Name: the monoiodoacetate model of osteoarthritis pain in the mouse
Uploaded: 2016-05-16T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 26 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse at JoVE.com

JSV Avrupa Komisyonu (GAN 603191-PAINCAGE) tarafından MM ortak hibe ile desteklenmektedir.

Hayvan denekleri Prosedürleri King College London Etik Komitesi tarafından onaylanan ve İngiltere&#39;de Home Office Yönetmeliğine uygun olan edilmiştir (Hayvanlar Bilimsel Prosedürler 1986 Yasası). Diz Monoiodoacetate 1. intra-artiküler enjeksiyon <ol><li> House 8 -. Gıda ve su ad libitum ile 12 saat ışık / karanlık döngüsü altında 5 grup halinde 10 haftalık fareler (7:00 AM ışıklar) Önceki deney başlamadan fareler 1 hafta boyunca iklime alıştırmak edelim. </li><li> Rastgele ve kodlar gibi 5. hayvan sayılarına gruplar halinde kafes fareler tedavilere deneyci kör. rasgele dağıtım için parametre olarak vücut ağırlıkları kullanın. </li><li> Enjeksiyon gününde, taze olarak arzu edilen konsantrasyonlarda steril tuzlu su (% 0.9 NaCI) içinde monoiodoacetate bir solüsyon hazırlanır. Kontrol farelerinin ayrı bir grup halinde enjeksiyon için steril tuzlu su kullanın. MIA en yüksek tavsiye doz 10 ul 1 mg&#39;dır. Dikkat: Monoiodoacetate verToksik Y. Nedenle, toz taşıma ve çözüm hazırlarken eldiven ve maske yıpranmış tavsiye edilir. Çözelti, steril 0.22 mikron filtreyle filtre edilmelidir. </li><li> İlk O 2 karışımında% 2 izofluran teslim bir odaya yerleştirerek bir anestezik arabası kullanan fareler anestezi de% 2 izofluran-O 2 karışımı sunar burun konisi bölümünde, fareler aktarmak sonra (oran 1.5 L / dak akış) ve ve bu nedenle, enjeksiyon sırasında anestezi tutar. anestezi altında iken onların kurumasını önlemek için gözleri veteriner merhem yerleştirin. Enjeksiyon işlemi yaparken cerrahi önlük, eldiven ve maske takınız. </li><li> arka ayaklarında bir tutam uyarana yanıt hayvanın eksikliğini kontrol ederek anestezi onaylayın. </li><li> hayvan anestezi altına alındıktan sonra, sırtında üzerine yerleştirin. Trim ve alkol ile diz eklemini çevresini silin. Povidon iyot veya klorheksidin yanı f kullanılabilirveya dezenfeksiyon. patellar tendon (patella feryat beyaz çizgi) görünür hale gelecektir. </li><li> , Enjeksiyon bölgesini stabilize diz ekleminin ve ayak bileği ekleminin ön yüzeyi üzerinde başparmak altındaki işaret parmağını koyarak, bükülmüş pozisyonda, hareketsiz diz tutmak için. Ortak tercih gerekli değildir. </li><li> o patella altında boşluğu bulana kadar enjeksiyon hassas site bulmak için, yatay diz (böylece ucu ile cilt delmek değil) boyunca bir şırınga bağlı 26 G iğne çalıştırın. bölgeyi işaretlemek ve ardından iğneyi kaldırıp enjeksiyon için dikey şırıngaya hafif bir baskı uygulayın. tibia dik, patellar tendon boyunca, belirgin bir alanda iğne takın. Hiçbir direnç hissettim edilmelidir. <ol><li> Bir kılavuz olarak başparmak kullanın ve giriş siteye yüzeysel enjekte. enjeksiyonundan sonra, çözümün eşit dağılımını sağlamak için diz masaj yapın. Keskin hemen iğne atıns kutusu. </li><li> geri ısıtılmış mat temiz bir ev kafes içine fareler yerleştirin ve onları kurtarmak için izin verir. Onlar sternum yatma kazanmak onlar tarafından ölçülür uygun bilinç, yeniden dek hayvanlar üzerinde sürekli teyakkuz tutun. hayvanlar kurtarıldı sonra, kendi kafesine geri dönmek. Not: Bir boya kullanılır ve hemen otopsi diseksiyon enjeksiyonu doğru lokalizasyonu onaylamak için yapılan en iyi uygulama ve eğitim amaçlı önerilmektedir. </li></ol></li></ol> Mekanik hipersensitivitesinin 2. Ölçüm (Allodini) Not: Statik mekanik geri çekme barajları, arka pençenin plantar yüzeyine von Frey kılları uygulanarak değerlendirilir. <ol><li> davranışsal odasına fareler getirin ve pervasız hayvanlar tel örgü ızgara üstüne akrilik kabinleri (8 cm x 5 cm x 10 cm) iklime alıştırmak sağlar. <ol><li> Frey saç uygulama iki gün önce sipariş için kabinleri için taşıma ve 2 saat alışkanlık Train farelervon Frey kılları uygulanması sırasında stres ve ambulasyon sınırlamak için. Test günlerinde, 60 dakika kadar önce test için kabinleri için