Bu çalışma Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı tarafından desteklenmiştir (No.82074523,82104996).

Tüm hayvan deneyleri, Pekin Çin Tıbbı Üniversitesi Hayvan Etik Komitesi tarafından gözden geçirilmiş ve onaylanmıştır (No. BUCM-4-2022010101-1097). Bu protokolde, 24 adet 6 haftalık erkek Yeni Zelanda tavşanı, 20-25 °C, %50-60 nem ve 12 saat aydınlık/12 saat karanlık sirkadiyen döngüsü gibi belirli bir koşul altında barındırıldı. Tavşanlar uyuşturuldu ve derin anestezi ve hava embolizasyonu kombine edilerek sakrifiye edildi. Ağrı, KOA'nın tipik patolojik özelliklerinden biridir ve aynı zamanda KOA'nın hayvan modellerini ve müdahale yöntemlerini değerlendirmek için kullanılan anahtar göstergelerden biridir, bu nedenle model hazırlama sırasında analjezikler kullanılmaz.
1. KOA tavşan modeli
<ol><li>Tavşanları kulak kenarında intravenöz olarak %3 pentobarbital sodyum (30 mg/kg) ile uyuşturun. Uygun anestezi seviyesini doğrulamak için, cildi hemostatik forseps ile klempledikten sonra önemli ölçüde zayıflamış veya yok olmuş bir kornea refleksi ve ağrı olup olmadığına bakın. Anestezi sırasında, tavşanların gözlerinin kurumasını önlemek için her 15 dakikada bir tavşanların gözlerine 2-3 damla kayganlaştırıcı ekleyin.</li>
	<li>Anesteziden sonra, her tavşanı sırtüstü pozisyonda sabitleyin ve sol arka ayağı tamamen uzatılmış bir pozisyona çekin.</li>
	<li>Her tavşanın sol arka bacaklarını uzatılmış pozisyonda sabitleyin.<ol><li>İlk katman olarak, tavşanın derisini kasıktan ayak bileği eklemine kadar kaplamak için tıbbi bant kullanın.</li>
		<li>İkinci katman olarak, tıbbi bandın üzerine 36 mm genişliğinde, çift taraflı köpük bant sarın ve ardından kasıktan ayak bileği eklemine bir polimer bandaj sarın. Diz ekleminin 180° düz olduğundan ve ayak bileği ekleminin 60° dorsifleksiyonlu olduğundan emin olun.</li>
		<li>Üçüncü katman olarak, diz ve ayak bileği eklemlerinin önündeki ve arkasındaki küçük atellerle eklemleri hareketsiz hale getirin ve ısırıklara karşı korumak için en dış katmanın etrafına çelik ağ sarın. Kan dolaşımının normal olup olmadığını gözlemlemek için tavşanların ayak parmaklarını açığa çıkarın.</li>
	</ol></li>
	<li>KOA modelini oluşturmak için hayvanları 6 hafta boyunca hareketsiz hale getirin (Şekil 1). NOT: 1) Model hazırlığı sırasında kalıpları gün aşırı kontrol edin. Herhangi bir kalıp gevşemiş veya ayrılmışsa, tavşanları uyuşturun ve sol arka bacakları uzun bir pozisyonda yeniden hareketsiz hale getirin. 2) Tavşanların uzuvlarının sıkışmasını ve yaralanmaya neden olmasını önlemek için kafeslerin altına koruyucu paspaslar koyun.</li>
</ol>2. Akupotomi müdahalesi
NOT: Akupotomi müdahalesine başlamadan önce, tavşanları kulak kenarı intravenöz enjeksiyonu ile% 3 pentobarbital sodyum (30 mg / kg) ile uyuşturun.
<ol><li>Tedavi noktalarını belirleyin.<ol><li>Tavşanın sol arka bacağının diz ekleminin kürkünü tıraş edin.</li>
		<li>Tavşan diz eklemi medial femoral kas tendonu yerleştirilmesi, rektus femoral tendon yerleştirilmesi, pazı femoris tendonu yerleştirilmesi ve kaz ayağı bursasını palpe edin. Lokal kasların patolojik endurasyonlarını steril bir cilt işaretleyici ile işaretleyin. Diz eklemini dönüşümlü tıbbi iyodofor ve% 75 tıbbi alkol ile üç kez dezenfekte edin.</li>
	</ol></li>
	<li>Akupotomi operasyonu<ol><li>Akupotomi bıçağını tendona ve uzvun uzunlamasına eksenine paralel hareket yönüne paralel tutun.</li>
		<li>İşaretleme noktasına giren cilde bastırmak için sol elin başparmağını kullanın ve başparmağın ventral tarafında kan damarları ve sinirler ayrılacak şekilde yanal olarak hareket edin.</li>
		<li>Akupotomi sapı sağ elinizdeyken, akupotomi bıçağının anında deriden geçmesi için küçük bir kuvvetle hızlıca bastırın. Akupotomi bıçağını yavaşça yerel kas endurasyonlarına ilerletin ve uzunlamasına kesimler yapın ve yanal olarak sallanın.</li>
		<li>Akupotomi operasyonu tamamlandıktan sonra diz eklemini tekrar dezenfekte edin ve yara bandı uygulayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Bu işlemi 4 hafta boyunca haftada bir kez gerçekleştirin (Şekil 2). NOT: 1) Vastus medialis, vastus lateralis, rektus femoris, biceps femoris veya anserin bursa'nın tendon girişinde herhangi bir endurasyon veya kordon benzeri doku dokunulmamışsa, tendon girişlerini doğrudan serbest bırakmak için akupotomi iğnesi kullanılmalıdır. 2) Akupotomi müdahalesi sırasında akupotomi grubundaki tavşanların ve ekstansiyon pozisyonundaki model grubunun sol arka bacaklarını hareketsiz hale getirmeyin.</li>
</ol>3. Kuadriseps femoris'in elastik modülü
