Name: a doxorubicin-induced cardiomyopathy model in adult zebrafish
Uploaded: 2018-06-07T13:30:00
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Este trabajo fue financiado en parte por una subvención de desarrollo científico de la Asociación Americana del corazón (14SDG18160021 a YD), la US NIH R01 otorga HL 81753 y HL 107304 al XX y la Fundación de Mayo para XX.

Todos los procedimientos aquí descritos se realizaron conforme a la guía para el cuidado y uso de animales de laboratorio (nacional academias prensa. 2011), y fueron aprobadas por la Comisión de uso y de Mayo clínica institucional Animal Care.
1. preparación de pez cebra adulto
<ol><li>Establecer suficientes pares de crianza en tanques de la travesía para adquirir al menos dos veces tantos como el total de pescado necesario para la inyección de DOX. Si comparar pescado con diferentes ...

<ol>
	<li>Octavia, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin-induced+cardiomyopathy:+from+molecular+mechanisms+to+therapeutic+strategies.">Doxorubicin-induced cardiomyopathy: from molecular mechanisms to therapeutic strategies.</a> J Mol Cell Cardiol. 52 (6), 1213-1225 (2012).</li><li>Singal, P. K., Iliskovic, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin-induced+cardiomyopathy.">Doxorubicin-induced cardiomyopathy.</a> N Engl J Med. 339 (13), 900-905 (1998).</li><li>Angsutararux, P., Luanpitpong, S., Issaragrisil, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Chemotherapy-Induced+Cardiotoxicity:+Overview+of+the+Roles+of+Oxidative+Stress.">Chemotherapy-Induced Cardiotoxicity: Overview of the Roles of Oxidative Stress.</a> Oxid Med Cell Longev. , 795602 (2015).</li><li>Ichikawa, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiotoxicity+of+doxorubicin+is+mediated+through+mitochondrial+iron+accumulation.">Cardiotoxicity of doxorubicin is mediated through mitochondrial iron accumulation.</a> J Clin Invest. 124 (2), 617-630 (2014).</li><li>Zhang, Y. W., Shi, J., Li, Y. J., Wei, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cardiomyocyte+death+in+doxorubicin-induced+cardiotoxicity.">Cardiomyocyte death in doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> Arch Immunol Ther Exp (Warsz). 57 (6), 435-445 (2009).</li><li>Sawyer, D. 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A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin+cardiomyopathy+is+associated+with+a+decrease+in+calcium+release+channel+of+the+sarcoplasmic+reticulum+in+a+chronic+rabbit+model.">Doxorubicin cardiomyopathy is associated with a decrease in calcium release channel of the sarcoplasmic reticulum in a chronic rabbit model.</a> J Clin Invest. 91 (4), 1697-1705 (1993).</li><li>Mitry, M. A., Edwards, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin+induced+heart+failure:+Phenotype+and+molecular+mechanisms.">Doxorubicin induced heart failure: Phenotype and molecular mechanisms.</a> Int J Cardiol Heart Vasc. 10, 17-24 (2016).</li><li>Aminkeng, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+coding+variant+in+RARG+confers+susceptibility+to+anthracycline-induced+cardiotoxicity+in+childhood+cancer.">A coding variant in RARG confers susceptibility to anthracycline-induced cardiotoxicity in childhood cancer.</a> Nat Genet. 47 (9), 1079-1084 (2015).</li><li>Deng, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dystrophin-deficiency+increases+the+susceptibility+to+doxorubicin-induced+cardiotoxicity.">Dystrophin-deficiency increases the susceptibility to doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> Eur J Heart Fail. 9 (10), 986-994 (2007).</li><li>Leong, S. L., Chaiyakunapruk, N., Lee, S. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Candidate+Gene+Association+Studies+of+Anthracycline-induced+Cardiotoxicity:+A+Systematic+Review+and+Meta-analysis.">Candidate Gene Association Studies of Anthracycline-induced Cardiotoxicity: A Systematic Review and Meta-analysis.</a> Sci Rep. 7 (1), 39 (2017).</li><li>Wasielewski, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Potential+genetic+predisposition+for+anthracycline-associated+cardiomyopathy+in+families+with+dilated+cardiomyopathy.">Potential genetic predisposition for anthracycline-associated cardiomyopathy in families with dilated cardiomyopathy.</a> Open Heart. 1 (1), e000116 (2014).</li><li>Lebrecht, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dexrazoxane+prevents+doxorubicin-induced+long-term+cardiotoxicity+and+protects+myocardial+mitochondria+from+genetic+and+functional+lesions+in+rats.">Dexrazoxane prevents doxorubicin-induced long-term cardiotoxicity and protects myocardial mitochondria from genetic and functional lesions in rats.</a> Br J Pharmacol. 151 (6), 771-778 (2007).</li><li>QuanJun, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protective+Effects+of+Dexrazoxane+against+Doxorubicin-Induced+Cardiotoxicity:+A+Metabolomic+Study.">Protective Effects of Dexrazoxane against Doxorubicin-Induced Cardiotoxicity: A Metabolomic Study.</a> PLoS One. 12 (1), e0169567 (2017).</li><li>Seifert, C. F., Nesser, M. E., Thompson, D. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dexrazoxane+in+the+prevention+of+doxorubicin-induced+cardiotoxicity.">Dexrazoxane in the prevention of doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> Ann Pharmacother. 28 (9), 1063-1072 (1994).</li><li>Adams, J. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Enhanced+Galphaq+signaling:+a+common+pathway+mediates+cardiac+hypertrophy+and+apoptotic+heart+failure.">Enhanced Galphaq signaling: a common pathway mediates cardiac hypertrophy and apoptotic heart failure.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 95 (17), 10140-10145 (1998).</li><li>Bowles, N. E., Bowles, K. R., Towbin, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+&amp;#34;final+common+pathway&amp;#34;+hypothesis+and+inherited+cardiovascular+disease.+The+role+of+cytoskeletal+proteins+in+dilated+cardiomyopathy.">The &amp;#34;final common pathway&amp;#34; hypothesis and inherited cardiovascular disease. The role of cytoskeletal proteins in dilated cardiomyopathy.</a> Herz. 25 (3), 168-175 (2000).</li><li>Kroumpouzou, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Common+pathways+for+primary+hypertrophic+and+dilated+cardiomyopathy.">Common pathways for primary hypertrophic and dilated cardiomyopathy.</a> Hybrid Hybridomics. 22 (1), 41-45 (2003).</li><li>Towbin, J. A., Bowles, K. R., Bowles, N. 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M., Xu, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+GATAD1-Associated+Dilated+Cardiomyopathy+in+Adult+Zebrafish.">Modeling GATAD1-Associated Dilated Cardiomyopathy in Adult Zebrafish.</a> J Cardiovasc Dev Dis. 3 (1), (2016).</li><li>Ding, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Trapping+cardiac+recessive+mutants+via+expression-based+insertional+mutagenesis+screening.">Trapping cardiac recessive mutants via expression-based insertional mutagenesis screening.</a> Circ Res. 112 (4), 606-617 (2013).</li><li>Ding, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+modifier+screen+identifies+DNAJB6+as+a+cardiomyopathy+susceptibility+gene.">A modifier screen identifies DNAJB6 as a cardiomyopathy susceptibility gene.</a> JCI Insight. 2 (8), (2017).</li><li>Kinkel, M. D., Eames, S. C., Philipson, L. H., Prince, V. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intraperitoneal+injection+into+adult+zebrafish.">Intraperitoneal injection into adult zebrafish.</a> J Vis Exp. (42), (2010).</li><li>Wang, L. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standardized+echocardiographic+assessment+of+cardiac+function+in+normal+adult+zebrafish+and+heart+disease+models.">Standardized echocardiographic assessment of cardiac function in normal adult zebrafish and heart disease models.</a> Dis Model Mech. 10 (1), 63-76 (2017).</li><li>Desai, V. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Development+of+doxorubicin-induced+chronic+cardiotoxicity+in+the+B6C3F1+mouse+model.">Development of doxorubicin-induced chronic cardiotoxicity in the B6C3F1 mouse model.</a> Toxicol Appl Pharmacol. 266 (1), 109-121 (2013).</li><li>Zhu, W., Shou, W., Payne, R. M., Caldwell, R., Field, L. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+mouse+model+for+juvenile+doxorubicin-induced+cardiac+dysfunction.">A mouse model for juvenile doxorubicin-induced cardiac dysfunction.</a> Pediatr Res. 64 (5), 488-494 (2008).</li><li>Chatterjee, K., Zhang, J., Honbo, N., Karliner, J. 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D., Sucov, H. M., Evans, R. M., Chien, K. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retinoid-dependent+pathways+suppress+myocardial+cell+hypertrophy.">Retinoid-dependent pathways suppress myocardial cell hypertrophy.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 92 (16), 7391-7395 (1995).</li><li>Hershman, D. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin,+cardiac+risk+factors,+and+cardiac+toxicity+in+elderly+patients+with+diffuse+B-cell+non-Hodgkin's+lymphoma.">Doxorubicin, cardiac risk factors, and cardiac toxicity in elderly patients with diffuse B-cell non-Hodgkin's lymphoma.</a> J Clin Oncol. 26 (19), 3159-3165 (2008).</li><li>Silber, J. H., Barber, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Doxorubicin-induced+cardiotoxicity.">Doxorubicin-induced cardiotoxicity.</a> N Engl J Med. 333 (20), 1359-1360 (1995).</li><li>Von Hoff, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Risk+factors+for+doxorubicin-induced+congestive+heart+failure.">Risk factors for doxorubicin-induced congestive heart failure.</a> Ann Intern Med. 91 (5), 710-717 (1979).</li><li>Pugach, E. K., Li, P., White, R., Zon, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Retro-orbital+injection+in+adult+zebrafish.">Retro-orbital injection in adult zebrafish.</a> J Vis Exp. (34), (2009).</li><li>Zang, L., Morikane, D., Shimada, Y., Tanaka, T., Nishimura, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+protocol+for+the+oral+administration+of+test+chemicals+to+adult+zebrafish.">A novel protocol for the oral administration of test chemicals to adult zebrafish.</a> Zebrafish. 8 (4), 203-210 (2011).</li><li>Collymore, C., Rasmussen, S., Tolwani, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gavaging+adult+zebrafish.">Gavaging adult zebrafish.</a> J Vis Exp. (78), (2013).</li></ol>

