Bu araştırma, Çin Ulusal Doğa Bilimleri Vakfı (Hibe No.82174521), Hunan Çin Tıbbı Üniversitesi Lisansüstü Öğrencileri için İnovasyon Projesi(2022CX109) tarafından sağlanan hibelerle desteklenmiştir.

Hayvanları içeren prosedürler, Hunan Çin Tıbbı Üniversitesi'ndeki Kurumsal Bakım ve Kullanım Komitesi tarafından onaylanmıştır.
1. Haddeleme masajının montajı
<ol><li>Kauçuk rulo, çatal tutucu, yay, limit bölmesi, ayar ateli, vida ve akrilik saptan oluşan bir masaj aleti seçin (Şekil 1). Kauçuk silindirin 3 cm uzunluğunda ve 1.6 cm çapında, yayın 3 cm uzunluğunda ve 0.9 cm çapında, sınır bölmesinin 3 cm uzunluğunda ve 2 cm genişliğinde ve sapın 12 cm uzunluğunda ve 0.9 cm çapında olduğundan emin olun.</li>
	<li>Kuvvet kontrolü: Literatür sonuçlarınagöre 23, Ding'in yuvarlanma yönteminde aşağı doğru basıncın vücut ağırlığının yaklaşık %10'u kadar olduğu, dolayısıyla ileri yuvarlanma tasarımı sırasında uygulanan basıncın sıçanın vücut ağırlığının yaklaşık %10'u (0.2-0.3 N) olduğu bulunmuştur. Limit bölmesinin açısını ayarlayarak masaj aletinin tartım kontrol cihazındaki maksimum basıncını yaklaşık 0,3 N olacak şekilde test edin. Bu basınç gereksinimi sıçanın ihtiyaçlarını karşılar.</li>
	<li>Geri dönerken minimum basıncın yaklaşık 0.08 N olduğundan emin olun (Şekil 2). Basıncın, ileri ve geri kuvvetlerin oranının 3: 1 olduğu Ding'in yuvarlanma yönteminin gerekliliğine tam olarak uygun olduğundan emin olun.</li>
	<li>Tedaviden önce, operatörden haddeleme frekansını 140 rulo/dk'ya kadar kontrol etmek için metronom yazılımıyla çalışmasını isteyin ve işlemin standartlaştırıldığından emin olmak için bunu ön deneyde 3 kattan fazla uygulayın.</li>
</ol>2. İskelet kası yaralanmasının sıçan modelinin oluşturulması
<ol><li>24 erkek, Sprague-Dawley sıçanını (200-250 g ağırlığında) rastgele olarak, kontrol (C), notexin (NTX) ve Tuina (NTX + Tuina) ile notexin dahil olmak üzere her biri sekiz sıçandan oluşan üç gruba bölün ve standart bir diyetle beslenin. 12 saat aydınlık/12 saat karanlık döngüsünde, 20-25 °C'de ve %50-70 nemde evde muhafaza edin.</li>
	<li>İntraperitoneal enjeksiyon ile %1 pentobarbital sodyum (40 mg/kg) ile uyuşturun ve ardından tüy dökücü krem ile sağ alt ekstremitedeki tüyleri alın. Kürkü çıkardıktan sonra, kalan kremi tuzlu su kullanarak silin. Ayak parmağını kıstırma tepkisi ile yeterli anesteziyi onaylayın. Hayvan anestezi altındayken gözleri nemlendirmek için oftalmik merhem sürün. Prosedür boyunca termal destek sağlayın.</li>
	<li>Enjeksiyondan önce iyodofor dezenfeksiyon solüsyonu ve% 75 alkol ile sağ alt ekstremite için alternatif cilt dezenfeksiyonu. İyodofor dezenfekte edici solüsyona batırılmış bir pamuklu çubuğa alt ekstremite derisinin ortasına dokunun ve dışa doğru dairesel hareketlerle uygulayın. Etanole batırılmış pamuklu çubukla tekrarlayın.</li>
	<li>Referans yöntemine göre iskelet kası yaralanma modelleri oluşturun24. Notexin'i sadece bir bacağa enjekte edin (çift notexin enjeksiyonunu önlemek için). 30G iğne ile 1 mL'lik bir şırıngaya 200 μL notexin solüsyonu (15 mL'lik bir santrifüj tüpünde 10 mL normal saline 100 μg notexin eklenerek hazırlanan 10 μg / mL notexin solüsyonu) çekin ve kas yaralanması oluşturmak için notexin solüsyonunu intramüsküler olarak gastroknemius kasına enjekte edin.</li>
	<li>Notexin'i yavaşça enjekte edin ve iğneyi çıkarmadan önce 3 saniye bekleyin (tamamen enjekte edilecek). DİKKAT: Notexin, açık bir yara ile temas ettiğinde derhal bol su ile yıkanmasını ve gerekirse derhal tıbbi yardım alınmasını gerektiren toksik bir kimyasaldır.</li>
	<li>Kontrol grubundaki sıçanlara 200 μL salin solüsyonu enjekte edin. Anestezi uygulanmış fareleri temiz yataklı boş kafeslere taşıyın. Nefeslerini temiz tutmak için farelerin burnunun ve ağzının etrafındaki dolguyu çıkarmaya dikkat edin. Sıçanlar yeterli bilinci yeniden kazanana kadar enjeksiyonun sonunda doku rengini ve solunum hızını görsel olarak gözlemleyin.</li>
	<li>Fareleri ev kafesine geri koyun ve tipik olarak 24 saat boyunca yetiştirin.</li>
</ol>3. Tuina terapisi
<ol><li>Gastroknemius kasını ortaya çıkarmak için% 75 alkolle dezenfekte edilmiş deney platformuna başı siyah bir bezle kaplı bir SD sıçan yüzüstü pozisyonda yerleştirin. Çok sıkı örtmeyin.</li>
	<li>NTX+Tuina grubu için Tuina masaj aletini kullanma: Masaj aletini tutun ve silindiri sıçanın gastroknemius kasına yerleştirin ve yay sınır bölmesine temas edene kadar ileri doğru yuvarlayın. Ardından kuvveti geri çekin ve orijinal konumuna geri dönün, böylece ileri geri hareket (Şekil 3).</li>
	<li>Masaj aletini dakikada 140 rulo hızında yuvarlayın ve her işlemi 3 dakika boyunca gerçekleştirin. Masajları sabah bir kez ve öğleden sonra bir kez art arda 3 gün boyunca yapın.</li>
	<li>Her tedaviden sonra fareleri ev kafesine geri koyun ve son tedaviden sonra 8 saat aç kalın.</li>
</ol>4. Deneyden sonra sıçanlardan kan ve doku toplanması