NOT: 1) Bu deney, her tavşan grubunda in vivo olarak kuadriseps femorisin elastik modülünü ölçmek için gerçek zamanlı kesme dalgası elastografisi (SWE) ultrason tanı cihazını kullandı. 2) Test cihazı, ultrason tespitinde deneyimli bir sonografi uzmanı olmalıdır. Ölçüm yaparken, lokal kas gerginliğini önlemek için ultrason probu kuadrisepslerin cilt yüzeyine nazikçe yerleştirilmelidir. Hayvan sessiz bir durumdayken, mücadele etmeden veya aktivite yapmadan ölçümlerin yapılması gerekir. Hayvan aktifse, testi yapmadan önce sakinleşene kadar bekleyin.
<ol><li>Sol arka ayağın kuadriseps bölgesindeki cildi ortaya çıkarmak için kürkü tıraş edin.</li>
	<li>Kuadriseps kas-karın bölgesini bulmak ve 1-2 cm derinliğe ayarlanmış ilgi bölgesini (ROI) belirlemek için geleneksel iki boyutlu ultrason kullanın.</li>
	<li>İnceleme için SWE modunu başlatın.<ol><li>İlgilenilen alanı 2 mm çapında dairesel bir alana ve ilgilenilen alanı cilt yüzeyinden ~ 0,5-1 cm derinliğe eşit şekilde ayarlayın.</li>
		<li>Kas dokusunu uyarmak ve doku elastografisi elde etmek için akustik bir radyasyon kuvveti darbesi oluşturmak için ultrasonik teşhis cihazını kullanın.</li>
		<li>Görüntünün sabitlenmesi için 2-3 saniye bekleyin ve ardından görüntüyü dondurun. Kuadriseps kasının Young modülünü ölçmek için cihazın Q-BOX işlevini etkinleştirin.</li>
		<li>Sistemin, Young'ın ROI modülünün maksimum, minimum ve ortalama değerlerini (birim: KPa) otomatik olarak hesaplamasını bekleyin. Üç ölçüm için aynı derinlikte üç ROI seçin ve istatistiksel analiz için ortalama değeri alın. NOT: Test cihazı, ultrason tespitinde deneyimli bir sonografi uzmanı olmalıdır. Ölçüm yaparken, lokal kas gerginliğini önlemek için ultrason probu kuadrisepslerin cilt yüzeyine nazikçe yerleştirilmelidir. Hayvan sessiz bir durumdayken, mücadele etmeden veya aktivite yapmadan ölçümlerin yapılması gerekir. Hayvan aktifse, testi yapmadan önce sakinleşene kadar bekleyin.</li>
	</ol></li>
</ol>4. Kuadriseps femoris'in kasılma kuvvetinin ölçülmesi
NOT: Kuadriseps femorisin kasılma kuvvetinin ölçülmesinden sonra, tavşanlara anestezi altında hava embolisi ile ötenazi yapıldı.
<ol><li>Tavşanları kulak kenarında intravenöz olarak %3 pentobarbital sodyum (30 mg/kg) ile uyuşturun. Uygun anestezi seviyesine ulaşıldığını doğrulamak için, cildi hemostatik forseps ile klempledikten sonra önemli ölçüde zayıflamış veya yok olan kornea refleksini ve ağrı olup olmadığını arayın. Anestezi sırasında, tavşanların gözlerinin kurumasını önlemek için her 15 dakikada bir tavşanların gözlerine 2-3 damla kayganlaştırıcı ekleyin.</li>
	<li>Kuadriseps kaslarını açığa çıkarın ve gerginlik dönüştürücüyü takın.<ol><li>Cildi patellanın altında, uzuvun uzunlamasına ekseni boyunca uyluğun tabanına doğru kesin ve cildi 3-4 cm yukarı doğru kesmeye devam edin. Cildi ve fasyayı dikkatlice soyun ve kası ortaya çıkarın. Patellar ligamenti kesin ve kuadrisepsleri iliak bileşkeden dikkatlice ayırın, kuadrisepsleri iliacium ile bağlantılı tutun.</li>
		<li>Cerrahi dikişleri patella ve kuadriseps kası arasındaki tendon kavşağındaki dikişleri bağlayın. Kası doğal haliyle tam uzunluğuna kadar gerin ve ardından gerginlik dönüştürücüsüne takın. Kas üzerindeki ligasyon çizgisini, kuvvet dönüştürücüsündeki ligasyon çizgisi ile düz bir çizgide tutun.</li>
		<li>Gerilim dönüştürücüyü brakete sabitleyin. Gerilim dönüştürücüsündeki sinyal toplama hattını biyosinyal toplama sistemi işlemcisine bağlayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Kuadriseps kasının kasılma performansını ölçün.<ol><li>Elektrotları kuadriseps karnına paralel olarak yerleştirin ve elektrotlar arasında herhangi bir temastan kaçının.</li>
		<li>Osiloskop düğmesine basın. Taban çizgisini sıfırda tutmak için kuvvet dönüştürücüsünün braket üzerindeki konumunu ayarlayın. Stimülatörün stimülasyon parametrelerini 5 ms dalga genişliği ve 10 ms gecikme ile seçin.</li>
		<li>Önce tek bir uyaran kullanın ve her seferinde 0,1 V'luk bir artışla uyaran yoğunluğunu sıfırdan kademeli olarak ayarlayın. Kuadrisepslerin maksimum tek kasılma genliği (Pt) belirlenene kadar kas kasılma eğrisi ve kasılma genliğindeki değişiklikleri gözlemleyin. Sonraki istatistikler için kaydedin.</li>
		<li>Bir küme uyaranı kullanın ve kası sürekli olarak uyarmak ve uyaran frekansını kademeli olarak artırmak için temel olarak maksimum tek kasılma genliğini indükleyen uyaran genliğini kullanın. Kuadrisepslerin maksimum kasılma genliği (Pt) belirlenene kadar kas kasılma eğrisindeki değişiklikleri gözlemleyin. Sonraki istatistikler için kaydedin. NOT: 1) Her kas kasılmasından sonra, kas tampon solüsyonu kas üzerine sürekli damlatılarak kasın gevşemesi için 30 saniye verilmelidir. 2) Operasyon sırasında, tavşanların göz kapağı refleksini, solunum ritmini, kas gevşemesini ve cilt sıkışma tepkisini izleyerek anestezi durumunu değerlendirin.</li>