hayvanları alıştırarak. tüm davranışsal deneyler sırasında önlük, eldiven ve maske takın. </li></ol></li><li> Fiber bükülene kadar arka pençenin taban yüzeyine kalibre edilmiş von Frey kılları (üretici firma tarafından kalibre edilmiş ve gram (g ifade edilen kuvvet seviyesini tanımlanmış sarf artan çapına) esnek naylon elyaflar) uygulanır. test sırasında 0.008, 0.02, 0.04, 0.07, 0.16, 0.4, 0.6, ve 1.0 g lifleri kullanın. <ol><li> 3 saniye yerine her bir saç tutun veya pençe geri kadar ikinci olumlu bir yanıt oluşturan. Bir geri çekilme tepkisi X olarak işaretleyiniz ve tepki Ey yokluğu: 0.07 g uyarıcı gücü ile başlayarak, &quot;yukarı-aşağı yöntemi&quot; 21 göre tüyleri geçerlidir. Bir yanıt tespit edilinceye kadar, 1 g (cut-off kuvvet) kadar kuvvet artan düzende uygulayın. </li><li> tekrarlayarak pençe yeniden sınamakBir geri çekilme üretilen altındaki bir kuvvet uygular lif ile başlayan 2.2.1 adım. </li><li> Hiçbir çekilme oluşana kadar, sonra kuvvet azalan sıralı kalan iplikçikler geçerlidir. Yeniden uygulamak bir yanıt gözlenmiştir kadar artan düzende filamentler. Altı yanıtları bir dizi 21 değerleri tabular atıfta &#39;k&#39; değeri elde etmek için, (örneğin, OXOXOX) elde edilinceye kadar devam edin. </li><li> gram% 50 pençe çekme eşikleri olarak pençe çekme değerleri ifade eder. Formülü (10 [Xr + K δ]) / kullan Xr = son (günlük birimlerinde) sırayla kullanılan von Frey filament, k = tablo değerini, ve δ = lifleri arasındaki kuvvetlerin fark anlamına 10,000. Yanıt tespit edildiğinde, 1 gr 21,22 maksimal yanıt kullanmak. </li></ol></li><li> (2.2.1-2.2.4), yukarıda tarif edilen prosedüre göre, MIA injectio önce her iki arka pençesi mekanik eşik değerlendirmekbazal değerler olarak n. Enjeksiyon sonrası, mekanik allodini gelişimini tespit etmek MIA sonra birkaç hafta boyunca düzenli günlük aralıklarla ipsilateral ve kontralateral pençeleri eşik değerlendirmek. Not: Örneğin, ölçülen eşik değerleri rapor 0, 3, 5, 7, 10, MIA enjeksiyonundan sonra 14, 21 ve 28 gün. bu, 0.1 g ya da daha az bir yanıt sergilemesidir Hayvanlar allodinik olarak kabul edilir. 1 gr aralığında - Normal tepkiler 0.6 giren. </li></ol> Ağırlık Rulman Açıklarının 3. Ölçüm Not: ağırlık değişiklikler bir ağırlık incapacitance test cihazı kullanılarak ölçülür rulman. <ol><li> aygıtı üzerinde bir Pleksiglas odasına yürümek ve tutma kutusunda oturmak için her fare tren. Tutma kutusunun önünde fare yerleştirin kadar 45 ° girişi kaldırın ve fare yürümek ve kutusunu kapatmak için izin verir. Onlar bir oturma duruş benimsenmesi kadar hayvanların serbestçe hareket etmesine izin verir. Bu eğitim en az iki gün sürer ve hayvan hala ve l garantiodasının her iki tarafında eaning. (Veya ekipman talimatlarına göre) 100 g onay ağırlığı ile, kullanımdan önce aleti kalibre edin. <ol><li> Her bir arka pençe uygun kayıt ped 11 yerleştirilir emin olun. Her ölçüm süresi üreticinin talimatlarına göre, 1 sn sürer. </li></ol></li><li> Her kayıt oturumu için kayıt pedi her arka pençesine üzerinde taşınan ağırlığın üç ölçüm toplayın ve ipsilateral ve kontralateral pençeleri tarafından karşılanacaktır ağırlık farkı hesaplamak için ortalama değeri kullanın. gram kontralateral ve ipsilateral pençelerinin arasındaki fark olarak Ekspres değerleri. </li><li> bazal değerleri olarak MIA enjeksiyon öncesinde ağırlık taşıyan değişiklikleri değerlendirmek. Sonra, birkaç hafta içinde düzenli aralıklarla tekrar değerlendirilmesi kapı değişiklikleri gelişimini tespit etmek için. Örneğin, ölçülen eşik değerleri rapor 0, 3, 5, 7, 10, MIA enjeksiyonundan sonra 14, 21 ve 28 gün. Not: Normal bir ağırlık b% 50 küpe değeri ipsilateral ve kontralateral hindlimb karşısında eşit ağırlık dağılımı temsil eder. Hayvanlar aşırı hassas ekran yaklaşık% 45 değişim taşıyan bir ağırlık düşündü. ne son nokta, diğer etkiler gibi mekanik eşikleri ve ağırlık taşıyan açıklarının Ölçümler, aynı farelerde yapılabilir. farmakolojik değerlendirme için, hayvanlar her bir grubu kullanılan bileşiğin farmakokinetik profili doğrultusunda dozlamadan sonra belirli zamanlarda test edilmelidir. </li></ol>

