Bu çalışma, Ulusal Sağlık ve Tıbbi Araştırma Konseyi APP1194139/APP1126276 (JC), Avustralya Ulusal Kök Hücre Vakfı ve Yeni Güney Galler Devlet Sağlık ve Tıbbi Araştırma Ofisi (JC) tarafından finanse edilmiştir. DS, Royal Australasian College of Physicians, Klinik Patoloji ve Tıbbi Araştırma Enstitüsü ve Avustralya Hükümeti Araştırma Eğitim Programı tarafından desteklenmiştir. TD, Klinik Patoloji ve Tıbbi Araştırma Enstitüsü, Penfolds Aile Bursu, Ulusal Sağlık ve Tıbbi Araştırma Konseyi (APP2002783) ve Avustralya Ulusal Kalp Vakfı (104615) tarafından desteklenmiştir.

<ol>
	<li>Vogel, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=ST-segment+elevation+myocardial+infarction.">ST-segment elevation myocardial infarction.</a> Nature Reviews Disease Primers. 5 (1), 39 (2019).</li><li>Niccoli, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Optimized+treatment+of+ST-elevation+myocardial+infarction.">Optimized treatment of ST-elevation myocardial infarction.</a> Circulation Research. 125 (2), 245-258 (2019).</li><li>Ezekowitz, J. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Declining+in-hospital+mortality+and+increasing+heart+failure+incidence+in+elderly+patients+with+first+myocardial+infarction.">Declining in-hospital mortality and increasing heart failure incidence in elderly patients with first myocardial infarction.</a> Journal of the American College of Cardiology. 53 (1), 13-20 (2009).</li><li>Hastings, C. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drug+and+cell+delivery+for+cardiac+regeneration.">Drug and cell delivery for cardiac regeneration.</a> Advanced Drug Delivery Reviews. 84, 85-106 (2015).</li><li>Silva, K. A. S., Emter, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Large+animal+models+of+heart+failure:+a+translational+bridge+to+clinical+success.">Large animal models of heart failure: a translational bridge to clinical success.</a> JACC: Basic to Translational Science. 5 (8), 840-856 (2020).</li><li>Suzuki, Y., Yeung, A. C., Ikeno, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+representative+porcine+model+for+human+cardiovascular+disease.">The representative porcine model for human cardiovascular disease.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 195483 (2011).</li><li>Thavapalachandran, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Platelet-derived+growth+factor-AB+improves+scar+mechanics+and+vascularity+after+myocardial+infarction.">Platelet-derived growth factor-AB improves scar mechanics and vascularity after myocardial infarction.</a> Science Translational Medicine. 12 (524), (2020).</li><li>Hou, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Radiolabeled+cell+distribution+after+intramyocardial,+intracoronary,+and+interstitial+retrograde+coronary+venous+delivery:+implications+for+current+clinical+trials.">Radiolabeled cell distribution after intramyocardial, intracoronary, and interstitial retrograde coronary venous delivery: implications for current clinical trials.</a> Circulation. 112, 150-156 (2005).</li><li>Tousoulis, D., Briasoulis, A., Antoniades, C., Stefanadi, E., Stefanadis, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Heart+regeneration:+what+cells+to+use+and+how.">Heart regeneration: what cells to use and how.</a> Current Opinion in Pharmacology. 8 (2), 211-218 (2008).</li><li>Bonnet, G., Ishikawa, K., Hajjar, R. J., Kawase, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+myocardial+injection+of+vectors.">Direct myocardial injection of vectors.</a> Methods in Molecular Biology. 1521, 237-248 (2017).</li><li>Marchlinski, F. E., Callans, D. J., Gottlieb, C. D., Zado, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Linear+ablation+lesions+for+control+of+unmappable+ventricular+tachycardia+in+patients+with+ischemic+and+nonischemic+cardiomyopathy.">Linear ablation lesions for control of unmappable ventricular tachycardia in patients with ischemic and nonischemic cardiomyopathy.</a> Circulation. 101 (11), 1288-1296 (2000).</li><li>Polin, G. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endocardial+unipolar+voltage+mapping+to+identify+epicardial+substrate+in+arrhythmogenic+right+ventricular+cardiomyopathy/dysplasia.">Endocardial unipolar voltage mapping to identify epicardial substrate in arrhythmogenic right ventricular cardiomyopathy/dysplasia.</a> Heart Rhythm. 8 (1), 76-83 (2011).</li><li>Tatay, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Veterinary Sutures Handbook. , (2018).</li><li>McCall, F. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Myocardial+infarction+and+intramyocardial+injection+models+in+swine.">Myocardial infarction and intramyocardial injection models in swine.</a> Nature Protocol. 7 (8), 1479-1496 (2012).</li><li>Sun, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Establishing+a+swine+model+of+post-myocardial+infarction+heart+failure+for+stem+cell+treatment.">Establishing a swine model of post-myocardial infarction heart failure for stem cell treatment.</a> Journal of Visualized Experiments. (159), e60392 (2020).</li><li>Gwon, H. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+feasibility+and+safety+of+fluoroscopy-guided+percutaneous+intramyocardial+gene+injection+in+porcine+heart.">The feasibility and safety of fluoroscopy-guided percutaneous intramyocardial gene injection in porcine heart.</a> International Journal of Cardiology. 79 (1), 77-88 (2001).</li><li>Krause, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Percutaneous+intramyocardial+stem+cell+injection+in+patients+with+acute+myocardial+infarction:+first-in-man+study.">Percutaneous intramyocardial stem cell injection in patients with acute myocardial infarction: first-in-man study.</a> Heart. 95 (14), 1145-1152 (2009).</li><li>Wang, X., Shangguan, W., Li, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiotensin-(1-7)+prevents+atrial+tachycardia+induced-heat+shock+protein+27+expression.">Angiotensin-(1-7) prevents atrial tachycardia induced-heat shock protein 27 expression.</a> Journal of Electrocardiology. 51 (1-7), 117-120 (2018).</li><li>Klatt, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+nonfibrotic+left+ventricular+hypertrophy+in+an+ANG+II-induced+chronic+ovine+hypertension+model.">Development of nonfibrotic left ventricular hypertrophy in an ANG II-induced chronic ovine hypertension model.</a> Physiological Reports. 4 (17), 12897 (2016).</li><li>Singh, B., Dyce, K. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Dyce, Sack, and Wensing's Textbook of Veterinary Anatomy. , (2018).</li><li>Percie du Sert, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Reporting+animal+research:+Explanation+and+elaboration+for+the+ARRIVE+guidelines+2.0.">Reporting animal research: Explanation and elaboration for the ARRIVE guidelines 2.0.</a> PLOS Biology. 18 (7), 3000411 (2020).</li><li>Sch&#252;ttler, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+practical+guide+to+setting+up+pig+models+for+cardiovascular+catheterization,+electrophysiological+assessment+and+heart+disease+research.">A practical guide to setting up pig models for cardiovascular catheterization, electrophysiological assessment and heart disease research.</a> Lab Animals. 51 (2), 46-67 (2022).</li></ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Transepikardiyal intramiyokardiyal enjeksiyon Bu prosedür doğrudan kardiyak görselleştirme avantajına sahiptir ve terapötiklerin sistemik uygulama yöntemlerinden daha fazla lokal retansiyonu sağladığı gösterilmiştir 9,10,14. Bununla birlikte, torakotomiler invazivdir, önemli teknik beceri gerektirir ve tartışılan diğer yöntemlere göre daha fazla morbidite ve mortalite riski taşır10,15. Prosedürün kritik ve güvencesiz aşamaları hakkında bilgi sahibi olmak, bu artan riskin arabuluculuğuna yardımcı olabilir.
