Vi vil takke Dr. Arthur Nedder for hans hjelp og veiledning. Dette arbeidet ble støttet av Richard A. og Susan F. Smith President's Innovation Award, Michael B. Klein and Family, The Sidman Family Foundation, Michael B. Rukin Charitable Foundation, Kenneth C. Griffin Charitable Research Fund og The Boston Investment Council.

Alle in vivo-studier ble utført i samsvar med National Institutes of Healths retningslinjer for dyrepleie og bruk og ble godkjent av Boston Children's Hospital's Animal Care and Use Committee (Protocol 18-06-3715). Alle dyr fikk human omsorg i samsvar med guiden for pleie og bruk av forsøksdyr. Figur 1 viser tidslinjen, inkludert anestesi, kirurgisk forberedelse og tidspunkter for primære resultatmålinger av denne studien.
1. Induksjon, anestesi og intubasjon</p...

<ol>
	<li>Ali Pour, P., Kenney, M. C., Kheradvar, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Bioenergetics+consequences+of+mitochondrial+transplantation+in+cardiomyocytes.">Bioenergetics consequences of mitochondrial transplantation in cardiomyocytes.</a> Journal of the American Heart Association. 9 (7), 014501 (2020).</li><li>Giraud, S., Favreau, F., Chatauret, N., Thuillier, R., Maiga, S., Hauet, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Contribution+of+large+pig+for+renal+ischemia-reperfusion+and+transplantation+studies:+The+Preclinical+Model.">Contribution of large pig for renal ischemia-reperfusion and transplantation studies: The Preclinical Model.</a> Journal of Biomedicine and Biotechnology. 2011, 14 (2011).</li><li>Amdisen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Testing+Danegaptide+effects+on+kidney+function+after+ischemia/reperfusion+injury+in+a+new+porcine+two+week+model.">Testing Danegaptide effects on kidney function after ischemia/reperfusion injury in a new porcine two week model.</a> PLoS ONE. 11 (10), 1-13 (2016).</li><li>Bhargava, P., Schnellmann, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+energetics+in+the+kidney.">Mitochondrial energetics in the kidney.</a> Nature Reviews Nephrology. 13 (10), 629-646 (2017).</li><li>Bonventre, J. V., Weinberg, J. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+advances+in+the+pathophysiology+of+ischemic+acute+renal+failure.">Recent advances in the pathophysiology of ischemic acute renal failure.</a> Journal of the American Society of Nephrology. 14 (8), 2199-2210 (2003).</li><li>Case, J., Khan, S., Khalid, R., Khan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Epidemiology+of+Acute+Kidney+Injury+in+the+Intensive+Care+Unit.">Epidemiology of Acute Kidney Injury in the Intensive Care Unit.</a> Critical Care Research and Practice. 2013, 9 (2013).</li><li>Jabbari, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+transplantation+ameliorates+ischemia/reperfusion-induced+kidney+injury+in+rat.">Mitochondrial transplantation ameliorates ischemia/reperfusion-induced kidney injury in rat.</a> Biochimica et Biophysica Acta (BBA) - Molecular Basis of Disease. 1866 (8), 165809 (2020).</li><li>Malagrino, P. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Catheter-based+induction+of+renal+ischemia/reperfusion+in+swine:+Description+of+an+experimental+model.">Catheter-based induction of renal ischemia/reperfusion in swine: Description of an experimental model.</a> Physiological Reports. 2 (9), 1-13 (2014).</li><li>Freeman, R. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nephropathy+requiring+dialysis+after+percutaneous+coronary+intervention+and+the+critical+role+of+an+adjusted+contrast+dose.">Nephropathy requiring dialysis after percutaneous coronary intervention and the critical role of an adjusted contrast dose.</a> American Journal of Cardiology. 90 (10), 1068-1073 (2002).</li><li>Gasthuys, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Postnatal+maturation+of+the+glomerular+filtration+rate+in+conventional+growing+piglets+as+potential+juvenile+animal+model+for+preclinical+pharmaceutical+research.">Postnatal maturation of the glomerular filtration rate in conventional growing piglets as potential juvenile animal model for preclinical pharmaceutical research.</a> Frontiers in Pharmacology. 8 (431), 1-7 (2017).</li><li>Doulamis, I. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mitochondrial+transplantation+by+intra-arterial+injection+for+acute+kidney+injury.">Mitochondrial transplantation by intra-arterial injection for acute kidney injury.</a> American Journal of Physiology - Renal Physiology. 319 (3), 403-413 (2020).</li><li>Rewa, O., Bagshaw, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+kidney+injury-epidemiology,+outcomes+and+economics.">Acute kidney injury-epidemiology, outcomes and economics.</a> Nature Reviews Nephrology. 10 (4), 193-207 (2014).</li><li>Grossini, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Levosimendan+Protection+against+Kidney+Ischemia/Reperfusion+Injuries+in+Anesthetized+Pigs.">Levosimendan Protection against Kidney Ischemia/Reperfusion Injuries in Anesthetized Pigs.</a> Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 342 (2), 376-388 (2012).</li><li>Laskey, W. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Volume-to-creatinine+clearance+ratio.+A+pharmacokinetically+based+risk+factor+for+prediction+of+early+creatinine+increase+after+percutaneous+coronary+intervention.">Volume-to-creatinine clearance ratio. A pharmacokinetically based risk factor for prediction of early creatinine increase after percutaneous coronary intervention.</a> Journal of the American College of Cardiology. 50 (7), 584-590 (2007).</li></ol>