<ol>
	<li>Farrell, M., Gibson, S., McMeeken, J., Helme, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+and+hyperalgesia+in+osteoarthritis+of+the+hands.">Pain and hyperalgesia in osteoarthritis of the hands.</a> J. Rheumatol. 27 (2), 441-447 (2000).</li><li>Kuni, B., Wang, H., Rickert, M., Ewerbeck, V., Schiltenwolf, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+threshold+correlates+with+functional+scores+in+osteoarthritis+patients.">Pain threshold correlates with functional scores in osteoarthritis patients.</a> Acta. Orthop. 86 (2), 215-219 (2015).</li><li>Wylde, V., Hewlett, S., Learmonth, I. D., Dieppe, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Persistent+pain+after+joint+replacement:+prevalence,+sensory+qualities,+and+postoperative+determinants.">Persistent pain after joint replacement: prevalence, sensory qualities, and postoperative determinants.</a> Pain. 152 (3), 566-572 (2011).</li><li>Wylde, V., Palmer, S., Learmonth, I. D., Dieppe, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Test-retest+reliability+of+Quantitative+Sensory+Testing+in+knee+osteoarthritis+and+healthy+participants.">Test-retest reliability of Quantitative Sensory Testing in knee osteoarthritis and healthy participants.</a> Osteoarthr. Cartil. 19 (6), 655-658 (2011).</li><li>Hunter, D. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacologic+therapy+for+osteoarthritis--the+era+of+disease+modification.">Pharmacologic therapy for osteoarthritis--the era of disease modification.</a> Nat. Rev. Rheumatol. 7 (1), 13-22 (2011).</li><li>Lampropoulou-Adamidou, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Useful+animal+models+for+the+research+of+osteoarthritis.">Useful animal models for the research of osteoarthritis.</a> Eur. J. Orthop. Surg. Traumatol. 24 (3), 263-271 (2014).</li><li>Yamamoto, K., Shishido, T., Masaoka, T., Imakiire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+studies+on+the+ageing+and+osteoarthritis+of+the+articular+cartilage+in+C57+black+mice.">Morphological studies on the ageing and osteoarthritis of the articular cartilage in C57 black mice.</a> J. Orthop. Surg. (Hong Kong). 13 (1), 8-18 (2005).</li><li>Huebner, J. L., Hanes, M. A., Beekman, B., TeKoppele, J. M., Kraus, V. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparative+analysis+of+bone+and+cartilage+metabolism+in+two+strains+of+guinea-pig+with+varying+degrees+of+naturally+occurring+osteoarthritis.">A comparative analysis of bone and cartilage metabolism in two strains of guinea-pig with varying degrees of naturally occurring osteoarthritis.</a> Osteoarthr. Cartil. 10 (10), 758-767 (2002).</li><li>Thysen, S., Luyten, F. P., Lories, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targets,+models+and+challenges+in+osteoarthritis+research.">Targets, models and challenges in osteoarthritis research.</a> Dis Model Mech. 8 (1), 17-30 (2015).</li><li>Longo, U. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Osteoarthritis:+new+insights+in+animal+models.">Osteoarthritis: new insights in animal models.</a> Open. Orthop. J. 6, 558-563 (2012).</li><li>Bove, S. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weight+bearing+as+a+measure+of+disease+progression+and+efficacy+of+anti-inflammatory+compounds+in+a+model+of+monosodium+iodoacetate-induced+osteoarthritis.">Weight bearing as a measure of disease progression and efficacy of anti-inflammatory compounds in a model of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis.</a> Osteoarthr. Cartil. 11 (11), 821-830 (2003).</li><li>Pomonis, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+and+pharmacological+characterization+of+a+rat+model+of+osteoarthritis+pain.">Development and pharmacological characterization of a rat model of osteoarthritis pain.</a> Pain. 114 (3), 339-346 (2005).</li><li>Schuelert, N., McDougall, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grading+of+monosodium+iodoacetate-induced+osteoarthritis+reveals+a+concentration-dependent+sensitization+of+nociceptors+in+the+knee+joint+of+the+rat.">Grading of monosodium iodoacetate-induced osteoarthritis reveals a concentration-dependent sensitization of nociceptors in the knee joint of the rat.</a> Neurosci. Lett. 465 (2), 184-188 (2009).</li><li>Vonsy, J. L., Ghandehari, J., Dickenson, A. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+analgesic+effects+of+morphine+and+gabapentin+on+behavioural+measures+of+pain+and+disability+in+a+model+of+osteoarthritis+pain+in+rats.">Differential analgesic effects of morphine and gabapentin on behavioural measures of pain and disability in a model of osteoarthritis pain in rats.</a> Eur. J. Pain. 13 (8), 786-793 (2009).</li><li>Im, H. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alteration+of+sensory+neurons+and+spinal+response+to+an+experimental+osteoarthritis+pain+model.">Alteration of sensory neurons and spinal response to an experimental osteoarthritis pain model.</a> Arthritis Rheum. 62 (10), 2995-3005 (2010).</li><li>Sabri, M. I., Ochs, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+glyceraldehyde-3-phosphate+dehydrogenase+in+mammalian+nerve+by+iodoacetic+acid.">Inhibition of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase in mammalian nerve by iodoacetic acid.</a> J. Neurochem. 18 (8), 1509-1514 (1971).</li><li>van der Kraan, P. M., Vitters, E. L., van de Putte, L. B., van den Berg, W. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+osteoarthritic+lesions+in+mice+by+'metabolic'+and+'mechanical'+alterations+in+the+knee+joints.">Development of osteoarthritic lesions in mice by 'metabolic' and 'mechanical' alterations in the knee joints.</a> Am. J. Pathol. 135 (6), 1001-1014 (1989).</li><li>Guingamp, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mono-iodoacetate-induced+experimental+osteoarthritis:+a+dose-response+study+of+loss+of+mobility,+morphology,+and+biochemistry.">Mono-iodoacetate-induced experimental osteoarthritis: a dose-response study of loss of mobility, morphology, and biochemistry.</a> Arthritis Rheum. 40 (9), 1670-1679 (1997).</li><li>Janusz, M. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Moderation+of+iodoacetate-induced+experimental+osteoarthritis+in+rats+by+matrix+metalloproteinase+inhibitors.">Moderation of iodoacetate-induced experimental osteoarthritis in rats by matrix metalloproteinase inhibitors.</a> Osteoarthr. Cartil. 9 (8), 751-760 (2001).</li><li>Marker, C. L., Pomonis, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+monosodium+iodoacetate+model+of+osteoarthritis+pain+in+the+rat.">The monosodium iodoacetate model of osteoarthritis pain in the rat.</a> Methods Mol. Biol. 851, 239-248 (2012).</li><li>Chaplan, S. R., Bach, F. W., Pogrel, J. W., Chung, J. M., Yaksh, T. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantitative+assessment+of+tactile+allodynia+in+the+rat+paw.">Quantitative assessment of tactile allodynia in the rat paw.</a> J. Neurosci. Methods. 53 (1), 55-63 (1994).</li><li>Dixon, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+analysis+of+experimental+observations.">Efficient analysis of experimental observations.</a> Ann. Rev. Pharmacol. Toxicol. 20, 441-462 (1980).</li><li>Ogbonna, A. C., Clark, A. K., Gentry, C., Hobbs, C., Malcangio, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain-like+behaviour+and+spinal+changes+in+the+monosodium+iodoacetate+model+of+osteoarthritis+in+C57Bl/6+mice.">Pain-like behaviour and spinal changes in the monosodium iodoacetate model of osteoarthritis in C57Bl/6 mice.</a> Eur. J. Pain. 17 (4), 514-526 (2013).</li><li>Fernihough, J., Gentry, C., Malcangio, M., Fox, A., Rediske, J., Pellas, T., Kidd, B., Bevan, S., Winter, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pain+related+behaviour+in+two+models+of+osteoarthritis+in+the+rat.">Pain related behaviour in two models of osteoarthritis in the rat.</a> Pain. 112 (1-2), 83-93 (2004).</li></ol>