<ol><li>İlgili hayvan deneyleri etik kurulunun gerekliliklerine göre, sıçanlara %1'lik pentobarbital sodyum (40 mg/kg, intraperitoneal enjeksiyon) intraperitoneal enjeksiyon ile anestezi yapılır. Ayak parmağını kıstırma tepkisi ile yeterli anesteziyi onaylayın. Kan alındıktan sonra abdominal aort kanı alarak sıçanlara ötenazi yapın.</li>
	<li>Enjeksiyondan önce iyodofor dezenfeksiyon solüsyonu ve% 75 alkol ile alternatif cilt dezenfeksiyonu. Povidon-iyot ile ıslatılmış bir pamuklu çubuğu karın derisinin ortasına dokunun ve dışa doğru dairesel hareketlerle uygulayın. Etanole batırılmış pamuklu çubukla tekrarlayın. Dezenfeksiyonu 3 kez tekrarlayın.</li>
	<li>Asistandan karnın ortasındaki cildi kaldırmak için iki hemostat kullanmasını isteyin. Operatör olarak, karın derisini ve kasları raphe'den kasık simfizine kesmek için bir neşter kullanın.</li>
	<li>Karın boşluğunu açtıktan sonra, karın arka duvarındaki abdominal aortu ortaya çıkarmak için bağırsağı steril pamuk topları ile ayırın.</li>
	<li>Abdominal aortu bulun, 5 mL sıçan kanını kan alma tüplerine alın ve 1 saat boyunca kan bekledikten sonra 10 dakika boyunca 3000 x g'da santrifüj ederek plazmayı 1.5 mikrotüplere alın. Plazmayı -80 °C'de saklayın.</li>
	<li>Alt ekstremite kaslarını açığa çıkararak alt karın açıklığı boyunca sağ alt ekstremitenin lateral yönüne doğru cildi cerrahi makasla kesin ve fasyayı forseps ile dikkatlice ayırdıktan sonra, sağlam gastroknemius kasını çıkarmak için neşteri kesin.</li>
	<li>Yapışan saçları ve kanı çıkarmak için gastroknemius kasını steril salinle yıkayın.</li>
	<li>Çıkarılan gastroknemius kasını %4 paraformaldehit içeren 15 mL'lik bir santrifüj tüpüne yerleştirin.</li>
</ol>5. Plazma CK ve FABP 3 seviyelerinin ELISA ile tespiti
<ol><li>Bir deney için gereken önceden sarılmış plakaların sayısını hesaplayın ve belirleyin. Gerekli plakaları çıkarın, 96 oyuklu çerçeveye yerleştirin, kalan mikroplakaları sızdırmazlık için alüminyum folyo torbaya geri koyun ve 4 °C'de saklayın.</li>
	<li>Kitleri ve numuneleri oda sıcaklığında (25-28 °C) 120 dakika dengeleyin, oda sıcaklığına tamamen dengeleyin. NOT: Kitin ve numunenin dengelenmesi kritiktir ve yeterli sürede dengelenmelidir.</li>
	<li>Standart, numune ve boş kuyucukları ayarlayın. Standart kuyucuklara farklı konsantrasyonlarda (100, 50, 25, 12.5, 6.25, 0 ng/mL) 50 μL CK veya FABP3 standardı ekleyin. Her standardı bir kez tekrarlayın, toplam 12 kuyu işgal edin.</li>
	<li>Numune kuyucuklarını 40 μL numune seyreltici (0,8 g NaCl, 0,02 g KH 2 PO 4, 0,29 g Na 2 HPO 4 12H2O, 0,02 g KCl, 0,01 g NaN3100 mL çift damıtılmış su içinde, pH7,4) ile doldurun ve ardından test edilecek numuneden 10 μL ekleyin. Her numuneyi bir kez tekrarlayın, toplamda 48 kuyu işgal edin.</li>
	<li>Son numune kuyusunun arkasında bulunan iki kuyucuk dışındaki boş kuyucuklar dışında, her standart ve numune kuyucuğuna 100 μL HRP etiketli anti-insan CK veya FABP3 antikoru (enzim etiketli antikor) ekleyin.</li>
	<li>Kuyucukları sızdırmazlık filmi ile kapatın ve 37 ° C'lik bir su banyosunda veya termostatta 60 dakika inkübe edin.</li>
	<li>Sıvıyı atın, emici kağıt üzerinde kurulayın, her kuyucuğu yıkama sıvısıyla doldurun, 20 saniye bekletin, yıkama sıvısını sallayın, kurutma kağıdına hafifçe vurarak kurulayın ve plakayı 5 kez yıkamayı tekrarlayın (veya bir plaka yıkayıcı kullanın).</li>
	<li>Her bir kuyucuğa 50 μL kromojen çözeltisi A (100 mL çift damıtılmış su içinde 20 mg tetrametilbenzidin 10 mL etanol) ve 50 μL kromojen çözeltisi B (0.1 M/L sitrik asit, 0.2 M/L sodyum dihidrojen fosfat tamponu, pH 5.0-5.4) ekleyin. 37 °C'de 15 dakika ışıktan uzak tutun.</li>
	<li>Standart kuyular, numune kuyuları ve boş kuyular için, her kuyucuğa 50 μL sonlandırma çözeltisi ekleyin ve her kuyucuğun optik yoğunluk değerini 15 dakika içinde 450 nm'de ölçün.</li>
</ol>6. Sıçanlarda notexin kaynaklı gastroknemius kas hasarının histolojik analizi
<ol><li>25'te tarif edildiği gibi hafif mikroskobik inceleme için hematoksilen ve eozin ile boyanmış 5 μm kalınlığında parafin kesitleri hazırlayın.</li>
</ol>7. Görüntü işleme ve veri analizi
<ol><li>Görüntüleme sisteminin yakaladığı görüntüleri analiz yazılımı ile okuyun ve analiz edin. Seçili görüntü alanını fareyle ekranın ortasına taşıyın, 40x'i tıklatın ve ardından Anlık Görüntü Al'ı tıklatın.</li>
	<li>ELISA'dan gelen OD değerlerini bir elektronik tabloya kaydedin ve standart eğriyi kullanarak numunelerdeki sıçan CK ve FABP3 seviyelerini hesaplayın.</li>
	<li>İstatistiksel analizler için istatistiksel analiz yazılımı kullanın. Ölçümleri ortalama ± standart sapma (<img alt="Equation 1" src="/files/ftp_upload/65820/65820eq01.jpg" style="margin: auto;">) olarak ifade edin ve gruplar arasındaki karşılaştırmaları tek yönlü ANOVA ile, varyans tekdüze olduğunda LSD testi ve varyans tekdüze olmadığında Tamhane T2 yöntemi ile analiz edin. Fark, 0.05'ten küçük bir p değerinde istatistiksel olarak anlamlı kabul edildi.</li>
</ol>