Yüksek aritmi riski ve buna bağlı hemodinamik bozukluk nedeniyle kalp apeksi ortaya çıkarmak için kalbi manipüle ederken çok dikkatli olunmalıdır. Sürekli invaziv kan basıncı izleme ve elektrokardiyografi, hipotansiyon veya kararsız aritmilerin hızlı bir şekilde tanımlanmasına olanak tanıyarak hızlı müdahale ve düzeltmeyi kolaylaştırır. Geçici hipotansiyon genellikle metaraminol bolusları ile tedavi edilebilir. Sürekli hipotansiyon, inhalan anesteziklerin azaltılması (anestezik derinliğin dikkatli bir şekilde izlenmesi) ve bir vazopresör infüzyonunun başlatılması ve aynı zamanda değişen hemodinamiğin nedeninin belirlenmesi ile geçici hale getirilebilir. Ventriküler taşikardi veya ventriküler fibrilasyon gibi kararsız aritmiler, intravenöz antiaritmikler olsun veya olmasın elektriksel kardiyoversiyon ile tedavi edilebilir.
Hayvanların hayatta kalması için eşit derecede önemli olan, göğsü kapatmadan önce plevral boşluktan serbest gazın başarılı bir şekilde çıkarılmasıdır. Bunun yapılmaması, bir pnömotoraks gelişmesiyle sonuçlanabilir ve hayvanı, iyileşme sırasında mekanik ventilatörden ayrıldıktan sonra büyük solunum yetmezliği ve ölüm riskiyle karşı karşıya bırakabilir. Pozitif hava yolu basıncı, kabarcıklanma artık gözlenene kadar en az 30 saniye boyunca korunmalıdır. Silikon boru, kabarcıklanmanın durması üzerine derhal çıkarılır ve daha sonra toraks hızla kapatılır. Ayrıca, bir torakostomi tüpünün cerrahi olarak kapatılmasına yerleştirilmesi de mümkündür, bu da sonraki 24-72 saat boyunca manuel hava ve enflamatuar sıvının çıkarılmasına izin verir. Bununla birlikte, özellikle hayvanlar bir arada barındırılıyorsa, bunun temiz ve sağlam tutulması zordur. Tüpün hasar görmesi veya kirlenmesi piyomotoraks, pnömotoraks veya sepsise yol açabilir. Deneyimlerimize göre, göğüs kapanmadan önce serbest gaz yeterince çıkarılırsa geçici bir göğüs dreni takılması gerekli değildir.
Perkütan transendokardiyal intramiyokardiyal enjeksiyon Bu terapötik uygulama yöntemi, cerrahi yaklaşıma kıyasla daha az invaziv doğası nedeniyle daha düşük riskle lokal doku dağıtımına izin verme avantajına sahiptir10,14. Bu teknik, doğrudan görselleştirmenin yokluğunda kılavuz olarak hem floroskopi hem de elektromekanik haritalama ile büyük hayvan çalışmalarında zaten kullanılmaktadır10,16,17.
Kalbin doğrudan görüş altında olmadığı göz önüne alındığında, prosedür uzmanının bir enjeksiyon bölgesi seçerken ortogonal floroskopik görünümleri kullanması ihtiyatlıdır. Ayrıca, terapötik maddenin uygulanmasından önce ve verilmesinden önce seyreltilmiş iyot kontrastının enjeksiyonu, miyokardiyal teması doğrulamada son derece değerlidir. Uygun temas, doku alımından önce enjeksiyon başarısının tek belirteçlerinden biri olabilecek karakteristik bir 'miyokardiyal allık' gözlemlenerek doğrulanabilir. Hazne perforasyonu riski nedeniyle, seçilen enjeksiyon bölgesindeki miyokard duvar kalınlığının da 9 mm'den büyük olması önerilir14,16.
Juguler venöz ozmotik mini pompa Ozmotik mini pompa, küçük hayvan çalışmalarında yaygın olarak kullanılan popüler bir cihazdır. Terapötik bir ajanın belirli bir süre boyunca tutarlı bir oranda uygulanmasının benzersiz avantajı göz önüne alındığında, bu cihazın büyük hayvan modellerinde 7,18,19 kullanılmasına artan bir ilgi olmuştur. Bu yöntemin olası bir sınırlaması, pompayı değiştirmeden veya çıkarmadan ilacın infüzyon hızlarını değiştirememesi veya durduramamasıdır. Tedaviyi bu şekilde denemeden önce bu düşünülmelidir.
Bu çalışma, bu yöntemin domuzlarda yüksek başarı oranı, düşük morbidite ve mortalite ile uygulanabileceğini göstermiştir. Lenf düğümleri, timus ve karotis arter dahil olmak üzere birçok hayati yapının cerrahi bölgeye bitişik olduğu unutulmamalıdır. Yönteme bağlı kalınması ve anatomik metinlerin20 konsültasyonu, bu yapılardan herhangi birinin kasıtsız olarak zarar görmesini önlemek için şiddetle tavsiye edilir. Bu yöntemin en önemli komplikasyonu, juguler venin veya çevresindeki bir yapının yanlışlıkla yaralanmasına bağlı hemorajik şoktur. Bu nedenle juguler veni çevreleyen yumuşak dokunun dikkatli bir şekilde çıkarılması çok önemlidir. Bu adımın düzgün bir şekilde tamamlanmaması, mini pompa hortumunun yerleştirilmesinde veya yanlışlıkla kanamanın kontrol edilmesinde zorluklara yol açabilir.
Bu makale, kardiyoaktif terapötiklerin verilmesi için üç yöntem tanımlamıştır. Her tekniğin bildirilen başarısına rağmen, dikkate alınması gereken doğal sınırlamalar vardır. İnvaziv prosedürler (transepikardiyal enjeksiyon) terapötik uygulamanın doğruluğunun artmasına izin verir; Bununla birlikte, potansiyel olarak ölümcül komplikasyon riski daha yüksektir. Ayrıca, invaziv doğum, komplikasyon riskini en aza indirmek için teknik becerilere daha fazla ihtiyaç duyar. Benzer şekilde, floroskopik kılavuzlu, transendokardiyal enjeksiyon, kateterizasyon ve donanımın manipülasyonu için bir dereceye kadar teknik beceri gerektirir. Bu yöntem yanlış yapılırsa, enjeksiyon başarısızlığı ve ölümcül komplikasyonlar mümkündür.
Tarif edilen doğrudan enjeksiyon yöntemleri, bir terapötiğin hedef dokuya bir defaya mahsus uygulanmasına izin verir. Juguler venöz ozmotik mini pompa, 7 günlük bir süre boyunca bir terapötiğin sistemik olarak uygulanmasına izin verir. Nispeten, bu yöntem daha basittir ve daha az riskle ilişkilidir, ancak miyokarda giden yolu bulan sistemik bir terapötik maddeye dayanır. Ek olarak, pompa yerleştirildikten sonra, hayvanı yeniden uyuşturmadan ve pompayı çıkarmadan uygulamayı durdurmak veya doz oranını değiştirmek mümkün değildir.
Bu makalede açıklanan tüm yöntemler, miyokard enfarktüsünden sonraki gün veya 2 hafta sonra hayvanlar üzerinde gerçekleştirildi. Bu nedenle, bu çalışma, sağlıklı hayvanlarda veya alternatif bir kardiyak patolojiye maruz kalan hayvanlarda söz konusu yöntemlerin başarısını bildirememektedir. Son olarak, amaçlanan herhangi bir ajanın farmakolojisi ve biyoteknolojisi dikkatlice düşünülmelidir, çünkü bu, doğal olarak seçilen dağıtım yolunun etkinliği ile bağlantılı olacaktır. Bunun ayrıntılı bir tartışması bu makalenin kapsamı dışındadır.
Klinik öncesi yöntemlerin kapsamlı tasvirleri, hayvan refahına ve daha geniş bilimsel topluluğa fayda sağlar. Sonuç olarak, prosedürlerin ve sonuçların tekrarlanabilirliğinin artması, daha az hayvan sağlığı komplikasyonuna, önemli sonuçlar elde etmek için gereken hayvan sayısının azalmasına ve deneysel sonuçlara daha fazla güvene yol açar21,22. Bu makalede, bir domuz modelinde miyokard enfarktüsünün tedavisi için yeni terapötiklerin üç uygulama yöntemi tanımlanmıştır. Kullanılan teknikleri detaylandırarak ve her birinin yararlarını ve risklerini dile getirerek, araştırmacıların araştırma hedeflerine uygun, tutarlı ve güvenilir klinik öncesi modelleri rahatça oluşturabilecekleri tahmin edilmektedir.