None of the authors have competing interests or conflicting interests.

Bu metodoloji ile, arka bacaklarda zararlı olmayan ve ağrılı uyarılara bir diz ekleminin ve duyarlılık değerlendirmesinde MIA bir eklem içi enjeksiyon ile fare OA-benzeri ağrı uyarılması için tercih edilen bir yöntem açıklanmaktadır. MIA enjeksiyon kalıcı ağrı davranışı, yani değişmiş arka bacak ağırlık taşıyan ve anılan mekanik aşırı duyarlılık (allodini) gelişimi ile ilişkilidir. Böyle statik ölçümler serbestçe hareket eden hayvanlar bir koşu bandı üzerinde ya da podyum analizi ile yürüyüş analizi ile tamamlanabilir. MIA kalıplara tedavi yaklaşımları seçici için yararlı olabileceğini gösteren, geleneksel bir ağrı giderici tedaviler 24 duyarlıdırlar. MIA enjeksiyonu teknik olarak zor değildir, eklem kapsülü kondrosit toksisite oluşturduğu kapsülün dışındaki MIA sızıntı ve daha sonraki yetmezliği ile sonuçlanan, enjeksiyon sırasında delinmiş olabilir. Gerçekten de, MIA sistemik enjeksiyonu, kemirgenlere, ölümcül olabilirnd dokulara ve kondrosit dışındaki hücreler üzerinde MIA olası etkileri istenmeyen olmasının yanı sıra, sonuçları yanıltabilecek. Bunun gibi, büyük bir dikkatle bu modelin kritik bir bileşenidir ve güven enjeksiyon eklem boşluğuna gerçekleştiğini verilmesi ihtiyacı olduğu, MIA enjeksiyon verilmesi gerektiğini vurguladı gerekir. Bu protokol, bunu sağlamak için yardımcı olur. Burada anlatılan protokoller hayvanlar test süresi boyunca tutarlı ağrı gibi yanıt vermek sağlamaktır. Ayrıca, patoloji 15,23 ikna etmek için kullanılan MIA dozunu değiştirerek hastalık şiddetinin ayarlanmasını sağlar. Her iki hastalık durumuna ve ağrı gibi davranışların hızlı indüksiyon ağrı modifiye bileşiklerin zamanında değerlendirilmesini sağlar. Bu cerrahi mevcut ve kendiliğinden duyarlılık geliştirmesi için uzun bir süre alabilir OA modelleri, gelişmekte olan avantajlıdır. Ayrıca, özellikle spontan modeller için, hastalık PatholMIA modeli yanıt önemli insidansı ile ilişkili ise, - (% 80 7 yaklaşık 20) ogy tüm hayvanları tezahür etmez. OA, her iki dizde geliştikçe Ayrıca, spontan modelleri, ağırlık taşıma değişikliklerin ölçümleri için uygun değildir. davranışsal ölçümleri dikkate alındığında, hayvanlar değerlendirmeler sırasında sakin ve rahat tutulması gerekir. Kayıt ölçümlerden önce ve hayvanlar deneyci aşina olmasını sağlayan tekrarlayan kullanım, erken eğitimle, protokolde ayrıntılı olarak bu elde edilir. Stresi azaltmak için önemli bir nokta sürekli değişen önce bahsedilen sorunları neden olacak gibi boyunca davranışsal test için aynı deneyci kullanmaktır. herhangi bir model gibi, OA MIA modeli tür hastalarda OA patolojinin yavaş gelişimini benzemez ortak bozulması hızlılık gibi sınırlamalar, taşımaktadır. Bu sorunu aşmak için bir yolu su ile bu modeli tamamlamak olacaktırOA rgical modeli. Bileşik geliştirme MIA kimyasal modelinin kullanımı OA benzeri ağrı gelişimi ve korunması üzerindeki önleyici ve tedavi edici protokol kullanımına izin vermektedir. Son olarak, MIA modeli ayrıca OA hastalığı anlamak için yardımcı knock-out farelerde fenotipik özelliklerin çalışmalarını tamamlayıcı olacaktır.

Klinik olarak, osteoartrit (OA), veya dejeneratif eklem hastalıkları, eklem kıkırdağı, ve eklem çevresindeki dokuların hafif enflamasyon, osteofit oluşumu ve kemik kistleri, bazen oluşumunun ilerleyen kaybıyla karakterize edilen bir acı ve zayıflatıcı bir durumdur. OA olan hastalar sürekli ağrı 1 ve ekran artritik eklem 2-4 basınç ve ağrılı uyarılara karşı duyarlılığın artması rapor. Şu anda, mevcut tedavi yaklaşımları ve analjezikler başarı 5 dereceye sahip, bu durumla ilişkili ağrıyı hafifletmek için reçete edilir ile OA için tedavisi yoktur. Ancak, OA ağrı OA klinik sorunu ve hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek ve tedavisi için yeni hedefler ifşa geliştirilmektedir kalır. Farklı özelliklere 6 kullanılabilir OA çeşitli hayvan modelleri vardır. Böyle anterior olarak cerrahi yöntemler,çapraz bağ transeksiyonu, kullanılabilir. Ancak, becerili bir cerrahi müdahale gerektiren ve iç menisküs (DMM) istikrarsızlık fare kullanılır ise esas olarak, farede gerçekleştirilmiştir. OA Spontan gelişme kobay ve spontan eklem dejenerasyonu yaş 7,8 3 ila 16 ay arasında C57 siyah farelerde rapor edilmiştir oluşur. Spontan OA modelleri durumu ikna etmek için herhangi bir müdahale içermeyen, ama onlar doğal değişkenlik ve gibi, daha fazla sayıda tabi ve 9,10 maliyet. Kimyasal kaynaklı modeller, diğer taraftan, cerrahi modellere göre çok daha az invazif prosedürler gerektirir ve gibi uygulamak kolay ve farklı aşamalarda OA lezyonların çalışma izin verir. Bu modeller ortak alan kaçış eğer zehirli olabilir enflamatuar ajanlar, imünotoksinlerdeki, kollajenaz, papain, ya da monoiodoacetate ve diz, tek enjeksiyonları içerir. OA bütün kimyasal modelleri, MIA bir en sık kullanılan, paBu model, MIA doz 11-15 değiştirerek kademeli edilebilir, tekrarlanabilir, sağlam ve hızlı ağrı gibi fenotip üretir olarak rticularly, ağrıyı tedavi etmek farmakolojik ajanların etkinliğini test etmek için. kemirgenlerde MIA Eklem içi enjeksiyonu OA-benzeri lezyonlar ve analiz ve belirlenebilir fonksiyonel bozulma üretir. MIA hücresel glikolizin bozarak, hücre ölümü ile sonuçlanan 16,17, gliseraldehid-3-fosfatazın bir inhibitörüdür. MIA artikül içi enjeksiyonu 18,19 osteofit gibi kemik görünüm gibi kıkırdak dejenerasyonu ve daha sonra subkondral kemik değişikler gelen kondrosit hücre ölümüne neden olur. Rat MIA yarar 20 önce tarif edildiği gibi, bu model giderek knock-out farelerde kullanılabilirliği birlikte kullanıldığı gibi, bu çalışmada farelerde MIA kaynaklı OA metodoloji odaklanmak. Bu injec için bir prosedürü açıklamaktadırçok küçük diz içine hacimleri ve arka bacaklarda zararlı ve zararlı olmayan uyaranlara duyarlılık ölçmek için yöntemler yon. metodoloji dökümü değişkenliğini azaltmaya yardımcı, ve gibi, çalışma için gerekli hayvan sayısını modelini rafine ve azaltacaktır.

