A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.
Method Article
هذه المقالة طريقة لتصور الشرايين الدماغية الفئران من خلال نافذة الجمجمة باستخدام قطع القحف الزمنية لعرض أجزاء القريبة من الشريان الدماغي الأوسط ( الشكل 1). ويمكن الجمع بين هذه الطريقة تنوعا مع تقنيات مختلفة لاستخدام العقاقير لقياس التفاعل الدماغي الشريان في الجسم الحي.
إنشاء نافذة الجمجمة هو الأسلوب الذي يسمح التصور المباشر الهياكل على سطح القشرية من الدماغ 1-3. لا يمكن أن يؤديها هذه التقنية في العديد من المواقع التي تغمر المخ الفئران، ولكن هو الأكثر بسهولة نفذت من خلال خلق قطع القحف على العظام يمكن الوصول إليها بسهولة أو الجبهي الجداري. في معظم الأحيان، وقد استخدمنا هذه التقنية بالاشتراك مع endothelin-1 الشريان المخي الأوسط نموذج انسداد السكتة الدماغية لتحديد التغيرات في الشريان المخي الأوسط قطر السفينة التي تحدث مع الحقن من 1-endothelin في لحمة الدماغ المتاخمة للMCA القريبة 4، 5. من أجل تصور الجزء القريب من خلال MCA يسببها endothelin MCAO -1، نستخدم تقنية لإنشاء إطار الجمجمة عن طريق العظم الصدغي على الجانب الوحشي من الجمجمة الفئران (الشكل 1). يمكن تصور الشرايين الدماغية إما مع أو الجافية سليمة مع قطعي الجافية وretraالمديرية. الأكثر شيوعا، نترك سليمة الجافية خلال التصور منذ endothelin-1 MCAO بفعل ينطوي على تسليم الببتيد vasoconstricting في لحمة الدماغ. هذا يتجاوز الحاجة إلى شق الجافية مباشرة عبر السفن تصور لتسليم المخدرات. وهذا البروتوكول تصف كيفية إنشاء إطار لتصور الشرايين القحفية الدماغية على نحو تدريجي، وكذلك كيفية تجنب الكثير من المزالق المحتملة المتصلة بهذا الأسلوب.
وقد وافق هذا البروتوكول من قبل رعاية الحيوان واللجنة المؤسسية الاستخدام (IACUC) في جامعة ولاية فلوريدا ومتوافق مع "دليل لرعاية واستخدام الحيوانات المختبرية" (الطبعة الثامنة، والأكاديمية الوطنية للعلوم، 2011).
المواد
1. خطوات ما قبل الجراحة
2. قبل الجمجمة نافذة إعداد
ontent "> قبل إنشاء نافذة الجمجمة، ينبغي إعداد الفئران عن أي تجارب من قبل غرس الأجهزة الأخرى المطلوبة ويجب أن يحصل أي إجراءات المطلوبة الجراحية. لهذا البروتوكول، لقد زرع في السابق قنية دليل لل1-endothelin (ET- 1) الناجم عن MCAO كما هو مبين في منشور بعنوان رفيق "Endothelin-1 المستحثة انسداد الشريان الدماغي الأوسط نموذج للالسكتة الدماغية مع التوجيه بالليزر Flowmetry دوبلر في الفئران."3. إنشاء نافذة القحف
بعد وضع قنية دليل أو المعدات اللازمة لإجراء التجارب، وإنشاء إطار لتصور الجمجمة مباشرة القريب من أجزاء الشريان الدماغي الأوسط خلال إجراء السكتة الدماغية.
4. تسجيل انقباض الشريان الدماغي
يستخدم خيمة "> لشرح كيفية التقاط الصور في الوقت الحقيقي، والفئران التي تمر ET-1 يسببها MCAO لهذا البروتوكول.5. تحليل الصور
يمكن تحديد القطر السفينة عن أي جزء من تصور MCA. وكمثال على ذلك، سوف نستخدم فرع واحد من MCA لقياس قطر السفينة على نقطة في الوقت قبل وبعد حقن ET-1. الأمراض المنقولة جنسيايتم التقاط إطارات ليرة لبنانية من الفيديو على فترات حد أدنى 1 باستخدام VLC media player ل(VideoLAN).
صور ثابتة مأخوذة من عرض الفيديو الملتقط أن التغيير في القطر الشريان الدماغي بعد ET-1 يمكن حقن تقديره بسهولة باستخدام هذه التقنية نافذة الجمجمة (الشكل 2). في غضون دقائق من حقن ET-1، سوف تبدأ في السفينة انقباض. في نهاية المطاف سوف تكون الأوعية الصعب تصور وأنسجة الم?...