	</ol></li>
</ol>5. Kuadriseps tendonunun mekanik performansı
<ol><li>Ön işleme: Test gününde, kuadriseps tendonunun uzunluğunu, genişliğini ve kalınlığını sürmeli bir kumpas ile ölçün ve yorulma test makinesine özel bir kaymaz kelepçe takın. Ön işleme için yükleme ve boşaltmayı 15 kez tekrarlayın.</li>
	<li>Gerilme gevşeme testi: 0 N ila 100 N arasında değişen sensörü kullanın, gerekli uzunluğa ulaşana kadar 5 mm/dak hızla gerin ve ardından veri toplamaya başlayın. Bilgisayar veri toplama süresini t (0) olarak ayarlayın, her 0,1 saniyede bir veri toplayın ve 1.800 saniye bekleyin. Ayarlanan süreye ulaştıktan sonra, verileri ve eğrileri kaydedin.</li>
	<li>Çekme testi: 0 N ila 100 N arasında değişen sensörü kullanın ve numune ayrılana kadar maksimum yüke kadar 5 mm/dak hızında gerin. Testten sonra, numunenin maksimum yer değiştirmesini, nihai yükünü ve sertliğini hesaplayın.</li>
</ol>6. Eklem temas yüzeyi basıncı ve kıkırdağın birim alanı başına basınç
<ol><li>Femur ve tibia örneklerini her iki tarafa fikstür üzerinde düz bir konumda sabitleyin ve bir ön yük testi yapın. Diz ekleminin yaklaşık aralığını ölçün, basınca duyarlı kağıdı aynı şekilde kesin ve streç filmle kapatın.</li>
	<li>Sızdırmaz basınca duyarlı kağıdı tibia ve femur eklemleri arasına yerleştirin ve diz eklemi üzerinde 5 mm/dak basınç ve maksimum 50 N basınçla basınç testi yapın. Basınca duyarlı kağıt sabit bir şekilde renklendirildiğinde basıncı 2 N'ye ulaşana kadar 50 dakika koruyun.</li>
	<li>2 dakika sonra, basınca duyarlı kağıdı çıkarın, renkli yüzeyi A4 boyutunda bir kağıda sabitleyin ve ölçek bir kenara bırakılmış olarak görüntüler elde edin.</li>
	<li>Resmi bilgisayara yükleyin. Alan ölçümü ve düzensiz şekiller için çok segmentli ölçüm için referans verilen yazılımı kullanın. Femur ve tibia eklemlerinin iç ve dış kısmındaki basıncı ölçün ve sonuçları kaydedin.</li>
</ol>7. Diz eklemi kıkırdağının Safranin O / Fast Green boyaması
<ol><li>Akupotomi müdahalesinin bitiminden sonra, kıkırdak-subkondral kemik kompleks dokularını alın ve parafine gömün. Hazırlanan doku balmumu bloklarını dilimleyin ve slaytlar hazırlayın. Hazırlanan doku slaytlarını her biri 15 dakika boyunca çevresel mum alma solüsyonu (I) ve çevresel mum alma solüsyonu (II) ile deparafinize edin; daha sonra, bunları art arda ksilen ve susuz etanol (1:1), susuz etanol (I), %95 etanol, %85 etanol ve %75 etanole, her adımda 2-5 dakika daldırın; Ve son olarak, 15 dakika damıtılmış suda bekletin.</li>
	<li>Boyama yapın.<ol><li>Slaytları 1 dakika boyunca Fast Green solüsyonu ile boyayın. Bu işlem sırasında, slaytları çözeltiden çıkarın ve doku koyu yeşile boyanana kadar mikroskop altında gözlemleyin.</li>
		<li>Renk ayrımı: Fazla Fast Green solüsyonunu ultra saf suyla durulayın. Slaytları hızlı bir şekilde% 1 asetik asit çözeltisinde 5 - 10 saniye bekletin.  Yine, slaytı ultra saf suyla durulayın.</li>
		<li>Slaytları Safranine O solüsyonunda kıkırdak kırmızıya boyanana kadar 10-15 dakika boyayın.</li>
	</ol></li>
	<li>Dokuyu kurutun ve berraklaştırın, cam slaytları kapatın ve mikroskop altında gözlemleyin.<ol><li>Slaytları art arda %75 etanol, %85 etanol, %95 etanol ve %100 etanol içinde 3-5 saniye bekletin.</li>
		<li>Slaytları art arda 10 dakika boyunca çevresel mum alma çözeltisine (I) ve çevresel mum alma çözeltisine (II) batırın. Slaytları çıkarın ve nötr reçineli ortamı slaytların önüne bırakarak dokudan kaçının. Kapak camının kenarını sürgünün üzerine yerleştirin ve ardından nötr balzamı örtmek için yavaşça aşağı indirin. Havayı çıkarın ve hava kabarcıklarını önleyin. Ekstra ksilen ve nötr balsamı silin ve gece boyunca oda sıcaklığında bekletin.</li>
		<li>Slaytları mikroskop altında gözlemleyin ve görüntüler elde edin. Her grup için altı tavşan diz kıkırdağı örneği seçin ve değerlendirme için her örnek için rastgele dört farklı görüntüleme alanı seçin. Her grubun kıkırdak histolojisini Mankin yöntemine göre puanlayın (Tablo 1).</li>
	</ol></li>
</ol>8. İstatistiksel analiz
<ol><li>Verileri ortalama ± standart sapma (<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65584/65584eq01.jpg" style="margin: auto;"> ± s) olarak ifade edin.</li>
	<li>Çoklu grup karşılaştırmalarının istatistiksel anlamlılığını belirlemek için tek yönlü varyans analizi (ANOVA) ve LSD testi gerçekleştirin.</li>
	<li>P < 0.05 olduğunda farklılıkları istatistiksel olarak anlamlı olarak düşünün.</li>
</ol>