<table><tbody><tr><td>Monoiodoacetate</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>I-2512-25G</td><td>&amp;#8805; 98% purity</td></tr><tr><td>0.9% Saline</td><td>Mini-Plasco basic</td><td>365 4840</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Merial</td><td>DNI 4090/1</td><td></td></tr><tr><td>26 G Needle</td><td>Fisher Scientific</td><td>12947606</td><td></td></tr><tr><td>50 &amp;#956;l Hamilton Syringe</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>20701</td><td></td></tr><tr><td>Von Frey Hairs</td><td>Linton Instruments</td><td>NC 122775-99</td><td></td></tr><tr><td>Incapacitance tester</td><td>Linton Instruments</td><td></td><td>Delivery on Request</td></tr><tr><td>Testing Cage Rack&amp;nbsp;</td><td>Ugo Basile</td><td>37450</td><td></td></tr><tr><td>Compact Anesthetic system</td><td>Vet-Tech</td><td>AN001B</td><td></td></tr><tr><td>Medical O&lt;sub&gt;2&lt;/sub&gt;</td><td>BOC</td><td>101-F</td><td></td></tr><tr><td>Aldasorbers</td><td></td><td>Vet -Tech</td><td>AN006A</td></tr></tbody></table>

the monoiodoacetate model of osteoarthritis pain in the mouse

osteoartrit (OA) olan hastalarda önemli bir belirti ağrı yolları içinde periferik yanı sıra merkezi değişikliklerden tetiklenir ağrıdır. Bu NSAID&#39;ler ve opiatlar gibi OA ağrı mevcut tedaviler ne yeterince etkili ya zararlı yan etkilerden yoksun bulunmaktadır. OA Hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek ve tedavisi için yeni farmakolojik hedefler tanımlamak için geliştirilmektedir. Şu kemirgenlerde OA mevcut modelleri bir diz eklemi içine cerrahi ve kimyasal müdahaleleri bulunur. monoiodoacetate (MIA) modeli sıçan ve fareler hem OA ortak bozulma modelleme için bir standart haline gelmiştir. Sıçanlarda, uygulaması daha kolay olan bir model, ipsilateral kolun hızlı ağrısı gibi yanıtları, farklı dozlarda enjekte edilerek kontrol edilebilir seviyesini oluşturan bir diz eklemine MIA enjeksiyonu içerir. MIA Eklem içi enjeksiyon glycer inhibe ederek kondrosit glikoliz bozarAldehit-3-fosfat dehidrogenaz ve kondrosit ölüm, neovaskülarizasyon, subkondral kemik nekrozu ve çökmesi ile sonuçlanır ve ayrıca inflamasyon. artiküler kıkırdak ve kemik bozulması morfolojik değişimler hasta patolojisi bazı yönlerinin yansıtıcıdır. eklem hasarı ile birlikte, MIA enjeksiyon indükler ölçülebilir ve ölçülebilir olan ipsilateral arka ayak ve ağırlık taşıyan açıklarında mekanik duyarlılık anılacaktır. Bu davranış değişiklikleri, böylece OA ağrı kullanışlı ve ilgili klinik öncesi model olarak diz MIA enjeksiyon doğrulayarak, hasta popülasyonu tarafından bildirilen semptomların bazıları benzerler. Bu makalenin amacı, tutarlı ve güvenilir kayıtları vermek için gerekli adımları vurgulamak için bir zihin ile intraartiküler MIA enjeksiyonları ve aşırı duyarlılık ilişkili gelişim davranışsal kayıtların metodolojisini tanımlamaktır.