Koroner arter hastalığı (KAH) ve buna bağlı ST yükselmeli miyokard enfarktüsü (STEMI) dünya çapında önde gelen ölüm nedenleridir. Son yirmi yılda, perkütan koroner girişim, fibrinolitik tedaviler ve reperfüzyonun zamanında elde edilmesini sağlamak için tedavi algoritmalarının standardizasyonu yoluyla STEMI ile başvuran hastaların hastane içi mortalitesinin azaltılmasında büyük ilerleme kaydedilmiştir 1,2,3. Buna rağmen, STEMI ile ilişkili morbidite önemli bir yük olmaya devam etmektedir, bu nedenle yeni kardiyoprotektif ve rejeneratif tedavilerin geliştirilmesine büyük ihtiyaç duyulmaktadır 2,3. Terapötik gelişimin önemli bir bileşeni, yeni bir tedavinin nasıl uygulanacağının belirlenmesidir4. Her yöntemin güvenliği, etkinliği ve uygulanabilirliği, tedavinin kendi özellikleriyle eşleştirilmelidir.
Fizyolojik olarak ilgili büyük hayvan modelleri, çeşitli terapötik uygulama stratejilerinin bu özelliklerini değerlendirmede kritik öneme sahiptir5. Kardiyovasküler fizyoloji, koroner vasküler anatomi ve kalp ağırlığı/vücut ağırlığı oranındaki benzerlikleri nedeniyle domuz, miyokard enfarktüsü için yeni tedavilerin klinik öncesi değerlendirmesinde tercih edilen türlerden biridir6. Daha önce bir rekombinant protein tedavisinin7 onarıcı kapasitesini göstermek için bir domuz STEMI modeli kullandık ve bu modeli kullanarak yeni farmakolojik, hücresel ve genetik tedavileri araştırmaya devam ettik. Burada, enfarktüs oluşturulduktan sonra domuz modellerinde kullanılan üç terapötik uygulama tekniği açıklanmaktadır: torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, perkütan transendokardiyal enjeksiyon ve juguler venöz ozmotik mini pompa implantasyonu. İlk iki yöntem, lokal doku iletimini mümkün kılar, gerekli dozajları, hedef dışı etkileri ve hepatik ilk geçiş metabolizmasını azaltır 8,9,10. Ozmotik mini pompa, kısa bir yarı ömre sahip bir ilacın sürekli olarak verilmesine izin vererek, her ikisi de büyük hayvan modellerinde uygulanması zor olan bir infüzyon pompasına ve patentli intravenöz kanüle olan bağımlılığı ortadan kaldırır.
Bu teknikleri açıklayarak, bu makalenin büyük hayvan modellerinde miyokard enfarktüsünü takiben yeni kardiyoprotektif veya rejeneratif ajanları araştırmada translasyonel bilim adamlarına yardımcı olabileceği umulmaktadır.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Central line placement</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>2-0 sutures</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>JJ9220</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Arrow&#39; Paediatric Two-Lumen Central Venous Catheterisation Set with Blue FlexTip Catheter (contains 18G cook needle and 0.035&#34; J-tip wire)</td>
			<td>Teleflex</td>
			<td>CS-14502</td>
			<td>Central Line</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Green Fluorsence Protein (GFP)</td>
			<td>Abcam</td>
			<td>ab13970</td>
			<td>1:100 dilution ratio</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Histology antibodies</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ku80</td>
			<td>Cell Signalling Technology</td>
			<td>C48E7</td>
			<td>1:500 dilution ratio</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 11 scalpel</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sparq&#39; Ultrasound System</td>
			<td>Philips</td>
			<td>MP11742 Medpick</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile ultrasound probe cover</td>
			<td>Atris</td>
			<td>28041947</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Swine Jacket with Pocket, size &#39;Medium&#39;</td>
			<td>Lomir Biomedical</td>
			<td>SS J2YJJET</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Jugular vein osmotic minipump implantation</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Brown Tissue Forceps</td>
			<td>Icon Medical Supplies</td>
			<td>KLINI316012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bellucci Self-Retaining Retractor</td>
			<td>surgicalinstruments.net.au</td>
			<td>group-24.26.02</td>
			<td>Self retaining tissue retractor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrosurgical Pencils with &#39;Edge&#39; Coated Electrodes</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td>Cautery Pencil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Icon Medical Supplies</td>
			<td>ARMO3250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 22 scalpel blade</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Suture&#160; (2-0, 3-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>D9635, 663G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Osmotic Infusion Minipump</td>
			<td>Alzet</td>
			<td>2ML1, 2ML2, 2ML4</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vascular Silicone Ties</td>
			<td>Vecmedical</td>
			<td>95001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Vicryl suture (5-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>W9982</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Percutaneous transedocardial injection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Artis Zee&#39; C-Arm Fluoroscopy&#160;</td>
			<td>Siemens&#160;</td>
			<td>IR-19-1994</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CARTO&#39; 3 System&#160;&#160;</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td></td>
			<td>Electrophysiological Mapping Software &#38; System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cook Access Needle</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G07174</td>
			<td>Cannulation needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast-Cath&#39; Introducer (6 French, 8 French)</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>406204, 406142</td>
			<td>Vascular sheath with introducer and guidewire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Myostar&#39; Injection Catheter</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td>121117S, 121119S, 1211120S</td>
			<td>Intramyocardial injection catheter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No.11 scalpel</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>203</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Omnipaque&#39; Iohexol Contrast</td>
			<td>GE Healthcare</td>
			<td>AUST R 39861&#160;</td>
			<td>Iodinated contrast agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sparq&#39; Ultrasound System</td>