Forfatterne erklærer ingen konkurrerende økonomiske interesser.

AKI er en vanlig klinisk lidelse som påvirker opptil 50% av innlagte voksne pasienter over hele verden6,12. En klinisk relevant dyremodell er nødvendig for å undersøke sykdommens patofysiologi og potensielle terapeutiske mål ytterligere. Selv om det er flere murine modeller som replikerer AKI, etterligner disse ikke helt sine respektive kliniske scenarier og anatomien til den menneskelige nyre. Denne studien foreslår en klinisk relevant svinemodell for å t...

Akutt nyreskade (AKI) er en vanlig diagnostisert tilstand blant kirurgiske pasienter forbundet med betydelig sykelighet ogdødelighet 1,2. Tilgjengelige data viser at AKI kan påvirke selv halvparten av alle innlagte pasienter over hele verden og fører til 50 % dødelighet hos pasienter påintensivavdelingen 1,3. Til tross for sin høye utbredelse forblir nåværende AKI-terapi begrenset til forebyggende strategier, for eksempel væskehåndtering og dialyse. Derfor er det en løpende interesse i å utforske alternative terapier for AKI4,5,6.
AKI er vanligvis klassifisert i pre-nyre, iboende og post-nyre basert på sin etiologi4,5,6. Flertallet av kirurgiske pasienter med AKI er forbundet med pre-nyre årsaker på grunn av hypovolemi, noe som resulterer i iskemi-reperfusjonsskade (IRI) av nyrene2. Klinisk sett reduseres urinproduksjonen, og kreatininnivået øker på grunn av nedsatt nyrefunksjon. Nyrene er et høyt metabolsk organ og utsatt for iskemi. En svært reproduserbar stor dyremodell av nyre-IRI er nødvendig for å få et bedre innblikk i AKI-patofysiologien og dens potensielle terapeutiske tilnærminger5.
For å etterligne det kliniske scenariet av nyrehyperfusjon peri-operativt, anses en modell av bilateral nyrearterie okklusjon egnet. Tidligere beskrevne modeller som innebærer ensidig nyrearterie okklusjon med eller uten reseksjon av den kontralaterale nyre gir ikke tilstrekkelig klinisk anvendbarhet7,8. Selv om disse modellene er tilstrekkelige for å forårsake AKI, ligner de ikke kliniske scenarier i det virkelige liv verken når det gjelder type eller varighet av skade.
Målet med dette papiret er å presentere en svinemodell av perkutan bilateral midlertidig okklusjon av nyrearteriene ved ballongkateter okklusjon under angiografi. Bilateral nyrearterie okklusjon etterligner det kliniske scenariet for nyrehyperfusjon, etterfulgt av etterfølgende fjerning av ballongen for reperfusjon9,10. De tekniske trinnene er beskrevet, inkludert kateterisering, kateterveiledning, angiografi og hemodynamisk overvåking. Denne metoden tillater ikke bare en svært kontrollert og replikerbar okklusjon av nyrearteriene, men den perkutane tilnærmingen minimerer virkningen av den inflammatoriske responsen ved å begrense mengden fornærmelse mot kroppen sammenlignet med en åpen tilnærming.