Nota başlangıç ​​bölgelerinin doza bağlı 23 olmasına rağmen, fare diz eklemi indükler 1 mg İB 4 hafta için açığı taşıyan mekanik aynı taraftaki arka pençede hipersensitivite (alodinya) ve ağırlığı ifade - Son zamanlarda 0.5 enjeksiyonu bildirmiştir. Şekil 1 &#39;de rapor edilen veriler diz enjekte dozlar aralığı, aşağıdaki aynı taraftaki arka pençelerine MIA-kaynaklı mekanik aşırı duyarlılık zamanla bir örnek teşkil etmektedir. Spesifik olarak, İB (0.5 mg / fare) en düşük doz günde 10 tuz enjeksiyonuna kıyasla eşiklerin% 50&#39;lik bir azalmaya neden olduğu ve eşik enjeksiyondan sonra 28. günde salin kontrol grubuna göre% 70 düşmüştür. MIA 0.75 mg ara madde dozu günde 10 tuz kontrolü eşik% 80 daha düşük olduğu ve 1 mg MIA en yüksek doz, bir işareti ile ilişkili günden 28. kadar düşük kalmıştır eşik kademeli bir azalma ile sonuçlandı5. günde eşiğinde ificant damla ve 28 güne kadar sürekli günden 10 üzerinde daha fazla azalma. Şekil 2&#39;de bildirilen veriler diz eklemlerinde MIA enjeksiyonu ile ilişkili ağırlık taşıyan değişikliklerin örnekleri sunmaktadır. 0.5 mg MIA doz çalışmasında 28 gün süresince taşıyan ağırlığında önemli bir değişikliğe neden olmadı ise Bu deney setinde, İN, 0.75 mg MIA doz günde 10 ipsilateral pençeye tarafından taşınan ağırlıkta belirgin bir azalma ile sonuçlandı itibaren. Özellikle, ağırlık taşıyan asimetri çalışmalarında 23 arasında değişken ve tutarsız sonuçlar doğurabilir MIA 0.75 mg ile ilişkili. Bunun yerine, 1 mg MIA dozu genellikle asimetrik ve Şekil 2&#39;deki veri taşıyan tekrarlanabilir ağırlığı göstermektedir gözlem döneminin sonuna kadar 3 gün ipsilateral arka pençe üzerinde taşınan ağırlığın belirgin bir azalma neden olur. beklenen, sali olarakne-tedavi edilen hayvanların değişiklikleri taşıyan hiçbir ağırlığı gösterdi. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/53746/53746fig1.jpg" /> Şekil 1. Geliştirme Mekanik Allodini Mesaj MIA Enjeksiyon. Ipsilateral ve kontralateral ayak pençelerinin pençe çekme eşikleri önce ve İB (0.5, 0.75 ve 1 mg / fare) ve tuzlu su (% 0.9 NaCI) enjeksiyonundan sonra değerlendirilir, n = 8 edildi - 10 fare / grup. * P &lt;0.05, ** P &lt;0.01, *** P &lt;tuzlu su ile tedavi edilen grupta karşı 0.001; Öğrenci Newman-Keuls ardından iki yönlü ANOVA post hoc testi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53746/53746fig1large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a> <img alt="şekil 2" src="/files/ftp_upload/53746/53746fig2.jpg" /> Ağırlık Rulman Açığının Şekil 2. Gelişmes Mesaj MIA Enjeksiyon. İki arka bacaklarda arasındaki vücut ağırlığı dağılımındaki değişiklikler olarak hesaplanmıştır [* 100 (ağırlık ipsilateral ve kontralateral pençeleri üzerinde taşınan ağırlığın ipsilateral pençe / toplamı karşılanır)] öncesi ve MIA enjeksiyon (sonra değerlendirildi 0.5, 0.75 ve 1 mg / fare) ve tuzlu su (% 0.9 NaCl), n = 8-10 fare / grup. * P &lt;0.05, ** P &lt;0.01, *** P &lt;0.001 salin ile tedavi edilen grupta karşı. Öğrenci Newman-Keuls ardından iki yönlü ANOVA post hoc testi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53746/53746fig2large.jpg" target="_blank">Bu rakamın büyük halini görmek için lütfen buraya tıklayınız.</a>

Watch this Scientific Journal Video about The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse at JoVE.com

The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

Fare Osteoartrit Ağrı Monoiodoacetate Modeli

Osteoartrit (OA), ya da dejeneratif eklem hastalığı, yalnızca kısmen kullanılabilir analjezik tarafından kontrol kalır ağrı ile ilişkili bir zayıflatıcı bir durumdur. Hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek için geliştirilmektedir. Burada fare OA ağrısının monoiodoacetate modeli için bir yöntem tarif eder.

A major symptom of patients with osteoarthritis (OA) is pain that&#160;is triggered by peripheral as well as central changes within the pain pathways. The ...

the-monoiodoacetate-model-of-osteoarthritis-pain-in-the-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

34.9K Görüntüleme.  King's College London.  Osteoartrit (OA), ya da dejeneratif eklem hastalığı, yalnızca kısmen kullanılabilir analjezik tarafından kontrol kalır ağrı ile ilişkili bir zayıflatıcı bir durumdur. Hayvan modelleri OA ile ilgili ağrı mekanizmalarının anlayışımızı geliştirmek için geliştirilmektedir. Burada fare OA ağrısının monoiodoacetate modeli için bir yöntem tarif eder. 

Video: The Monoiodoacetate Model of Osteoarthritis Pain in the Mouse

Technical Aspects of the Mouse Aortocaval Fistula

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta and inferior vena cava (IVC) are exposed. The proximal infrarenal aorta and the distal aorta are dissected for clamp placement and needle puncture, respectively. Special attention is paid to avoid dissection between the aorta and the IVC. After clamping the aorta, a 25 G needle is used to puncture both walls of the aorta into the IVC. The surrounding connective tissue is used for hemostatic compression. Successful creation of the AVF will show pulsatile arterial blood flow in the IVC. Further confirmation of successful AVF can be achieved by post-operative Doppler ultrasound.

The goal is to produce an arteriovenous fistula that is simple and reproducible. This method does not use sutures or glue adhesive. Therefore the samples can be used with the least amount of foreign materials for analysis.

Fare Aortocaval Fistül Teknik Yönleri

Technical aspects of creating an arteriovenous fistula in the mouse are discussed. Under general anesthesia, an abdominal incision is made, and the aorta ...

Tıp

Inflammatory TMJ Pain Mouse Model: Bite Force and Von Frey Filament Assessments

Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

Temporomandibular joint (TMJ) pain and osteoarthritis (OA) are common and debilitating disorders that impair patients' quality of life. The mechanisms driving diseases-related pain are poorly understood, and current treatments fail to provide effective and long-term therapeutic effects. Additionally, pain assessment in research, particularly orofacial pain, poses several challenges that complicate studies in both clinical and basic science settings. Therefore, we have established an inflammatory TMJ pain mouse model via intra-articular injection of CFA (Complete Freund's Adjuvant) and evaluated pain behaviors by bite force measurement and the von Frey filament test. Mice with CFA injection exhibited orofacial pain behaviors compared to PBS injection, including reduced bite force and head withdrawal threshold in the von Frey filament test. These methods are relatively easy to execute to have reproducible results and can be potentially extended to pain studies for other disease models related to TMJ disorders. Together, bite force, and the von Frey filament tests are reliable in measuring orofacial pain, as demonstrated in CFA injection-induced painful TMJOA mouse models.

This protocol describes how measuring bite force and head withdrawal threshold can capture pain behavior in Complete Freund's Adjuvant (CFA)-induced inflammatory temporomandibular joint (TMJ) pain.

Temporomandibular joint (TMJ) pain and osteoarthritis (OA) are common and debilitating disorders that impair patients' quality of life. The mechanisms ...