			<td>Philips</td>
			<td>MP11742 Medpick</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sedation &#38; general anaesthesia</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Compound Sodium Lactate Hartmann&#39;s Solution</td>
			<td>Free flex</td>
			<td>894451</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl 50 mcg/mL</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>AUST R 107027.</td>
			<td>Intravenous anaesthesia and analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Forthane&#39; Isoflurane</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>AUST R 29656&#160;</td>
			<td>Inhalant anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>GE Aestiva 5 Anaesthesia Machine&#160;</td>
			<td>Datex Ohmeda</td>
			<td>17002-9, 17002A9 Avante Health Solutions</td>
			<td>Anaesthetic Machine&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hypnovel&#39; Midazolam 5 mg/mL</td>
			<td>Roche</td>
			<td>AUST R 13726</td>
			<td>Sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous cannula</td>
			<td>BD Angiocath</td>
			<td>381137</td>
			<td>20 gauge cannula</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ketamil&#39; Ketamine 10 mg/mL</td>
			<td>Ilium</td>
			<td>APVMA number: 51188c&#160;</td>
			<td>Sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Laryngoscope</td>
			<td>Miller</td>
			<td>VDI-6205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medetomidine 1 mg/mL</td>
			<td>Ilium</td>
			<td>APVMA number 64251; ACVM number A10488&#160;</td>
			<td>Sedative</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metaraminol 10 mg/mL</td>
			<td>Phebra</td>
			<td>AUST R 284784</td>
			<td>Short-acting vasopressor</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Methadone 10 mg/mL</td>
			<td>Ilium</td>
			<td>APVMA number: 63712&#160;</td>
			<td>Sedative, Restricted drug</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Onsetron&#39; Ondansetron 2 mg/mL</td>
			<td>Accord Healthcare</td>
			<td>AUST R 205593&#160;</td>
			<td>Anti-emetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Propofol-Lipuro&#39; Propofol 10 mg/mL</td>
			<td>Braun</td>
			<td>AUST R 142906&#160;</td>
			<td>Intravenous anaesthetic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pulse Oximeter&#160;</td>
			<td>Meditech</td>
			<td>GVPMT-M3S</td>
			<td>Portable pulse oximeter</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shiley&#39; Cuffed Basic Endotracheal Tube (Size 5.5 &#38; 6.0)</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>86108-, 86109-</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Shiley&#39; Intubating Stylet, 10 Fr</td>
			<td>Medtronic</td>
			<td>85864</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sodium Chloride 0.9%</td>
			<td>Free flex</td>
			<td>FAH1322</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thoracotomy and epicardial Cell Injection</td>
			<td></td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>27 G Insulin needle</td>
			<td>Terumo</td>
			<td>51907</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adson Brown Tissue Forceps</td>
			<td>Icon Medical Supplies</td>
			<td>KLINI316012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>CARTO&#39; 3 System&#160;&#160;</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td></td>
			<td>Electrophysiological Mapping Software &#38; System</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cefazolin 1 g Vial</td>
			<td>AFT Pharmaceuticals</td>
			<td>9421900137367 CH2</td>
			<td>Antibiotic Prophylaxis&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Chest drainage tube</td>
			<td>SurgiVet</td>
			<td>SKU-336</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cook Access Needle</td>
			<td>Cook Medical</td>
			<td>G07174</td>
			<td>Cannulation needle</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cooley Sternotomy Retractor Paediatric</td>
			<td>Millennium Surgical</td>
			<td>9-61287</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Durogesic&#39; 100 mcg/h Fentanyl Patch</td>
			<td>Janssen</td>
			<td>AUST R 112371&#160;</td>
			<td>Postoperative analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrosurgical Pencils with &#39;Edge&#39; Coated Electrodes</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td>Cautery Pencil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Electrosurgical Pencils with &#39;Edge&#39; Coated Electrodes</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>E2450H</td>
			<td>Cautery Pencil</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast-Cath&#39; Introducer (6 French, 8 French)</td>
			<td>Abbott</td>
			<td>406204, 406142</td>
			<td>Vascular sheath with introducer and guidewire</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Lignocaine 20 mg/mL</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>AUST R 49296, AUST R 49297, AUST R 49293 and AUST R 49295.</td>
			<td>Local anaesthesia, anti-arrhythmic</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Marcaine&#39; Bupivacaine 0.5%</td>
			<td>Pfizer</td>
			<td>AUST R 48328&#160;</td>
			<td>Local anaesthesia.&#160;</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum Scissors</td>
			<td>Icon Medical Supplies</td>
			<td>ARMO3250</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>No. 22 scalpel</td>
			<td>Swann-Morton</td>
			<td>208</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Nylon Suture&#160; (2-0, 3-0)</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>D9635, JJ76264</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Size 1 PDS suture</td>
			<td>Ethicon</td>
			<td>JJ75414</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sparq&#39; Ultrasound System</td>
			<td>Philips</td>
			<td>MP11742 Medpick</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile gauze</td>
			<td>Kerlix</td>
			<td>KE5072</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sterile laparotomy sponges</td>
			<td>Propax</td>
			<td>2907950</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Thermocool Smartouch&#39; Catheter</td>
			<td>Biosense Webster</td>
			<td>D133601, D133602, D133603</td>
			<td>Epicardial Mapping Catheter</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