Modifiye Videman Yöntemi Kullanılarak Tavşanlarda KOA Modelinin Kurulması

<ol>
	<li>Roseti, L., Desando, G., Cavallo, C., Petretta, M., Grigolo, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Articular+cartilage+regeneration+in+osteoarthritis.">Articular cartilage regeneration in osteoarthritis.</a> Cells. 8 (11), 1305 (2019).</li><li>Cui, A. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global,+regional+prevalence,+incidence+and+risk+factors+of+knee+osteoarthritis+in+population-based+studies.">Global, regional prevalence, incidence and risk factors of knee osteoarthritis in population-based studies.</a> EClinicalMedicine. 29-30, 100587 (2020).</li><li>Miyauchi, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alleviation+of+murine+osteoarthritis+by+deletion+of+the+focal+adhesion+mechanosensitive+adapter,+Hic-5.">Alleviation of murine osteoarthritis by deletion of the focal adhesion mechanosensitive adapter, Hic-5.</a> Sci Rep. 9 (1), 15770 (2019).</li><li>Wright, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomechanical+factors+in+osteoarthritis:+the+effects+of+joint+instability.">Biomechanical factors in osteoarthritis: the effects of joint instability.</a> HSS J. 8 (1), 15-17 (2012).</li><li>Patsika, G., Kellis, E., Kofotolis, N., Salonikidis, K., Amiridis, I. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Synergetic+and+antagonist+muscle+strength+and+activity+in+women+with+knee+osteoarthritis.">Synergetic and antagonist muscle strength and activity in women with knee osteoarthritis.</a> J Geriatr Phys Ther. 37 (1), 17-23 (2014).</li><li>Blalock, D., Miller, A., Tilley, M., Wang, J. X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Joint+instability+and+osteoarthritis.">Joint instability and osteoarthritis.</a> Clin Med Insights. Arthritis and Musculoskelet Disord. 8, 15-23 (2015).</li><li>Henriksen, M., Christensen, R., Danneskiold-Sams&#248;e, B., Bliddal, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Changes+in+lower+extremity+muscle+mass+and+muscle+strength+after+weight+loss+in+obese+patients+with+knee+osteoarthritis:+a+prospective+cohort+study.">Changes in lower extremity muscle mass and muscle strength after weight loss in obese patients with knee osteoarthritis: a prospective cohort study.</a> Arthritis Rheum. 64 (2), 438-442 (2012).</li><li>Schwartz, A. G., Lipner, J. H., Pasteris, J. D., Genin, G. M., Thomopoulos, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Muscle+loading+is+necessary+for+the+formation+of+a+functional+tendon+enthesis.">Muscle loading is necessary for the formation of a functional tendon enthesis.</a> Bone. 55 (1), 44-51 (2013).</li><li>Felson, D. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis+as+a+disease+of+mechanics.">Osteoarthritis as a disease of mechanics.</a> Osteoarthr Cartil. 21 (1), 10-15 (2013).</li><li>Ma, S. N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+acupotomy+on+FAK-PI3K+signaling+pathways+in+KOA+rabbit+articular+cartilages.">Effect of acupotomy on FAK-PI3K signaling pathways in KOA rabbit articular cartilages.</a> Evid Based Complement Alternat Med. 2017, 4535326 (2017).</li><li>Yu, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+of+experimental+animal+models+of+knee+osteoarthritis.">Research progress of experimental animal models of knee osteoarthritis.</a> China Medical Herald. 16 (27), 41-44 (2019).</li><li>Li, L. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+of+rabbit+knee+osteoarthritis+model.">Research progress of rabbit knee osteoarthritis model.</a> Journal of Jiangxi University of Chinese Medicine. 31 (4), 108-113 (2019).</li><li>Zhang, W., Gao, Y., Guo, C. Q., Khattab, I. Z. A., Mokhtari, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+acupotomy+versus+electroacupuncture+on+ethology+and+morphology+in+a+rabbit+model+of+knee+osteoarthritis.">Effect of acupotomy versus electroacupuncture on ethology and morphology in a rabbit model of knee osteoarthritis.</a> J Tradit Chin Med. 39 (2), 229-236 (2019).</li><li>An, X. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chondroprotective+effects+of+combination+therapy+of+acupotomy+and+human+adipose+mesenchymal+stem+cells+in+knee+osteoarthritis+rabbits+via+the+GSK3+beta-cyclin+D1-CDK4/CDK6+signaling+pathway.">Chondroprotective effects of combination therapy of acupotomy and human adipose mesenchymal stem cells in knee osteoarthritis rabbits via the GSK3 beta-cyclin D1-CDK4/CDK6 signaling pathway.</a> Aging Dis. 11 (5), 1116-1132 (2020).</li><li>Guo, C. Q., Liu, N. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+on+the+distribution+features+of+Ashi+points+in+Jingjin+disorders.">Analysis on the distribution features of Ashi points in Jingjin disorders.</a> Journal of Basic Chinese Medicine. 17 (8), 899-900 (2011).</li><li>Guo, C. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+acupotomy+therapy+on+tenderness+point+around+knee+joint+in+patients+with+knee+osteoarthritis:+a+randomized+controlled+clinical+trial.">Effects of acupotomy therapy on tenderness point around knee joint in patients with knee osteoarthritis: a randomized controlled clinical trial.</a> Journal of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine. 33 (3), 3-5 (2010).</li><li>Zhao, Y., Dong, F. H., Zhang, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Analysis+of+soft+tissues+mechanical+changes+and+treatment+of+meridian+tendon+pain.">Analysis of soft tissues mechanical changes and treatment of meridian tendon pain.</a> Beijing Journal of Traditional Chinese Medicine. (9), 705-707 (2008).</li><li>Zhang, L. P., Cheng, F., Liu, D. Y., Zhu, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Application+progress+of+biomechanics+in+knee+osteoarthritis.">Application progress of biomechanics in knee osteoarthritis.</a> Chinese Archives of Traditional Chinese Medicine. 34 (7), 1644-1647 (2016).</li><li>Thomas, A. C., Sowers, M., Karvonen-Gutierrez, C., Palmieri-Smith, R. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+quadriceps+dysfunction+in+women+with+early+knee+osteoarthritis.">Lack of quadriceps dysfunction in women with early knee osteoarthritis.</a> J Orthop Res. 28 (5), 595-599 (2010).</li><li>Li, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+unloaded+muscle+atrophy+on+contractile+characteristics+of+hind-limb+skeletal+muscles+in+mice.">Effects of unloaded muscle atrophy on contractile characteristics of hind-limb skeletal muscles in mice.</a> Space Med Med Eng. 25 (5), 322-325 (2012).</li></ol>

Yazarların ifşa edecek herhangi bir çıkar çatışması yoktur.