Davranış

Spontaneous and Evoked Measures of Pain in Murine Models of Monoarticular Knee Pain

Pain is the main cause of disability from arthritis. There is currently an unmet need for adequate treatments for arthritis pain. Pre-clinical models are necessary and useful for studying the mechanisms of pain and for evaluating efficacy of arthritis therapies. Measuring pain in animal models of arthritis is challenging. We have developed methods for measuring evoked and spontaneous pain in three models of murine arthritis. We quantitate the evoked pain responses of mice subjected to firm palpation of a painful knee. We also evaluate spontaneous pain by the proportion of weight and the amount of time placed on each of their 4 limbs after induction of arthritis pain in one knee. Joint pain in these mouse models produces a significant increase in evoked pain responses and an alteration in weight bearing. Since mice are quadrupeds, they offload the painful limb to the contralateral limb, to the forelimbs, or some combination. These methods are simple, require minimal equipment, and are reproducible and sensitive for detecting pain. They are useful for studying both disease-modifying arthritis treatments and analgesics in mice.

We have developed an evoked measure of arthritis pain and coupled it with a standardized method for measuring spontaneous pain in different murine models of chemically induced arthritis. These measures are sensitive and reproducible for different types of joint pain.

Fare modelleri Monoarticular diz ağrısı kendiliğinden ve uyarılmış önlemler

Pain is the main cause of disability from arthritis. There is currently an unmet need for adequate treatments for arthritis pain. Pre-clinical models are ...

Osteoarthritis Pain Model Induced by Intra-Articular Injection of Mono-Iodoacetate in Rats

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the pathophysiological changes of human OA. However, as the main symptom in the late stage of OA, pain affects the patients&#39; daily life, and there are not many available models. The mono-iodoacetate (MIA)-induced model is the most widely used OA pain model, mainly used in rodents. MIA is an inhibitor of glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase, which causes chondrocyte death, cartilage degeneration, osteophyte, and measurable changes in animal behavior. Besides, expression changes of matrix metalloproteinase (MMP) and pro-inflammatory cytokines (IL1 &#946; and TNF &#945;) can be detected in the MIA-induced model. Those changes are consistent with OA pathophysiological conditions in humans, indicating that MIA can induce a measurable and successful OA pain model. This study aims to describe the methodology of intra-articular injection of MIA in rats and discuss the resulting pain-related behaviors and histopathological changes.

This study describes the method of intra-articular injection of mono-iodoacetate in rats and discusses the resulting pain-related behaviors and histopathological changes, which provide references for future applications.

Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli

The current animal models of osteoarthritis (OA) can be divided into spontaneous models and induced models, both of which aim to simulate the ...

Standardized Histomorphometric Evaluation of Osteoarthritis in a Surgical Mouse Model

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, primarily in the hip and knee joints, which results in significant impacts on patient mobility and quality of life. To date, there are no existing curative therapies for OA able to slow down or inhibit cartilage degeneration. Presently, there is an extensive body of ongoing research to understand OA pathology and discover novel therapeutic approaches or agents that can efficiently slow down, stop, or even reverse OA. Thus, it is crucial to have a quantitative and reproducible approach to accurately evaluate OA-associated pathological changes in the joint cartilage, synovium, and subchondral bone. Currently, OA severity and progression are primarily assessed using the Osteoarthritis Research Society International (OARSI) or Mankin scoring systems. In spite of the importance of these scoring systems, they are semiquantitative and can be influenced by user subjectivity. More importantly, they fail to accurately evaluate subtle, yet important, changes in the cartilage during the early disease states or early treatment phases. The protocol we describe here uses a computerized and semiautomated histomorphometric software system to establish a standardized, rigorous, and reproducible quantitative methodology for the evaluation of joint changes in OA. This protocol presents a powerful addition to the existing systems and allows for more efficient detection of pathological changes in the joint.

The current protocol establishes a rigorous and reproducible method for quantification of morphological joint changes that accompany osteoarthritis. Application of this protocol can be valuable in monitoring disease progression and evaluating therapeutic interventions in osteoarthritis.

Cerrahi Fare Modelinde Osteoartritin Standart Histomorfometrik Değerlendirilmesi

One of the most prevalent joint disorders in the United States, osteoarthritis (OA) is characterized by progressive degeneration of articular cartilage, ...

Flow Cytometry Analysis of Immune Cell Subsets within the Murine Spleen, Bone Marrow, Lymph Nodes and Synovial Tissue in an Osteoarthritis Model

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent evidence indicates a potential inflammatory component of the disease, with both T-cells and monocytes/macrophages potentially associated with the pathogenesis of OA. Further studies postulated an important role for subsets of both inflammatory cell lineages, such as Th1, Th2, Th17, and T-regulatory lymphocytes, and M1, M2, and synovium-tissue-resident macrophages. However, the interaction between the local synovial and systemic inflammatory cellular response and the structural changes in the joint is unknown. To fully understand how T-cells and monocytes/macrophages contribute towards OA, it is important to be able to quantitively identify these cells and their subsets simultaneously in synovial tissue, secondary lymphatic organs and systemically (the spleen and bone marrow). Nowadays, the different inflammatory cell subsets can be identified by a combination of cell-surface markers making multi-color flow cytometry a powerful technique in investigating these cellular processes. In this protocol, we describe detailed steps regarding the harvest of synovial tissue and secondary lymphatic organs as well as generation of single cell suspensions. Furthermore, we present both an extracellular staining assay to identify monocytes/macrophages and their subsets as well as an extra- and intra-cellular staining assay to identify T-cells and their subsets within the murine spleen, bone marrow, lymph nodes and synovial tissue. Each step of this protocol was optimized and tested, resulting in a highly reproducible assay that can be utilized for other surgical and non-surgical OA mouse models.

Here, we describe a detailed and reproducible flow cytometry protocol to identify monocyte/macrophage and T-cell subsets using both extra- and intracellular staining assays within the murine spleen, bone marrow, lymph nodes and synovial tissue, utilizing an established surgical model of murine osteoarthritis.

Bir Osteoartrit Modelinde Minör Dalak, Kemik İliği, Lenf Düğümleri ve Sinovyal DokuDaki İmmün Hücre Alt Kümelerinin Akış Sitometri Analizi

Osteoarthritis (OA) is one of the most prevalent musculoskeletal diseases, affecting patients suffering from pain and physical limitations. Recent ...

