Bu, ligatür yerleşimi ile kombine edilmiş lipopolisakkarit enjeksiyon tekniklerine dayanan deneysel periodontitisin sıçan modelidir ve hastalığın ilerlemesini incelemek ve periodontitis tedavilerini değerlendirmek için etkili bir yöntem sunar. Her iki tekniğin bireysel yöntemlerle birleştirilmesi, hızlı bir hastalık indüksiyonu ile sonuçlanır, yıkıcı inflamatuar yanıtı arttırır ve bağ dokusu kaybını ve alveoler kemik rezorpsiyonunu arttırır. Bu yöntem, periodontitis tedavilerinin etkisini değerlendirmek için değerli bir fırsat sağlar.
Prosedürü gösteren Dr.Oscar Villa, PhD. Ameliyattan önce tüm cerrahi aletleri sterilize ederek başlayın. PBS veya salin içinde seyreltilmiş bir mililitre ksilazin ile 1.6 mililitre ketamin karıştırarak ketamin ve ksilazin karışımı hazırlayın ve stoğu dört santigrat derecede saklayın.
Atipamezol'ü mililitre başına 0.25 miligramlık nihai bir konsantrasyona ve buprenorfin'i PBS veya salin cinsinden mililitre başına 0.03 miligramlık bir nihai konsantrasyona seyreltin ve stokları dört santigrat derecede saklayın. Bir mililitre PG-LPS'yi steril salin içinde hazırlayın ve stoğu eksi 20 santigrat derecede saklayın. Deney için dişi ve erkek Wistar fareleri kullanın.
Hayvanları gruplar halinde uygun ortamda, yiyecek ve standart su ile ad libitum olarak saklayın. Sıçan uyuşturulduktan sonra, hayvanı ısıtılmış bir cerrahi platforma sırt üstü yerleştirin. Isı kaybını önlemek için işlem sırasında hayvanın vücudunu örtün.
Küçük bir burun konisi kullanarak% 100 oksijen uygulayın ve nabız oksimetresi ile nabız hızını ve oksijen doygunluğunu izleyin. Şimdi, kesici dişlerin etrafında alüminyum bir ağız tıkaç kullanarak sıçan ağzını açın. Dili onunla geri çekin ve maksilla ve mandibulayı açık, rahat bir çalışma pozisyonunda stabilize ederek mandibuler azı dişlerine erişim sağlayın.
GCF'yi toplam dört emici kağıt noktası numarası 30 kullanarak, hafif bir direnç gösterene kadar M1'in meziopalatalının etrafındaki dişeti yarığına yerleştirerek toplayın. Hemen çıkarmadan önce kağıt noktasını 30 saniye boyunca aynı konumda tutun. Toplandıktan sonra, kağıt noktasını hemen plastik bir şişeye aktarın ve tahlil performansına kadar eksi 80 santigrat derecede saklayın.
Dikişin distal kuyruğunu dişlenmenin damak tarafına yerleştirin ve proksimal segmenti M1 ve ikinci maksiller azı dişlerinin teması arasına yerleştirin. Sütürü sulkus içine yerleştirmek için periosteal mikrocerrahi asansörü kullanın. Ligatürü M1'in bukkal yüzeyinin etrafına çok dikkatli bir şekilde sarın, çünkü bu seviyedeki dokular dar bir bağlı dişeti bölgesi sunar.
Dişeti sulkusuna sürülmek üzere dikişin her iki ucunda sıkıldığından emin olun. Daha sonra, dikişin uçlarını bir cerrahın düğümü ile bağlayın ve kuyrukları mümkün olduğunca kısa kesin. Düğümü sulkusa yerleştirin.
Ligatür konumlandırmadan sonra, M1'in meziopalatal tarafındaki subgingival dokuya steril salin içinde 40 mikrolitre PG-LPS enjekte edin. Ligatürü incelemek ve ayarlamak için, anestezi uygulanan hayvanı sırtına yerleştirin ve işlem sırasında hayvan anestezisinin sürdürülmesi için% 1 izofluran ve% 100 oksijen içeren küçük bir burun konisi kullanın. Kesici dişlerin etrafındaki alüminyum ağız tıkaçlarını kullanarak sarma ağzını açın, dili onunla geri çekin ve maksilla ve mandibulayı açık, rahat bir çalışma pozisyonunda stabilize ederek ligatürlere erişim sağlayın.
Periosteal mikrocerrahi asansör yardımıyla bağları dişetine karşı sıkın ve bağların dikişinin yerleştirildiğinden emin olun, bu da dişeti çevresinde iltihap oluşturur. Ligatür ayarlamasından sonra, daha önce gösterildiği gibi, M1'in meziopalatal tarafındaki subgingival dokuya iki taraflı olarak 40 mikrolitre PG-LPS enjekte edin. Hayvanı 14. günde kurban ettikten sonra, daha önce gösterildiği gibi GCF'yi toplayın.
Kağıt noktasını hemen plastik bir şişeye aktarın ve tahlil performansına kadar eksi 80 santigrat derecede saklayın. Maksiller azı dişlerinin alveoler kemiğinin iki boyutlu görüntüleri, periodontitis kurulduktan sonra bazal kontrolde daha fazla kemik hacmi ve daha yüksek alveoler kemik kaybı göstermektedir. Sagital görüntülerin analizi, periodontitis kuruluşundan sonra M1 ve M2'nin interradiküler kemik bölgesinde, bazal kontrol grubuna kıyasla daha belirgin bir alveoler kemik kaybını vurgulamaktadır.
Fedakarlıktan sonra, damak, M1'deki dişeti çekilmesinde farklı gruplar arasında farklılıklar gösterdi. Periodontitis grubu, bazal kontrol grubuna göre maksiller azı dişleri çevresinde daha belirgin apikal dişeti göçü ve dişeti iltihabı gösterir. Ayrıca, periodontitis grubu, GCF'den pro-inflamatuar sitokin 1L-1 beta'nın kontrol grubundan anlamlı derecede daha yüksek bir salınımı göstermiştir.
Prosedürdeki önemli adımlar, sütür ve düğümün sulkusa doğru yerleştirilmesi, ligatürün uygun şekilde ayarlanması ve 14 günlük protokol sırasında doğru lipopolisakkarit enjeksiyonudur.