<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>0.9% sodium chloride injection, usp, 100 ml viaflex plastic container</td>
			<td>Baxter</td>
			<td>2B1302</td>
			<td>For animal hydration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Agent contrast 100.0ml injection media btl ioversal 74%</td>
			<td>CARDINAL HEALTH</td>
			<td>133311</td>
			<td>For visualizing the vasculature</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bard Bardia Closed System Urinary Drainage Bag</td>
			<td>BARD Inc</td>
			<td>802001</td>
			<td>For urine collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer K2 EDTA</td>
			<td>BD</td>
			<td>367841</td>
			<td>For blood sample storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>BD Vacutainer Lithium Heparin</td>
			<td>BD</td>
			<td>366667</td>
			<td>For blood sample storage</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Betadine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>6906950</td>
			<td>For skin disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bookwalker retractor</td>
			<td>Codman</td>
			<td></td>
			<td>For skin retraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bupivacaine 0.25%</td>
			<td>Hospira</td>
			<td></td>
			<td>Administer at incision site for analgesia</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Buprenorphine SR</td>
			<td>Zoo Pharm</td>
			<td></td>
			<td>10mg/ml bottle, Dose: 0.2mg/kg SC</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cath angio 5.0 Fr x100.0 cm 0.038 in JR4</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>7523-21</td>
			<td>For identification of the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cuffed endotracheal tube</td>
			<td>Emdamed</td>
			<td></td>
			<td>To establish a secure airway for the duration of the operation</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>EKG Medtronics- Physiocontrol LifePak 20 Oxygen saturation monitor</td>
			<td>GE Healthcare Madison WI</td>
			<td></td>
			<td>For oxygen saturation monitoring</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Encore 26 inflator</td>
			<td>BOSTON SCIENTIFIC</td>
			<td>710113</td>
			<td>For inflating the balloon catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ethanol 95% (Ethyl alcohol)</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td></td>
			<td>For skin disinfection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Fentanyl patch</td>
			<td>Mylan</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 25-50mcg/hr, TD</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gold silicone coated Foley</td>
			<td>TELEFLEX MEDICAL INC</td>
			<td>180730160</td>
			<td>For urine collection</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin sodium</td>
			<td>LEO Pharma A/S</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 200 IU/kg IV</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>i33 ultrasound machine</td>
			<td>Phillips</td>
			<td></td>
			<td>Use ultrasonographic guidance for femoral catherization if necessary</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Inqwire diagnostic guide wire - 0.035&#34; (0.89 mm) - 260 cm (102&#34;) - 1.5 mm j-tip</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>6609-33</td>
			<td>For guiding the balloon catheters to the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Intravenous catheter, size 20 gauge</td>
			<td>Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td>Inc SC-360097</td>
			<td>For fluid administration</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td>
			<td>21283620</td>
			<td>Dose: 3%, INH</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Metzenbaum blunt curved 14.5 cm - 5(3/4)&#34;</td>
			<td>Rudolf Medical</td>
			<td>RU-1311-14M</td>
			<td>For tissue dissection and cutting</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Neonatal disposable transducer kit with 30ml/hr flush device and double 4-way stopcocks for continuous monitoring</td>
			<td>Argon Medical</td>
			<td>041588505A</td>
			<td>For pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Powerflex pro PTA dilatation catheter 6 x 20 mm - shaft length (135cm)</td>
			<td>CARDINAL HEALTH</td>
			<td>4400602X</td>
			<td>For occlusion of the renal arteries</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure monitoring lines mll/mll - 12&#34; clear, mll/mll</td>
			<td>Smiths Medical</td>
			<td>B1571/MX571</td>
			<td>For pressure measurement</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Procedure pack</td>
			<td>Molnlycke Health Care</td>
			<td>97027809</td>
			<td>Surgical drape, gauze pads, syringes, beaker etc</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Protamine</td>
			<td>Henry Schein</td>
			<td>1044148</td>
			<td>For heparin reversal</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Scalpel blade - size #10</td>
			<td>Cardinal Health (Allegiance)</td>
			<td>32295-010</td>
			<td>For the skin incisions</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Stopcock iv 4 way lrg bore rotg male ll adptr strl</td>
			<td>Peoplesoft</td>
			<td>1550</td>
			<td>For connecting tubings</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Straight lateral retractor</td>
			<td>Codman</td>
			<td></td>
			<td>For skin retraction</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Suture perma hnd 18in 2-0 braid silk blk</td>
			<td>CARDINAL HEALTH 1</td>
			<td>A185H</td>
			<td>For suturing incision site and securing catheters</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe contrast injection 10ml fixed male luer red</td>
			<td>MERIT MEDICAL SYSTEM INC</td>
			<td>MSS111-R</td>
			<td>To administer the contrast agent</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe medical 60ml ll plst strl ltx free disp</td>
			<td>CARDINAL HEALTH 1</td>
			<td>BF309653</td>
			<td>For urine collection and flushing of the angiocath</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tilzolan (tiletamine/zolazepam)</td>
			<td>Patterson Veterinary Supply, Inc.</td>
			<td>07-893-1467</td>
			<td>Dose: 4-6 mg/kg, IM</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Xylazine</td>
			<td>Putney, INC</td>
			<td></td>
			<td>Dose: 1.1-2.2 mg/kg, IM</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