Para modelar un DIC progresiva, la dosis de 20 mg/kg DOX se determinó experimentalmente como la dosis más alta que no causa muerte de peces importantes durante 1 wpi pero aún resultados en la muerte de peces y la reducción de la función cardiaca después de wpi 4 (figura 3 y Figura 4). Esta dosis es comparable a los que se utilizan con frecuencia en modelos de roedores DIC (15-25 mg/kg) y la dosis acumulativa de límite en los seres humanos (550 mg/m2...

Doxorrubicina (DOX), también llamada Adriamycin, ha sido desarrollada como un medicamento antineoplásico desde la década de 19601,2. Ahora es todavía activamente usado como un medicamento quimioterapéutico importante para un amplio espectro de tumores. Sin embargo, aplicación clínica de DOX se vio obstaculizada por su toxicidad dependiente de la dosis, especialmente cardiotoxicidad caracterizada por síntomas variables que van desde cambios electrocardiográficos asintomáticos a pericarditis y descompensada la miocardiopatía 1 , 2. hasta la fecha, por lo menos tres hipótesis principales se han planteado para explicar la DIC, incluyendo activadas de oxígeno reactivo (ROS) las especies1,3,4,5, inhibición de la topoisomerasa II-β ( TOP2β)6,7y modulación del calcio intracelular de liberación de8,1,9. La acumulación de pruebas también sugiere predisposición genética como factor de riesgo fundamental para DIC10,11,12,13. Identidades de genes relacionados con estas predisposiciones DIC, sin embargo, siguen siendo en gran parte desconocidos. El dexrazoxano es el único agente adyuvante aprobado por la US Food y Drug Administration (FDA) para tratar Cid, pero con limitada aplicación14,15,16, subrayando la necesidad de identificar más estrategias terapéuticas. Modelos animales de DIC se exploran, por tanto, para estos fines. Debido a su accesibilidad y sencillez, estudios mecanísticos de modelos DIC potencialmente podrían tener impactos más amplios en otros tipos de miocardiopatías: patogenesia común podría ser compartido entre miocardiopatías de diversas etiologías, especialmente en más adelante las etapas patológicas17,18,19,20.
Además de modelos de roedores de la Cid, modelos DIC de pez cebra con un mayor rendimiento se han desarrollado para facilitar el descubrimiento de nuevos factores genéticos y terapéuticos. Se ha establecido un modelo embrionario de DIC en los embriones de pez cebra transparente para la detección de compuestos terapéuticos21. Dado que las miocardiopatías son enfermedades de inicio adulto con una patogenesia progresiva, cardiomiopatía del pez cebra adulto modelos han sido desarrollados22,23,24,25,26. Generamos el primer modelo adquirido para la cardiomiopatía resultante de la anemia crónica24, seguido por el Cid como el segundo modelo de cardiomiopatía adquirida en pez cebra adulto23. Hemos encontrado que la inyección de un bolo único de DOX en pez cebra adulto induce la cardiotoxicidad que consiste en una fase aguda más o menos dentro de 1 semana posterior a la inyección (wpi), seguida por una fase crónica de la cardiomiopatía para después de la inyección 6 meses. Mientras que el haploinsufficiency de la mecanicista Diana de la rapamicina(mtor) mejora la cardiomiopatía en la fase crónica, exagera la mortalidad de peces en la fase aguda, subrayando el valor del modelo DIC adulto discernir dependiente de la etapa mecanismos23. Hemos demostrado además que el modelo adulto de DIC puede utilizarse para destacar una colección de pez cebra insertional cardiaca (ZIC) mutantes que se están generando a través de un enfoque basado en el transposon mutagénesis de insertional del27. Una pantalla piloto identificado 3 genes cardiomiopatía conocido como DnaJ (Hsp40) homólogo, subfamilia B y miembro 6b (dnajb6b) como nuevo DIC susceptibilidad genes28. Por lo tanto, la generación del modelo adulto de DIC en el pez cebra condujo a una nueva metodología que permite sistemáticamente identificación de modificadores genéticos de la DIC, que complementa la existente estudio de asociación del genoma completo (GWAS) y locus de carácter cuantitativo (QTL ) análisis.
Durante la generación y aplicación del modelo DIC pez cebra adulto, hemos observado variaciones significativas entre los diferentes investigadores o incluso entre diferentes inyecciones realizadas por el investigador mismo. La naturaleza longitudinal del modelo impone retos para registrar los resultados de diferentes investigadores y al proceso secuencial de solución de problemas. Para facilitar el uso de este sencillo método de estrés inducen cardiomiopatía por la comunidad de investigación, describimos nuestro protocolo en detalle, presente dos tipos de inyección de la IP y discutir consideraciones para reducir las variaciones entre los diferentes investigadores.