Bir sıçan modelinde kas yaralanmasını tedavi etmek için Ding'in yuvarlanma manipülasyonuna dayalı bir masaj aleti

<ol>
	<li>Lempainen, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Management+of+anterior+thigh+injuries+in+soccer+players:+practical+guide.">Management of anterior thigh injuries in soccer players: practical guide.</a> BMC Sports Science, Medicine and Rehabilitation. 14 (1), 41 (2022).</li><li>Bayer, M. L., Mackey, A., Magnusson, S. P., Krogsgaard, M. R., Kj&#230;r, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatment+of+acute+muscle+injuries+(in+Danish).">Treatment of acute muscle injuries (in Danish).</a> Ugeskrift for Laeger. 181 (8), V11180753 (2019).</li><li>Serner, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progression+of+Strength,+Flexibility,+and+Palpation+Pain+During+Rehabilitation+of+Athletes+with+Acute+Adductor+Injuries:+A+Prospective+Cohort+Study.">Progression of Strength, Flexibility, and Palpation Pain During Rehabilitation of Athletes with Acute Adductor Injuries: A Prospective Cohort Study.</a> The Journal of Orthopaedic and Sports Physical Therapy. 51 (3), 126-134 (2021).</li><li>Gozubuyuk, O. B., Koksal, C., Tasdemir, E. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rehabilitation+of+a+patient+with+bilateral+rectus+abdominis+full+thickness+tear+sustained+in+recreational+strength+training:+a+case+report.">Rehabilitation of a patient with bilateral rectus abdominis full thickness tear sustained in recreational strength training: a case report.</a> Physiotherapy Theory and Practice. 38 (13), 3216-3225 (2022).</li><li>Hotfiel, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Current+Conservative+Treatment+and+Management+Strategies+of+Skeletal+Muscle+Injuries.">Current Conservative Treatment and Management Strategies of Skeletal Muscle Injuries.</a> Zeitschrift f&#252;r Orthop&#228;die und Unfallchirurgie. 154 (3), 245-253 (2016).</li><li>de Sire, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+Treatment+for+Acute+Traumatic+Musculoskeletal+Pain+in+Athletes.">Pharmacological Treatment for Acute Traumatic Musculoskeletal Pain in Athletes.</a> Medicina. 57 (11), 1208 (2021).</li><li>Connor, D. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+potential+of+exosomes+in+rotator+cuff+tendon+healing.">Therapeutic potential of exosomes in rotator cuff tendon healing.</a> Journal of Bone and Mineral Metabolism. 37 (5), 759-767 (2019).</li><li>Martins, A. L. L., Giorno, L. P., Santos, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue+Engineering+Applied+to+Skeletal+Muscle:+Strategies+and+Perspectives.">Tissue Engineering Applied to Skeletal Muscle: Strategies and Perspectives.</a> Bioengineering. 9 (12), 744 (2022).</li><li>Horgan, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clouds+across+the+new+dawn+for+clinical,+diagnostic+and+biological+data:+accelerating+the+development,+delivery+and+uptake+of+personalized+medicine.">Clouds across the new dawn for clinical, diagnostic and biological data: accelerating the development, delivery and uptake of personalized medicine.</a> Diagnosis. , (2023).</li><li>Urits, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Comprehensive+Review+of+Alternative+Therapies+for+the+Management+of+Chronic+Pain+Patients:+Acupuncture,+Tai+Chi,+Osteopathic+Manipulative+Medicine,+and+Chiropractic+Care.">A Comprehensive Review of Alternative Therapies for the Management of Chronic Pain Patients: Acupuncture, Tai Chi, Osteopathic Manipulative Medicine, and Chiropractic Care.</a> Advances in Therapy. 38 (1), 76-89 (2021).</li><li>Lee, N. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chuna+(or+Tuina)+Manual+Therapy+for+Musculoskeletal+Disorders:+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis+of+Randomized+Controlled+Trials.">Chuna (or Tuina) Manual Therapy for Musculoskeletal Disorders: A Systematic Review and Meta-Analysis of Randomized Controlled Trials.</a> Evidence-based Complementary and Alternative Medicine: eCAM. 2017, 8218139 (2017).</li><li>Xie, J., Deng, D. X., Chen, Y., Peng, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Progress+in+the+intervention+of+massage+techniques+on+skeletal+muscle+injury.">Progress in the intervention of massage techniques on skeletal muscle injury.</a> Hunan Journal of Traditional Chinese Medicine. 34 (04), 199-201 (2018).</li><li>Yuan, Y., Zhang, H., Zhang, G. H., Xue, X. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Research+progress+on+microstructure+changes+and+rehabilitation+treatment+of+exercise-induced+skeletal+muscle+injury.">Research progress on microstructure changes and rehabilitation treatment of exercise-induced skeletal muscle injury.</a> Massage and Rehabilitation Medicine. 14 (6), 29-33 (2023).</li><li>Zhao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Establishment+of+Famous+Tuina+Master+Ding+Jifeng+and+Wei+Fa+-+Commemorating+the+100th+Anniversary+of+Mr.