delivery of cardioactive therapeutics in a porcine myocardial infarction model

Miyokard enfarktüsü, dünya çapında önde gelen ölüm ve sakatlık nedenlerinden biridir ve yeni kardiyoprotektif veya rejeneratif stratejilere acil ihtiyaç vardır. İlaç geliştirmenin önemli bir bileşeni, yeni bir terapötiğin nasıl uygulanacağının belirlenmesidir. Fizyolojik olarak ilgili büyük hayvan modelleri, çeşitli terapötik uygulama stratejilerinin fizibilitesini ve etkinliğini değerlendirmede kritik öneme sahiptir. Kardiyovasküler fizyoloji, koroner vasküler anatomi ve kalp ağırlığının vücut ağırlığına oranı açısından insanlarla benzerlikleri nedeniyle domuz, miyokard enfarktüsü için yeni tedavilerin klinik öncesi değerlendirmesinde tercih edilen türlerden biridir. Bu protokol, bir domuz modelinde kardiyoaktif terapötik ajanların uygulanmasının üç yöntemini açıklamaktadır. Perkütan olarak indüklenen miyokard enfarktüsünden sonra, dişi kara ırkı domuzu, (1) torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, (2) kateter bazlı transendokardiyal enjeksiyon veya (3) juguler ven ozmotik mini pompa yoluyla intravenöz infüzyon yoluyla yeni ajanlarla tedavi edildi. Her teknik için kullanılan prosedürler tekrarlanabilir ve bu da güvenilir kardiyoaktif ilaç dağıtımı ile sonuçlanır. Bu modeller, bireysel çalışma tasarımlarına uyacak şekilde kolayca uyarlanabilir ve bu uygulama tekniklerinin her biri, çeşitli olası müdahaleleri araştırmak için kullanılabilir. Bu nedenle, bu yöntemler, miyokard enfarktüsünü takiben kardiyak onarımda yeni biyolojik yaklaşımlar peşinde koşan translasyonel bilim adamları için yararlı bir araçtır.

Torakotomi ve epikardiyal hücre enjeksiyonu Torakotomi ve epikardiyal enjeksiyon yapılan 29 hayvandan 26'sı hayatta kaldı. Histolojik analiz, hayatta kalan tüm hayvanlarda bu yöntemle verilen insan hücrelerinin aşılandığını doğruladı (Şekil 1E). Bir hayvan hücre enjeksiyonu sırasında ölümcül aritmiler yaşadı ve yeniden canlandırılamadı. Bir diğeri, kapanma sırasında nabızsız elektriksel aktivite yaşadı ve hava yollarına uzun süreli pozitif basınç uygulandı ve geri kazanılamadı. Üçüncü bir hayvan hem kustu, hem de ekstübasyon sırasında solunum durmasına girdi. Bu hayvan hayata döndürülemedi.
İki hayvan büyük komplikasyonlar yaşadı ancak kurtarılabildi. Bir hayvanda intramiyokardiyal enjeksiyon sırasında ventriküler fibrilasyon gelişti ve dahili defibrilasyon kürekleri ve kalp masajı ile resüsitasyon yapılabildi. İkinci hayvan ekstübasyon üzerine kustu ve kısa bir solunum durması geçirdi, ancak hızla yeniden entübe edildi ve iyi bir şekilde iyileşti. Bu olayların tümü erken deneyler sırasında meydana geldi ve protokolle ilgili ekip deneyimi arttıkça advers olaylar azaldı (Tablo 1).
Juguler ven ozmotik mini pompa implantasyonu Juguler ozmotik minipump implantasyonu ile ilişkili mortalite veya majör komplikasyon bildirilmemiştir. Yedi hayvanın çoğu, ilk 24 saat içinde ameliyat bölgesinde hafif şişlik yaşadı ve bu da müdahale edilmeden düzeldi. Pompa implantasyonundan sonraki 3. günde serum üzerinde gerçekleştirilen ELISA, kontrol7'ye kıyasla trombosit kaynaklı büyüme faktörü-AB insanının (PDGF-AB) önemli bir kan konsantrasyonuna ulaşarak pompanın etkinliğini gösterdi (Şekil 2E).
Perkütan transendokardiyal enjeksiyon Toplam 22 hayvana endokardiyal enjeksiyon yapıldı. Bu enjeksiyonlardan 17'si, ölüm sonrası hedef dokuda gözlenen floresan veya mürekkep lekelenmesi ile belirlenen 'başarılı' olarak kabul edildi (Şekil 3B). Bu prosedürle ilişkili mortalite yoktu. Bir hayvanda sağ ventrikül perforasyonundan küçük hacimli perikardiyal efüzyon gelişti. Bu kendi kendini sınırladı ve kardiyovasküler uzlaşmaya neden olmadı. Aynı hayvan öldü; Bununla birlikte, bu, intramiyokardiyal enjeksiyondan sonra ilgisiz bir ek prosedürden kaynaklanıyordu.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig01.jpg"> Şekil 1: Transepikardiyal kardiyomiyosit enjeksiyonu, doğrudan kardiyak görselleştirmeye izin verir ve miyokarda iletilen yüksek oranda canlı hücre sağlar. (A) Kalp apeksi, kalbin tabanının altına yönlendirilen nemli bir gazlı bez askısı ile açığa çıkar. (B) Bir epikardiyal haritalama kateteri, yara izini ve sınır bölgelerini tanımlar ve enjeksiyon bölgelerini açıklar. (C) Hücreleri miyokarda transepikardiyal olarak enjekte etmek için 31 G'lik bir iğne kullanılır. (D) Enjeksiyon bölgesi açıklamalı epikardiyal voltaj haritası. Mor: normal voltaj, sağlıklı miyokard; Kırmızı: anormal voltaj, hastalıklı miyokard; Gri noktalar: enjeksiyon bölgeleri. Kurban edildikten sonra, kalp toplanır ve aşağı akış histolojik değerlendirmesi için formalin ile sabitlenir. (E)'de, aşılanmış insan hücreleri, insan anti-nükleer antikoru, Ku80 ve bir anti-GFP antikoru için immün boyama ile tespit edilir. Ölçek çubuğu = 200 μm. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig01large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig02.jpg"> Şekil 2: Juguler ven mini pompa yerleştirilmesi, 7 günlük bir süre boyunca güvenli ve güvenilir bir PDGF iletimi yöntemi sağlar . (A) Sağ juguler ven açığa çıkar ve yumuşak doku damardan temizlenir. (B) Vasküler bağlar damarı tıkarken, mini pompa hortumunun içinden geçirildiği bir delik açmak için 14 G'lik bir iğne kullanılır. (C) Mini pompa hortumu damarın içine ilerletilir ve mini pompa gövdesi bitişik yumuşak dokuya sabitlenir. (D) İmplantasyondan önce mini pompa gövdesi ve hortumu. (E) Minipump ve PDGF-AB yoluyla verilen rekombinant proteinin serum konsantrasyonu, implantasyondan sonraki 3. günde her hayvandan ELISA kullanılarak ölçüldü. PDGF-AB alan hayvanların, kontrol hayvanlarına göre önemli ölçüde daha yüksek kan PDGF-AB konsantrasyonuna sahip olduğu gösterildi ve bu da ozmotik mini pompa uygulama yönteminin etkinliğini doğruladı. **gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark olduğunu gösterir (p = 0.005, Mann-Whitney U testi) <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig02large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/64177/64177fig03.jpg"> Şekil 3: Transendokardiyal intramiyokardiyal enjeksiyon, minimal invaziv bir terapötik uygulama yöntemine izin verir. (A) Miyokarda kontrast madde (sarı ok) uygulayan enjeksiyon kateterini (beyaz ok) gösteren sağ ön eğik floroskopik görüntü. Kontrast madde enjeksiyonu, terapötik enjeksiyondan önce ve sonra gelir, böylece miyokard içindeki iğne yerleşimi doğrulanabilir. (B) Enjekte edilen vektör, yeşil floresan proteini (GFP) eksprese eder, böylece enjekte edilen materyal doku toplandıktan sonra floresan olur, böylece enjeksiyonun başarısını doğrular. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/64177/64177fig03large.jpg" target="_blank">Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always"><tbody><tr><td></td>
			<td>Transepikardiyal Enjeksiyon (n = 29)</td>
			<td>Transendokardiyal Enjeksiyon (n=22)</td>
			<td>Ozmotik Mini Pompa (n = 7)</td>
		</tr><tr><td>Ölümlülük</td>
			<td>3</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Ameliyat sonrası kusma ve solunum durması</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Enjeksiyon sırasında ventriküler fibrilasyon</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Göğüs kapanması sırasında nabızsız elektriksel aktivite</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Morbidite</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Pnömotoraks</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Plevral efüzyon</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Kalp odası perforasyonu</td>
			<td>0</td>
			<td>1</td>
			<td>0</td>
		</tr><tr><td>Kanama</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
			<td>0</td>
		</tr></tbody></table>Tablo 1: Komplikasyonlar listesi.