<table>
	<tbody>
		<tr>
			<td>Crossing tank</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>ZHCT100</td>
			<td>Fish breeding</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Incubator</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td></td>
			<td>Maintaining embryo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>3 L medium tank</td>
			<td>Aquaneering</td>
			<td>ZT280</td>
			<td>Maintaining fish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Paramecia</td>
			<td>Carolina</td>
			<td>131560</td>
			<td>Food for juvenile fish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Live hatched brine shrimp</td>
			<td>in house</td>
			<td></td>
			<td>Food for adult fish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Doxorubicin hydrochloride</td>
			<td>Sigma</td>
			<td>D1515-10MG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>1.5 ml safe-lock tube</td>
			<td>Eppendorf</td>
			<td>No. 022363204</td>
			<td>For drug storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Aluminum foil paper</td>
			<td>Fisher</td>
			<td>1213104</td>
			<td>For preventing light exposure</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Proteinase K</td>
			<td>Roche</td>
			<td>No. 03115887001</td>
			<td>For dechorionating embryo</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Hank&#39;s balanced salt solution (HBBS)</td>
			<td>ThermoFisher</td>
			<td>14025076</td>
			<td>Vehicle for DOX</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>100 mm petri dish</td>
			<td>Falcon</td>
			<td>431741</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>10 &#956;L NanoFil micro-syringe</td>
			<td>WPI</td>
			<td>NANOFIL</td>
			<td>For injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>34 gauge needle&#160;</td>
			<td>WPI</td>
			<td>NF34BV-2</td>
			<td>For injection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tricaine</td>
			<td>Argent</td>
			<td>MS-222</td>
			<td>Anesthetizing fish</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>96 well plate</td>
			<td>Costar</td>
			<td>3539</td>
			<td>For embryo drug treatment</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Transfer pipette</td>
			<td>Bel-art product</td>
			<td>F37898</td>
			<td>For transfering embryo</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a doxorubicin-induced cardiomyopathy model in adult zebrafish

El pez cebra adulto genéticamente accesible (Danio rerio) se ha utilizado cada vez más como un modelo vertebrado para la comprensión de enfermedades humanas como la cardiomiopatía. Debido a su conveniencia y receptividad a la manipulación genética de alto rendimiento, la generación de modelos de cardiomiopatía adquirida, tales como el modelo de miocardiopatía inducida por la doxorrubicina (DIC) en pez cebra adulto, está abriendo las puertas a nuevas vías de investigación, como descubrir modificadores de cardiomiopatía por cribado genético hacia adelante. A diferencia del modelo de embrión de pez cebra DIC, inicial aguda y posteriormente crónica fases de miocardiopatía pueden determinarse en el modelo de pez cebra adulto DIC, lo que permite el estudio de mecanismos de señalización dependiente del escenario y estrategias terapéuticas. Sin embargo, pueden obtenerse resultados variables con el modelo actual, incluso en manos de investigadores experimentados. Para facilitar la futura implementación del modelo de Cid, se presenta un protocolo detallado sobre cómo generar este modelo DIC en pez cebra adulto y describir dos formas alternativas de inyección intraperitoneal (IP). Discutimos más opciones reducir las variaciones para obtener resultados fiables y ofrecen sugerencias sobre cómo interpretar correctamente los resultados.