+Ding+Jifeng's+Birthday.">The Establishment of Famous Tuina Master Ding Jifeng and Wei Fa - Commemorating the 100th Anniversary of Mr. Ding Jifeng's Birthday.</a> Traditional Chinese Medicine Culture. 9 (6), 18-21 (2014).</li><li>Hardy, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparative+Study+of+Injury+Models+for+Studying+Muscle+Regeneration+in+Mice.">Comparative Study of Injury Models for Studying Muscle Regeneration in Mice.</a> PloS one. 11 (1), e0147198 (2016).</li><li>Plant, D. R., Colarossi, F. E., Lynch, G. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Notexin+causes+greater+myotoxic+damage+and+slower+functional+repair+in+mouse+skeletal+muscles+than+bupivacaine.">Notexin causes greater myotoxic damage and slower functional repair in mouse skeletal muscles than bupivacaine.</a> Muscle &amp; Nerve. 34 (5), 577-585 (2006).</li><li>Tierney, M. T., Sacco, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inducing+and+Evaluating+Skeletal+Muscle+Injury+by+Notexin+and+Barium+Chloride.">Inducing and Evaluating Skeletal Muscle Injury by Notexin and Barium Chloride.</a> Methods in Molecular Biology. 1460, 53-60 (2016).</li><li>Torres-Ruiz, J., Alcal&#225;-Carmona, B., Alejandre-Aguilar, R., G&#243;mez-Mart&#237;n, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammatory+myopathies+and+beyond:+The+dual+role+of+neutrophils+in+muscle+damage+and+regeneration.">Inflammatory myopathies and beyond: The dual role of neutrophils in muscle damage and regeneration.</a> Frontiers in Immunology. 14, 1113214 (2023).</li><li>Tu, H., Li, Y. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inflammation+balance+in+skeletal+muscle+damage+and+repair.">Inflammation balance in skeletal muscle damage and repair.</a> Frontiers in Immunology. 14, 1133355 (2023).</li><li>Castro, C., Gourley, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Diagnosis+and+treatment+of+inflammatory+myopathy:+issues+and+management.">Diagnosis and treatment of inflammatory myopathy: issues and management.</a> Therapeutic Advances in Musculoskeletal Disease. 4 (2), 111-120 (2012).</li><li>Dabby, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymptomatic+or+minimally+symptomatic+hyperCKemia:+histopathologic+correlates.">Asymptomatic or minimally symptomatic hyperCKemia: histopathologic correlates.</a> The Israel Medical Association Journal: IMAJ. 8 (2), 110-113 (2006).</li><li>Khodabukus, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tissue-Engineered+Human+Myobundle+System+as+a+Platform+for+Evaluation+of+Skeletal+Muscle+Injury+Biomarkers.">Tissue-Engineered Human Myobundle System as a Platform for Evaluation of Skeletal Muscle Injury Biomarkers.</a> Toxicological Sciences. 176 (1), 124-136 (2020).</li><li>Zhou, X. W., Jin, W. D., Zhu, L., Liu, X. H., Zhou, B. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+observation+on+the+influence+of+different+frequency,+intensity+and+action+time+of+Ding+rolling+manipulation+on+hemodynamics.">Experimental observation on the influence of different frequency, intensity and action time of Ding rolling manipulation on hemodynamics.</a> Shanghai Journal of Traditional Chinese Medicine. (06), 42-44 (1998).</li><li>Pablos, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+Effects+of+Foam+Rolling+against+Inflammation+and+Notexin+Induced+Muscle+Damage+in+Rats.">Protective Effects of Foam Rolling against Inflammation and Notexin Induced Muscle Damage in Rats.</a> International Journal of Medical Sciences. 17 (1), 71-81 (2017).</li><li>Wisner, L., Larsen, B., Maguire, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhancing+Tumor+Content+through+Tumor+Macrodissection.">Enhancing Tumor Content through Tumor Macrodissection.</a> Journal of Visualized Experiments: JoVE. (180), e62961 (2022).</li><li>Deng, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contusion+concomitant+with+ischemia+injury+aggravates+skeletal+muscle+necrosis+and+hinders+muscle+functional+recovery.">Contusion concomitant with ischemia injury aggravates skeletal muscle necrosis and hinders muscle functional recovery.</a> Experimental Biology and Medicine. 247 (17), 1577-1590 (2022).</li><li>Dobek, G. L., Fulkerson, N. D., Nicholas, J., Schneider, B. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mouse+model+of+muscle+crush+injury+of+the+legs.">Mouse model of muscle crush injury of the legs.</a> Comparative Medicine. 63 (3), 227-232 (2013).</li><li>Armstrong, D. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sildenafil+citrate+protects+skeletal+muscle+of+ischemia-reperfusion+injury:+immunohistochemical+study+in+rat+model.">Sildenafil citrate protects skeletal muscle of ischemia-reperfusion injury: immunohistochemical study in rat model.</a> Acta Ciru&#769;rgica Brasileira. 28 (4), 282-287 (2013).</li></ol>