Uygun bir hayvan modeli, deneysel hedeflere ulaşmak ve belirli bir bilimsel soruyu açıklığa kavuşturmak için kilit faktörlerden biridir. Bu çalışma, akupotomolojide "Zongjin'in kemikleri kontrol etmesi ve eklemleri yağlaması" ve "mekanik dengesizlik" teorilerine dayandırılarak, akupotomi tedavisinde "kemik bozukluklarını tedavi etmek için kasları ve tendonları modüle ederek" KOA tedavisinin arkasındaki bilimsel çağrışımı açıklamayı amaçlamıştır. Başka bir deyişle, akupotomi, dejeneras...

Diz osteoartriti (KOA), osteoartritin en sık görülen şeklidir ve genellikle eklem kıkırdak dejenerasyonu ile karakterize bir tüm eklem hastalığı olarak tanınır ve klinik olarak ağrı, şişme ve etkilenen eklemlerin sınırlı hareketi olarak kendini gösterir1. Son epidemiyolojik istatistiklere göre, KOA'nın 2020 yılına kadar dünya çapında 40 yaş ve üstü 654,1 milyon kişiyi etkilediği bildiriliyor. KOA prevalansı ve insidansı yaşla birlikte artar, orta yaşlı ve yaşlı erişkinlerde en yüksektir ve erkeklerden daha fazla kadını etkiler2. Dünya çapında yaşlanan nüfus ve obezite salgını nedeniyle KOA prevalansının artması muhtemeldir ve küresel halk sağlığı için büyüyen bir tehdit oluşturmaktadır. Yaş, cinsiyet, obezite, travma ve KOA ile ilişkili diğer karmaşık risk faktörlerinin tümü diz instabilitesini doğrudan etkiler ve diz eklemlerinde biyomekanik dengesizliği KOA3'ün birincil nedenlerinden biri haline getirir.
Normal fizyolojik şartlarda diz eklemi mekanik denge halindedir ve eklemdeki mekanik yüklerin kıkırdak üzerinde eşit olarak dağılmasını sağlar. Diz eklemindeki herhangi bir mekanik dengesizlik, kıkırdakta anormal strese yol açarak kıkırdak dejenerasyonuna ve KOA4'ün başlamasına neden olabilir. Kas-tendon sistemi, diz ekleminin mekanik dengesini koruyan ana dinamik sistemdir. Ekstansör ve fleksör kas-tendon sisteminin koordineli hareketi, hareketin ürettiği yükü kıkırdak yüzeyinde eşit olarak dağıtarak, kıkırdak kaybına neden olan fizyolojik yükünün ötesinde lokal kıkırdak streslerinin metabolik dengesizliğini önleyebilir5. Azalmış kas gücü, semptomatik KOA öncesi ortaya çıkabilen kas içi hareket bozukluğu ve kıkırdak hasarının ana nedenidir. 
KOA ayrıca artrojen kas inhibisyonunu () indükleyerek kas güçsüzlüğü ve diz çevresinde kas kuvvetinin azalması olarak ortaya çıkabilir6. Bu kaslar arasında kuadriseps femoris grubu, diz eklemi stabilitesinin korunmasında önemli bir yapı olan tek diz ekstansörü olarak işlev görür. Çalışmalar, kuadriseps kesit alanında ve kas gücünde bir azalmanın KOA ilerlemesi ile anlamlı ve pozitif ilişkili olduğunu göstermiştir7. Kuadriseps gücündeki düşüş, yürüyüş paternini, diz stabilitesini, hareket paternlerini ve diğer birçok işlevi etkiler. Ayrıca, kas gücündeki düşüş, tendon sertliğinde, elastik modülde ve diğer biyomekanik özelliklerde bir azalma olarak kendini gösteren tendon fonksiyonunu bozar8. Uzun süreli zorlanma onarımında, diz ekleminin kas ve tendonlarında adezyon ve kontraktür gibi değişiklikler meydana gelebilir, mekanik özelliklerine zarar verebilir, eklem instabilitesine neden olabilir ve sonuçta KOA'nın patolojik değişikliklerinin kısır döngüsünü oluşturabilir. Bu nedenle, kas-tendon sisteminin mekanik özelliklerini iyileştirmek ve eklem mekanik dengesini yeniden sağlamak KOA tedavisi için çok önemlidir.
KOA'nın nedenleri arasında biyomekanik dengesizlik diz ağrısı, disfonksiyon, inflamatuar lezyonlar ve kıkırdak dejenerasyonu için ana indükleyici faktördür9. Bu nedenle, KOA'yı tedavi etmenin anahtarı, diz ekleminin biyomekanik dengesini yeniden sağlamaktır. Akupotomoloji, KOA'nın etiyolojisi ve patogenezinin "mekanik dengesizlik" olduğuna inanmaktadır. Diz çevresindeki yumuşak dokuların mekanik özellikleri anormal şekilde değiştiğinde, diz eklemi mekanik dengesini kaybeder ve eklemin anormal mekanik stres ortamı dejenerasyonu hızlandırarak yumuşak doku adezyonlarını, kontraktürlerini daha da şiddetlendirmek için inflamatuar stimülasyona neden olur ve eklem stabilitesinde daha fazla azalma. Bu kısır döngü sonunda KOA'ya dönüşür. Akupotomi, yumuşak doku yapışıklıklarını ve kontraktürlerini gevşetmenin yanı sıra kaslardaki ve tendonlardaki stres konsantrasyonunu azaltarak, "Kemik Bozukluklarını Tedavi Etmek için Kasları ve Tendonları Modüle Etme" teorisi ile birlikte yumuşak doku mekaniğini iyileştirir ve eklemin mekanik stresini dengeleyen, kıkırdak dejenerasyonunu etkili bir şekilde hafifleten ve "kemik bozukluklarını tedavi eden" "kasları ve tendonları modüle eder"10. Hayvan modeli seçimi açısından, bu çalışmanın amacına dayanarak, KOA modelini sol arka bacak ekstansiyonunun modifiye edilmiş Videman yöntemi ile hazırladık.
Bu yazıda, sol arka ekstremite ekstansiyon immobilizasyonunun modifiye edilmiş Videman yöntemi kullanılarak KOA modelinin oluşturulması ve akupotominin operasyon yöntemi ve önlemleri detaylandırılmaktadır. Kuadriseps, femoris ve tendonun mekanik özelliklerini test ederek ve eklem kıkırdağı stresi ve morfolojisindeki değişiklikleri tespit ederek akupotominin etkinliğini gösteriyoruz.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Acupotomy</td>
			<td>Beijing Zhuoyue Huayou Medical Devices Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td>0.4 x 40 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Connect Cast Orthopedic Casting Tape</td>
			<td>Suzhou Connect Medical Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>KCP06</td>
			<td>15.0 cm x 360 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Double-sided Foam Tape</td>
			<td>Deli Group Co.,Ltd.</td>
			<td>NO.30416</td>
			<td>36 mm x 5 yard x 2.5 mm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Environmental Dewaxing Solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol absolute</td>
			<td>Beijing Hengkangda Medicine Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast Green solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1031</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fast grenn FCF</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>2353-45-9</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fatigue testing machine</td>
			<td>BOSE, America</td>
			<td></td>
			<td>Bose Electro Force 3300</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Four-channel physiological recorder</td>
			<td>Chengdu Instrumeny Frctory</td>
			<td></td>
			<td>RM-6420</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FPD-305E</td>
			<td>Fuji, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FPD-306E</td>
			<td>Fuji, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical iodophor disinfectant</td>
			<td>Shan Dong Lircon Medical Technology Co., Ltd.</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Medical Tape</td>
			<td>Shandong Rongjian Sanitary Products Co., Ltd.</td>
			<td>200402</td>
			<td>1.5 x 500 cm</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Muscle tension transducer&#160;</td>
			<td>Chengdu Instrumeny Frctory</td>
			<td></td>
			<td>JH-2204005, 50 g</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Prescale</td>
			<td>Fuji, Japan</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Real-time SWE ultrasound diagnostic instrument</td>
			<td>SuperSonic Imagine SA,France</td>
			<td></td>
			<td>SuperSonic Imagine AixPlorer</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rhamsan gum</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>WG10004160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranine O</td>
			<td>Sigma,America</td>
			<td>477-73-6</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Safranine O solution</td>
			<td>Wuhan Servicebio Technology Co.,Ltd.</td>
			<td>G1015</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Statistical Package for the Social Sciences (SPSS)</td>
			<td>IBM, America</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