Watch this Scientific Journal Video about Delivery of Cardioactive Therapeutics in a Porcine Myocardial Infarction Model at JoVE.com

Delivery of Cardioactive Therapeutics in a Porcine Myocardial Infarction Model

Bu protokol, bir domuz modelinde kardiyoaktif terapötik ajanların uygulanmasının üç yöntemini açıklamaktadır. Dişi kara ırkı domuzları, (1) torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, (2) kateter bazlı transendokardiyal enjeksiyon veya (3) juguler ven ozmotik mini pompa yoluyla intravenöz infüzyon yoluyla tedavi gördü.

Domuz Miyokard Enfarktüsü Modelinde Kardiyoaktif Terapötiklerin Verilmesi

Myocardial infarction is one of the leading causes of death and disability worldwide, and there is an urgent need for novel cardioprotective or ...

delivery-cardioactive-therapeutics-porcine-myocardial-infarction

Research

JoVE Journal

Medicine

1.1K Görüntüleme.  The University of Sydney. Bu protokol, bir domuz modelinde kardiyoaktif terapötik ajanların uygulanmasının üç yöntemini açıklamaktadır. Dişi kara ırkı domuzları, (1) torakotomi ve transepikardiyal enjeksiyon, (2) kateter bazlı transendokardiyal enjeksiyon veya (3) juguler ven ozmotik mini pompa yoluyla intravenöz infüzyon yoluyla tedavi gördü.

Video: Delivery of Cardioactive Therapeutics in a Porcine Myocardial Infarction Model

Acute Myocardial Infarction in Rats

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular diseases. Animal models that mimic human cardiac disease, such as myocardial infarction (MI) and ischemia-reperfusion (IR) that induces heart failure as well as pressure-overload (transverse aortic constriction) that induces cardiac hypertrophy and heart failure (Goldman and Tarnavski), are useful models to study cardiovascular disease. In particular, myocardial ischemia (MI) is a leading cause for cardiovascular morbidity and mortality despite controlling certain risk factors such as arteriosclerosis and treatments via surgical intervention (Thygesen). Furthermore, an acute loss of the myocardium following myocardial ischemia (MI) results in increased loading conditions that induces ventricular remodeling of the infarcted border zone and the remote non-infarcted myocardium. Myocyte apoptosis, necrosis and the resultant increased hemodynamic load activate multiple biochemical intracellular signaling that initiates LV dilatation, hypertrophy, ventricular shape distortion, and collagen scar formation. This pathological remodeling and failure to normalize the increased wall stresses results in progressive dilatation, recruitment of the border zone myocardium into the scar, and eventually deterioration in myocardial contractile function (i.e. heart failure). The progression of LV dysfunction and heart failure in rats is similar to that observed in patients who sustain a large myocardial infarction, survive and subsequently develops heart failure (Goldman). The acute myocardial infarction (AMI) model in rats has been used to mimic human cardiovascular disease; specifically used to study cardiac signaling mechanisms associated with heart failure as well as to assess the contribution of therapeutic strategies for the treatment of heart failure. The method described in this report is the rat model of acute myocardial infarction (AMI). This model is also referred to as an acute ischemic cardiomyopathy or ischemia followed by reperfusion (IR); which is induced by an acute 30-minute period of ischemia by ligation of the left anterior descending artery (LAD) followed by reperfusion of the tissue by releasing the LAD ligation (Vasilyev and McConnell). This protocol will focus on assessment of the infarct size and the area-at-risk (AAR) by Evan's blue dye and triphenyl tetrazolium chloride (TTC) following 4-hours of reperfusion; additional comments toward the evaluation of cardiac function and remodeling by modifying the duration of reperfusion, is also presented. Overall, this AMI rat animal model is useful for studying the consequence of a myocardial infarction on cardiac pathophysiological and physiological function.

The rat model of acute myocardial infarction (AMI) is useful to study the consequence of a MI on cardiac pathophysiological and physiological function.

Sıçanlarda Akut Miyokard Enfarktüsü

With heart failure leading the cause of death in the USA (Hunt), biomedical research is fundamental to advance medical treatments for cardiovascular ...