Yazarların açıklayacak hiçbir şeyi yok.

Burada, sıçanlarda iskelet kası hasarının Tuina tedavisi için bir protokol tanımladık ve daha sonra yöntemin etkinliğini doğrulamak için tedaviden sonra iskelet kası yaralanmasının derecesini analiz ettik. Özellikle, ilaç indüksiyonu (notexin, bupivakain)16, künt kontüzyon26, crush27 ve iskemi-reperfüzyon28 dahil ancak bunlarla sınırlı olmamak üzere sıçan iskelet kası yaralanma modellerine Tuina ile...

Kas yaralanmaları, klinik ve günlük yaşamda sık görülen, dışarıdan alınan darbeler (kontüzyonlar) veya kas liflerinin kronik aşırı zorlanması (gerilmeler) vb. nedeniyle kas fonksiyon bozukluğu ve ağrı ile sonuçlanan, hatta hastanın yaşam kalitesini ciddi şekilde etkileyen travmatik yaralanmalardır1. Akut zorlanma yaralanmasından sonra rehabilitasyona mümkün olduğunca erken başlamak, sporadönüş süresini kısaltmanın 2 ve ağrıyı azaltmanınanahtarıdır 3,4. Modern Batı tıbbında, kas yaralanmaları için klinik ilk yardım, kas dokusuna zararlı kanamayı durdurmak için dinlenme, buz, kompresyon ve yükselme (RICE)ilkelerini takip eder 5 ve ağrıyı hafifletmek için steroid olmayan antienflamatuar ilaçlar6. Eksozom7 ve doku mühendisliği8 gibi yeni tedavilerin keşfi, iskelet kası hastalıkları için potansiyel tedavi stratejileri haline geldi ve önceki farmakolojik tedavilerin eksikliklerini telafi etti. Bununla birlikte, hastalar için tedavi maliyetini de artırabilir ve onları muazzam bir mali baskı altına sokabilir9. Bu nedenle, kas-iskelet sistemi problemlerini tedavi etmek için alternatif ve tamamlayıcı tedaviler önerilmektedir10. Tuina, Çin'de geleneksel bir tıbbi yöntem olarak klinik olarak yaygın olarak kullanılmaktadır ve etkinliği ve daha az yan etkisi nedeniyle hastalar arasında popülerdir. Kas-iskelet sistemi bozuklukları için Tuina terapisi ağrıyı hafifletebilir ve işlevi iyileştirebilir11,12,13. Ünlü bir Şanghay Tuina uygulayıcısı olan Bay Ding Jifeng, Ding'in rulo yöntemi14'ü kurdu. Geniş bir kuvvet alanına, düzgün ve yumuşak kuvvete ve yoğun penetrasyona sahip benzersiz bir haddeleme ve kırma tekniğidir.
Farklı hayvan modelleri farklı etiyolojilere dayanmaktadır. Avantajları ve dezavantajları vardır ve doğru ve uygun hayvan modellerinin seçimi, iskelet kası yaralanmasından sonra rejenerasyon ve onarımın hücresel ve moleküler sinyal yollarının anlaşılmasına yardımcı olan temel deneyler için büyük önem taşımaktadır. Kimyasal olarak indüklenen kas yaralanması modelleri, miyofiber nekrozuna neden olan ve 2 hafta içinde etkili bir şekilde yenilenebilen rejenere alanlar üreten iskelet kası enjeksiyonları ile yaygın olarak kullanılmaktadır15. Hem notexin hem de bupivakain kas hasarına neden olabilir. Bununla birlikte, notexin, iskelet kasında bupivakainden daha ciddi miyotoksik hasara neden olabilir ve doğal fonksiyonel iyileşme nispeten daha yavaştır16. İlaç intramüsküler enjeksiyon kalıplama sadece daha az zaman almakla kalmaz, aynı zamanda iskelet kası hasarının kontrollü etkilerine ve derecesine sahiptir. Bu ölçülebilir kontrol, başarılı kalıplamayı daha az zorlaştırır15,17.
İnflamatuar yanıt, miyopati bağlamında kapsamlı bir şekilde incelenmiş önemli bir biyolojik yanıttır18,19. İskelet kası yaralanmasının erken evrelerinde, miyofiber nekrozu lokal kas homeostazını bozar ve birçok enflamatuar hücre yaralanma bölgesine sızarak birçok proinflamatuar sitokinsalgılar 19. Kreatin kinaz (CK), iskelet kası hasarını değerlendirmek için kullanılan geleneksel bir serum biyobelirtecidir. Bununla birlikte, doku özgüllüğü20 ve duyarlılık21'den yoksundur, bu da ilaca bağlı kas hasarının derecesini değerlendirme ve yaralanma sonrası kas iyileşmesinin derecesini dolaylı olarak bildirme yeteneğini sınırlar. Yağ asidi bağlayıcı protein 3 (FABP3) dahil olmak üzere yeni biyobelirteçler, son zamanlarda iskelet kası yaralanmasının kemirgen modellerinde nispeten yüksek doku özgüllüğü ve duyarlılığı göstermiştir. FABP3, esas olarak kalp ve iskelet kası hücrelerinde eksprese edilen ve yağ asidi metabolizması, taşınması ve sinyalizasyonunda rol oynayan bir bağlayıcı protein ailesidir22. Bu nedenle, noteksinin neden olduğu iskelet kası hasarının derecesini ve tedaviden sonra iyileşmeyi değerlendirmek için iki biyobelirteç olan CK ve FABP3'ün bir kombinasyonunu seçtik.