Software-Assisted Quantitative Measurement of Osteoarthritic Subchondral Bone Thickness

Subchondral bone thickening and sclerosis are the major hallmarks of osteoarthritis (OA), both in animal models and in humans. Currently, the severity of the histologic subchondral bone thickening is mostly determined by visual estimation based semi-quantitative grading systems. This article presents a reproducible and easily executed protocol to quantitatively measure subchondral bone thickness in a mouse model of knee OA induced by destabilization of the medial meniscus (DMM). This protocol utilized ImageJ software to quantify subchondral bone thickness on histologic images after defining a region of interest in the medial femoral condyle and the medical tibial plateau where subchondral bone thickening usually occurs in DMM-induced knee OA. Histologic images from knee joints with a sham procedure were used as controls. Statistical analysis indicated that the newly developed quantitative subchondral bone measurement system was highly reproducible with low intra- and inter-observer variabilities. The results suggest that the new protocol is more sensitive to subtle or mild subchondral bone thickening than the widely used visual grading systems. This protocol is suitable for detecting both early and progressing osteoarthritic subchondral bone changes and for assessing in vivo efficacy of OA treatments in concert with OA cartilage grading.

This methodology article presents a software-assisted quantitative measurement protocol to quantify histologic subchondral bone thickness in murine osteoarthritic knee joints and normal knee joints as controls. This protocol is highly sensitive to subtle thickening and is suitable for detecting early osteoarthritic subchondral bone changes.

Osteoartrit Subkondral Kemik Kalınlığının Yazılım Destekli Nicel Ölçümü

Subchondral bone thickening and sclerosis are the major hallmarks of osteoarthritis (OA), both in animal models and in humans. Currently, the severity of ...

Destabilization of the Medial Meniscus and Cartilage Scratch Murine Model of Accelerated Osteoarthritis

Osteoarthritis is the most prevalent musculoskeletal disease in people over 45, leading to an increasing economic and societal cost. Animal models are used to mimic many aspects of the disease. The present protocol describes the destabilization and cartilage scratch model (DCS) of post-traumatic osteoarthritis. Based on the widely used destabilization of the medial meniscus (DMM) model, DCS introduces three scratches on the cartilage surface. The current article highlights the steps to destabilize the knee by transecting the medial meniscotibial ligament followed by three intentional superficial scratches on the articular cartilage. The possible analysis methods by dynamic weight-bearing, microcomputed tomography, and histology are also demonstrated. While the DCS model is not recommended for studies that focus on the effect of osteoarthritis on the cartilage, it enables the study of osteoarthritis development in a shorter time window, with special focus on (1) osteophyte formation, (2) osteoarthritic and injury pain, and (3) the effect of cartilage damage in the whole joint.

The present protocol describes the controlled microblade scratches on the surface of the articular cartilage after destabilizing the mouse knee by cutting the medial miniscotibial ligament. This animal model presents an accelerated form of osteoarthritis (OA) suitable for studying osteophyte formation, osteosclerosis, and early-stage pain.

Hızlandırılmış Osteoartritin Medial Menisküs ve Kıkırdak Çizik Murin Modelinin Destabilizasyonu

Osteoarthritis is the most prevalent musculoskeletal disease in people over 45, leading to an increasing economic and societal cost. Animal models are ...

<meta charset="utf8"></head><body>Gelişmiş Analjezik Test için Çift Arka Pençe Enjeksiyonu

A Modified Inflammatory Pain Model to Study the Analgesic Effect in Mice

The hot plate test is widely used to evaluate analgesic effects on inflammatory pain in mice. A commonly used model of inflammatory pain was induced with an intraplantar injection of carrageenan in one hind paw. However, the findings from our laboratory showed that mice with a single-hind-paw injection of carrageenan lifted their paws to avoid thermal nociception during the hot plate test. Because of this response,&#160;previous injection method cannot accurately reflect the thermal pain threshold. Thus, we investigated a new method to avoid this issue. In the present study, we modified the previous method by injecting carrageenan into both hind paws to establish the model of inflammatory pain. The results demonstrated that both-hind-paw injection with carrageenan was sensitive and a better method to induce inflammatory pain when using the hot plate test than single-hind-paw injection. On the basis of these findings, we designed further experiments in which mice with either both-hind-paw or single-hind-paw injection of carrageenan were treated intragastrically with celecoxib (30 mg/kg). The results of the hot plate test showed that celecoxib augmented the thermal pain threshold in mice with both-hind-paw injection of carrageenan but not in mice with single-hind-paw injection of carrageenan. In summary, we developed a superior method to induce a model of inflammatory pain to evaluate analgesic effect.

<meta charset="utf8"></head><body>Yazar Spotlight: Analjezik Etkileri Değerlendirmek İçin Gelişmiş Yöntem — Farelerde Çift Arka Pençe Carrageenan Enjeksiyonu

Here, we present a modified inflammatory pain model with the both-hind-paw carrageenan injection to evaluate the analgesic effect.

Farelerde analjezik etkiyi incelemek için modifiye edilmiş bir inflamatuar ağrı modeli

The hot plate test is widely used to evaluate analgesic effects on inflammatory pain in mice. A commonly used model of inflammatory pain was induced with ...

Fare Osteoartrit Ağrı Monoiodoacetate Modeli

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Fare Aortocaval Fistül Teknik Yönleri

Temporomandibular Joint Pain Measurement by Bite Force and Von Frey Filament Assays in Mice

Fare modelleri Monoarticular diz ağrısı kendiliğinden ve uyarılmış önlemler

Sıçanlarda Mono-İyodoasetatın Eklem İçi Enjeksiyonu ile İndüklenen Osteoartrit Ağrı Modeli

Cerrahi Fare Modelinde Osteoartritin Standart Histomorfometrik Değerlendirilmesi

Bir Osteoartrit Modelinde Minör Dalak, Kemik İliği, Lenf Düğümleri ve Sinovyal DokuDaki İmmün Hücre Alt Kümelerinin Akış Sitometri Analizi

Osteoartrit Subkondral Kemik Kalınlığının Yazılım Destekli Nicel Ölçümü

Hızlandırılmış Osteoartritin Medial Menisküs ve Kıkırdak Çizik Murin Modelinin Destabilizasyonu

Farelerde analjezik etkiyi incelemek için modifiye edilmiş bir inflamatuar ağrı modeli

Farelerde analjezik etkiyi incelemek için modifiye edilmiş bir inflamatuar ağrı modeli