application of acupotomy in a knee osteoarthritis model in rabbit

Diz osteoartriti (KOA), ortopedi bölümünde en sık karşılaşılan hastalıklardan biridir ve KOA'lı kişilerin yaşam kalitesini ciddi şekilde düşürmektedir. Çeşitli patojenik faktörler arasında, diz ekleminin biyomekanik dengesizliği KOA'nın ana nedenlerinden biridir. Akupotomoloji, diz ekleminin mekanik dengesinin yeniden sağlanmasının KOA tedavisinin anahtarı olduğuna inanmaktadır. Klinik çalışmalar, akupotominin diz eklemi çevresindeki kaslarda ve tendonlarda yapışmayı, yumuşak dokuların kasılmasını ve stres konsantrasyon noktalarını azaltarak ağrıyı etkili bir şekilde azaltabileceğini ve diz hareketliliğini iyileştirebileceğini göstermiştir. 
Bu protokolde, sol arka ayağı düz bir pozisyonda hareketsiz hale getirerek bir KOA modeli oluşturmak için modifiye edilmiş Videman yöntemini kullandık. Akupotomi ile ilgili operasyon yöntemi ve önlemleri ayrıntılı olarak özetledik ve kuadriseps, femoris ve tendonun mekanik özelliklerinin yanı sıra kıkırdak mekaniği ve morfolojisinin tespiti yoluyla "Kemik Bozukluklarını Tedavi Etmek için Kas ve Tendonların Modüle Edilmesi" teorisi ile birlikte akupotominin etkinliğini değerlendirdik. Sonuçlar, akupotominin diz eklemi çevresindeki yumuşak dokuların mekanik özelliklerini ayarlayarak, kıkırdak stres ortamını iyileştirerek ve kıkırdak dejenerasyonunu geciktirerek kıkırdak üzerinde koruyucu bir etkiye sahip olduğunu göstermektedir.

Knee osteoarthritis (KOA) is the most frequent form of osteoarthritis, often recognized as a whole-joint disease characterized by articular cartilage degeneration, which manifests clinically as pain, swelling, and limited movement of the affected joints1. According to recent epidemiological statistics, KOA is reported to have affected 654.1 million individuals globally who were 40 years of age or older by 2020. The prevalence and incidence of KOA rise with age, are the highest in middle-aged and older adults, and affect more women than men2. The prevalence of KOA is likely to increase due to the aging population and obesity epidemic worldwide, posing a growing threat to global public health. Age, sex, obesity, trauma, and other complicated risk factors associated with KOA all directly impact knee instability, making a biomechanical imbalance in knee joints one of the primary causes of KOA3.
Under normal physiological conditions, the knee joint is in a state of mechanical balance, ensuring that the mechanical loads in the joint are evenly distributed on the cartilage. Any mechanical imbalance in the knee joint can lead to abnormal stress in cartilage, resulting in cartilage degeneration and the onset of KOA4. The muscle-tendon system is the main dynamic system that maintains the mechanical balance of the knee joint. The coordinated movement of the extensor and flexor muscle-tendon system can evenly distribute the load generated by the movement on the cartilage surface, avoiding the metabolic imbalance of local cartilage stresses beyond its physiological load that results in cartilage loss5. Decreased muscle strength is the main cause of intramuscular movement disorder and cartilage damage, which may occur before symptomatic KOA. 
KOA can also induce arthrogenous muscle inhibition (AMI), manifesting as muscle weakness and decreased muscle strength around the knee6. Among these muscles, the quadriceps femoris group functions as the only knee extensor, an important structure in maintaining knee joint stability. Studies have shown that a decrease in quadriceps cross-sectional area and muscle strength is significantly and positively correlated with KOA progression7. The decline in quadriceps strength affects the gait pattern, knee stability, movement patterns, and many other functions. Moreover, the decline in muscle strength impairs tendon function, manifested as a decrease in tendon stiffness, elastic modulus, and other biomechanical properties8. In long-term strain repair, changes such as adhesion and contracture may occur in the muscles and tendons of the knee joint, damaging their mechanical properties, causing joint instability, and ultimately forming a vicious cycle of pathological changes of KOA. It is, therefore, crucial for KOA treatment to improve the mechanical properties of the muscle-tendon system and restore the joint mechanical balance.
Among the causes of KOA, biomechanical imbalance is the main inducing factor for knee pain, dysfunction, inflammatory lesions, and cartilage degeneration9. Therefore, the key to treating KOA is to restore the biomechanical balance of the knee joint. Acupotomology believes that the etiology and pathogenesis of KOA are "mechanical imbalance." When the mechanical characteristics of the soft tissues around the knee change abnormally, the knee joint loses its mechanical balance, and the abnormal mechanical stress environment of the joint accelerates degeneration, causing inflammatory stimulation to further aggravate the soft tissue adhesions, contractures, and further decline in joint stability. This vicious cycle eventually develops into KOA. By loosening soft tissue adhesions and contractures, as well as reducing stress concentration in the muscles and tendons, acupotomy in conjunction with the theory of "Modulating Muscles and Tendons to Treat Bone Disorders" improves the soft tissue mechanics and "modulates muscles and tendons," which balances the mechanical stress of the joint, effectively alleviating cartilage degeneration and "treating bone disorders"10. In terms of animal model selection, based on the purpose of this study, we prepared the KOA model by the modified Videman method of left hindlimb extension immobilization.
This paper details the establishment of the KOA model using the modified Videman method of left hind limb extension immobilization and the method of operation and precautions of acupotomy. We demonstrate the effectiveness of acupotomy by testing the mechanical properties of quadriceps femoris and tendon and detecting changes in articular cartilage stress and morphology.