Aquí, se presentan dos métodos para realizar la inyección del IP modelo DIC en pez cebra adulto. Cuando se utiliza el clásico, establecido IP inyección método29, se observó que la solución inyectada de DOX (color rojo) a veces puede exudar hacia fuera desde el lugar donde la aguja penetró. La inyección IP alternativa utiliza una ubicación diferente para la penetración de la aguja que es 3-4 mm del peritoneo donde se libera el DOX (f...

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A Doxorubicin-induced Cardiomyopathy Model in Adult Zebrafish

Un modelo de cardiomiopatía inducida por la doxorrubicina en pez cebra adulto

Aquí se describe un método para generar un modelo de cardiomiopatía inducida por la doxorrubicina en adultos pez cebra (Danio rerio). Dos formas alternativas de la inyección intraperitoneal se presentan y se discuten las condiciones para reducir las variaciones entre los diferentes grupos experimentales.

The genetically accessible adult zebrafish (Danio rerio) has been increasingly used as a vertebrate model for understanding human diseases such as ...

Research

JoVE Journal

Medicine

Induction of Myocardial Infarction in Adult Zebrafish Using Cryoinjury

La inducción de infarto de miocardio en adultos de pez cebra Uso de Cryoinjury

The mammalian heart is incapable of significant regeneration following an acute injury such as myocardial infarction1. By contrast, urodele amphibians and ...

Investigación

Medicina

Assessing Teratogenic Changes in a Zebrafish Model of Fetal Alcohol Exposure

Evaluación de los cambios teratogénicos en un modelo de pez cebra de la exposición fetal al alcohol

Fetal alcohol syndrome (FAS) is a severe manifestation of embryonic exposure to ethanol. It presents with characteristic defects to the face and organs, ...

Screening for Melanoma Modifiers using a Zebrafish Autochthonous Tumor Model

La detección de Modificadores melanoma utilizando un modelo de pez cebra Tumor autóctona

Genomic studies of  human cancers have yielded a wealth of information about genes that are altered  in tumors1,2,3. A challenge arising from these ...

A Zebrafish Model of Diabetes Mellitus and Metabolic Memory

Un modelo de pez cebra de la diabetes mellitus y la memoria metabólica

Diabetes mellitus currently affects 346 million individuals and this is projected to increase to 400 million by 2030. Evidence from both the laboratory ...

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

A Possible Zebrafish Model of Polycystic Kidney Disease: Knockdown of wnt5a Causes Cysts in Zebrafish Kidneys

Un posible modelo de pez cebra de la enfermedad renal poliquística: Derribo de<em&gt; Wnt5a</em&gt; Causas Los quistes en el pez cebra Riñones

Polycystic kidney disease (PKD) is one of the most common causes of end-stage kidney disease, a devastating disease for which there is no cure. The ...

Studying Diabetes Through the Eyes of a Fish: Microdissection, Visualization, and Analysis of the Adult tg(fli:EGFP) Zebrafish Retinal Vasculature

Studying Diabetes Through the Eyes of a Fish: Microdissection, Visualization, and Analysis of the Adult tgfli:EGFP Zebrafish Retinal Vasculature

Estudiar la Diabetes a través de los ojos de un pez: Microdissection, visualización y análisis de la vasculatura de retina de pez cebra de adulto tg(fli:EGFP)

Diabetic retinopathy is the leading cause of blindness among middle-aged adults. The rising prevalence of diabetes worldwide will make the prevention of ...

Tachycardia-Induced Cardiomyopathy As a Chronic Heart Failure Model in Swine

Cardiomiopatía Taquicardia-inducida como un modelo de insuficiencia cardíaca crónica en porcino

A stable and reliable model of chronic heart failure is required for many experiments to understand hemodynamics or to test effects of new treatment ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

Medición de la contractilidad isométrica de la arteria mesentérica de ratón con cable miografía

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Isolation of Atrial Myocytes from Adult Mice

Aislamiento de miocitos auriculares de ratones adultos

The electrophysiological properties of atrial myocytes importantly affect overall cardiac function. Alterations in the underlying ionic currents ...

Murine Myocardial Infarction Model using Permanent Ligation of Left Anterior Descending Coronary Artery

Modelo de infarto de miocardio murino usando ligadura permanente de la arteria coronaria descendente anterior izquierda

Myocardial infarction (MI) and acute coronary diseases are among the most prominent causes of death in population with western lifestyle. The murine ...