a large animal model for acute kidney injury by temporary bilateral renal artery occlusion

Akutt nyreskade (AKI) er forbundet med høyere risiko for sykelighet og dødelighet postoperativt. Iskemi-reperfusjonsskade (IRI) er den vanligste årsaken til AKI. For å etterligne dette kliniske scenariet presenterer denne studien en svært reproduserbar stor dyremodell av nyre-IRI i svin ved hjelp av midlertidig perkutan bilateral ballongkateter okklusjon av nyrearteriene. Nyrearteriene er okkludert i 60 minutter ved å introdusere ballongkateterene gjennom lår- og karotisarterien og føre dem inn i den proksimale delen av arteriene. Jodkontrast injiseres i aorta for å vurdere eventuell opacifisering av nyrekarene og bekrefte suksessen til arterie okklusjonen. Dette bekreftes videre ved sammenslåing av pulsbølgeformen på spissen av ballongkateteret. Ballongene deflateres og fjernes etter 60 min bilateral nyrearterie okklusjon, og dyrene får lov til å gjenopprette i 24 timer. På slutten av studien øker plasmakreatinin og blod urea nitrogen betydelig, mens eGFR og urinutgangen reduseres betydelig. Behovet for jodkontrast er minimalt og påvirker ikke nyrefunksjonen. Bilateral nyrearterie okklusjon etterligner bedre det kliniske scenariet for perioperativ nyrehyperfusjon, og den perkutane tilnærmingen minimerer virkningen av den inflammatoriske responsen og risikoen for infeksjon sett med en åpen tilnærming, for eksempel en laparotomi. Evnen til å skape og reprodusere denne klinisk relevante svinemodellen letter den kliniske oversettelsen til mennesker.

Funksjonell analyse De representative resultatene av denne studien oppstår fra 6 dyr, og dataene som vises er gjennomsnittlige ± standardfeil av gjennomsnittet. Nyrefunksjonen vurderes ved å bestemme urinutgangen, estimert glomerulær filtreringshastighet (eGFR), plasmakreatin og blodurea nitrogen (BUN). Biomarkørene for nyrefunksjon vurderes ved hjelp av en bærbar kjemianalysator. eGFR beregnes i henhold til følgende formel: eGFR =1,879 × BW1,092/PCr0,6 (BW: kr...