Yazar Gündemi: Diz Osteoartriti Tedavisinde Akupotominin Etki Mekanizmasının Araştırılması

Tavşanda Diz Osteoartrit Modelinde Akupotomi Uygulaması

Our research scope is the study of the mechanism of action of acupotomy in the treatment of new osteoarthritis. The question we want to answer, the how acupotomy regulates the mechanical properties of the soft tissues around the knee to protect the cartilage. At present, micro CT, nuclear magnetic resonance, phenetole elemental analysis, and bio mechanical detection techniques can be used to promote research in this field.We found that acupotomy improved the mechanical properties of soft tissue by removing the excisions and pathological contractors around the knee, thereby playing a role in protecting cartilage. To a certain extent, this protocol explains the mechanism and reveals the scientific connotation of acupotomy in the treatment of KOA and fills the gap in the basic research of acupotomy tendon and bone treatment method. In the future, our laboratory will focus on the specific mechanism or action of the acupotomy tendon and bone control method on cartilage protection.

Kuadriseps, femoris ve tendonun mekanik özelliklerinin deneysel sonuçları KOA'lı tavşanlarda akupotomolojinin kuadriseps femorisin mekanik özellikleri üzerindeki etkisini değerlendirmek için sırasıyla gerçek zamanlı kayma dalgası elastik ultrason görüntüleme ve kas gerginliği transdüseri kullandık. Kontrol grubu ile karşılaştırıldığında, KOA grubunda kuadriseps femoris Young modülü azaldı (P < 0.05). KOA grubu ile karşılaştırıldığında, akupotomi grubunun...

Watch this Scientific Journal Video about Author Spotlight: Investigating the Mechanism of Action of Acupotomy in Treating Knee Osteoarthritis at JoVE.com

Bu protokolde modifiye Videman yöntemi kullanılarak diz osteoartriti modeli hazırlanmış olup, akupotominin operasyon prosedürleri ve önlemleri detaylandırılmıştır. Akupupotominin etkinliği, kuadriseps, femoris ve tendonun mekanik özellikleri ve kıkırdağın mekanik ve morfolojik özellikleri test edilerek gösterilmiştir.

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department, which seriously reduces the quality of life of ...

Araştırma kapsamımız, yeni osteoartrit tedavisinde akupotominin etki mekanizmasının incelenmesidir. Cevaplamak istediğimiz soru, akupotominin kıkırdağı korumak için diz çevresindeki yumuşak dokuların mekanik özelliklerini nasıl düzenlediğidir. Şu anda, bu alandaki araştırmaları teşvik etmek için mikro BT, nükleer manyetik rezonans, fenetol element analizi ve biyomekanik algılama teknikleri kullanılabilir.Akupotominin diz çevresindeki eksizyonları ve patolojik yüklenicileri çıkararak yumuşak dokunun mekanik özelliklerini iyileştirdiğini ve böylece kıkırdağın korunmasında rol oynadığını bulduk. Bu protokol bir dereceye kadar KOA tedavisinde akupotominin mekanizmasını açıklamakta ve bilimsel çağrışımını ortaya koymakta ve akupotomi tendonu ve kemik tedavi yönteminin temel araştırmalarındaki boşluğu doldurmaktadır. Gelecekte, laboratuvarımız akupotomi tendonu ve kemik kontrol yönteminin kıkırdak koruması üzerindeki spesifik mekanizmasına veya etkisine odaklanacaktır.

application-of-acupotomy-in-a-knee-osteoarthritis-model-in-rabbit

Research

JoVE Journal

Medicine

Application of Acupotomy in a Knee Osteoarthritis Model in Rabbit

680 Görüntüleme.  Beijing University of Chinese Medicine. Araştırma kapsamımız, yeni osteoartrit tedavisinde akupotominin etki mekanizmasının incelenmesidir. Cevaplamak istediğimiz soru, akupotominin kıkırdağı korumak için diz çevresindeki yumuşak dokuların mekanik özelliklerini nasıl düzenlediğidir. Şu anda, bu alandaki araştırmaları teşvik etmek için mikro BT, nükleer manyetik rezonans, fenetol element analizi ve biyomekanik algılama teknikleri kullanılabilir.Akupotominin diz çevresindeki eksizyonları ve patolo...

