, yumuşak dokuları sternumun altından geri çekmek ve süpürmek için bir parmağınızı kullanın.
Sternumu bir kemik testeresi ile açın, sternumun tamamen bölündüğünden emin olun, sternal kemiğin üst kısmının altındaki damara dikkat edin. Daha sonra, sternumu koterize edin veya yeterli hemostazı sağlamak için kemik mumu uygulayın. Daha sonra, elektrokoter kullanarak, perikarddan kaldırarak timusu diseke edin ve çıkarın ve kanamayı önlemek için timusu aorttan ve superior vena kavadan besleyen damarları koterize edin.
Perikadı koter ile dikkatlice kesin. Keserken, kalbe zarar gelmesini önlemek için parmaklarınızı perikardın altına yerleştirin. Daha sonra, sistemik antikoagülasyon elde etmek için kilogram heparin başına 300 ünite intravenöz olarak uygulayın.
Test mevcutsa, aktif pıhtılaşma süresinin 300 saniyeden fazla olduğundan emin olun. İntravenöz olarak kilogram propofol başına üç miligramlık bir bolus uygulayın. Ardından, mekanik ventilasyonu durdurun ve endotrakeal tüpün bağlantısını kesin.
Arteriyel basıncı ve periferik oksijen doygunluğunu izleyin. Sistolik basınç 50 milimetre cıvadan az olduğunda, fonksiyonel sıcak iskemi zamanına başlayın. Asistol olduğunda ve arteriyel pulsatilite olmadığında dolaşım durması oluşturun.
Yaşamı sürdüren tedavilerin kesilmesinden ve ölümün doğrulanmasından sonra, sağ ventrikül çıkış yolu aşağıya, pulmoner arteri sola ve aortu sağa doğru geri çekin. Daha sonra, koter kullanarak aort pulmoner boşluğunu dikkatlice diseke edin. Serebral perfüzyonu önlemek ve dışlamak için supraaortik damarların üzerine büyük bir çapraz kelepçe uygulayın.
Daha sonra, Metzenbaum ve dik açılı forsepsleri kullanarak, superior vena kava ile innominate arter arasında ve inferior vena kava ve perikard arasında hassas bir şekilde diseke edin. Ve üst ve alt vena kava'yı bir göbek bandı veya basit bir sıfır ipek sütür kullanarak daire içine alın ve bir turnike ile sabitleyin. 3-0'lık bir sütür kullanarak, distal yükselen aort adventitisi üzerine iki konsantrik çanta ipi sütürü yerleştirin ve tam kat dikişlerden kaçının.
Ardından, tüm dikişleri turnike ile sabitlemeden önce sağ atriyuma bir çanta ipi sütürü yerleştirin. Daha sonra, normotermik bölgesel perfüzyon sistemini kurun ve hazırlayın. Daha sonra, 17 ila 21 Fransız arteriyel kanülü kullanarak aortu kanüle edin ve turnikeyi sıkarak, çanta ipi sütürünü tutarak yerine sabitleyin.
Sağ atriyumdaki çanta ipinin merkezinde beş milimetrelik bir kesi oluşturun ve dik açı veya çıtçıt gibi küçük açılı bir alet kullanarak genişletin. Aşırı kanamayı önlemek için kesiyi parmağınızla örtün. Daha sonra, sağ atriyumu kanüle etmek için çift aşamalı bir venöz kanül kullanın.
Ardından, bir turnike kullanarak kese ipi dikişlerini sıkarak kanülü sabitleyin. Kanülleri, normotermik bölgesel perfüzyon devresinin venöz hattına, sekiz inçten fazla bir konektörün üzerinde yarım ila üç konektör kullanarak bağlayın ve sistemde bir hava kilidini önlemek için tam bir havalandırma sağlayın. Ölüm ilanı ile normotermik rejyonel perfüzyonun başlatılması arasında klinik uygulama hazırlığı, örtücülük ve kalbe erişimde ihtiyaç duyulan süreyi kapsayacak şekilde en az 15 dakika geçmesini sağlamak.
Fonksiyonel sıcak iskemi zamanına başladıktan 15 dakika sonra, normotermik bölgesel perfüzyonu başlatın ve metrekare başına dakikada 2.5 litrelik bir perfüzyon indeksine ulaşmak için akış hızlarını kademeli olarak ayarlayın. Mekanik ventilasyonu, %50 ilham verici oksijen fraksiyonu ve kilogram gelgit hacmi başına altı mililitre ile yeniden başlatın. Sütten kesme kriterleri karşılandığında, normotermik bölgesel perfüzyonu durdurun.
Kanülü sağ atriyumdan çıkarın ve kan kaybını en aza indirmek için çanta ipi sütürünü hızla sıkın. Dikişi düğümlerle sabitleyin. Daha sonra aort kanülünü çıkarmak için aynı prosedürü izleyin.
Standart bir transözofageal prob ve doğrudan kalbe yerleştirilen bir transtorasik prob kullanarak ekokardiyografi yoluyla kardiyak fonksiyonu analiz edin. Kardiyak fonksiyonun temsili sonuçları, dolaşım ölümünden sonra bağış sonrası kalp fonksiyonunda anlamlı bir düşüş olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, bu organlar, geleneksel olarak nakledilen kalplerle karşılaştırıldığında, nakil sonrası benzer fonksiyonel iyileşme göstermiştir.
Supraaortik damarlar kelepçelenmişken normotermik rejyonel perfüzyon sırasında yapılan serebral oksimetri ölçümleri yeterli serebral perfüzyonun yokluğunu doğrularken, normotermik bölgesel perfüzyon sırasında ve destekten kesildikten sonra akciğer uyum ölçümleri başlangıçtan anlamlı bir değişiklik göstermedi. Bu tekniğin geliştirilmesi, dolaşım ölümü ve normotermik bölgesel perfüzyon sonrası bağış bağlamında akciğerler, böbrekler ve karaciğer gibi diğer organların nakil edilebilirliğinin değerlendirilmesinin önemini ortaya koymuştur.