Kemirgenlerde kaslar sığdır ve cilt alanı küçüktür, bu da kemirgenlerde masajın çeşitli parametrelerinin hayvan terapisinde olduğu gibi insanlarda olduğu gibi aynı olmayacağını belirler, masaj terapisti onları Ding'in rulo yöntemini kullanarak daha az kuvvetle tedavi etmelidir ve yaralı bölgenin küçük boyutu nedeniyle bu tekniğin çalışmasına elverişli olmayabilir, bu da sonuçta masajın etkinliğinde bir azalmaya yol açabilir. Bu nedenle, deney, sıçanlarda noteksin kaynaklı iskelet kası yaralanması modelinin terapötik etkisine müdahale etmek ve değerlendirmek için Ding'in yuvarlanma yönteminin özelliklerine uyan evde yapılan yuvarlanma masajını kullandı, bu da Tuina'nın moleküler etki mekanizmasını derinlemesine araştırmak için deneysel hayvan çalışmalarında Tuina'nın parametrelerini standartlaştırmaya yardımcı oldu. kas-iskelet sistemi hastalıklarında geleneksel bir Çin tıbbı tedavi yöntemi.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>1 mL syringe</td>
			<td>JIANGXI FENGLIN</td>
			<td>20220521</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 microtubes&#160;</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>EP-150X-J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>15 mL centrifuge tube</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>EP-1501-J</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>30G needle</td>
			<td>CONPUVON</td>
			<td>220318</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>5 mL blood collection tube</td>
			<td>Servicebio</td>
			<td>QX0023</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Acrylic handle</td>
			<td>Guangdong Guangxingwang Plastic Materials Co., Ltd</td>
			<td>65643645</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Adjustment splint</td>
			<td>CREROMEM</td>
			<td>20220729</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Swab</td>
			<td>INOHV</td>
			<td>22080215</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Enzyme-labeled Instrument</td>
			<td>Rayto</td>
			<td>RT-6100&#160;</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol</td>
			<td>INOHV</td>
			<td>211106</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fork holder</td>
			<td>Yongkang Kangzhe Health Technology Co., Ltd</td>
			<td>JL001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hair removal cream</td>
			<td>Veet, France</td>
			<td>LOTC190922002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hematoxylin dyeing solution set</td>
			<td>Wuhan Google Biotech</td>
			<td>G1005</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Imaging system&#160;</td>
			<td>Nikon, Japan</td>
			<td>Nikon DS-U3</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>IODOPHOR disfecting solution</td>
			<td>Hale&#38;Hearty</td>
			<td>20221205</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Light microscope</td>
			<td>Nikon, Japan</td>
			<td>Nikon Eclipse E100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Limit baffle</td>
			<td>CREROMEM</td>
			<td>20220724</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Notexin</td>
			<td>Latoxan S.A.S.</td>
			<td>L8104-100UG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pentobarbital sodium</td>
			<td>Merck KGaA</td>
			<td>P3761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat creatine kinase (CK) ELISA kit</td>
			<td>LunChangShuoBiotech</td>
			<td>YD-35237</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat fatty acid-binding protein 3 (FABP3) ELISA kit</td>
			<td>LunChangShuoBiotech</td>
			<td>YD-35730</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rubber roller</td>
			<td>Hebei Mgkui Chemical Technology Co.,Ltd</td>
			<td>202207</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Screw</td>
			<td>Weiyan Hardware</td>
			<td>B05Z122</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Sprague Dawley rats</td>
			<td>Hunan Slake Kingda Laboratory Animal Co.</td>
			<td>SYXK2019-0009</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Spring</td>
			<td>Bingzhang Hardware</td>
			<td>TH001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical blade</td>
			<td>Covetrus</td>
			<td>#23</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Weigh controller</td>
			<td>Iyoys</td>
			<td>HY-XSQ</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