Video: Yazar Gündemi: Diz Osteoartriti Tedavisinde Akupotominin Etki Mekanizmasının Araştırılması

Knee osteoarthritis (KOA) is one of the most frequently encountered diseases in the orthopedic department, which seriously reduces the quality of life of people with KOA. Among several pathogenic factors, the biomechanical imbalance of the knee joint is one of the main causes of KOA. Acupotomology believes that restoring the mechanical balance of the knee joint is the key to treating KOA. Clinical studies have shown that acupotomy can effectively reduce pain and improve knee mobility by reducing adhesion, contracture of soft tissues, and stress concentration points in muscles and tendons around the knee joint. 
In this protocol, we used the modified Videman method to establish a KOA model by immobilizing the left hindlimb in a straight position. We have outlined the method of operation and the precautions related to acupotomy in detail and evaluated the efficacy of acupotomy in conjunction with the theory of "Modulating Muscles and Tendons to Treat Bone Disorders" through the detection of the mechanical properties of quadriceps femoris and tendon, as well as cartilage mechanics and morphology. The results show that acupotomy has a protective effect on cartilage by adjusting the mechanical properties of the soft tissues around the knee joint, improving the cartilage stress environment, and delaying cartilage degeneration.

In this protocol, a knee osteoarthritis model was prepared using the modified Videman method, and the operation procedures and precautions of acupotomy are detailed. The effectiveness of acupotomy has been demonstrated by testing the mechanical properties of quadriceps femoris and tendon and the mechanical and morphological properties of cartilage.

Tıp

Establishing the Knee Osteoarthritis Rabbit Model and Applying Acupotomy for Modulating Muscles and Tendons

To begin, fix the anesthetized rabbit in a supine position. Then, pull and fix the left hind limb in the fully extended position. Using medical tape as the first layer, cover the skin from the groin to the ankle joint.For the second layer, wrap 36 millimeter-wide double-sided foam tape over the medical tape. Then, wrap a polymer bandage from the groin to the ankle joint. Ensure the knee joint is 180 degrees straight, and the ankle joint is dorsiflexed by 60 degrees.For the third layer, immobilize the joints with small splints at the front and back of the knee and ankle joints. Then, wrap steel mesh around the outermost layer to protect against bites. Ensure to keep toes exposed, to observe blood circulation.To determine points of acupotomy treatment, palpate and mark pathological indurations of knee joints with a sterile skin marker. Then, disinfect the knee joint three times with alternating rounds of iodophor and 75%ethanol. Now align an acuoptomy blade parallel to the travel direction of the tendon and the longitudinal axis of the limb.Using the left thumb, press down on the skin at the marker point, then shift laterally to facilitate the separation of blood vessels and nerves on the thumb's ventral side. With the acupotomy handle in the right hand, apply a quick gentle pressure, causing the acupotomy blade to penetrate the skin. Slowly advance the blade to muscle induration, making longitudinal cuts and swinging laterally.After acupotomy, disinfect the knee joint using iodophor and apply a bandaid.

Diz Osteoartriti Tavşan Modelinin Kurulması ve Kas ve Tendonların Modülasyonu İçin Akupotomi Uygulanması

Measuring Mechanical Properties of Quadriceps Femoris Contraction Force in Rabbits

To begin, cut the skin of an anesthetized rabbit below the patella, following the length of the limb upwards to the thigh base, then continue upwards for three to four centimeters. Carefully peel off the skin and fascia, exposing the quadriceps muscle. Cut the patellar ligament and carefully separate the quadriceps from the iliac junction, while maintaining the quadriceps in connection with the ilicium.Now ligate the surgical sutures at the tendon junction between the patella and quadriceps muscle. Stretch the muscle to its full length in its natural state and attach it to the tension transducer, aligning the ligation line on the muscle with that on the transducer. Secure the tension transducer to the bracket.Connect the signal acquisition line on the transducer to the bio signal acquisition system processor. Insert the electrodes parallel to the quadriceps abdomen, avoiding contact between the electrodes. Next, press the oscilloscope button.Adjust the position of the force transducer on the bracket to maintain the baseline at zero. At this stage, set the stimulator stimulation parameters with a single stimulus, a wave width of five milliseconds and a delay of 10 milliseconds. Set the initial value of the stimulus amplitude to zero volt and set the automatic amplitude to increase by 0.1 volt each time, to gradually increase the stimulus intensity.Then start the stimulation while observing the changes in the muscle contractions curve and contraction amplitude, until the maximum signal twitch amplitude of the quadriceps is determined. Next, use a cluster stimulus and set the stimulus amplitude, causing a maximum single twitch as the baseline to continuously stimulate the muscle. Set the initial value of the stimulation frequency to 10 hertz, and set the automatic frequency to increase by one hertz each time to gradually increase the stimulus frequency.Finally, start the stimulation while observing the changes in the muscle contraction curve until the maximum tetanic contraction amplitude of the quadriceps is determined. Young's modulus, single contraction amplitude, and tetanic contraction amplitude of the quadriceps femoris were significantly reduced in knee osteoarthritis group compared to the control and Acupotomy group.

Tavşanlarda Kuadriseps Femoris Büzülme Kuvvetinin Mekanik Özelliklerinin Ölçülmesi

Safranin O/Fast Green Staining of Knee Joint Cartilage in Rabbits

After acupotomy intervention, embed the cartilage subchondral bone complex tissues in paraffin. Then, slice the tissue wax blocks and place them on the slides. Deparaffinize the slides with successive environmental dewaxing solutions for 15 minutes each.Then, dip the slides successively in xylene and anhydrous ethanol for two to five minutes each, followed by dehydration in decreasing ethanol concentrations. Stain the slide with fast green solution for one minute. After rinsing the excess fast green solution with ultrapure water, rinse slide quickly with 1%acetic acid solution several times for color separation.Again, rinse the slide with water as demonstrated before staining with safranin O solution for 10 to 15 minutes. Soak the slide in increasing ethanol concentrations for three to five seconds each, then, place the slide in successive xylene solution for 10 minutes each. Add a neutral resonance medium on the front of the slide, avoiding the tissue.Place the edge of the cover glass on the slide and slowly lower it to cover the neutral balsam. Wipe off the extra xylene and neutral balsam. After overnight drying, observe the slide under the microscope for cartilage histology scoring.In the control group, the cartilage surface was smooth and exhibited organized chondrocyte arrangement in all layers. In contrast, the cartilage surface was rough in the KOA group and the chondrocyte arrangement was disordered. Acupotomy improved the smoothness of the cartilage surface and preserved normal chondrocyte structure.The cartilage integrity score was significantly increased in the KOA group compared to the control and acupotomy group.