Tıp

MRI and PET in Mouse Models of Myocardial Infarction

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ideal model for testing novel therapeutic strategies.
In vivo magnetic resonance imaging (MRI) gives excellent views of the heart noninvasively with clear anatomical detail, which can be used for accurate functional assessment. Contrast agents can provide basic measures of tissue viability but these are nonspecific. Positron emission tomography (PET) is a complementary technique that is highly specific for molecular imaging, but lacks the anatomical detail of MRI. Used together, these techniques offer a sensitive, specific and quantitative tool for the assessment of the heart in disease and recovery following treatment.
In this paper we explain how these methods are carried out in mouse models of acute myocardial infarction. The procedures described here were designed for the assessment of putative protective drug treatments. We used MRI to measure systolic function and infarct size with late gadolinium enhancement, and PET with fluorodeoxyglucose (FDG) to assess metabolic function in the infarcted region. The paper focuses on practical aspects such as slice planning, accurate gating, drug delivery, segmentation of images, and multimodal coregistration. The methods presented here achieve good repeatability and accuracy maintaining a high throughput.

We describe how to perform MRI and PET imaging of the mouse heart. The protocol is tailored to assess treatment efficacy in models of myocardial infarction and heart failure.

Myocardial infarction is one of the leading causes of death in the Western world. The similarity of the mouse heart to the human heart has made it an ...

Myocardial Infarction and Functional Outcome Assessment in Pigs

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One important prerequisite is a good understanding of all safety and efficacy aspects obtained in a large animal model that validly reflect the human scenario of myocardial infarction (MI). Pigs are widely used in this regard since their cardiac size, hemodynamics, and coronary anatomy are close to that of humans. Here, we present an effective protocol for using the porcine MI model using a closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. This approach is based on 90 min of myocardial ischemia, inducing large left ventricle infarction of the anterior, septal and inferoseptal walls. Furthermore, we present protocols for various measures of outcome that provide a wide range of information on the heart, such as cardiac systolic and diastolic function, hemodynamics, coronary flow velocity, microvascular resistance, and infarct size. This protocol can be easily tailored to meet study specific requirements for the validation of novel cardioregenerative biologics at different stages (i.e. directly after the acute ischemic insult, in the subacute setting or even in the chronic MI once scar formation has been completed). This model therefore provides a useful translational tool to study MI, subsequent adverse remodeling, and the potential of novel cardioregenerative agents.

This protocol describes the porcine myocardial infarction (MI) model using a 90 min closed-chest coronary balloon occlusion of the left anterior descending artery (LAD), followed by reperfusion. Furthermore, the protocol for several outcome parameters, such as cardiac function, hemodynamics, microvascular resistance, and infarct size, are also presented.

Domuzlar miyokard enfarktüsü ve Fonksiyonel Sonuç Değerlendirmesi

Introduction of newly discovered cardiovascular therapeutics into first-in-man trials depends on a strictly regulated ethical and legal roadmap. One ...

A Hydrogel Construct and Fibrin-based Glue Approach to Deliver Therapeutics in a Murine Myocardial Infarction Model.

The murine MI model is widely recognized in the field of cardiovascular disease, and has consistently been used as a first step to test the efficacy of treatments in vivo1. The traditional, established protocol has been further fine-tuned to minimize the damage to the animal. Notably, the pectoral muscle layers are teased away rather than simply cut, and the thoracotomy is approached intercostally as opposed to breaking the ribs in a sternotomy, preserving the integrity of the ribcage. With these changes, the overall stress on the animal is decreased. 
Stem cell therapies aimed to alleviate the damage caused by MIs have shown promise over the years for their pro-angiogenic and anti-apoptotic benefits. Current approaches of delivering cells to the heart surface typically involve the injection of the cells either near the damaged site, within a coronary artery, or into the peripheral blood stream2-4. While the cells have proven to home to the damaged myocardium, functionality is limited by their poor engraftment at the site of injury, resulting in diffusion into the blood stream5. This manuscript highlights a procedure that overcomes this obstacle with the use of a cell-encapsulated hydrogel patch. The patch is fabricated prior to the surgical procedure and is placed on the injured myocardium immediately following the occlusion of the left coronary artery. To adhere the patch in place, biocompatible external fibrin glue is placed directly on top of the patch, allowing for it to dry to both the patch and the heart surface. This approach provides a novel adhesion method for the application of a delicate cell-encapsulating therapeutic construct.

This protocol aims to alleviate the limitation of poor cell engraftment for stem cell treatment of myocardial infarctions through the use of a hydrogel system and a fibrin-based glue. With this approach, cell-to-tissue contact post-infarction can be maintained, increasing the therapeutic potential of beneficial agents at the site of injury.

Bir Hidrojel Construct ve Fare Miyokard Enfarktüsü Modeli Therapeutics sunun için Tutkal Yaklaşım Fibrin tabanlı.

The murine MI model is widely recognized in the field of cardiovascular disease, and has consistently been used as a first step to test the efficacy of ...

Primary Outcome Assessment in a Pig Model of Acute Myocardial Infarction

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are therefore required to confine cardiac damage, promote survival and reduce the disease burden of heart failure. Large animal experiments are an essential part in the translational process from experimental to clinical therapies. To optimize clinical translation, robust and representative outcome measures are mandatory. The present manuscript aims to address this need by describing the assessment of three clinically relevant outcome modalities in a pig acute myocardial infarction (AMI) model: infarct size in relation to area at risk (IS/AAR) staining, 3-dimensional transesophageal echocardiography (TEE) and admittance-based pressure-volume (PV) loops. Infarct size is the main determinant driving the transition from AMI to heart failure and can be quantified by IS/AAR staining. Echocardiography is a reliable and robust tool in the assessment of global and regional cardiac function in clinical cardiology. Here, a method for three-dimensional transesophageal echocardiography (3D-TEE) in pigs is provided. Extensive insight into cardiac performance can be obtained by admittance-based pressure-volume (PV) loops, including intrinsic parameters of myocardial function that are pre- and afterload independent. Combined with a clinically feasible experimental study protocol, these outcome measures provide researchers with essential information to determine whether novel therapeutic strategies could yield promising targets for future testing in clinical studies.

Reliable and accurate outcome assessment is the key for translation of preclinical therapies into clinical treatment. The current paper describes how to assess three clinically relevant primary outcome parameters of cardiac performance and damage in a pig acute myocardial infarction model.

Akut Miyokard İnfarktüsü bir Domuz Modeli İlköğretim Sonuç Değerlendirmesi

Mortality after acute myocardial infarction remains substantial and is associated with significant morbidity, like heart failure. Novel therapeutics are ...