mimicking ding's roll method on notexin-induced muscle injury in rats

Ding'in rulo yöntemi, geleneksel Çin masajı (Tuina) kliniklerinde en sık kullanılan manipülasyonlardan biridir ve Çin'deki en etkili çağdaş Tuina manipülasyonlarından biridir. Tek parmak Zen türünde yaygın olarak kullanılan ve Ding'in yuvarlanma yöntemi olarak adlandırılan geleneksel yuvarlanma yöntemine dayanmaktadır. Anti-enflamatuar ve kan dolaşımını teşvik edici etkileri nedeniyle, Ding'in yuvarlanma yöntemi miyopati üzerinde sağlam terapötik etkilere sahiptir. İnsan derisine uygulanan geniş kuvvet alanı nedeniyle, Ding'in yuvarlanma yönteminin, sıçanlar ve tavşanlar gibi küçük deri alanlarına sahip deney hayvanları üzerinde gerçekleştirilmesi zordur. Ek olarak, insan vücuduna uygulanan Tuina'nın gücü, deney hayvanlarına uygulanandan farklıdır, bu nedenle, deney sırasında Tuina'nın terapötik etkisini elde etmek için gücün çok yüksek veya çok düşük olması olabilir. Bu deney, Ding'in yuvarlanma manipülasyon parametrelerine (güç, frekans, Tuina süresi) dayalı olarak sıçanlar için uygun basit bir masaj aleti oluşturmayı amaçlamaktadır. Cihaz, hayvan deneylerinde manipülasyonu standartlaştırabilir ve öznel faktörler nedeniyle farklı hayvanlara uygulanan Tuina kuvvetindeki değişimi azaltabilir. Noteksin kaynaklı iskelet kası hasarının bir sıçan modeli oluşturuldu ve Tuina'nın iskelet kası hasarı üzerindeki terapötik etkisini değerlendirmek için plazma hasarı belirteçleri kreatin kinaz (CK) ve yağ asidi bağlayıcı protein 3 (FABP3) kullanıldı. Sonuçlar, bu Tuina masajının CK ve FABP3 ekspresyon seviyelerini azaltabileceğini ve iskelet kası yaralanmasının derecesini yavaşlatabileceğini gösterdi. Bu nedenle, burada tarif edilen Tuina masajı, Ding'in rulo yöntemini taklit ederek, deneysel araştırmalarda Tuina manipülasyonunun standartlaştırılmasına katkıda bulunur ve Tuina'nın miyopati için moleküler mekanizması üzerine sonraki araştırmalar için çok yardımcı olur.

Muscle injuries are common traumatic injuries in clinical and daily life, caused by external blows (contusions) or chronic overstrain of muscle fibers (strains), etc., resulting in muscle dysfunction and pain, even seriously affecting the patient&#39;s quality of life1. Starting rehabilitation as early as possible after an acute strain injury is the key to reducing the time to return to sports2&#160;and in reducing pain3,4. In modern Western medicine, clinical first aid for muscle injuries follows the principles of rest, ice, compression, and elevation (RICE) to stop injurious bleeding into the muscle tissue5&#160;and non-steroidal anti-inflammatory drugs to relieve pain6. The discovery of novel therapies such as exosomes7&#160;and tissue engineering8&#160;became potential treatment strategies for skeletal muscle diseases, compensating for previous pharmacological treatments&#39; shortcomings. However, it can also increase the cost of treatment for patients, putting them under tremendous financial pressure9. Therefore, alternative and complementary therapies are recommended for treating musculoskeletal problems10. Tuina is widely used clinically in China as a traditional medical method and is popular among patients for its efficacy and fewer side effects. Tuina therapy for musculoskeletal disorders can alleviate pain and improve function11,12,13. Mr. Ding Jifeng, a famous Shanghai Tuina practitioner, founded Ding&#39;s roll method14. It is a unique rolling and crushing technique with a large force area, uniform and gentle force, and intense penetration.
Different animal models are based on different etiologies. They have advantages and disadvantages, and the selection of correct and appropriate animal models is of great significance to basic experiments, which helps understand the cellular and molecular signaling pathways of regeneration and repair after skeletal muscle injury to develop new therapies for treating the treatment of skeletal muscle diseases. Chemically induced models of muscle injury are widely used, with injections of skeletal muscle causing myofiber necrosis and producing regenerated areas that can effectively regenerate within 2 weeks15. Both notexin and bupivacaine can cause muscle damage. However, notexin can cause more severe myotoxic damage to skeletal muscle than bupivacaine, and natural functional recovery is relatively slower16. Drug intramuscular injection molding not only takes less time but also has controlled effects and extent of skeletal muscle damage. This quantifiable control makes successful molding less difficult15,17.
Inflammatory response is an essential biological response that has been extensively studied in the context of myopathy18,19. In the early stages of skeletal muscle injury, myofiber necrosis disrupts local muscle homeostasis, and many inflammatory cells infiltrate the injury site, secreting many pro-inflammatory cytokines19. Creatine kinase (CK) is a traditional serum biomarker for assessing skeletal muscle injury. However, it lacks tissue specificity20&#160;and sensitivity21, which limits its ability to assess the extent of drug-induced muscle damage and indirectly report the extent of muscle recovery after injury. Novel biomarkers, including fatty acid binding protein 3 (FABP3), have recently shown relatively high tissue specificity and sensitivity in rodent models of skeletal muscle injury. FABP3 is a family of binding proteins expressed primarily in cardiac and skeletal muscle cells and implicated in fatty acid metabolism, transport, and signaling22. Therefore, we chose a combination of two biomarkers, CK and FABP3, to assess the extent of notexin-induced skeletal muscle damage and recovery after treatment.
In rodents, the muscles are shallow, and the skin area is small, which also determines that the various parameters of massage in rodents will not be the same as in humans, such as in animal therapy, the massage therapist should treat them with less force using Ding&#39;s roll method, and may not be conducive to the operation of this technique due to the small size of the injured area, which can ultimately lead to a reduction in the effectiveness of the massage. Therefore, the experiment utilized the rolling massager made in-house, which conforms to the characteristics of Ding&#39;s roll method, to intervene and evaluate the therapeutic effect of the notexin-induced skeletal muscle injury model in rats, which helps to standardize the parameters of Tuina in experimental animal studies in order to profoundly investigate the molecular mechanism of action of Tuina, a traditional Chinese medicine treatment method, on musculoskeletal diseases.

