JoVE Logo
Authors
Contact Us

Sign In

A subscription to JoVE is required to view this content. Sign in or start your free trial.

In This Article

  • Summary
  • Abstract
  • Introduction
  • Protocol
  • النتائج
  • Discussion
  • Disclosures
  • Acknowledgements
  • Materials
  • References
  • Reprints and Permissions

Summary

Analyzing the physiological properties of olfactory sensory neurons still faces technical limitations. Here we record them through perforated patch-clamp in an intact preparation of the olfactory epithelium in gene-targeted mice. This technique allows the characterization of membrane properties and responses to specific ligands of neurons expressing defined olfactory receptors.

Abstract

تحليل الاستجابات الفسيولوجية للخلايا العصبية الحسية الشمية (OSN) عندما حفز مع بروابط معينة أمر بالغ الأهمية لفهم أساس السلوكيات مدفوعة حاسة الشم والتشكيل الخاصة بهم. هذه الخصائص الترميز تعتمد بشكل كبير على التفاعل الأولي بين جزيئات الرائحة ومستقبلات الشم (OR) أعربت في OSNs. هوية وخصوصية ويجند الطيف من التعبير عن أو حاسمة. أعرب احتمال العثور على يجند من OR في OSN اختيارها عشوائيا داخل الظهارة منخفضة جدا. لمواجهة هذا التحدي، هذا البروتوكول يستخدم وراثيا الفئران الموسومة معربا عن GFP بروتين فلوري تحت سيطرة المروج من نسب الأرجحية محددة. وتقع OSNs في ظهارة ضيقة وتنظيم المبطنة للتجويف الأنف، مع الخلايا المجاورة تؤثر النضج وظيفة. نحن هنا تصف طريقة لعزل والظهارة الشمية سليمة وتسجيل من خلال تسجيلات التصحيح المشبك خصائص OSNs هxpressing مستقبلات الرائحة محددة. بروتوكول يسمح احد لتوصيف خصائص الغشاء OSN مع الحفاظ على تأثير الأنسجة المجاورة. تحليل نتائج التصحيح، المشبك غلة الكمي الدقيق ليجند / أو التفاعلات، ومسارات نقل والصيدلة، والترميز خصائص OSNs 'والتشكيل على مستوى الغشاء.

Introduction

الخلايا العصبية الحسية الشمية (OSN) تمثل الخطوة الأولى للإدراك حاسة الشم. تقع في الظهارة الشمية بطانة التجويف الأنفي لدى القوارض، وتحويل المعلومات الكيميائية للعطر في إمكانات العمل التي يتم إرسالها عبر محور عصبي على الدماغ. لفهم أفضل للآليات الترميز حاسة الشم، فمن الضروري أن تميز تنبيغ وغشاء خصائص OSNs. حتى وقت قريب، نفذت معظم التقنيات المستخدمة لوصف خصائص OSNs الثدييات خارجا على فصل OSNs 1-4. تستخدم عملية التفكك المختلفة (أي الإنزيمات) العمليات الميكانيكية والكيميائية لتحرير OSNs من بيئتهم. هذه العمليات لحث على عدد منخفض من خلايا متاحة للتسجيلات. هذا العدد المنخفض يمكن أن يكون أكثر أهمية في حالة الخلايا GFP المسمى. التفكك أيضا إلى إزالة الخلية الى خلية التفاعلات المحلية بين OSNs وخلايا أخرى من الظهارة الشمية التي قد تعزز survivالقاعدة وتعديل خصائص OSNs. من أجل تجاوز الإجراء التفكك، تم وضع إعداد سليمة 5.