Myocardial Infarction in Neonatal Mice, A Model of Cardiac Regeneration

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and regeneration, and to define new targets for therapeutics. For decades, models of complete heart regeneration existed in amphibians and fish, but a mammalian counterpart was not available. The recent discovery of a postnatal window during which mice possess regenerative capabilities has led to the establishment of a mammalian model of cardiac regeneration. A surgical model of mammalian cardiac regeneration in the neonatal mouse is presented herein. Briefly, postnatal day 1 (P1) mice are anesthetized by isoflurane and placed on an ice pad to induce hypothermia. After the chest is opened, and the left anterior descending coronary artery (LAD) is visualized, a suture is placed around the LAD to inflict myocardial ischemia in the left ventricle. The surgical procedure takes 10-15 min. Visualizing the coronary artery is crucial for accurate suture placement and reproducibility. Myocardial infarction and cardiac dysfunction are confirmed by triphenyl-tetrazolium chloride (TTC) staining and echocardiography, respectively. Complete regeneration 21 days post myocardial infarction is verified by histology. This protocol can be used to as a tool to elucidate mechanisms of mammalian cardiac regeneration after myocardial infarction.

This protocol describes a highly reproducible model of cardiac regeneration by surgical induction of myocardial infarction in the left ventricle of postnatal day 1 mice. The method involves induction of hypothermic anesthesia and ligation of the left anterior descending coronary artery.

Yenidoğan Farelerde Miyokard Enfarktüsü, Kalp Rejenerasyon Bir Model

Myocardial infarction induced by coronary artery ligation has been used in many animal models as a tool to study the mechanisms of cardiac repair and ...

Improvement of a Closed Chest Porcine Myocardial Infarction Model by Standardization of Tissue and Blood Sampling Procedures

Myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury contributes to almost half of the necrotic area after myocardial infarction. To date there is no approved drug to prevent or reduce myocardial I/R injury. The study and understanding of the pathophysiological mechanisms of myocardial I/R injury is essential to develop successful treatments. Large animal experiments are an important step in translational methods. The porcine model of acute myocardial infarction has been established and described by ourselves and others. We aimed to further improve the value of the model by focusing in detail on the sampling techniques for use in future experiments. Furthermore, we emphasize small but important steps that can affect the quality of the final results. To mimic the clinical situation of myocardial I/R injury, a percutaneous coronary intervention (PCI) catheter was inserted into the left anterior descending coronary artery (LAD) of an anesthetized pig. &#176;&#176;&#176;This model mimics acute myocardial infarction and PCI treatment in humans with the possibility of accurately determining the area at risk as well as the necrotic- and viable ischemic tissue. Here the model was used to investigate the effect of a bicyclic peptide inhibitor of FXIIa. The model can also be modified to allow longer reperfusion times to study later effects of myocardial infarction.

Here we demonstrate a protocol to standardize sampling procedures of an established porcine model of acute myocardial infarction in order to increase its translational value in the understanding of the pathophysiology of myocardial ischemia/reperfusion injury and to test novel drug candidates.

Kapalı göğüs domuz miyokard infarktüsü manken standardizasyon doku ve kan örnekleme prosedürleri tarafından geliştirilmesi

Myocardial ischemia reperfusion (I/R) injury contributes to almost half of the necrotic area after myocardial infarction. To date there is no approved ...

A Cryoinjury Model to Study Myocardial Infarction in the Mouse

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we demonstrate a murine cryoinjury infarct model that generates precise infarct sizes with high reproducibility and replicability. In brief, after intubation and sternotomy of the animal, the heart is lifted from the thorax. The probe of a handheld liquid nitrogen delivery system is applied onto the myocardial wall to induce cryoinjury. Impaired ventricular function and electrical conduction can be monitored with echocardiography or optical mapping. Transmural myocardial remodeling of the infarcted area is characterized by collagen deposition and loss of cardiomyocytes. Compared to other models (e.g., LAD-ligation), this model utilizes a handheld liquid nitrogen delivery system to generate more uniform infarct sizes.

This article demonstrates a model to study cardiac remodeling after myocardial cryoinjury in mice.

Farede Miyokard Enfarktüsü Çalışması İçin Kriyoyaralanma Modeli

The use of animal models is essential for developing new therapeutic strategies for acute coronary syndrome and its complications. In this article, we ...

Establishing a Swine Model of Post-myocardial Infarction Heart Failure for Stem Cell Treatment

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major causes of mortality and morbidity around the world. Cell-based therapies for cardiac repair and improvement of left ventricular function after MI have attracted considerable attention. Accordingly, the safety and efficacy of these cell transplantations should be tested in a preclinical large animal model of HF prior to clinical use. Pigs are widely used for cardiovascular disease research due to their similarity to humans in terms of heart size and coronary anatomy. Therefore, we sought to present an effective protocol for the establishment of a porcine chronic HF model using closed-chest coronary balloon occlusion of the left circumflex artery (LCX), followed by rapid ventricular pacing induced with pacemaker implantation. Eight weeks later, the stem cells were administered by intramyocardial injection in the peri-infarct area. Then the infarct size, cell survival, and left ventricular function (including echocardiography, hemodynamic parameters, and electrophysiology) were evaluated. This study helps establish a stable preclinical large animal HF model for stem cell treatment.

We sought to establish a swine model of heart failure induced by left circumflex artery blockage and rapid pacing to test the effect and safety of intramyocardial administration of stem cells for cell-based therapies.

Kök Hücre Tedavisi Için Post-miyokard Enfarktüsü Kalp Yetmezliği Domuz Modeli Oluşturma

Although advances have been achieved in the treatment of heart failure (HF) following myocardial infarction (MI), HF following MI remains one of the major ...

Intramyocardial Transplantation of MSC-Loading Injectable Hydrogels after Myocardial Infarction in a Murine Model

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of transplanted cells within the injured myocardium, limiting their therapeutic efficacy. Recently, the use of scaffolding biomaterials has gained attention for improving and maximizing stem cell therapy. The objective of this protocol is to introduce a simple and straightforward technique to transplant bone marrow-derived mesenchymal stem cells (MSCs) using injectable hydroxyphenyl propionic acid (GH) hydrogels; the hydrogels are favorable as a cell delivery platform for cardiac tissue engineering applications due to their ability to be cross-linked in situ and high biocompatibility. We present a simple method to fabricate MSC-loading GH hydrogels (MSC/hydrogels) and evaluate their survival and proliferation in three-dimensional (3D) in vitro culture. In addition, we demonstrate a technique for intramyocardial transplantation of MSC/hydrogels in mice, describing a surgical procedure to induce myocardial infarction (MI) via left anterior descending (LAD) coronary artery ligation and subsequent MSC/hydrogels transplantation.

Stem cell-based therapy has emerged as an efficient strategy to repair injured cardiac tissues after myocardial infarction. We provide an optimal in vivo application for stem cell transplantation using gelatin hydrogels that are able to be enzymatically cross-linked.

Murine Modelinde Miyokard İnfarktüsünden Sonra MSC Yüklemeli Enjekte Edilebilir Hidrojellerin intramiyokardiyal Transplantasyonu

One of the major issues facing current cardiac stem cell therapies for preventing postinfarct heart failure is the low retention and survival rates of ...