Yazar Spotlight: Kendi Kendine Yapılan Bir Masaj Aleti Kullanarak Sıçanlarda Tuina Masajı Yapma 

Sıçanlarda Notexin Kaynaklı Kas Yaralanmasında Ding'in Rulo Yöntemini Taklit Etmek

The scope of our research is the biological mechanism of tuina in the treatment of musculoskeletal diseases. Here we are trying to make the self-made tuina device to standardize and effectively perform tuina treatments on laboratory animals. We are addressing the inability to perform this rolling manipulation with pairs by creating a massager that can simulate this rolling manipulation on rats, and verifying the effectiveness of the massager on rats with muscle injuries.We will focus on the questions of how efficacious the rolling massager is on the skeletal muscle injury in rats under different parameters in future standardized research.

Yaralanma sonrası sıçan iskelet kasının morfolojik özelliklerini gözlemlemek için gastroknemius kası hematoksilen ve eozin ile boyandı ve boyanan görüntüler grup başına 8 sıçan için protokolde anlatıldığı gibi bir analiz yazılımı ile okundu. Notexin (NTX grubu) tarafından indüklenen gastroknemius kas hasarı olan sıçanlarda, birçok kas hücresi yırtılmış, atrofik, nekrotik ve düzensiz düzenlenmiştir. Ayrıca etkilenen bölge çevresinde yüksek oranda nötrofil ve lenfosit infiltrasyo...

Watch this Scientific Journal Video about Performing Tuina Massage in Rats Using a Self-Made Massager at JoVE.com

Bu protokol, Ding'in yuvarlanma yöntemini taklit eden, iskelet kası hasarının bir sıçan modelini oluşturan ve hasarlı dokunun patolojisini gözlemlemek için hematoksilen-eozin boyamasını ve serum hasar belirteçlerindeki değişiklikleri tespit etmek için enzime bağlı immünosorbent testini kullanan basit bir cihazı tanımlar.

Ding's roll method is one of the most commonly used manipulations in traditional Chinese massage (Tuina) clinics and one of the most influential ...

Araştırmamızın kapsamı, kas-iskelet sistemi hastalıklarının tedavisinde tuina'nın biyolojik mekanizmasıdır. Burada, laboratuvar hayvanları üzerinde tuina tedavilerini standartlaştırmak ve etkili bir şekilde gerçekleştirmek için kendi kendine yapılan tuina cihazını yapmaya çalışıyoruz. Sıçanlar üzerinde bu yuvarlanma manipülasyonunu simüle edebilen bir masaj aleti oluşturarak ve masaj aletinin kas yaralanmaları olan sıçanlar üzerindeki etkinliğini doğrulayarak bu yuvarlanma manipülasyonunu çiftlerle gerçekleştirememeyi ele alıyoruz.Gelecekteki standart araştırmalarda farklı parametreler altında sıçanlarda yuvarlanma masajının iskelet kası hasarı üzerinde ne kadar etkili olduğu sorularına odaklanacağız.

mimicking-ding-s-roll-method-on-notexin-induced-muscle-injury-in-rats

Research

JoVE Journal

Medicine

Mimicking Ding's Roll Method on Notexin-Induced Muscle Injury in Rats

535 Görüntüleme.  Hunan University of Chinese Medicine. Araştırmamızın kapsamı, kas-iskelet sistemi hastalıklarının tedavisinde tuina'nın biyolojik mekanizmasıdır. Burada, laboratuvar hayvanları üzerinde tuina tedavilerini standartlaştırmak ve etkili bir şekilde gerçekleştirmek için kendi kendine yapılan tuina cihazını yapmaya çalışıyoruz. Sıçanlar üzerinde bu yuvarlanma manipülasyonunu simüle edebilen bir masaj aleti oluşturarak ve masaj aletinin kas yaralanmaları olan sıçanlar üzerindeki etkinliğini doğrulay...