Watch this Scientific Journal Video about A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion at JoVE.com

A Large Animal Model for Acute Kidney Injury by Temporary Bilateral Renal Artery Occlusion

Denne studien presenterer en svært reproduserbar stor dyremodell av nyre iskemi-reperfusjonsskade i svin ved hjelp av midlertidig perkutan bilateral ballongkateter okklusjon av nyrearteriene i 60 min og reperfusjon i 24 timer.

En stor dyremodell for akutt nyreskade ved midlertidig bilateral nyrearterie okklusjon

Acute kidney injury (AKI) is associated with higher risk for morbidity and mortality post-operatively. Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the most ...

Denne studien beskriver en reproduserbar stor dyremodell av nyre iskemi reperfusjonsskade, som kan brukes til å studere patofysiologien til akutt nyreskade, og utforske potensielle terapeutiske modaliteter. Denne metoden er svært reproduserbar og minimerer virkningen av inflammatorisk respons ved å begrense mengden fornærmelse mot kroppen sammenlignet med en åpen tilnærming. Denne prekliniske modellen etterligner kliniske scenarier, for eksempel nyretransplantasjon, nyrehyperfusjon etter kardiogent sjokk, transkateterprosedyrer som resulterer i nyre iskemi og kardiovaskulære prosedyrer med langvarige kardio-sirkulasjonsstanstider.Til å begynne med desinfiserer du høyre sideområde av nakken ved å bruke betadin og deretter 95% etanol tre ganger. Draper dyret på en steril måte. Utfør en nedskjæring for kateterisering av riktig halspulsåre og høyre jugulær vene.Trekk tilbake sternocleidomastoid muskelen lateralt, og disseker den ned til høyre halspulsåre og høyre jugular vene. Sett inn en 5F angiografihylse i både arterien og venen. Fest den med en silke 2-0 sutur.Sett inn en 5F angiografihylse ved hjelp av Seldinger-teknikken i venstre lårarterie ved å punktere arterien med en hul nål. Sett inn en soft-tip ledevaier gjennom lumen og før den inn i lårbensarterien. Hold ledevaieren godt fast med en hånd mens du fjerner kanylen.Før angiografihylsen over ledevaieren inn i lårarterien og trekk ledevaieren tilbake ved hjelp av ultralydveiledning om nødvendig. Intravenøst administrere 200 IE per kilo natrium heparin for å oppnå systemisk antikoagulasjon. For å utføre angiografi, injiser et jodet kontrastmiddel under fluoroskopi for å identifisere nyrearteriene.Identifiser nyrearteriene og før ledevaieren manuelt i ledekateteret. Plasser 5F JL4 ledekateteret i venstre nyrearterie gjennom høyre halspulsåre. Plasser det andre 5F JL4 ledekateteret i høyre nyrearterie gjennom venstre lårarterie.Bruk ledevaierne til å dirigere en 5F perkutan transluminal angioplastikk, eller PTA-dilatasjonskateter, i hver nyrearterie. Plasser hvert ballongkateter på plass, og koble en trykkledning til hvert kateter. Kontroller tilstedeværelsen av arterielle pulsbølgeformer i trykkmonitoren for å sikre riktig posisjonering av kateteret.Blås opp hver ballong og sikt på et trykk på ca. 2,5 atmosfærisk trykk inne i ballongen. For å bekrefte opphør av blodstrømmen til nyrene, observere sammenslåingen av pulsbølgeformen på spissen av ballongkateteret. Injiser jodkontrastmedium i en 1:1 fortynning med saltvann og kontroller om nyrefartøyene er opacification.Etter 60 minutter med okklusjon, tøm forsiktig og fjern ballongkateterene fra nyrearteriene. Utfør en angiografi ved hjelp av et 1:1 fortynnet kontrastmedium for å bekrefte nyrearterie patency og etablering av nyrereperfusjon. Fjern 5F-angiografihylsen fra venstre lårarterie.Påfør fra trykk på kateteriseringsstedet i 30 minutter. Reverser effekten av heparin ved administrering av tre milligram per kilo protamin til normalisering av aktiv koaguleringstid. For å prøve urin i den postoperative perioden, fest et rør til Foley-kateteret med en silke 2-0 sutur ved hjelp av en avbrutt maske på huden.For blodprøvetaking, la angiografihylsene i riktig halspulsåre og høyre jugularvene være på plass, og sikre dem med en silke 2-0 sutur. administrer tre milligram per kilo bupivacaine på snittstedet for å minimere smerte. Fortsett å hydrere dyret med 0,9 natriumklorid i totalt to timer etter slutten av iskemi.Lukk nakkesnittet med en silke 2-0 sutur ved hjelp av en avbrutt søm i to lag. Plasser en fentanylplaster på 25 til 50 mikrogram i timen på baksiden av dyret for å minimere postoperativ smerte, og overvåk dyret på mekanisk ventilasjon til det våkner. Samle de endelige blod- og urinprøvene og beregn urinutgangen.Utfør et midline laparotomi snitt ved hjelp av et størrelse-10 blad fra xiphoid ned til midt bekkenet. Bruk en rett lateral retraktor for å trekke tilbake bukhuden. Disseker de laterale bukalfestene på bukveggen for å eksponere høyre og venstre retroperitoneum.Identifiser og disseker både nyrearterier og årer. Ligate både nyrearterier og årer med en 2-0 silke sutur og utføre bilaterale nephrectomies å samle hele vev prøver for histologisk og metabolsk analyse. Nyrefunksjonen ble vurdert ved å bestemme urinutgangen, eGFR, plasmakreatin og BUN.Etter 60 minutter med bilateral nyrearterie okklusjon, urinproduksjonen ble betydelig redusert og forble på denne måten på seks og 24 timer etter reperfusjon. Tilsvarende ble det observert en betydelig reduksjon i eGFR, som falt fra baseline sammenlignet med slutten av iskemi på to timer, seks timer og 24 timers reperfusjon. Plasmakreatinin ble signifikant økt ved to, seks og 24 timer reperfusjon sammenlignet med baseline.BUN ble økt sammenlignet med baseline ved seks og 24 timers reperfusjon. Tydelige nekrotiske og hemorragiske områder ble ujevnt fordelt i begge nyrene på slutten av de 60 minuttene med bilateral nyre iskemi og 24 timers reperfusjon. Massons trichrome farging avslørte konfluent coagulativ nekrose, som lå ved proksimale tubuli av nyrebarken.Plastinnbygde seksjoner ble også vurdert. Alle Massons trichrome lysbilder ble evaluert for cellenekrose, tap av børstekant, støpt formasjon og tubule dilatasjon. Akutt rørformet nekrose, eller ATN-skåring, viste betydelig skade på nyrebarken og medulla.Når du utfører denne protokollen, kontroller plasseringen av ballongstedene på nærhet av RC, og fullstendig okkluder strømmen til nyrene. Pass på at den ikke knekker i vannet. Etter denne prosedyren kan endovaskulære kateterstrømsonder settes inn i nyrearteriene for å vurdere nyreblodstrøm, eller nyrebiopsier kan utføres for å vurdere nyrevevsskade.

a-large-animal-model-for-acute-kidney-injury-temporary-bilateral

Research

JoVE Journal

Medicine

4.2K Views.  Harvard Medical School. This study describes a reproducible large animal model of renal ischemia reperfusion injury, which can be used to study the pathophysiology of acute kidney injury, and explore potential therapeutic modalities. This method is highly reproducible and minimizes the impact of inflammatory response by limiting the amount of insult to the body compared to an open approach. This preclinical model mimics clinical scenarios, such as renal transplantation, renal hypoperfusion following cardiogenic shoc...