كل OSN يعبر عن مستقبلات الشم واحدة (OR) مختارة من عائلة متعددة الجينات كبيرة 6. هناك ~ 1000 نسب الأرجحية التي أعرب عنها في الظهارة الشمية الرئيسية في الماوس. نظرا لوجود عدد كبير من الحيوانات أو في نوع البرية، وفرص لتسجيل OSNs التعبير عن نفسه أو منخفضة جدا. للتغلب على هذه القيود، هي الجينات المستهدفة الفئران المتاحة فيها جميع OSNs التعبير عن الهوية أو وصفت مع البروتين الفلوري 7-9. واستخدمت هذه OSNs المسمى للقيام تحليل وظيفي في الأعمال التحضيرية فصلها 7،10،11 مع العيوب المذكورة في وقت سابق. لذا لإعداد ظهارة سليمة 5 من الفئران وصفت وراثيا تلتف هذه القضايا. لأنها تتيح رصد نشاط OSNs معربا عن نسب الأرجحية محددة بدقة في بيئة أقرب إلى في السادسفو وقت ممكن. الى جانب ذلك، تسجيلات التصحيح المشبك من OSNs تسمح أيضا تحليل دقيق لخصائص الغشاء، تنبيغ مسار الصيدلة، يجند / أو التفاعلات. بالكاد يمكن تحليل كل هذه المواضيع باستخدام التسجيلات خارج الخلية. استخدمنا هذه التقنية لرصد ردود OSNs التعبير عن مستقبلات الرائحة SR1 وMOR23 12،13. تم تأكيد جدوى هذه التقنية من قبل مجموعات أخرى على MOR23 معربا عن OSNs 14 فضلا عن نسب الأرجحية الأخرى معربا عن الخلايا العصبية 15،16. رصد مجموعة محددة من OSNs يمكن أن يؤدي إلى تحليل خصائصها في العديد من السياقات المختلفة مثل التنمية 14، والشيخوخة 17، الرائحة التي يسببها اللدونة 18، ودور الاختلافات في تسلسل مستقبلات الرائحة في رائحة الترميز 15. وبالتالي يتيح هذا البروتوكول أداة قوية لرصد الخصائص الفنية للOSNs المعرفة على مستوى الغشاء.

Protocol

هذا البروتوكول يتبع المبادئ التوجيهية رعاية الحيوان من جامعة دي بورغون وتمت الموافقة من قبل لجنة الأخلاق جامعة دي بورغون.

1. الحيوانات

  1. استخدام الفئران المعدلة وراثيا OR-IRES-tauGFP المتاحة في مختبر جاكسون. وقد وضعت هذه الفئران في المختبر الدكتور بيتر Mombaerts "من أجل تحليل استهداف أكسون وتطوير النظام الشمي 19. على سبيل المثال، خط MOR23-IRES-tauGFP، والأوراق المالية رقم 006643، يحمل اسم سلالة B6 الرسمي؛ 129P2- Olfr16 tm2Mom / MomJ. وبالمثل، فإن خط SR1-IRES-tauGFP، والأوراق المالية رقم 6717 يحمل اسم B6 الرسمي؛ 129P2- Olfr124 tm1Mom / MomJ.
  2. وفيما يتعلق عمر الحيوانات: من أجل نتائج أفضل من البروتوكول، واستخدام الحيوانات بين 2 و 4 أسابيع من العمر. في هذه الفئة العمرية، وتشريح هو أسهل (العظام أكثر ليونة، أكثر حزما الظهارة الشمية) والمقابض شجيري هي ثنائيةgger مقارنة الحيوانات الأكبر سنا.

2. إعداد أقطاب وحلول

  1. لماصات محفزة: شراء prepulled تحفيز ماصات. خلاف ذلك، وإعداد عليها يدويا.
    1. باستخدام اللهب، ثني ستة الماصات الزجاج 1 مم في حوالي 1 سم من الحافة. إدراج هذه الماصات ستة زائد على التوالي ال 7 في 1.5 سم الحرارة يتقلص أنابيب تعزيز من قبل العيينة.
    2. الحرارة يتقلص أنابيب للحفاظ على برميل المرفقة معا. إرفاق إضافي أنابيب الحرارة يتقلص إلى أقصى الطرف الآخر من برميل. سحب هذا ماصة تحفيز مع مجتذب متعددة برميل.
    3. إضافة بعض الغراء السائل الأبيض حول العيينة لتعزيز نصائح محني. اسمحوا الجافة O / N.
  2. إعداد 1 أو 2 لتر من محلول طبيعي رينغر خارج الخلية (في ملي: كلوريد الصوديوم 124، بوكل 3، 4 MgSO 1.3، CaCl 2 2، 3 NaHCO 26، ناه 2 PO 4 1.25، الجلوكوز 15؛ درجة الحموضة 7.6 و 305 الميلي أسمول). الحفاظ على 4 ° Cحتى الاستخدام.
  3. إعداد محلول المخزون داخل الخلايا (مم): بوكل 70، KOH 53، حمض methanesulfonic 30، EGTA 5، HEPES 10، السكروز 70؛ الرقم الهيدروجيني 7.2 (KOH) و 310 الميلي أسمول. الحفاظ على 4 درجات مئوية حتى الاستخدام. جيدة لعدة أسابيع.
  4. يعد حل داخل الخلايا تسجيل مع النيستاتين بشكل إرتجالي (في آخر لحظة) قبل التجربة.
    1. تزن 3 ملغ من النيستاتين، إضافة 50 ميكرولتر من DMSO. دوامة 20 ثانية ثم يصوتن 2-3 دقائق حتى المخفف بالكامل.
    2. إضافة 20 ميكرولتر من حل DMSO نيستاتين في 5 مل من محلول المخزون داخل الخلايا. دوامة و 20 ثانية، ثم يصوتن 3 دقائق. الحفاظ على هذا الحل في 4 درجات مئوية، وحماية من الضوء المباشر، نيستاتين غير حساسة للضوء. هذا الحل يمكن استخدامها لبضع ساعات. استبدال كل يوم.
    3. مرة واحدة إعداد الظهارة الشمية تحت المجهر، واتخاذ بعض من هذا الحل في حقنة 1 مل مع طرف الأصفر ممدود اللهب لملء الأقطاب. بعيدا عن الضوء المباشر. مرة واحدة على RT، والحل نيستاتينغير مستقر. استبدال الحل في حقنة 1 مل كل ساعة أو الاحتفاظ بها في الجليد.
  5. سحب أقطاب تسجيل مع ساحبة للحصول على رقبة طويلة ورأس صغير (~ 2 ميكرون) مع المقاومة من 15-20 MΩ مع الحل نيستاتين الداخلي.
  6. يعد حل الرائحة عند 0.5 M في DMSO تحت غطاء الدخان. قسامة والحفاظ على درجة حرارة -20 درجة مئوية حتى الاستخدام. تخفيف الرائحة في حل قارع الأجراس حتى التركيز المطلوب. ملء ماصة محفزة.

3. إعداد الظهارة الشمية

ملاحظة: الفئران OR-IRES-tauGFP تعبر عن tauGFP تحت سيطرة أو المروج. في هذه الفئران، وصفت جميع الخلايا العصبية معربا عن OR في المصالح مع GFP. ويتم تكييف هذا البروتوكول لنسب الأرجحية التي أعرب عنها في جميع المناطق. ومع ذلك، تشريح والتسجيلات هي أسهل للنسب الأرجحية أعرب في المنطقة الظهرية.

  1. تخدير الحيوان عن طريق حقن مزيج من الكيتامين وزيلازين (150 ملغ / كغ و 10 ملغم / كغم بودالوزن ذ، على التوالي). قطع الرأس يمكن القيام بها مع مقص حاد للفئران شابة أو مع المقصلة القوارض وتصان بشكل مناسب لالفئران الأكبر سنا.
    1. باستخدام مقص حلقة تشريح جعل شق وسطي طولية من خلال الجلد الظهرية. إزالة الجلد عن طريق سحب إربا. باستخدام مقص، وقطع أقل الفكين في مفصل الفك. إزالة الأسنان الأمامية العلوية التي كتبها خفض مواز الاكليلية للأسنان.
    2. اجراء خفض الاكليلية من الرأس خلف العينين وتبقي فقط على الجزء الأمامي من الرأس. تراجع في حل قارع الأجراس المثلج للتشريح ضمن نطاق.
  2. تشريح تحت النطاق: في الجانب البطني، وجعل قطع طولية على طول الفك العلوي / الأسنان. قطع العظام الظهرية طوليا، في أعقاب الجانب ظهراني الجانبي للتجويف الأنف. إزالة معظم العظام والحنك. نقل الحاجز وظهارة المرتبطة به في الاوكسيجين قارع الأجراس في RT.
  3. لتشريح النهائي: الحق قبل البدء في تسجيلالدورة، قشر بعيدا ظهارة من الحاجز الأساسي بالملقط. فصل ظهارة مع ملقط ومع اثنين من 4-5 ملم تخفيضات مقص (microvannas استخدام مقص) في الجزء الأمامي من الحاجز حيث التصاق أقوى.
    1. إزالة بعناية الجهاز الميكعي بقطع عليه على طول اتصال ظهري لظهارة الحاجز. نقل الظهارة إلى غرفة تسجيل مع طبقة المخاط مواجهة. يبقيه شقة في غرفة مع القيثارة.
  4. تثبيت غرفة تحت المجهر تستقيم مجهزة البصريات مضان وكاميرا حساسة. تصور إعداد على شاشة الكمبيوتر في تضخم عالية من خلال 40X الهدف الغمر بالمياه (الفتحة العددية 0.8) و2X أو 4X التكبير اضافية من خلال عدسة مكبرة تحقيقه. يروي باستمرار مع الاوكسيجين قارع الأجراس في RT (1-2 مل / دقيقة).

4. تسجيل الدورة

  1. بحث عن الخلية الفلورسنت: تثير إعداد 480نانومتر لEGFP، التي تنبعث الضوء في نطاق 530-550 نانومتر. هدف واحد مقبض شجيري وهو أمر واضح بشكل صحيح في مضان وتحت حقل مشرق.
  2. ملء القطب مع الحل الخلايا مع النيستاتين. إزالة الفقاعات من خلال استغلال بلطف على القطب.
  3. إدراج القطب على حامل الكهربائي، وتطبيق الضغط الايجابي في ماصة. يجب أن تكون المقاومة 15-20 MΩ.
  4. جلب الكهربائي بالقرب من الخلية؛ عند بلوغ المقاومة ~ 40 MΩ، والإفراج عن الضغط الإيجابي والضغط السلبي طفيف للوصول إلى gigaseal.
  5. حالما يتم التوصل إلى ختم، تعيين غشاء المحتملة بنحو -75 بالسيارات.
  6. مرة واحدة يتم فتح الخلية، والمضي قدما مع بروتوكولات التحفيز، والعلاجات الدوائية. لقياس استجابة لتحفيز الرائحة واحد، سجل 200-500 ميللي ثانية من النشاط العفوي، وتحفيز لمدة 500 ميللي ثانية وقياس استجابة الخلايا لمدة تصل إلى 10 ثانية (13). لعلاجات الدوائية، يروي كلاء الدوائية فيالتركيز المطلوب 20.

5. تحليل البيانات

  1. تحليل التيارات التي تسببها التحفيز الرائحة على النحو التالي: الحد الأقصى للسعة، لمرة وارتفاع (الوقت اللازم لتصل إلى 90٪ من الحد الأقصى للسعة، في مللي ثانية)، ومجموع (منطقة تحت منحنى في PAS) الحالية، والوقت بنسبة 50٪ (الوقت بين بداية وإزاحة استجابة بنسبة 50٪ من الحد الأقصى للسعة، في مللي ثانية).
    1. باستخدام التيارات ذروة تنبيغ (بلغت أقصى اتساع) بتركيزات مختلفة، ورسم وتناسب منحنى الاستجابة للجرعة باستخدام المعادلة هيل: I = ايماكس / (1 ​​+ (K 02/01 / C) ن)، حيث كنت يمثل الذروة الحالية ، IMAX أكبر عدد من الردود في تركيزات تشبع، K1 / 2 تركيز الذي تم التوصل نصف الحد الأقصى للاستجابة، C تركيز الرائحة ون معامل هيل.
  2. تحليل تسجيلات لغشاء المحتملة في المشبك الحالي لتحقيق أقصى قدر من الاستقطاب، وTOTAل إمكانات أثارت (منطقة تحت منحنى في mVsec)؛ سجل النشاط العفوي ارتفاعه أكثر من 30 ثانية إلى 1 التسجيلات دقيقة. استثارة سجل عن طريق المسامير التي تسببها الحقن التيارات (5-10 باسكال).

النتائج

نتائج هذا البروتوكول يعتمد على نوعية تشريح. يجب أن يكون هذا الخطوات تشريح قصيرة (أقل من 10 إلى 15 دقيقة) ودقيق (أي، لتجنب أضرار من ظهارة). يوضح الشكل 1 كيف يمكن إعداد مثالية يشبه في مستويات التكبير المختلفة. في تضخم منخفض تحت حقل مشرق أنواع مختلفة من الخلايا (...

Discussion

قدرة هذا البروتوكول لرصد خصائص OSNs صحية بشكل صحيح تعتمد بشكل كبير على جودة إعداد. ولذلك، فإن الخطوات تشريح حاسمة. أولا من المهم جدا أن تولي اهتماما لنوعية (الرقم الهيدروجيني، الأسمولية)، الأوكسجين ودرجة الحرارة (المثلج ولكن ليس المجمدة) من المتوسط ​​تشريح. ثانيا، الت...

Disclosures

The authors declare that they have no competing financial interest.

Acknowledgements

Authors would like to thank Peter Mombaerts for the generous gift of OR-GFP mice; Anne Lefranc and the CSGA animal facility for excellent animal care. Funding was provided by CNRS through an ATIP and ATIP Plus grants, by Conseil Régional de Bourgogne (FABER and PARI grants), by Université de Bourgogne (BQR program).

Materials

NameCompanyCatalog NumberComments
vibration table with Faraday cageTMC63-500 SERIESrequired : isolates the recording system from vibrations induced by the environment (movements of experimenter, vibrations of equipment such as fans for cooling computers, etc); can also be purchased with a Faraday cage, or equipped by a custom made Faraday cage; this cage is recommended to avoid electric noise from the environment
optics
microscopeOlympusBX51WIupright microcope equipped with epifluorescence; fixed or moving stage depending on the user's preference
objectivesOlympusLUMPLFL40XWat least 2 objectives required: a 4X or 10X for coarse approach to the cell; and a 40X immersion long distance example Olympus LUMPLFL40XW / IR /0,8 / WD:3.3 MM
magnifierOlympusU-TVCACABSOLUTELY REQUIRED: placed in the light path between the objective and the camera; allows to magnify the image on the screen in order to reach precisely the knob with the recording electrode
cameraOlympusDP72a good camera is required to see the neurons in fluorescence as well as in bright field; the controlling software is simple and allows to take pictures and do live camera image to monitor the approach of the electrode to the cell. An ultrasensitive camera is not necessary
filtersOlympus/Chromadepending on the fluorescent protein used in the mice; example for GFP: excitation : BP460-490: emission: HQ530/50m
amplifierHEKAEPC10 USBmonitors the currents flowing through the recording electrode and also controls the puffing by sending a TTL signal to the spritzer; the EPC10 setup is controled by computer
softwareHEKAPatchmastercontrols the amplifier during the experiment
micromanipulatorSutterMP225precision micromanipulator, allows precise movements down to 1/10th of a micrometer; this model is very stable; avoid hydraulic manipulators that may drift
electrode pullerSutterP97with a FT345-B wide trough filament;  to prepare recording pipets of about 2µm diameter with a long tip to reach the cells; the resistance should be 15 to 20Mohm with perforated patch clamp solution
glassSutterBF120-69-10in our recording conditions, this glass is ideal for recording pipets
recording chamberWarner InstrumentsRC-26Ga chamber is needed to set the preparation under the microscope. To maintain the preparation in the center of the chamber, a net/anchor should be used.
stimulation
glassWPITW100F-4attached in groups of 7, these pipettes are used to prepare prepulled stimulating pipettes
multibarrel pullerMDIPMP-107-Zby association of pull and twist, this puller allows us to prepare puffing electrodes with 7 barrels
precision pressure injector Toohey CompanyP/N T25-1-900 Single Channel   this precision pressure injector  controls the pressure ejected in the multibarrel puller; it is controlled manually or by the amplifier by a 5V  TTLs
micromanipulatorNarishigeYOU-1a coarse manipulator is enough to bring the puffing electrode close to the recording site
tubingsN/Atygon tubing to bring the pressure from the puffer to the puffing pipette
solutions/perfusion/chemicals
vacuum pumpgardner denver300 seriesa vibrating membrane pump is more quiet and efficient than other types of pumps
perfusion systemN/AN/Agravity perfusion system with polyethlylen tubing to bring in and out the external solution from the recording chamber
nystatinSigma-AldrichN3503mandatory to perpare internal solution for perforated patch clamp
DIMETHYL SULFOXIDESigma-AldrichD5879used to disolve nystatin for internal solution for perforated patch 
Sodium chlorideSigma-AldrichS9625extracellular solution
Potassium chlorideSigma-AldrichP4504intracellular/extracellular solution
Calcium chloride dihydrateSigma-AldrichC7902extracellular solution
Sodium phosphate monobasic monohydrate (NaH2PO4)Sigma-AldrichS9638extracellular solution
Magnesium sulfate heptahydrate (MgSO4 7H2O)Sigma-Aldrich63140extracellular solution
GlucoseSigma-AldrichG8270extracellular solution
Sodium bicarbonateSigma-AldrichS6297extracellular solution
EGTA (Ethylene glycol-bis(2-aminoethylether)-N,N,N′,N′-tetraacetic acid)Sigma-AldrichE3889internal solution
Potassium hydroxydeSigma-AldrichP1767internal solution
Methyl SulfoxideSigma-AldrichW387509intracellular solution
Hepes-NaSigma-AldrichH7006intracellular solution
SucroseSigma-AldrichS0389intracellular solution

References

  1. Lowe, G., Gold, G. H. Nonlinear amplification by calcium-dependent chloride channels in olfactory receptor cells. Nature. 366 (6452), 283-286 (1993).
  2. Ponissery Saidu, S., Dibattista, M., Matthews, H. R. Odorant-induced responses recorded from olfactory receptor neurons using the suction pipette technique. J Vis Exp. (62), e3862 (2012).
  3. Moss, R. L., et al. Electrophysiological and biochemical responses of mouse vomeronasal receptor cells to urine-derived compounds: possible mechanism of action. Chem Senses. 23 (4), 483-489 (1998).
  4. Kaur, A., Dey, S. Live cell calcium imaging of dissociated vomeronasal neurons. Methods Mol Biol. 1068, 189-200 (2013).
  5. Ma, M., Chen, W. R. Electrophysiological characterization of rat and mouse olfactory receptor neurons from an intact epithelial preparation. J Neurosci Methods. 92 (1-2), 31-40 (1999).
  6. Axel, R. A novel multigene family may encode odorant receptors: a molecular basis for odor recognition. Cell. 65 (1), 175-187 (1991).
  7. Bozza, T., Feinstein, P., Zheng, C. Odorant receptor expression defines functional units in the mouse olfactory system. J Neurosci. 22 (8), 3033-3043 (2002).
  8. Bozza, T., et al. Mapping of class I and class II odorant receptors to glomerular domains by two distinct types of olfactory sensory neurons in the mouse. Neuron. 61 (2), 220-233 (2009).
  9. Vassalli, A., Rothman, A., Feinstein, P., Zapotocky, M. Minigenes impart odorant receptor-specific axon guidance in the olfactory bulb. Neuron. 35 (4), 681-696 (2002).
  10. Feinstein, P., Bozza, T., Rodriguez, I., Vassalli, A. Axon guidance of mouse olfactory sensory neurons by odorant receptors and the beta2 adrenergic receptor. Cell. 117 (6), 833-846 (2004).
  11. Mombaerts, P. Genes and ligands for odorant, vomeronasal and taste receptors. Nat Rev Neurosci. 5 (4), 263-278 (2004).
  12. Grosmaitre, X., et al. SR1, a mouse odorant receptor with an unusually broad response profile. J Neurosci. 29 (46), 14545-14552 (2009).
  13. Grosmaitre, X., Vassalli, A., Mombaerts, P., Shepherd, G. M. Odorant responses of olfactory sensory neurons expressing the odorant receptor MOR23: a patch clamp analysis in gene-targeted mice. Proc Natl Acad Sci U S A. 103 (6), 1970-1975 (2006).
  14. Lam, R. S. Odorant responsiveness of embryonic mouse olfactory sensory neurons expressing the odorant receptors S1 or MOR23. Eur J Neurosci. 38 (2), 2210-2217 (2013).
  15. Zhang, J., Huang, G., Dewan, A., Feinstein, P. Uncoupling stimulus specificity and glomerular position in the mouse olfactory system. Mol Cell Neurosci. 51 (3-4), 79-88 (2012).
  16. Zhang, J., Pacifico, R., Cawley, D., Feinstein, P. Ultrasensitive detection of amines by a trace amine-associated receptor. J Neurosci. 33 (7), 3228-3239 (2013).
  17. Lee, A. C., Tian, H., Grosmaitre, X. Expression patterns of odorant receptors and response properties of olfactory sensory neurons in aged mice. Chem Senses. 34 (8), 695-703 (2009).
  18. Cadiou, H., et al. Postnatal odorant exposure induces peripheral olfactory plasticity at the cellular level. J Neurosci. 34 (14), 4857-4870 (2014).
  19. Mombaerts, P. Axonal wiring in the mouse olfactory system. Annu Rev Cell Dev Biol. 22, 713-737 (2006).
  20. Grosmaitre, X., Santarelli, L. C., Tan, J., Luo, M. Dual functions of mammalian olfactory sensory neurons as odor detectors and mechanical sensors. Nat Neurosci. 10 (3), 348-354 (2007).
  21. Duchamp-Viret, P., Chaput, M. A. Odor response properties of rat olfactory receptor neurons. Science. 284 (5423), 2171-2174 (1999).
  22. Heydel, J. M., et al. Odorant-binding proteins and xenobiotic metabolizing enzymes: implications in olfactory perireceptor events. Anat Rec (Hoboken). 296 (9), 1333-1345 (2013).
  23. Pelosi, P. Perireceptor events in olfaction). J Neurobiol. 30 (1), 3-19 (1996).
  24. Spehr, M., Wetzel, C. H., Hatt, H. 3-phosphoinositides modulate cyclic nucleotide signaling in olfactory receptor neurons. Neuron. 33, 731-739 (2002).
  25. Chen, S., Lane, A. P., Bock, R., Leinders-Zufall, T. Blocking adenylyl cyclase inhibits olfactory generator currents induced by 'IP(3)-odors. J Neurophysiol. 84 (1), 575-580 (2000).
  26. Savigner, A., et al. Modulation of spontaneous and odorant-evoked activity of rat olfactory sensory neurons by two anorectic peptides, insulin and leptin. J Neurophysiol. 101 (6), 2898-2906 (2009).
  27. Ukhanov, K., Brunert, D., Corey, E. A. Phosphoinositide 3-kinase-dependent antagonism in mammalian olfactory receptor neurons. J Neurosci. 31 (1), 273-280 (2011).

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Explore More Articles

101

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Privacy

Terms of Use

Policies

Contact Us

Recommend to library

JoVE NEWSLETTERS

Research

Education

Authors

Librarians

ABOUT JoVE

Copyright © 2025 MyJoVE Corporation. All rights reserved