وباختصار، هذه النافذة إعداد الجمجمة تقنية متعددة جدا ويمكن تغييره لتلبية احتياجات العديد من التجارب مع تعديلات طفيفة 4، 5. على سبيل المثال، رصد نجحنا تدفق الدم الدماغي في فروع محددة باستخدام الليزر MCA دوبلر flowmetry التركيز مباشرة على الشريان الدماغي تصور من خلال ?...
الإعلان عن أي تضارب في المصالح.
وأيد هذا العمل من المنح المقدمة من أمريكا انضم جمعية القلب جنوب شرق الكبرى (09GRNT2060421)، الجمعية الطبية الأمريكية، ومن جامعة العلوم السريرية ومعهد فلوريدا بالحركة. آدم مكة هو زميل NRSA NIH / NINDS، predoctoral (NS-F30 060335). تلقى روبرت Regenhardt predoctoral الدعم زمالة من جامعة فلوريدا برنامج التدريب المتعدد التخصصات في ارتفاع ضغط الدم (HL-T32 083810).
Name | Company | Catalog Number | Comments |
اسم كاشف | شركة | كتالوج رقم | التعليقات (اختياري) |
استنشاق التخدير النظام | VetEquip شركة، بليسانتون، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | 901806 | |
Isoflurane مخدر | الصيدلانيات باكستر، ديرفيلد، IL، USA | 1001936060 | |
نظام الحيوانات الصغيرة التجسيمي | ديفيد KOPF الصكوك، Tujunga، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | 900 | |
غير تمزق القضبان الأذن، الجرذ | ديفيد KOPF الصكوك، Tujunga، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | 957 | |
الفئران رئيس التخدير الغاز حامل | ديفيد KOPF الصكوك، Tujunga، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | 1929 | |
BAT-12 ميزان حرارة مسبار مجهري | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | BAT-12 | |
T / PUMP، غطاء حراري | صناعات Gaymar، وشركة، بستان حديقة، NY، USA | T / PUMP، TP600 | |
Metzenbaum مقص | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | 501254 | |
ملقط القزحية | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | 15915 | |
البلدغ الكامشات المشبك | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | 14119-G | |
10 حقنة ميكرولتر 26-gaugue | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | SGE010RNS | |
Bovie، الكي درجة حرارة عالية طقم | العالم آلات دقيقة، وشركة، ساراسوتا، FL، الولايات المتحدة الأمريكية | 500392 | |
ملقط الأسنان الفئران 0،12 | Stotz | E1811 | |
محرك صغروي الحفر | Stoelting،الخشب دايل، IL، الولايات المتحدة الأمريكية | 51449 | |
0.8 مم بر حفر الجولة | Roboz الجراحية الصك المحدودة، وشركة، غايثرسبيرغ، MD، الولايات المتحدة الأمريكية | RS-6280C-1 | |
STORZ بون خياطة ملقط | باوش ومب و، وشركة، روتشستر، نيويورك، الولايات المتحدة الأمريكية | ||
النايلون خياطة، حجم 3،0 | احة، Mettawa، IL، الولايات المتحدة الأمريكية | MV-663 | |
القطن مسحات | فيشر العلمية، بتسبرغ، PA، الولايات المتحدة الأمريكية | 22-029-488 | |
Puralube العين مرهم | فيشر العلمية، بتسبرغ، PA، الولايات المتحدة الأمريكية | NC0138063 | |
كليبرز الشعر الكهربائية | اوستر، بروفيدانس، رود آيلند، الولايات المتحدة الأمريكية | 78005-301 | |
ET-1 مخففة إلى 80 μ M تركيز في برنامج تلفزيوني | الببتيد الأمريكية، سانيفيل، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | 88-1-10A | |
الكلورهيكسيدين، 2٪ | Agrilabs، وسانت جوزيف، MO، الولايات المتحدة الأمريكية | 1040، القس 6-06، NAC رقم: 10580322 | |
المجهر الجراحي | SEILER الصك والتصنيع، وسانت لويس، MO، الولايات المتحدة الأمريكية | تطور xR6 | |
سوني هاندي كام | سوني، ميناتو، طوكيو، اليابان | HDR-SR12 | |
إضاءة الألياف البصرية | TechniQuip شركة، ليفرمور، CA، الولايات المتحدة الأمريكية | FO1-150 | |
VLC وسائل الاعلام لاعب | (باريس، فرنسا) | ||
الصورة J البرمجيات | الولايات المتحدة المعاهد الوطنية للصحة في بيثيسدا، MA، الولايات المتحدة الأمريكية |
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request PermissionThis article has been published
Video Coming Soon
Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved